Способ культивирования лейкоцитов свиньи

СОЮЗ СОЕЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 91 И) 2 Я 5/00 ОСУДАРСТВЕННЫО ИЗОБРЕТЕНИЯМРИ ГКНТ СССР НОМИТЕТОТКРЫТИЯМ ф 2 ЕСГ(56) Справочник ветериранта/Под ред. В.Я.АнтКолос, 1981, с. 99. 25 абоМ ног ова. КОЦИ- отеханиюя прокло(54) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЛК ТОВ СВИНЬИ (57) Изобретение относится к бнологии, а именно к культивироклеток животных, необходимых диэводства вирусных вакцин, мон Изобретение относится к биотехнологии и имеет отношение к культивированию клеток животных, необходимых для производства вирусных вакцин, моноклональных антител, биологически активных веществ, проведения диагностических исследований.Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта.П р и м е р 1. Во флаконы с питательной средой 9 199 и 157 сыворотки крупного рогатого скота (КРС) после добавления антибиотиков иэ расчета пенициллин 100 ед/мл, стрептомицин 100 мг/л пипеткой стерильно вносят индолилуксусную или гибберелловую кислоту 20 мг/л. Клетки лейкоцитов подсвинков в возрасте 3 мес суспендируют в приготооленной таким образом среде, доводя их концентрацию до 3 млн кл/мл. 1 мл суспензии клеток пипеткой при соблюдении условий асепнальных антител, биологически активных веществ, проведения диагностических исследований. Цель иэобретения -повышение выхода целевого продукта.Способ включает засев суспензии лейкцитов свиньи на питательную среду сдобавлением 157 сыворотки крупногорогатого скота и последующим инкубированием культур до образования монослоя, причем в культивируемую среду добавляют 20-250 мг/л фитогормонов, например индолилуксусную илигибберелловую кислоту, Выход лейкоцитов увеличивается в 6-8 раз посравнению с прототипом,тики вносят в бактериологические пробирки, Пробирки укладывают в штативРпод углом 30-40 и помещают в термостат при 37 С. Через 3 сут культивирования формируется монослой клеток типичной морфологии. Численность клеток определяют в камере Горяева.Количество клеток лейкоцитов при использовании питательной среды с 20 мг/мл индолилуксусной илн гибберелловой кислоты составляет соответственно 4,81-5,10 10 и 5,15-5,71 х х 10 кл/мл, в то время как в контроле 3,50-4, 10 10 кл/мл (при посевной дозе клеток 3,0-3,5 млн кл/мл),П р им е р 2. Во флаконы со средой Р 199 и 157 сыворотки КРС после добавления антибиотиков из расчета пенициллин 100 ед/мл, стрептомицнн 100 мкг/мл пипеткой вносят индолилуксусную или гибберелловую кислоту 150 мг/л. Клетки лейкоцитовподсвин1576562 6,10"6,34 10 ф кл/мл по сравнению с контролем 3,50-4,10 10 кл/мл (при посевной дозе клеток 3-3,5 млн кл/мл) .Способ позволяет значительно повысить стимуляцию роста клеток лейкоцитов свиньи на питательной среде с применением фитогормонов, Количество клеток культуры при добавлении фитогормонов увеличивается в 6-8 раз. Стимулирование роста клеток некоторых очень важных клеток животного организма может быть использовано также в диагностических исследованиях. ков в возрасте 3 мес суспендируют в приготовленной таким образом сре- де, доведя их концентрациюдо 3 млн кл/мл. По 1 мл суспензии клеток пипет 5 кой при соблюдении условий асептики вносят в бактериологические про.бирки. Пробирки укладывают в штатив под углом 30-40 и помещают в термостат при 37 С. Через 3 сут культивирования Формируется монослой клеток типичной морфологии. Численность клеток определяют в камере. Горяева,Количество клеток лейкоцитов при использовании питательной среды с индолилуксусной или гибберелловой кислотой составляет соответственно 27,00 - 28, 15 10 ф и 20,05 - 21, 1010 по сравнению с контролем 3,50- 4,10 10 кл/мл Жри посевной дозе клеток 3-3,5 млн кл/мл).П р и м е р 3. Опыт проводят в соот. ветствии с примерами 1 и 2,но в питательную среду вносят 250 мг/л индолилук,сусной или гибберелловой кислоты. В этих условиях количество клеток лейкоцитов при использовании питательной среды с индолилуксусной или гибберелловой кислотой составляет соответственно 5,33-5,41 10 и Формула изобретения Способ культивирования лейкоцитовсвиньи, включающий засев клеточнойсуспензии на питательную среду с добавлением сыворотки крупного рогатого скота и последующим инкубированием культур до Формирования монослоя,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения выхода целевого продукта, в культивируемую среду добавляют индолилуксусную или гибберелловую кислоту в концентрации 20250 мг/л среды,Составитель АЛаныкинРедактор Н.Рогулич Техред Л.Сердюкова Корректор А.Обручар г гйэмвйь 4 е юет вею еаетэ е юв шее е ющ Заказ 1830 Тираж 484 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101