C12N 5/00 — Недифференцированные клетки человека, животных или растений, например, клеточные линии; ткани; культивирование или сохранение их; питательные среды для них

Номер патента: 1752764

Опубликовано: 07.08.1992

Авторы: Боровиков, Булашев, Дмитриев, Ескендирова, Шенжанов

МПК: C12N 5/00

Метки: brucella, антител, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рода, штамм

...60 и20 КД сооттветственно. Константа связывания 2 х 10 М,Методы оценки специфичности МКА:непрямой и "сэндвич" варианты ТИФА, иммуноблот.Контаминация штамма, Контаминатовлинии, включая бактерии, грибов, дрожжейи микоплазм не обнаружено,Криоконсервация, К осадку гибридныхклеток добавляют фетальной сыворотки теленка и диметилсульфооксида до конечнойконцентрации 10%. Суспензию клеток разливают в стерильные пластиковые ампулы сзавинчивающимися крышками по 1-5 млн.кл., помещают в коробку иэ пенопласта и1752764 10 20 40 табл, 2,55 ставят на 1 сут в морозильник при -70 С,после чего ампулы переносят в жидкий азот, Условия размораживания. Замороженные клетки штамма вынимают из сосуда с жидким азотом и быстро помещают в водя ную баню на 37 С, Как...

Номер патента: 1756351

Опубликовано: 23.08.1992

Авторы: Андриенко, Белоус, Кравченко, Семенченко

МПК: C12N 5/00

Метки: гепатоцитов, гипотермического, изолированных, среда, хранения

...магний 0,100- гепатоцитов, что обусловлено наличием в ней 0,200; хлористый кальций 0,100-0,200; фосИаС 1 неблагоприятно влияющего на клетки. Форнокислый калий 0,050-0,100;Целью изобретения является повыше- фосфорнокислый натрий О,О 50-0,100; сахание морфофункциональной сохранности роза 70,0-100,0; альбумин 5,0-10,0; трисгепатоцитов. НС-буфер - до 1000 мл,П р и и е р. Выделение гепатоцитов Концечтрация клеток составляла проводили неферментативным методом с . (5-10) 10 кл/мл. Еакпечатки хранили в использованием ЭДТА и щадящей дезагре- течение 3 сут в битовом холодильнике. Тем1756351 Формула изобретения Таблицэ 1 Метаболические параметры изолированных гепатоцитов до и после 3 сут гипотермического хранения (л=б)лиц Метаболическое...

Номер патента: 1756352

Опубликовано: 23.08.1992

Авторы: Зоделава, Самильчук, Сарсания, Хаджирисьян

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа-1-антитрипсина, антигенной, антител, гибридных, детерминанте, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, общей, человека, штамм

...же момента через день в каж- дой лунке меняют приблизительно половину средыКультивирование гибридных клеток в поисутствии ГАТ проводят в течение первых двух недель после слияния, затем еще 4 дня клетки культивируют в присутствии ГТ (без аминоптерина) и далее переводят на обычную среду без добавок. Отбор гибридсм, продуцирующих МКА требуемой специфичности, осуществляют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). В первом случае на твердой фазе адсорбируют ААТ человека, во втором - ААТ павиана гамадрила, Для реакции используют 96-луночные ИФА панели, в лунки которых вносят ААТ (2 мкг/мл, 100 мил на лунку), разведенный в 50 мМ карбонатном буфере, рН 9,5, Адсорбци;о ведут при 4 С в течение 16-18 ч, после чего панели трижды...

Номер патента: 1759872

Опубликовано: 07.09.1992

Авторы: Березкина, Завадская, Игнатова, Ковалева, Плескач, Синакевич

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, трансферрину, человека, штамм

...температуре. Затем промывают . водой и ФБР и добавляют в каждую лунку по 50 мкл конъюгата кроличьих антимышиных антител с пероксидазой хрена в разведении 1:500, Через 1 ч платы промывают водой и Ф БР и добавляют по 50 мкл субстрата (0,1 О(, ортофенилдиамин, 0,03Н 20 О, 0,2 М цитратный буфер, рН 4,5) в каждую лунку. По окончании ферментативной реакции расщепления Н 20 о в присутствии арто-фенилендиамина при наличии МКА развивается желтая окраска, которую регистрируют на спектрофотометре Мультискан при длине волны 450 нм. Связывание МКА с трансферрином человека обнаруживают при разведении супернатанта до 10Отсутствие взаимодействия полученных МКА с гемоглобином, альбумином и С- реактивным белком человека определяют следующим образом. В...

