Способ выращивания картофеля

(51)5 С 12 Ю 5/ САНИЕ ИЗОБРЕТЕН ЬСТВУ АНИЯ КАРТОФЕЛЯ носится к биося выращивания 1 п ч 1 гго. Целью я повышение прин оздоровление ьную среду; на меристемы, в ка роста и морфориальную эндоагсевсепв. 4 табл(54) СПОСОБ ВЫРАЩИВ (51 Изобретение от технологии и касает меристем картофеля изобретения являетс живаемости меристем растений. В питател которой выращивают честве стимулятора генеза вносят бакте нуклеаэу БеггаГ 1 а ш о Л. ента концентлеаэуитра циях акт/мл)щивания кар. ем, Произпазуш куль тинной пига, В ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И (ЛНРЦТИЯМПРИ ПЛАНТ СССР К АВТОРСКОМУ С(71) Казанский государственныйуниверситет им. Ульянова-Ленина, Институт органического синтезаАН ЛатвССР, Научно-проиэводственн еобъединение по картофелеводству,.МГУ :я. М.В,Ломоносова, Институтцитологии и генетики СО АН СССРи Научно-исследовательскии и конструкторско-технологический институтбиологически активных веществ(56) Авторское свидетельство СССРУ 1378380, кл. А 01 Н 63/00, 1986. Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при выращивании вегетативно размножающихся сельскохозяйственных растений методом апикальной меристемы,Цель изобретения - повышение приживаемости меристем и оздоровление растений.Способ состоит в том, что в питательную среду в качестве стимули" рующего компонента добавляют бакте" риальные нуклеаэы в экспер ио подобранных оптимальных рациях, а бактериальную ну Беггаг 1 а шагсевсепв - в конц 60 - 90 мкг/мл (800 - 1200 ед.Предлагаемый способ выра тофеля заключается в следующ водят вычленение меристем ипочек стерильных растенийвирование их на модифициротательной среде Мурасиге-С1585328 3качестве стимулятора роста добавля-. ют в среду бактериальную зндонуклеазу в концентрациях 60 - 90 мкг/мл.Модифицированная среда Мурасиге" 1 Скуга имеет следующий состав (в расчете на 1 л) сахароза 20 г; БН Ю 1,65 г; КЯО 1,9 г; СаС 1 2 НО 0,44 г; МАМБО, 7 НО 0,37 г; КНРО 0,17 г; На,ЭДТА 0,37 г; РеБО+ 7 НО 0,028 г; Мп 80 4 Н О 0,022 г; Н ВО з 6,2 г; Еп 80 4 НО 8,6 г 1 К 1 0,75 г; СпЯО 5 Н 0 0,025 г; ЮаМоО 2 НО 0,025 г; СоС 1 2 НО 0,025 г пиридоксин 10 мг; тиамин 0,2 мг; аскорбиновая кислота 0,2 мг; гидролизат казеина 40 мг; кинетин 0,04 мг, /о-индолилуксусная кислота 1,0 мг, феруловая кислота 0,02 мг,агарг,Результаты стимулирующего действия учитывают по количеству прижившихся.меристем, длине ростков и количеству .листьев на них по сравнению с контролем, выращенным на немодифицированной среде.Полученные данные представлены в табл, 1 и 2.Предлагаемый способ обеспечивает ,повышение числа прижившихся мери- ,стем в 2 - 2,5 раза и ускорение роста в 2 - 3 раза и морфогенеза прижившихся меристем в 1,5 - 2 разаКак видно из данных табл. 1 и 2, оптимальной концентрацией в случае использования эндонуклеазы Яеггага шагсезсепв является концентрация в интервале 60 - 90 мкг/мл (800 - 1200 ед.акт,/мл). При данной концентрации в результате стимуляции морфогенеза происходит увеличение приживаемости меристем в 2 - 2,5 раза,Использование более высоких и более низких концентраций не оказывает аналогичного действия.П р и м е р 1, В приготовленную среду Мурасиге-Скуга добавляют нуклеазу Бег. шагсезсепв ВКПМ Вдо конечной концентрации 100 мкг/мл. Вычлененные меристемы из почек ростков картофеля сорта "Лорх" пересаживают на питательную среду в пробирки. Контролем служили меристемы, высаженные на среду без добавления нуклеазы. Проводили наблюдение за ростом прижившихся меристем через4 ч, 10, 14 недель выращивания,П р и м е р 2. Приготовление контрольной и используемой в опыте питательных сред проводят аналогично примеру 1. Конечная концентрациянуклеазы в питательной среде 10 мкг/мл,П р и м е р 3. Приготовлениеконтрольной и используемой в опытепитательных сред проводят аналогичнопримеру 1. Конечная концентрация нуклеазы в среде 1 мкг/мл.П р и м е р4. Приготовление 10 контрольной и используемой в опытепитательных сред проводят аналогично примеру 1. Конечная концентрациянуклеазы в питательной среде 0,1 мкг/мл,Полученные данные по примерам1 - 4 представлены в табл. 3.