C12N 5/00 — Недифференцированные клетки человека, животных или растений, например, клеточные линии; ткани; культивирование или сохранение их; питательные среды для них

Номер патента: 1555359

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Егоров, Зеленин, Колобков, Крамерова, Филякина

МПК: C12N 5/00

Метки: китайского, клеток, культивируемых, продуцент, хомячка, человека, штамм, эритропоэтина

...клеток с овальными ядрами, содержащими мелкие ядрышки. По мере увеличения плотности слоя клетки уменьшаются в размерах и приобретают сферическую форму.Культуральные свойства. Штамм 25 СНО Еро,1 поддерживается на отечественных средах Игла(в отношении 1:1) с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота в виде монослойнойкультуры, Отделение клеток от стекла или пластика проводят смесью 0,25%-ного раствора трипсина и 0,02%- ного раствора версена (1:1 О), кратность рассева 1:6-1:8, посевная доза 2 х 10 ф -Зх 10 клеток на 1.см площади сосуда. Плотного монослоя культура достигает к 4-му дню после пассажа.Криоконсервация. Криоконсервирова-: ние проводят на среде Игла(1:1) с 20% сыворотки крупного рогатого скота и 7% диметилсульфоксида...

Номер патента: 1555360

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Вербицкий, Папазов, Фидлер

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гонадотропных, гормонов, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, субъединице, человека, штамм

...37 С, газовая фазавоздух +5% СО, Способ культивирования - в пластиковых флаконах на 50-." 25250 мл, посевная доза 500.000 клеток/мл, кратность рассева 1:2времясубкультивирования 3-4 дня,В организме животного - .мьппь ВАЯВ/собработанная пристаном (0,5 мл.в/бр.за 5-40 дней до инокуляции), доза,инокуляции 3-8 млн клеток, время образования асцита 10-20 дней,Характеристика продуцируемого продукта, Штамм гибридных клеток продуцирует монАТ 1 яС класса, направленныепротив,Ы-ХГЧ с-ЛГ, о(-ФСГ и с(-ТТГчеловека. Концентрация полезного продукта (монАТ против Ы-ХГЧ. с-ЛГ,Я-ФСГ и ТТГ человека) в культуральной среде около 10 мкл/мл,.в асцити"ческой жидкости - около 7 мг/мл, титры данных антител при определении спомощью твердофазного...

Номер патента: 1555361

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Вербицкий, Папазов, Фидлер

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гонадотропину, гормону, животных, клеток, коровы, культивируемых, лютеинизирующему, мusсulus, моноклональных, продуцент, свиньи, специфичных, хорионическому, человека, штамм

...воздух + 5 СО .Споооб культивирования в пластиковых флаконах на 50-250 мл, посев,ная доза 500000 клеток/мл, кратностьрассева 1:2, время субкультивирования 3-4 дня,Культивирование в организме животного, В организме животного -мышьВИ В/с, обработанная приставом(0,5 мп в/бр, за 5-40 дней до инокулицин)доза инокуляции 3-8 млн.кле- .ток, время образования асцита 1020 дней,40Продуктивность штамма, Концентрация полезного продукта (монАТ против р-ХГЧ, р-ЛГЧ, р-ЛГС, р-ЛГК) в. купьтуральной сРеде около 10 мкг/мл,в асцитической жидкости - около7 мг/йл.Титры данных антител при определении с помощью твердофазного иммуноферментного метода: 1:3000 - в культуральной среде, 2 х 10 - в асцитичес-кой жидкости, при концентрации антигеяа при нанесении в...