Номер патента: 1761797

Опубликовано: 15.09.1992

Авторы: Глухова, Трошко

МПК: C12N 5/00

Метки: инкубации, млекопитающих, среда, трансплантируемых, эмбрионов

...тем, чтосреда содержит в мас.% перечисленные выше компоненты, рН среды 7,2 - 7,45, осмотическое давление 280 - 295 мосм/кПредлагается название среды - фосфатносолевая с малатом (ФС-М),Введение в фосфатный буфер яблочнойкислоты в качесгве единственного энергетического субстрата, а также глютамина какстабилизирующего агента, делает среду более экономичной, повышается сохранностьи приживляемость жизнеспособных эмбрионов млекопитающих, Среда является болеестабильной, так как ее раствор сохраняетсяпро комнатной температуре в течение 2 3лет, не меняя своего состава и физиологиче1761797 ского действия / раствор среды в прототипе выдерживают длительное хранение только при 4 С и при рН не ниже 7,0 - 7,2.Достижение цели иллюстрируется...

Номер патента: 1761798

Опубликовано: 15.09.1992

Авторы: Попов, Слепцова

МПК: A01K 61/00, C12N 15/00, C12N 5/00 ...

Метки: клеток-доноров, низших, отбора, позвоночных, ядер

...ядер у низших звоночных, который заключается в том берут клетки эмбрионов амфибий и выв их в монослойную клеточную культуру. Целью предлагаемого упрощение способа отбор ядер и, повышение точнос метода за счет использо костистых рыб, а также про ной идентификации и отб диям митотического цикла1761798 Результаты экспериментов по трансплантации ядер, находящихся на различных стадиях митотического цикла, в неоплодотворенные яйцеклетки вьюна) Развития нет Поставленная цель достигается тем, чтозародышей костистых рыб на различныхстадиях эмбриогенеза освобождают от оболочек известным микрохирургическим методом, диссоциируют на отдельные клеткив бескальциевом физиологическом растворе для холоднокровных животных, после чего проводят визуальную...

Номер патента: 1763486

Опубликовано: 23.09.1992

Авторы: Блинова, Громов, Кузьмина, Лобко, Матюшин, Нечитайло, Чадов

МПК: C12N 5/00

Метки: клеток, культивирования, млекопитающих, монослойного, поверхности, полистирола, пригодной, стерильной

...показателем ответа клеток на свойства поверхности чашек Петри служит эффективность клонирования, определяемая как отношение числа сформировавшихся на чашках Петри клонов к дозе посева (абсолютная эффективность). Для сравнительной характеристики вычисляют относительную эффективность, клонирования каждого варианта, т,е. отношение его абсолютной эффективности к абсолютной эффективности на чашках Петри зарубежных фирм в процентах.Качественной характеристикой являлась морфология клонов (степень компактности и однородности), их размеры, а также морфология клеток в соответствии с их нормальным фибробластоподобным фенотипом (т.е. соответствует ли форма клетки их нормальному фибробластоподобному состоянию). В качестве контроля использовали...

Номер патента: 1773938

Опубликовано: 07.11.1992

Авторы: Кенжебулатов, Муканов, Мукантаев, Соколова, Сырманов, Шегидевич

МПК: C12N 5/00

Метки: адгезивному, антигену, антител, гибридных, еsснеriснiа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...35 продуцировали антитела к К 99 адгезивномуантигену ЕзсЬегсЫа со, Штамм гибридных клеток продуцирует антитела в культуральную среду и в асцитную жидкость.Штамм гибридных клеток ЗР 60 хранит ся в специализированной коллекции перевиваемых соматических клеток позвоночных Института цитологии АН СССР под номером ВСКК(П) 519 Д. Штамм характеризуется следующими свойствами.45 Морфологические свойства, Гибридныеклетки представляют собой слабоприкрепляющиеся к носителю округлые клетки размером с исходную миеломную клетку, Ядро занимает большую часть клетки. Цитоплаз ма имеет вид тонкого ободка.Культуральные свойства. Гибридныеклетки выращивают в среде ЙРМ 1-1640, содержащей инактивированную нагреванием сыворотку эмбрионал коров (10-20%), -...