П р и м е р 5, В приготовленную среду Мурасиге-Скуга добавляютнуклеазу Бег,шагсезсепз ВИ-АТССдо конечной концентрации 20 100 мкг/мл. Вычлененные меристемыиз почек ростков картофеля сорта"Лорх" пересаживают на питательнуюсреду в пробирки. Контролем служилимеристемы, высаженные на среду без 25 добавления нуклеазы. Проводили наблюдение за ростом прижившихся меристем через 4, 1 О, 14 недель выращивания.Пр и м е р 6. Приготовлениеконтрольной.и используемой в опытепитательных сред проводят аналогичнопримеру 5. Конечная концентрация нуклеазы в питательной среде 10 мкг/мл,П р и м е р 7, Приготовлениеконтрольной и используемой в опытепитательных сред проводят аналогично примеру 5. Конечная концентрациянуклеазы в питательной среде 1 мкг/мл,П р и м е р 8. Приготовлениеконтрольной и используемой в опытепитательных сред проводят аналогично примеру 5, Конечная концентрациянуклеазы в среде 0,1 мкг/мл.Полученные данные по примерам 45 5 - 8 представлены в табл. 4.Предлагаемый способ выращиваниякартофеля методом апикальной меристемы с использованием низких концентрацийбактериальной эндонуклеазыв качестве стимулятора роста и морфогенеза имеет следующие преимущества 50перед известными: предлагаемый способ выращивания способствует увеличению числа прижившихся меристем в2 - 2,5 раза, увеличению длины ростков картофеля в 2 - 3 раза и ускорению морфогенеза в 1,5-2 раза уприжившихся меристем; эндонуклеазаЯеггаг 1 а шагсезсепз, используемая в585328 Таблица 1 Влияние эндонуклеазы Я.щагсевсепв ВИ-АТССна приживаемость меристем Питательная среда Сорт но меристем единиц Х Полет Контроль 14,3 Эндонуклеаза10 мкг/мл (300 ед.акт/мл) 42 12 28,6 Эндонуклеаза 20 мкг/мл(3000 ед.акт./мл) 44 20,5 качестве рострегуляторной добавки к питательной среде, является дешевым и доступным отечественным препаратом, производство которого освоейо промышленностью; способ прост, не требует специальной подготовки и может быть рекомендован по первичному семеноводству и специализированным хозяйствам по выращиванию элитных сортов картофеля; в употребляемых концентрациях бактериальная эндонуклеаза не оказывает мутаген ного действия, являясь веществом белковой природы, впоследствии онабудет метабилизироваться растениями. Формула изобретения Способ выращивания картофеля,включающий вычленение меристем ивыращивание их на среде ИурасигеСкуга с добавлением в нее стимулятора роста, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения приживае О мости меристем и оздоровления растений, в качестве стимулятора исполь зуют бактериальную эндонуклеазуЯеггайа шагсевсепз, которую вносят всреду в количестве 60-90 мкг/л.15 Вычисле- Прижилось,меристем1585328 Таблица 2Влияние эндонуклеазц 8. шагсезсепз 24 на риживаемостьмернстеи аемость меристем льна Я14,3 онтроль Зндонуклеаз7,5 мкг/млЗндонуклеаз 00 ед.акт/мл).акт./мл) 7 К 3 Кемеровскийранний ль Зндонуклеаза 7,5 мкг/мл (1 ед. акт. мл) 12 Зндонуклеаэа60 мкг/мл (ЯОО т./мл) ндонуклеаэа5 мкг/мл (100,акт,/м 13 лияние нуклеазы Беггада шагсезсенз Рмеристем картофеля сорта Лорх" шихся на рост пр Рост ихся меристем через, и ита тель на я 01 10 0,80+0,09 1 ОО 4, 2+О, 41 КонтрольнаяЗндонуклеаэа100 мкг/млед,5 51+044 1 3 5,6+0,47 1 5+009 111 О 1585328 Таблица 4 Влияние нуклеазы Яеггай 1 а шагсевсепв ВИ-АТСС на рост прижившихся меристем картофеля сорта "Лорх" Питательная среда 14 10 Контрольная Редактор Н,Киштулинец Заказ 2304 Тираж 5 О ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР 13035, Москва, Ж, Раущская наб., -д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 Эндонуклеаз а100 мкг/мл ед.акт,Эндонуклеаза.10 мкг/мл ед.акт. Эндонуклеаза1 мкг/мл - 30ед.акт. Эндонуклеаза 0,1 мкг/мл - 3ед.акт. Рост прижившихся меристем через, недель см 7. см Е см 7. 0,80+0, 09 100 2,80,35 100 4,2+0,41 100 Оэ 90+Оэ 08 112 34+Оэ 33 12 512+Ов 39 125 1,0010 10 125 3,8+0142 138 5 6+О 44 133э 210111 140 4 ф 1035 143 5 ю 9+Ов 38 140 095+0,09 119 3 5+037 125 5 1+О 38 121 Составитель В. ДемкннТехред Л. Сердюкова Корректор О, Кравцова