Номер патента: 1558984

Опубликовано: 23.04.1990

Авторы: Жола, Калис, Карклин, Каулиньш, Раминя

МПК: C12N 5/00

Метки: viтrо, выращивания, питательная, среда, фрезий

...кислотаМарганец сернокислыйМедь сернокислаяКобальт хлористыйНатрий молибденовокислыйКалий иодистый ТиаминПиридоксинВитамин РРКалиевая соль лимонной кислотыКалиевая соль изолимонной кислотыКалиевая соль яблочной кислотыГлицин "АденинГидролизат казеина 1-Индолилуксусная кислота6-БензиламинопуринГибберелловая кислотаСахарозаАгарОпыт 3Натрий фосфорнокислыйдвузамещенныйАммоний азотнокислыйКальций хлористыйКалий . азотнокислыйМагний сернокислый(с мезоинозитом) 4,0 100 115 4,5 50 107 4,3 119 Среда безмезоинозита 170,0 3,3 55 1650,0440,01990, 0370,0 Калий фосфорнокислый однозамещенный 170,0Железо сернокислое 27,8Натриевая соль этилендиаминтетрауксуснойкислотыЦинк сернокислыйБорная кислотаМарганец сернокислыйМедь сернокислаяКобальт...

Номер патента: 1560549

Опубликовано: 30.04.1990

Авторы: Буларгина, Ездакова, Катруха, Сологуб, Федоров, Феоктистова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рогатого, скота, штамм

...активность.В культуральной жидкости монАТнакапливаются в титрах 1:500 - 1:1000(ИАФ) или 1:8 - 1:16 (РДП - реакциядиффузионной преципитации).В. асцитной жидкости титры в ИФА0,5 (10 -10 ), в РДП 1:160 - 1:640,Контаминация, Иикоплазмы, бакте 50рии, плесневые грибы и дрожжи невыявлены,Криоконсервирование, Среда для замораживания; 45% среды Игла, 457 эмбриональной сыворотки к,р.с., 107ДМСО, Режим замораживания до -30 Со 55со скоростью 1 град/мин до "ЗООС соскоростью 2 град/мин, далее - жидкийазот. Раэмораживают при 40 С, центрифугируют при 1000 об/мин в течение1 О мин, ресуспендируют в ростовойсреде до концентрации 0,510 кл/мл.Использование штамма и продуцируемых монАТ иллюстрируется следующимипримерами,П р и м е р 1. Клетки клона...

Номер патента: 1562353

Опубликовано: 07.05.1990

Авторы: Демчева, Папковский, Савицкий, Чередникова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, копропорфирину, культивируемых, мusсulus, моноклональных, штамм

...вводят 0,5 мл 2, 6, 10, 14-тетряметилпентядекана в/б. На 7 день штаммклеток инъецируют В/б в количестве500000 клеток в мышь. Асцитную жидкость отбирают на 12-4 день. Объемасцита 4-5 мл. Клетки из асцита перевиваются новым мышам в течение 8 ОО пассажеи без заметного изменениянТИТРЯ МОНОКЛОНЯЛЬНЫХ ЯНТИТЕЛ В ЯСЦИТНОЙ ЖИДКО С Ти еПродуктивность штаьола,Концентрация моноклональных антлтел в культуряльной жидкости на7 день культивирования 100 икг/мл,а в аситной жидкости 10-2 мг/мл приопределении по методу Лоури и методомтвердофязного иммуноферментного анализа.Контаминация: бактерии и грибы вкультуре не обнаружены, Тест на микоплазму отрицателен.Кариологическая характеристикаштамма: модяльное число хромосом 100.Маркерых хромосом не...

Номер патента: 1563700

Опубликовано: 15.05.1990

Авторы: Аллахвердиев, Гринберг

МПК: A61K 39/02, C12N 5/00

Метки: fаlсiраruм, биомассы, возбудителя, малярии, рlаsмоdiuм

...не пропускают суспензию, отверстия большего 40диаметра пропускают клетки свободно,не вызывая лизиса, Толщина колонки5 - 8 мм определяется требованиямитехнической прочности изделия.Число пропусканий, необходимоедля удаления хрупких эритроцитов изкультуры, подбирают для конкретныхусловий. При этом исходят чз показателей гематркрита суспензии до и пос"ле пропускания. Гематокрит - отноше-;.ние объема (упакованных) интактныкэритроцитов к объему всей суспензии -определяют центрифугированием в узкомкапилляре.Снижение величины гематокрита помере пропускания клеток через колонку указывает на лнзис эритроцитов.Для стандартных условий культивирования (гематокрит суспензии в культуре. составляет 10%) используют 20 - 25- кратное пропускание...