Номер патента: 1774949

Опубликовано: 07.11.1992

Авторы: Агрба, Аравиашвили, Инджия, Какубава, Лапин, Тимановская, Чикобава

МПК: C12N 5/00

Метки: papio, антител, гамадрила, используемый, качестве, клеток, культивируемых, лимфотропного, моноклональных, намаdrylаs, павиана, павианов, ретровируса, т-клеточн, тест-объекта, типа, характеристики, штамм

...1,5 - 2 х 10 е кл/мл,Клетки штамма хорошо переносят криоконсервацию, В качестве криопротектораиспользуют 8%-ный диметилсульфоксид вэмбриональной сыворотке коров.Штамм представлен одиночными лимфоидными клетками и их небольшими скоплениями. При окраске препаратов клеток поРомановскому-Гимза выявляется морфологическая структура лимфоблэстов, Клетки восновном крупные с большим ядром и нежно-голубой цитоплазмой. В ядрах клеток определяются нуклеолы.гь,Цитогенетическая характеристика;Цитогенетический анализ; проводимыйметодом окраски хромосом на О-диски, выявил наличие нормального кариотипа павиана гамадрила (2 п = 42,хх) при модальном-классе хромосом, равным 42/30, и плоидности клеток (и = 300), равной 13,9%,З,Характеристика вирогенного...

Номер патента: 1776691

Опубликовано: 23.11.1992

Авторы: Гервазиева, Климович, Крутецкая, Овсянникова, Пашкова, Полищук, Самойлович

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, человека, штамм

...МКАТ может быть проверена в твердофазном иммуноферментном анализе с помощью 1 дЕ, адсорбированного на твердой фазе. МКАТ связываются с белком А стафилококка, что может быть использовано при их очистке. При адсорбции на твер 20 25 30 35 40 45 50 55 дой фазе МКАТ способны связывать сывороточный 1 дЕ и могут использоваться в качестве захватывающих антител в системе двухдетерминантного иммуноанализа (в паре с мечеными 1 дЕ-специфичными антителами) или при афинном извлечении 1 дЕ иэ сывороточных препаратов. МКАТ Е/5 Д 4, сохраняя антиген-распознающие свойства после присоединения ферментной метки,могут также служить выявляющим реагентом в двухдетерминантном иммуноанализе,Антитела специфичны в отношении эпитопа на 1 дЕ, который не...

Номер патента: 1778183

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Бауер, Беккерт, Белова, Оглоблина, Смирнов

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, ингибитору, используемый, кислотостабильному, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мочи, трипсина, человека, штамм

...разведений антител М 2 с концентрац ией от 2700 до 0,325 нг в 1 мл буфера Б и инкубируют 1 ч при комнат ной температуре. После этого панель отмывают три раза направленной струей водопроводной .воды и для проявления связавшихся в лунках МКА вносят в ячейки по 100 мкл раствора коньюгата 25 пероксидазы хрена с антителами кролика к иммуноглобулинам мыши, разведенного в 1000 раз буфером Б, и инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре, После трехкратного отмывания водой для определения связавшейся в лунках пероксидазы в лунки вносят по 100 мкл субстратной смеси (100 мкл раствора о-фенилдиамина 1 мг/мл в 1 О мл 0,02 М раствоое цитрата натрия, рН 4,5, с 10 мкл 303- ного раствора НО) и инкубируют при комнатной температуре до развития...

