Способ получения ферментных препаратов каталазы и глюкозооксидазы
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
Союз Соеетския Социалистических Республик(л, 6 а, 22,04 рнсоединенисм заявкиМП 1( Приоритет Комитет по деламбретеииЯ и сткрытии Сосете МииистроеСССР УДК 663.11:576.8.0933.Х 1.1967. Бюллетеньпуолпковано Дата опубликования описания 15.1.1968 Авторыизобретения М, Ф. Гулый, Р. Г, Дегтярь, Ю. В. Чумаченко, Л. С. Лотоцка Н. М. Пидопличко, Е. А. Никольская и В. И. Билай ститут биохимии АН Украинской СС Заявител СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ фЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТО КАТАЛАЗЫ И ГЛЮКОЗООКСИДАЗЫментов, закзиочается в след ерментных препаратов ксидазы из культуральго гриба Реп 1 с 11 штп я- вляющегося продуценСпособ получения ф каталазы и глюкозоо той жидкости плеснев а 1 е РЫор 1. е 1 В 11 а, я Известен спосоо получения ферментных препаратов каталазы н глюкозооксидазы из культуральной жидкости плесневого гриба Рептст 11 штп в 1 а 1 е РЫор 1. е 1 В 11 а 1, являющегося продуцентом этих ферментов,Согласно этому способу, из культуральной жидкости адсорбируют каталазу, отделяют адсорбент с каталазой, например, фильтрацией, выделяют каталазу, например, элюцией и осаждением спиртом.Затем из культуральной жидкости (фильтрата), оставшейся после отделения адсорбента с каталазой, адсорбируют глюкозооксида. зу, после чего выделяют ее элюцией, осажда. ют спиртом, растворяют осадок глюкозоокси. дазы в воде и затем осаждают ацетоном.Предлагаемый способ проще и дешевле за счет того, что адсорбцию каталазы и глюкозооксидазы проводят на каолпне, который задают в культуральную жидкость в два приема при естественных значениях ее рН 3,4 - 3,6.В первый прием для адсорбцип каталазы следует задавать 0,5 о/, каолина, а во второй прием для адсорбцпи глюкозооксндазы - 2,/о каолина к обьему культуральной якпдкостп. том этих фер ую.щем,К культуральной жидкости естественногорН (3,4 - 3,6) прибавляют каолин в количестве 0,5% к объему жидкости и проводят адсороцию каталазы в стационарных условияхв течение 15 хин. При содержании в 1,ттлкультуральной жидкости 300 единиц каталазыадсорбируется 95 - 100% ее. Каолин с адсор 10 бированной на пем каталазой отделяют центрифугировапием в течение 15 паин. При этомглюкозоокспдаза остается в центрифуге.Каталазу, адсорбированную на каолине,элюируют 0,1 лтоль фосфатного буфера с рН15 7,2, добавляя 4 объема элюента по отношениюк весу взятого каолпна, после чего рН раствора становится равным 6,8 - 6,9. Элюциюпроводят при интенсивном перемешивании напротяжении 1 час. Элюат отделяют полутор 20 ным объемом нзопропилового спирта или ацетона, а затем высушивают.В центрпфугат, полученный после отделения адсорбента с каталазой, добавляют каолнп в количестве 2/о к ооъему жидкости н25 адсорбпруют глюкозооксидазу в стационарных условиях прп геремсшпвании в течен е15 лин.Каолин с адсорбированной глюкозооксидазой отделяют центрпфугпрованпем. Адсорбп 30 руется 95 - 100% глюкозоокспдазы прп соЗаказ 4 97/; Тираж 535 ПодписноеЦ гП Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Центр, пр. Серова, д, 4 Типография, пр, Сапунова, 2 держании ее в кул 1 туральной жидкости до 50 ед/м,г и при рН культуральной жидкости 3,4 - 3,6. Глюксзооксидазу элюируют 0,2 мо,гь фосфатного буфера с рН 6,8, прибавляя элюент в количестве 4 объемов по отношению к весу адсорбента. После прибавления элюента рН составляет 6,1 - 6,2. Элюцию глюкозооксидазы проводят при энергичном перемешнвании в течение 1 час. Элюат отделяют 15-минутным центрифугированием. Он содержит 75 - 90 з/в адсорбированной глюкозооксидазы.Вторую элюцию проводят 0,1 моль фосфатного буфера с рН 6,2, прибавляя два объема элюента по отношению к весу каолина. Длительность второй элюции при перемешивании 30 мин, Адсорбируот и элюируют глюкозооксидазу и каталазу при комнатной температуре,Весь полученный элюат объединяют и осаждают при 0 С двойным объемом этилового спирта (температура спирта - 10 - 12 С). Осадок отделяют центрифугированием в течение 20 мин, затем растворяют его в воде, 1 - 2 раза переосаждают ацетоном при 0 С, снова растворяют в воде и водный раствор высушивают методом лиофильной сушки.Полуенные препараты по своей активности, специфичности и другим качествам пе уступают препаратам, полученным нз культуральной жидкости прн использовании в качестве адсорбснта окиси алюминия,Предмет изобретения5 1. Способ получения ферментных препаратов каталазы и глюкозооксидазы из культу- ральной жидкости плесневого гриба Решс 1 Ш- цш и 1 ае Рс 1 ор 1. е( В 1 аг, являющегося продуцентсм этих ферментов, путем адсороции 10 каталазы из культуральной жидкости, отделения адсорбента с каталазой, например, центрифугированием, выделения каталазы, например, элюцией и осаждением спиртом, адсорбции глюкозооксидазы из культуральной жид кости (центрифугата), оставшейся после отделения адсорбента с каталазой, и последующего выделения глюкозооксидазы элюцией, осаждением спиртом, растворением осадка в воде и осаждением ацетоном, отличающийся 20 тем, что, с целью упрощения и удешевленияпроцесса, адсороцию каталазы и глюкозооксидазы проводят на каолине, который задают в культуральную жидкость в два приема при естественных значениях ее рН (3,4 - 3,6).25 2. Способ по п. 1, отлггчающийся тем, чтов первый прием для адсорбции каталазы задают 0,5% каолина, а во второй прием для адсорбции глюкозооксидазы - 2% каолнна г объему культуральной жидкости
СмотретьЗаявка
1098225
М. Ф. Гулый, Р. Г. Дегт рь, Ю. В. Чумаченко, Л. С. Лотоцка Н. М. Пидопличко, Е. А. Никольска, В. И. Билай, Институт биохимии Украинской ССР
МПК / Метки
Метки: глюкозооксидазы, каталазы, препаратов, ферментных
Опубликовано: 01.01.1967
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-204962-sposob-polucheniya-fermentnykh-preparatov-katalazy-i-glyukozooksidazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения ферментных препаратов каталазы и глюкозооксидазы</a>
Предыдущий патент: Способ кондиционирования рудничного воздуха на глубоких горизонтах
Следующий патент: 204963
Случайный патент: Стенд для комплексных испытаний изделий на линейные ускорения и вибрации