Номер патента: 1564184

Опубликовано: 15.05.1990

Авторы: Баев, Зеленин, Капник, Прудовский, Рубцов, Скрябин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гормону, животных, используемый, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рогатого, роста, скота, штамм

...замораживания - на программномзамораживателеС/мин до -70 С, затем перенос в жидкий азот и хранениев нем.При размораживании клеток послехранения в жидком азоте ампулы быстро 40опереносят в водяную баню при 37 С,слегка покачивая. Содержимое ампулыстерильно переносят в подогретую питательную среду в ячейки платы с макорофагамн, инкубируют при 37 С. После 4520-24 ч инкубации среду сливают идобавляют свежую подогретую питательную среду,Жизнеспособность после размораживания - 70%.50Контроль контаминаций.Проверку на микоплаэменное и бактериальное заражение осуществляли сиспользованием флуорохромов Хехст33258 и ДАПИ и посевом культуральной55среды на мясопептонный; агар. Заражения не обнаружено.Прививаемость животным изогенногопроисхождения -...

Номер патента: 1567623

Опубликовано: 30.05.1990

Авторы: Али-Заде, Завальный, Зицманис, Зубов, Клявиньш, Лукин, Марквичева, Скуиньш, Туркин

МПК: C12N 11/02, C12N 5/00

Метки: клеток, культивирования, магнитных, микроносителей, эукариот

...раствора желатина в воде(соотношение МН и желатина 1:3), перемешивают до образования однороднойсуспензии и нагревают в течение 30 минпри 90 С. Все дальнейшие операции,начиная с добавления 35 мл 251-ногораствора глутарового альдегида, осуществляют по примеру 1. Получают45 400 г ММН с содержанием 6,4 Ж ферритакобальта.П р и м е р 7. Соли, 54 г РеС 1 хх 6 НО и 20 г Ч 1 С 1, растворяют в550 мл воды каждую, растворы объединяют и нагревают до 90 С, При перемешивании добавляют 150 мл 25 ь-ногораствора гидроокиси натрия и продолжают перемешивание в течение 40 мин 1 рпри той же температуре, Образовавшийся осадок (ИЮе 04 с размером частиц 0,05 мкм) промывают раствором0,05 М соляной кислоты до рН 6-8, Кпромытому осадку добавляют 400...

Номер патента: 1567624

Опубликовано: 30.05.1990

Авторы: Антропова, Барловская, Воробьев, Галактионов, Иванов, Маргулис, Пинаев, Фридлянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерферону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...проводят в смесиравных объемов в кондиционированнойростовой среды и 20-ного диметилсульфоксида на ростовой среде приконцентрации 0,5 10 кл. в 1 мл. Режим замораживания: 1 град в 1 мин от+20 до минус 60 С, 1 О град в 1 минот минус 60 до синус 100 С, 50 градв 1 мин от минус 100 до мину: 150 С,Клетки хранят в жидком азоте. Отогревают при 40 С в течение 1-2 мин,одалее разбавляют 10-кратным объемомсреды, центрифугируют 5 мин при1000 об/мин и высевают в ростовуюсредуЖизнеспособность клеток штамма 1580 после размораживания, определенная по включению трипановогосинего, составляет 60-701,Контаминация.Бактерии и грибы в культуре не обнаружены. Микроплазма не выявлена по включению тимидиновой метки,П р и м е р, Каждая мышь...

Номер патента: 1571063

Опубликовано: 15.06.1990

Авторы: Антропова, Барловская, Воробьев, Галактионов, Иванов, Маргулис, Пинаев, Фридлянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерферону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...проводится в смесиравных объемом кондиционированной ростовой среды и 20%-ного диметилсульфоксида на ростовой среде при концентрации0,5 -1 10 клеток в 1 мл. Режим заморажи 6вания: 1 амин от 20 до минус 60 С, 10 вмин от минус 60 до 100 С, 50 в мин отминус 100 доминус 150 С. Клетки хранят вжидком азоте. Отогревают при 40 С в течение 1-2 мин; далее разбавляют 10-кратнымобъемом среды, центрифугируют 5 мин при10 1000 об/мин и высевают в ростовую среду, Жизнеспособность клеток штамма 159 Д после размораживания, определенная повключению трипанового синего, 60-70%.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре не обнаружены, Микоплазма не выявлена по включению тимидиновой метки.П р и м е р, Каждая мышь линии ВА В/с...