Номер патента: 1778184

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Аркина, Кускова, Лимарева, Менявцева, Мирютова, Ратнер

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, иммуноглобулинов, используемый, клеток, кролика, культивируемых, легким, мusсulus, моноклональных, цепям, штамм

...препаратом иммунохимицес.ки чистых легких цепей иммуноглобули"нов кролика, режим активации: концентрация белка - 40 мнг/мл, наслаивающий буферный раствор - карбонатбикарбонатный буфер рН 9,6, время инкубации - 18 ч при 4 С. После отмывания планшетов от несвязавшегося белка (6 раз поочередно водопроводнойводой и дистиллированной водой с0,053 твина) в лунки вносят исследуемые пробы культуральной жидкостис продуктами жизнедеятельности гибридного клона Я 5, а также положительный (сыворотка мышей, иммунизированных легкими цепями иммуноглобули нов кролика) и отрицательный (культуральная жидкость, не содержащаяпродуктов жизнедеятельности гибридом)контроли (К+ и К- соответственно).Проволят инкубацию в течениео37 С, спмывают...

Номер патента: 1778185

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Бурба, Васин, Гулюкин, Дьяконов, Замараева, Иванова, Лобунцова, Шишков

МПК: C12N 5/00

Метки: вируса, клеток, крупного, легкого, лейкоза, перевиваемых, продуцент, рогатого, скота, штамм, эмбриона

...по 500000 ед/л). Оптимальнаяплотность посадки клеток штамма составляет 2 10 клеток на 1 мл среды.Монослой формируется через 3-4 суток.При пересеве клетки с поверхностистекла снимают подогретым до 37 С 400,023 раствором Версена.Коэффициент пересева равен 1:5.Клетки штамма продуцируют в питательную среду ВЛКРС и его антигены.Продуцируемый клетками штамма вирус,идентичен исходному вирусу, использованному для заражения клеток. Подэлектронным микроскопом продуцируемый клетками ЛЭК"ВИЭВ.вирус имееттипичную для вирусной частицы типа"С" морфологию, т.е. состоит изцентрально расположенного электронноплотного нуклеотида диаметром 6090 нм, между нуклеотидом и двухслой"ной внешней мембраной вириона располагается электронно-прозрацная проме"...

Номер патента: 1789559

Опубликовано: 23.01.1993

Авторы: Аннаева, Граевская, Гуськов, Пархоменко

МПК: C12N 5/00, G01N 33/18

Метки: веществ, водорастворимых, токсичности

...1, Для подготовки культурыклеток Неа берут в виде монослоя в стеклянном матрасе емкостью 0,5 л в среде следующего состава: среда 199-45 %, средаИгла 48 %, сыворотка крупного рогатого 40скота без консерванта 7 %, стрептомицинапо 250 ед/мл, На третий день культивирования клетки снимают со стекла 0,25 %-раствором трипсина, ресуспендируют впитательной среде, разбивают комки клеток 45пикетированием, подсчитывают число клеток е 1 мл и готовят суспензию одиночныхклеток в культуральной среде с плотностью20 клеток/мл, по 5 мл суспензии клеток, т, е.100 клеток на пробу, инокулируют в 10 камер, 5 из них служат контролем, в 5 вносят5 х 10 мг процента хлорофоса. Клетки культивируют при 370 С до появления видимыхневооруженным глазом макроколоний,...

Номер патента: 1791450

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Барков, Липницкий, Луговая, Свиридов, Синюкова, Фарбер, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, мелиоидоза, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, штамм

...ацзсццз 1. ВСКК(П)276 Д для получения моноклональных айотител.Моноклональные антитела к антигену 8возбудителя мелиоидоза получают из куль туральной жидкости среды), в которой клетки штамма выращивают вне организма ииэ асцитной жидкости мышей, которым клетки штамма вводят внутрибрюшинно,Для получения антител иэ культураль ной жидкости клетки штамма выращивают встандартных условиях: при температуре 37 С, влажности 98%, СО 2 - 5% в среде культивирования, Затем производят постепенный рассев культуры, Клетки выдерживают 0 для пролиферации без смены среды до достижения максимальной плотности, при которой клетки погибают. Культуральную жидкость осветляют центрифугированием и используют как источник антител.5Для определения титра...

Номер патента: 1791451

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Барков, Липницкий, Новицкая, Свиридов, Синюкова, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, маllеi, моноклональных, поверхностному, продуцент, рsеudомоnаs, сапа, типичных, штамм, штаммов

...выращивают вне организма и из асцитной жидкости мышей, которым клетки штамма вводят внутрибрюшинно. достижения максимальной плотности при которой клетки погибают. Культуральную жидкость осветляют центрифугированием и используют как источник антител.Титр моноклонэльных антител опреДеляют с помощью твердофазного .ИФА по общепринятой схеме. Для этого образцы культуральной жидкости титруют двукратным шагом с 1;10 до 1:5120 в лунках планшетов, сенсибилизированных водно-солевым экстрактом возбудителя сапа, В качестве отрицательного контроля используют нэдосадочную жидкость несекретирующей антитела миеломной клеточной линии РЗ-Х 63-Ац 8.653, в качестве положительного - сыворотку мышей, иммунизированных убитыми бактериальными клетками...

Номер патента: 1791452

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Лавренов, Филиппова

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: viтrо, культивирования, тканей

...см, 50-помещали в стерильный флакон с питательной средой Игла с добавлением антибиотиков (по 100 ЕД на 1 мл пенициллина + стрептомицина). Флакон закрывали рези 55 новой пробкой и доставляли в лабораторию Все дальнейшие работы производились в стерильных условиях: в боксе кусочки опухоли в чашке Петри с небольшим количеством культуральной среды измельчали на меры в системе В.В.Чеботарева быстро. 10+Кпреднизолонинсулинполивинилпирролидон 01 мг/млпенициллин 100 ЕД/мл стрептомицин100,ЕД/мл Кассета вкладывалась в сухую стерильную стеклянную банку 0,5 л, которая накрывалась стерильной чашкой Петри, что вместе составляло культивационную камеру. На 5 сутки культивированиясреду сливалии, культуры фиксировали 100 Д нейтральным формалином, пары...

Номер патента: 1791453

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Белкина, Дерюгина, Лапенков, Недорезов, Носырев, Оловникова, Удалов, Чекнева, Чертков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, н-антигена, растворимой, формам, человека, штамм

...свойства.Среда культивирования: ДМЕМ с добавлением 3 мм . глутамина, 1 мМ пируватанатрия, 20 мМ Хепес - буфера, 5 х 10М 2 - меркаптоэтанола, 10 ЭТС илиоленьей сыворотки и антибиотиков, Частотапассирования 1:2 - 1:3 через 2-3 сут. плотностьклеток вжидкойсреде 3-4 х 10 кл/мл.6Клетки выращивают при 37 С, 6-ном содержании СО 2 в воздухе и 95 - 100-нойвлажности. При культивировании 1 п чиччоМышам линии ВА 1 В/с внутрибрюшинно за7-30 сут. до введения гибридных клетоквводят пристан (0,25 мл), Гибридные клеткиинъецируют в количестве 2-3 х 10 /мышь,6асцитные опухоли образуются через 12-16сут,Морфологические признаки.Слабоприкрепленные к субстрату клетки с обычной для гибридом морфологией, 20 среда: 25 30 35 40 ного донора 50 55 5 10 15...

Номер патента: 1792426

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Барнабишвили, Иванидзе, Мирцхулава, Цибадзе

МПК: C12N 5/00, C12N 7/00

Метки: защиты, клеток, неспецифической, противовирусной

...цитопатическому действию (ЦПД) и реакции .гемагглютинации (РГА) микрометодом на полистироловых панелях, Титром антигенл считали его наивысшее разведение, при ко. тором обнаруживалась интенсивная гемагглютинация 3+-4 . В клеточных, где не наблюдалась ЦПД магнитного поля, эффек1792426 тивной защитой считали продуцироданную при действии поля защиту по отсутствии с РГА вирусосодержащей культуральной жидкости (ВКЖ) и ЦПД вирусов в течение 168 ч (7 дней), Более долгие сроки инкубации клеток приводят к нарушению целостности клеток в контроле, в необлученных магнитным полем образцах, Поэтому максимальное время для экспериментов 168 ч. В течение этого времени. отсутствие заражения вирусами облученйых магнитным полем клеточных...