Номер патента: 1571064

Опубликовано: 15.06.1990

Авторы: Байбурина, Путенихин

МПК: C12N 5/00

Метки: лиственницы, микроклонального, размножения

...почек выращивают на среде 1 с различными концентрациями гормональных веществ. В ходе экспериментов установлены предельные значения иоптимальные концентрации БАП и кинетина, Результаты представлены в табл.4 и 5 соответственно.П р и м е р 4. Растительный материал, как в примере 1. После культивирования на средах 1 и 2 полученные множественные микропобеги отделяют и субкультивируютиндивидуально на среде 3 с различными концентрациями мочевины с целью удлинения. Экспериментально определены предельные значения и оптимальныеконцентрации мочевины. Результаты представлены ниже.Концентрация мо- Средняя длина чевины,мг/л побегов,мм20 6,1 30 8,4 50 5,7П р и м е р 5. Черенки длиной 10 см заготавливают путем отстрела в 100-летних естественных...

Номер патента: 1576561

Опубликовано: 07.07.1990

Авторы: Барышников, Короткова, Тупицын

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, животных, клеток, кортикальных, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тимоцитов, человека, штамм

...КРИ 1 1640или среде МЕМ в 1 Х модификацииДульбекко, содержащей 15% телячьейзмбрйональной сыворотки, 2 мМ/мл глюгал 1 ина, 0,1 мг/мл гептамицина.Титр антител в культуральной жидкости определяют непрямой реакциейповерхностной иммунофлооресценции наживых тимоцитах, Интенсивность флюоресценции ацениваот на флюоресцентном микроскопе при увеличении объектива 40, окуляра 2,5-10.Титр антител в культуральной жидкости 1:50.Культивирование хп ч 1 чо. Для выращивания асцитной опухоли из штаммагибридных клеток пригодны мыши самкилинии ВА 1.В/С, Интактным мышам за 1-7днеи до прививки опухоли вводят внутрибрюшинно (в/бр) по 0,5 мл 3%-ногопептона на вазелиновом масле. Клеткигибридомы инъекцируют в/бр по 1 О кле 7так на мышь в 5 мл среды. Через...

Номер патента: 1576562

Опубликовано: 07.07.1990

Автор: Гаврилюк

МПК: C12N 5/00

Метки: культивирования, лейкоцитов, свиньи

...среды с 20 мг/мл индолилуксусной илн гибберелловой кислоты составляет соответственно 4,81-5,10 10 и 5,15-5,71 х х 10 кл/мл, в то время как в контроле 3,50-4, 10 10 кл/мл (при посевной дозе клеток 3,0-3,5 млн кл/мл),П р им е р 2. Во флаконы со средой Р 199 и 157 сыворотки КРС после добавления антибиотиков из расчета пенициллин 100 ед/мл, стрептомицнн 100 мкг/мл пипеткой вносят индолилуксусную или гибберелловую кислоту 150 мг/л. Клетки лейкоцитовподсвин1576562 6,10"6,34 10 ф кл/мл по сравнению с контролем 3,50-4,10 10 кл/мл (при посевной дозе клеток 3-3,5 млн кл/мл) .Способ позволяет значительно повысить стимуляцию роста клеток лейкоцитов свиньи на питательной среде с применением фитогормонов, Количество клеток культуры при...

Номер патента: 1578191

Опубликовано: 15.07.1990

Авторы: Кучко, Мицко, Петюх

МПК: C12N 5/00

Метки: картофеля, оценки, селекционных, скороспелости, форм

...приведены варианты с минималь- .ной, оптимальной и максимальной продолжительностью культивирования. ЪИз данных табл. 3 видно, что достоверное определение скороспелости испытываемых генотипов возможно при продолжительности культивирования междоузлий только в течение 13-15 сут (оптимум 14 сут). При меньшей продолжительности культивирования длина корешков недостаточна), а в некоторых случаях их еще и вовсе нет),для определения индекса, поэтому результаты в данном случае недостоверны.А при продолжительности культивирования междоузлий (эксплантетов) 16 и более суток уже не наблюдается четкой корреляции индекса корнеобразования между изучаемыми генотипами и сортами-стандартами, поэтому и здесь результаты также недостоверны,Способ...