Номер патента: 1794949

Опубликовано: 15.02.1993

Авторы: Авдиенко, Капина, Куликовская, Литвинов, Черноусова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, массой, микобактерий, молекулярной, моноклональных, продуцент, тuвеrсulоsis, типа, человеческого, штамм

...10 М2-меркаптоэтанола, 50 ед/мл гентамицина,Характер роста: стационарная суспензияМетод снятия; встряхиваниеЧастота пассирования:2-3 суток Посевная доза: 2-3 10 клеток/мл5Кратность рассева: 1;2-1:3Консервация клеток: клетки заморожены после 1,3, 10, 15 и 25 пассажей в культуре и после роста в виде асцитной опухоли в мышах, Общее количество ампул - 30, по 4-5 млн клеток в ампуле, Криозащитная сре"да: эмбриональная телячья сыворотка с 1020 одиметилсул ьфоксида, Режимзамораживания: клетки в криозащитнойсреде хранили 1-3 сут при -70 С, после чегопомещали в жидкий азот. Выживаемостьпри размораживании - 80 о ,5 Сведения о контаминантах линии: бактерии - нет,грибы - нет,микоплаэма - нет,дрожжи - нет,Морфология культуры; культура...

Номер патента: 1794950

Опубликовано: 15.02.1993

Авторы: Бирюкова, Буадзе, Егоров, Мостовая, Новиков

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: гибридных, клеток, культивирования, мыши

...жидкости 1;10. Титр антител определяют в реакции непрямойиммунофлюоресценции с использованием вкачестве антигенного материала мононуклеарных клеток периферической крови здоровых лиц,П Р и м е р 2. Во флакон со средой ДМ ЕМстерильно после добавления сывороткикрови плодов коров из расчета 10, и гентамицина в конечной концентрации 0,8 мг/млпипеткой вносят суспендированный в этой 20же среде коллагеновый микроноситель, доведя его концентрацию до 2 мг/мл. Затемфлакон засевают гибридными мышинымиклетками ИКО2 так, чтобы их конечная5 25концентрация в суспензии составила 4 х 10 25кл/мл. Флакон помещают в термастат и выдерживают при 37 С.Через 48 ч количество гибридных клетоксоставляет 4,8 х 10 кл/мл, а титр монокло 6нальных антител в...

Номер патента: 1798372

Опубликовано: 28.02.1993

Авторы: Агапов, Локтев, Перебоев, Святченко

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, вирусу, восточного, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лошадей, мusсulus, моноклональных, продуцент, протективных, штамм, энцефаломиелита

...Е 2 вируса ВсЭЛ в реакции иммуноблотинга. Активность МКА в реакции нейтрализации вируса ВсЭЛ на культуре клеток Чего составляет 1;200. МКА 1 В 2 эффективно защищают мышей от введения летальной дозы вируса ВсЭЛ. Индекс разистентности составляет 6,5 д. Титр МКА в ИФА составляет 1:5000 для культуральнойжидкости и 1:300000 для асцита. Стабильная продукция МКА сохраняется на протяжении не менее 30 пассажей и чего.5 Криоконсервирование. Среда для замораживания - среда ДМЕМ(М) -500 , фетальная сыворотка - 40%, диметилсульфоксид -10, 0,5 мл клеточной суспензии переносятв пластиковые криопробирки и помещают в10 пенопластовый контейнер с толщиной стенок 1,5 см, Контейнер вносят в пары жидкого азота, Через сутки пробирки переносят...

Номер патента: 1799907

Опубликовано: 07.03.1993

Авторы: Акатов, Берестовская, Лавровская

МПК: C12M 3/00, C12N 5/00

Метки: животных, клеток, пассирования

...и переносят во флакон со1799907 авитель В,Лавровск ор Л.Волкова Техред М.Моргентал Корректор О,КравцоваЗаказ 1138 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СС 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5енно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарин Прои свежей питательной средой, соблюдая условия стерильности. Дальше клетки растут на волокнах до образования мультислоя,Для отделения клеток флакон несколькораз встряхивают вручную. При этом слабо прикрепленные верхние слои клеток отде- /Уляются от волокон, обнажая монослой распластанных на волокнах клеток. Контроль за ростом и отделением клеток осуществляют визуально и с помощью микроскопа, Затем пробку 2 с волокнами 5, покрытыми...

Номер патента: 1801117

Опубликовано: 07.03.1993

Автор: Цунея

МПК: C12N 15/00, C12N 5/00

Метки: jthfs-про, антитела, антителу, белку, гибридомы, дуцентмоноклонального, клетка, культивируемая, лимфоцита, моноклонального, моноклональному, человека

...1 1640, содержащего 15%лошадиную сыворотку, добавляемого в течение 1 мин; 8 мкл ВРМ 1 1640, содержащего15% лошадиной сыворотки, добавляемого втечение 2 мин.Результирующие клетки слияния цент, рифугируют 10 мин при 1000 об./мин, повтЬрно суспендируют в ВРМ 1 1640,содержащей 15% лошадиной сыворотки ипенициллини стрептомицин в количестве100 ед. и 100 мг на 1 мл соответственно.Клетки помещают в чашки в количестве 0,1мл на ячейку в 96-ячеечных чашках, предварительно уравновешенных в 5 СО 2, Чашкиинкубируют в течение ночи при 37 С в 5 о СО 2На вторые сутки в каждую ячейку вводят0,1 мл среды НАТ (13,6 мкг/мл гипоксантина, 0,176 мкг/мл аминоптерина и 3,88мкг/мл тимидина) в ВРМ 1 1640, содержащем 15% лошадиную сыворотку. Эта средаобеспечивает...

Номер патента: 1806195

Опубликовано: 30.03.1993

Авторы: Вахтин, Кравцов, Федорова, Яковлев

МПК: C12N 15/00, C12N 5/00

Метки: клеток, популяции, селекции

...передлегочными метастазами заключается в следующем: в их высокой скорости формирования (7-14 суток) и достаточном количестве для проведения популяционного теста и отбора.Легочные метастазы формируются в течение 30 дней и более, и количество их значительно и недостаточно для проведения селекции.Кроме того, при отборе внутрибрюшинных узлов после нескольких циклов отбора получают популяции клеток миеломы с достоверно стабильным кариотипом и, следоНа чертеже йоказана частота клеток с микроядрами (ЧКМ) во внутрибрюшинных узлах перевивной миеломы ЗР 2/О,По оси абсцисс - частота клеток с микроядрами (Ч КМ), . По оси ординат - число внутрибрюшинных узлов, %, а - 40 в/б узлов до отбора; б - 20 в/б узлов после 1-го цикла отбора: в - 26 в/б...

Номер патента: 1808009

Опубликовано: 07.04.1993

Авторы: Герасимова, Колокольцова, Царева

МПК: A01N 63/00, C12N 5/00

Метки: agrotis, segetum, sснiff, вирусов, клеток, культивирования, озимой, перевиваемых, совки, штамм, эмбрионов, энтомопатогенных

...клеток на 1 мл 5 чевиной, в соотношении 200 мг гусениц на 1ростовой средой и переносят в сосуд для мл раствора. Титр вирионов определяют накультивирования. Миграцию и деление кле- ТООво, используя метод обработки результок наблюдают через 2,0-2,5 мес. Смену татов Рида-Менче, в 96-ячеистых пластикосреды осуществляютчерез 10-15 сут небо- .вых плашках фирмы "Роюч ЕаЬога 1 огез"лее чем на 30. После формирования 50- 10 (Англия).60, монослоя клетки снимают со стекла в Череэ 60 мин послезаражения культурысвежей порции ростовой среды и переносят клеток вирусную суспензию сливают, внов новый культуральный сосуд, Начйная с сят свежую питательную среду и культиви 10-15 пассажей пересевы проводят 2 раза руют при 28.С в термостате. Анализнеделю,...