Номер патента: 1578192

Опубликовано: 15.07.1990

Авторы: Абрамов, Алексеева, Быкорез, Михаловский, Немлий, Осипова

МПК: C12N 5/00

Метки: выращивания, клеток, печени

...качестве матрицы используют углеродный сорбент с объемомсорбционных пор по бензолу 0,5 смз /г,структурированный в виде войлока толщиной 3 мм, но без предварительногопокрытия Коллагеном или полилизином.При этом количество клеток, выявленных в среде для культивирования на 2-е и 3-и сут после нанесения, составляют соответственно 32и 35% от числа нанесенных. Следовательно, данный вариант матрицы, не покрытой коллагеном илиполилизином, непригоден для культивирования гепатоцитов,П р и м е р 4. Условия проведения эксперимента соответствуют примеру 1 за исключением толщины матрицы, составляющей 5 мм и объемом сорбционных пор по бензолу 0,5 см /г. Количество гепатоцитов, не прикрепившихся при92 бпатоцитов составляет 23,5, в последующем также...

Номер патента: 1578193

Опубликовано: 15.07.1990

Авторы: Попов, Починский

МПК: C12N 5/00

Метки: клеток, культивирования, тучных

...мазок получился в виде дорожки. Мазки просушивают и Фиксируют метанолом. Окраску мазков производят по Романов" скому-Гимэа, Паппенгейму, а с целью Идентификации тучных клеток - толуидийовым синим.Для контроля имплантируют камеры, заполненные взвесью клеток с Физраствором и беэ ньго.Затем проводят морФологическую идентификацию колоний методом микроскопииКачественная характеристика колоний в контроле (контроль 1 с фиэраст вором и контроль 2 без него) - всего20 камер - носит один и тот же характер и составляет: гранулоцетарные колонии 23,77, макрофагальные 45,8 Е,смешанные (гранулоцитарно-макрофагальные) 30,53, Колоний .тучных клетокв мазках с контролем обнаружено небыло.В мазках с гепарином (всего 30 камер) 923 составляют тучные клетки,...

Номер патента: 1581741

Опубликовано: 30.07.1990

Авторы: Байбурина, Бутенко, Катаева, Старова, Хайруллина

МПК: C12N 5/00

Метки: гибридов, микроклонального, осины, размножения

...побеги и помещают на среду 2 (табл,1) с добавками БАП 0,1 мг/л и НУК 0,02 мг/л (оптимальные концентрации), на,которой происходит рост побегов в длину и закладка пазушных почек в течение 2-4 недель, На этом этапе наблюдается развитие многочисленных пазушных побегов. Проводят 2- кратную мультипликацию побегов, возФормула 5 158никающих иэ пазушных почек, т.е, накаждом первоначальном побеге образуется 2-3 побега в пазухах листьев.При перенесении этих побегов, возникающих из пазушных почек, на свежуюпитательную среду 2 наблюдается повторение процесса активации роста пазушных почек, которые в свою очередьдают новые побеги для новой пересад"ки. Продолжительность дифференциациии роста побегов занимает 6-9 недельв зависимости от клона. Побеги...

Номер патента: 1583440

Опубликовано: 07.08.1990

Авторы: Алпатова, Баранова, Гольдрин, Кармышева, Кудинова, Миронова, Орлова, Попова, Стобецкий, Чернышев

МПК: C12N 5/00

Метки: африканской, вирусов, зеленой, клеток, кожи, культивируемых, мартышки, мышц, размножения, штамм, эмбриона

...имеет пластин" чатый характер, ядра округлые преимущественно с 1-2 ядрышками, На разных участках препаратов встречаются клет" ки с увеличенными ядрами, а также клетки с 2-3 и большим числом ядер (1-53), Среди митоэов имеются аномальные деления (многополюсные), с неправильным расположением и расхождением хромосом, местами неравномер- . ным делением ядер. Внутриядерных и цитоплазматических включений, вакуо" лизации и других признаков контами"нации клеток не обнаружено.Кариологическая характеристика,При кариологицеском изучении штамма 4 4921 на уровне 43 и 56 .пассажей уста"новлено, что штамм - гетероплоидный.Число хромосом колеблется от 57 до63. Модальный класс - с 61 хромосомой.Контроль штамма 4921 на посторонние контаминанть. При...