Номер патента: 1808010

Опубликовано: 07.04.1993

Авторы: Герасимова, Колокольцова, Царева

МПК: A01N 63/00, C12N 5/00

Метки: аrмigеrа, вирусов, клеток, куколок, культивирования, нuвn, неliотнis, перевиваемых, полиэдроза, совки, хлопковой, штамм, ядерного, яичников

...соответствующего вида насекомых.Поскольку полученный штамм клетокхлопковой совки НеОйэ ага 9 ега являетсяединственным продуцирующим ВЯП Н.агацега с одиночным включением вирионов в пучки и в литературе нет сведений одругих линиях клеток, продуцирующих данный вирус, то предложенное изобретение(предложенный штамм) обладает существенными отличиями,На фиг.1 приведена фотография клетоклинии МБ-ХС, В СКК(Б) А(нефиксированные и неокрашенные клетки ув.х 400); нафиг.2 представлена микрофотография метафазной пластинки клеток линии МБ-ХС(окраска азур-эоэином); на фиг,З изображена диаграмма распределения числа хромосом в клетках культуры МБ-ХСнаразных пассажах; на фиг.4 приведена диаграмма изоферментного анализа штамма перевиваемых клеток...

Номер патента: 1808872

Опубликовано: 15.04.1993

Авторы: Белова, Винтер, Котляр, Махмутова, Хамаде, Шапиро

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, днказе, зависимой, используемый, клеток, крыс, культивируемых, мusсulus, моноклональных, печени, хроматина, штамм

...среды и осаждают, ресуспендируют в 5 мл той же среды и переносятв культуральный флакон. Выживамость после размораживания более составляет более 30%.30 Контаминация,Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды.Характеристика полезного продукта,Моноклональные антитела связывают2+Мп -зависимую ДНКазу, при этом они способны ингибировать нуклеазную активность данного фермента. Титр МКА вкультуральной жидкости, определенный с40 помощью ИФА, составляет 1:8, в асцитнойжидкости - 1.10,5П р и м е р 1, Для определения специфического взаимодействия моноклональ 2+ных антител с Мп -зависимой ДНКазойпроводят определение нуклеэзной активно 2+сти Мп -зависимой ДНКазы в присутствииантител,...

Номер патента: 1813783

Опубликовано: 07.05.1993

Авторы: Гурьянов, Гурьянова, Ильясова, Коксин, Юсупов

МПК: A61K 35/14, C12N 5/00

Метки: животных, клеток, крови, культивирования, сыворотки, тканей

...брались в общепринятой 10%- ной концентрации в среде Игла МЕМ (рН 7,3) с глутамином и канамицином. Для работы взяты следующие культуры клеток; РК- из почек взрослой свиньи, НГУК- из опухоли гассерова узла крысы, Чего - иэ почечной ткани взрослой африканской зеленой мартышки, после 72-часоаого роста в матрасиках емкостью 200 мл. После смешивания суспенэии с сывороткой посевная концентрация клеточной суспензии становилась 60000 клеток/мл. Посевная клеточная взвесь рассеивалась по 2 мл ао флакончики емкостью 10 см с посевной318137 площадью 3 см . Плотность посева - 40000клеток/см . Клетки выращивались в термо- .стате при 37 С и подсчитывались через каждые 24 ч после посева. Динамики роставышеназванных культур клеток по индексу...

Номер патента: 1822876

Опубликовано: 23.06.1993

Авторы: Дронов, Завлин, Каранов, Литвинчук, Нурмамедов

МПК: C12N 5/00

Метки: глаза, заднего, клеток, культивирования, подложки, приготовления, роговицы, эпителия

...малоновой кислоты. Пленки готовятгя аналогично примеру 1, но в отличие от него высыхают на 5-10 мин скорее, т,е. в течение 30 - 35 мин, После промывания в 2 сменах физиологического раствора и в растворе питательной среды по 15 мин пленки использовались в качестве подложки для культивирования клеток заднего эпителия роговицы глаза кролика, Через 48 ч культивирования 1/3 площади подложки была заполнена распластанными и активно растущими клетками, форма и размер которых также характеризовались выраженным полиморфизмом; подложка выглядела гладкой и равномерно растянутой на всем протяжении. На 5 - 6 сутки культивирования клетками было покрыто 2/3 площади подложки. Большинство клеток сохраняло отросчатую форму, но их полиморфизм был менее...