Номер патента: 1585328

Опубликовано: 15.08.1990

Авторы: Атабеков, Бойко, Волкова, Гаевая, Егоров, Загребельный, Зейрук, Каплан, Карпейский, Катков, Колпаков, Куприянова, Леонова, Лещинская, Лопатнев, Матохина, Панфилова, Салганик, Сенженко, Тальянский, Трофимец, Якобсон

МПК: C12N 5/00

Метки: выращивания, картофеля

...Приготовлениеконтрольной и используемой в опытепитательных сред проводят аналогичнопримеру 1. Конечная концентрация нуклеазы в среде 1 мкг/мл.П р и м е р4. Приготовление 10 контрольной и используемой в опытепитательных сред проводят аналогично примеру 1. Конечная концентрациянуклеазы в питательной среде 0,1 мкг/мл,Полученные данные по примерам1 - 4 представлены в табл. 3.П р и м е р 5, В приготовленную среду Мурасиге-Скуга добавляютнуклеазу Бег,шагсезсепз ВИ-АТССдо конечной концентрации 20 100 мкг/мл. Вычлененные меристемыиз почек ростков картофеля сорта"Лорх" пересаживают на питательнуюсреду в пробирки. Контролем служилимеристемы, высаженные на среду без 25 добавления нуклеазы. Проводили наблюдение за ростом прижившихся меристем через...

Номер патента: 1585329

Опубликовано: 15.08.1990

Авторы: Беркова, Добрынин, Коробко, Чувпило, Шамборант

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, некроза, опухоли, продуцент, фактору, человека, штамм

...4 С.Плашку отмьвает 0,1%-ным растворомтвина 20 в О, 01 М натрий-Фосфатномбуфере, содержащем 0,15 М МаС 1(ФСБТ), рН 7,2, инкубируют с 200 мкл1%-ного раствора бычьего сынороточного альбумина (БСА) в течение 1 чпри 37 С, Плашку отмывают 3-4 разаФСБТ и вносят в лунки по 50 мкл препарата, содержащего антитела. Послеинкубации в течение 1,5 ч при 37 Сплашку отмывают ФСБТ и обрабатьваютраствором антител к иммуноглобулинам мыши, конъюгиронанных с пероксидазой хрена (50 мкл в лунку, разведение 1:1000, 1 ч при 37 С). Затемплашку отмьвают и нносят 50 мклраствора ортофенилендиамина (1 мг/мл)н 1%-ном цитратном буфере (рН 4,5),содержащем 0,05% Н О. Реакцию останавливают добавлением 50 мкл влунку растнора 2 М серной кислоты.Взаимодействие...

Номер патента: 1585330

Опубликовано: 15.08.1990

Авторы: Карканица, Панютич

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: гемопоэтического, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, продуцент, ростового, фактора, штамм

...продукции,Продукция гемопоэтического ростового фактора мыши сохраняется как минимум до 60-ти пассажей 1 п ч 1 гго,Криоконсервирование,Для длительного хранения клеткиштамма эамораживают в эмбриональнойтелячьей сыворотке с добавлением 10%диметилсульфоксида. Режим замораживания; 1 С/мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкийазот, Размораживание на водяной банепри 37 С. Жизнеспособность клетокпосле размораживания 60-70% по ок"рашиванию трипановьм синим.Контаминация,Бактерии и грибы в культуре необнаружены при длительном наблюдениии посевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при.окрашивании красителями на ДНК и похарактеру включения тимидиновойметки.Использование штамма иллюстрируется...

Номер патента: 1594213

Опубликовано: 23.09.1990

Авторы: Красников, Стегний, Шинкаренко

МПК: C12N 5/00

Метки: дьюара, приспособлений, размещения, сосуде, столик

...фиг. 1 изображен столик дляразмещения приспособлений на сосудеДьюра, общий вид; на Аиг. 2 - то же,вид сверху.Столик состоит иэ столешницы 1 сцентральным отверстием 2 для установки на горловину 3 сосуда Дьюара 4,Столешница снабжена опорой, выполненной в виде раструба 5, закрепленногопо.периметру отверстия 2, и телескопическими упорами 6, жестко закрепленными на раструбе 5 по его образующей, На столешнице 1 установленштатив 7 с термостатируемой камерой 8для кратковременного хранения в за. -мороженном состоянии извлеченных контейнеров 9 с биоматериалом и аппаратГ10 для его размораживания в виде термостатированной. водяной бани. Крометого, телескопические упоры 6 снабже ны эластичными наконечниками 11,30Столик используется...

Номер патента: 1445183

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Андросова, Владимирский, Ильиных, Погуляева, Трахт, Ходун

МПК: A61K 39/40, C12N 5/00

Метки: bcg, антител, воvis, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, штамм

...клеток 2 А 5 эамораживаютв эмбриональной телячьей сыворотке сдобавлением 10% ДМСО в жидком азотедля хранения. Другую часть используют для получения гибридной опухоли васцитной форме у мышей ВАЬВ/с введением внутрибрюшинно 10 клеток мы 7шам, подготовленным внутрибрюшиннойинъекцией 0,5 мл ваэелинового маслаэа 3-30 дней до инъекции клеток, Асцит образуется через 10-16 дней. Изасцнтической жидкости выделяют иммуноглобулины с помощью сульфата аммония, Штамм 2 А 5 хранится в Специализированной коллекции перевиваемьпссоматических клеток позвоночных Института цитологии АН СССР по номером600 и характеризуется следующимипризнаками,Культуральные признаки.Среда НРИ 1-1640 с 10% телячьей эмб-,риональной сыворотки и 10% лошадинойсыворотки, 4 мМ...

Номер патента: 1595902

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Барышников, Дубинкин, Заботина, Кадагидзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, кортикальных, культивируемых, мusсulus, моноклональных, сд38, тимоцитов, штамм

...и иэ положительной лун кй гибридому вновь клонируют. Колонки возникают на двенадцатый день в 58 из 96 лунок. Проводят скрининг на Т-клетках. Позитивные клоны поеле50 клонирования составляют 100% (58 иэ 58)Культивирование п чд 1 го. Для выращивания штамма используют пластиковую или стеклянную посуду. Во флаконобъемом 45 смэ в 5 мл среды запиваютпо 5 к 10 клеток штамма. Пассаж 1 разв 3-4 дня той же дозой, Штамм выращивают при 37 С на среде ВРМ 1-1640 илисреде МЕМ в 1 Х модификации Дульбекко,содержащей 15,0 оленьей или телячьейэмбриональной сыворотки; 2 мМ/мл глютамина; 0,1 мг/мл гентамицина,Культивирование п чиччо. Для выращивания опухоли из штамма гибридныхклеток пригодны мьппи самки линии;ВА 1 В/с, Интактным мьшам за 1-7 днейдо...

Номер патента: 1595903

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Гаврилова, Демчева, Егоров, Чередникова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...методу Лоури и в Е 1,1 БА,Криоконсервирование, Клетки штаммаресуспендируют в смеси, содержащей10% ДМСО, 30% Фетальной сыворотки и607. среды ДМЕМ, в концентрации 110клеток на 1 мл, разливают при 4 С впластиковые ампулы, помещают в полиуретановые контейнеры и переносят вхолодильник на -70 С на 18 ч, Затемклетки переносят в жидкий азот надлительное хранение. Размораживаниепроизводится при 37 С в водяной бане.Жизнеспособность клеток оцениваетсяс помощью трипанового синего и составляет 407,Концентрация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительг ном наблюдении. Тест на микоплазму отрицателен. П р и м е р, Моноклонапьные антитела используют для определения концентрации инсулина методом иммуноферментного анализа. В 96-луночные...

Номер патента: 1596251

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Попова, Титаренко

МПК: C12N 5/00, G01N 33/48

Метки: нематицидов, скрининга

...экз.Указанное свидетельствует о размно женин нематод в культуре ткани риса, отсутствии нематицидного действия упрепарата У 391 и его нефитотоксичнос П р и м е р 3. Схема и методика опыта аналогична описанным в примераи 2, В качестве испытуемого препар та берут химическое соединение 9 401 с неизвестной нематоцидной активностью.При оценке результатов через 6- 15 дней после внесения препарата и и нематод в пробирках с каллусами и проростками не выявлено ни одной по вижной нематоды, что указывает на в сокую нематоцидную активность соединения,Отмеченные потемнение и угнетение 5роста каллуса и проростка свидетельствует о фототоксичности препарата.П р и м е р 4 (по прототипу ). Опытпроводят в теплице. В десять вазоновс простерилизованной...

Номер патента: 1597386

Опубликовано: 07.10.1990

Авторы: Бутова, Скробова, Табацкая

МПК: C12N 5/00

Метки: березы, карельской, микроклонального, размножения

...контролируемых условиях: круглосуточное освещение при 25 26 С и освещенности 3-4 клк..Через 4 нед. среди выращиваемых культур выделяют 3 типа каллусов: хорошорастущие желтого и равномерно- зеленого цвета и растущие несколько ,хуже с плотными темно-зелеными участ 5 15 ками. Каллусов последнего типа отмечается больше, если первичная среда У 1 содержит 2,4-Л в концентйрации 0,5 мг/л, и значительно меньше, если количество 2,4-Д составляет 3 мг/л. Повторное выращивание каллусов на среде 9 2 приводит к образованию почек в культурах 3-го типа в количестве 5-10 шт. на одну культуру. Каллусы желтого и равномерно-зеленого цвета выраженных морфогенных признаков не проявляют и из дальнейшихопытов исключены. Почки, индуцированные в каллусе, через 3-4...

Номер патента: 1597387

Опубликовано: 07.10.1990

Авторы: Акопян, Олешкевич, Смирнова

МПК: C12N 5/00

Метки: животных, клеток, культуры

...повышение индекса пролиферации клеток. 1 табл. составляет 620 тыс. кл/мл (62 индекс пролиферации 7, 7.П р и м е р 3. Объем, концентрация клеточной суспензии и время образования монослоя аналогичны примеру 2. Суспензию клеток обрабатывают ультразвуком частотой 880 кГц с интенсивностью 0,02 Вт смв течение 10 с. Индекс пролиферации 6,7, что соответствует максимальному приросту клеточной массы 53 -10 кл/мл.П р и м е р 4. Объем, концентрация клеточной суспензии, время образования монослоя, частота и интенсивность действующего ультразвука аналогичны примеру 2. Время озвучивания суспензии клеток 30 с. Индекс пролиферации 5,0, что соответствует максимальному приросту клеточной массы 40 10 кл/мл.1597387прирост клеток и сократить время...

Номер патента: 1597388

Опубликовано: 07.10.1990

Авторы: Андреева, Мамаева, Плясунова

МПК: C12N 5/00

Метки: вируса, иммунодефицита, культивирования, типа, человека, штамма-продуцента

...После замораживания сыворотку оттаивают и вновьподвергают замораживанию. Цикл замораживание - оттаивание повторяют4 раза, сыворотку отфильтровываютчерез ватно-марлевый фильтр, анализируют на фракционный состав (табл. 1)и подвергают стерилизующей фильтрациичерез мембранные фильтры с диаметромйор 0,22 мкм. Очищенную таким образом сыворотку используют для культивирования клеток - продуцентовВИЧ.П р и м е р 2. Очистку сывороткиКРС проводят аналогично примеру 1, 45но к сыворотке добавляют полиэтиленгликоль до конечной концентрации9%, а цикл замораживания - оттаивания повторяют 3 раза.П р и м е р 3. Культивированиеклеток - продуцентов ВИЧ. Во флакон со средой КРМ 1-1640 ,стерильно после добавления антибиотиков (гентамицин 160 мкг/мп и...