C12N 5/10 — клетки, модифицированные введением чужеродного генетического материала, например клетки, трансформированные вирусом

Способ получения гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к рекомбинантным белкам

Загрузка...

Номер патента: 1733470

Опубликовано: 15.05.1992

Авторы: Войтенок, Панютич, Прасолов, Резников, Чумаков, Шидловская

МПК: C12N 5/10

Метки: антитела, белкам, гибридом, моноклональные, продуцирующих, рекомбинантным

...клетки ресуспендиравали в0,02 М фосфатном буферном растворе с0,15 М КаС, Клетки вводили внутрибрюшинно (в/б) по 10-20 млн, на мышь, чтосоответствует оптимальному количеству45 клеток для получения ЫКА к корпускулярным антигенам и/или внутриселезеночно(в/с) по 200-400 тыс, клеток на мышь, какописано Яри ес а. При комбинированномспособе иммунизации клетки вводили в/с50 через 21 сут после иммунизации в/б,Для оценки индукции иммунного ответаспленоциты культивировали в МОМ с 10;,ЭТС в концентрации 3-5 млн/мл в течение5 сут супернатанты тестировали методом55 иммуноферментного анализа (ИФА) по следующей схеме. Рекомбинантный ГР или бычий сывороточный альбумин (БСА)сорбировали в лунках микроплат (Мопсгппщпораде 1) (500 нг/лунку в 0,1 М...

Рекомбинантная плазмидная днк phiv 41-22, кодирующая кор антиген вируса гепатита в с экспонированным на его поверхности фрагментом белка 41 вируса иммунодефицита человека, способ ее конструирования и штамм бакт

Загрузка...

Номер патента: 1751210

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Берзин, Борисова, Грен, Дрейлиня, Лосева, Лэтч, Меринг, Озолс, Осе, Петцольд, Порстманн, Пумпен, Пушко, Розенталь, Ульрих, Цибиногин

МПК: C12N 15/48, C12N 15/51, C12N 5/10 ...

Метки: 41-22, антиген, бакт, белка, вируса, гепатита, днк, иммунодефицита, кодирующая, конструирования, кор, плазмидная, поверхности, рекомбинантная, фрагментом, человека, штамм, экспонированным

...С 1 4 В (2,1 х 75 см), уравновешенную тем же буфером, но без тритона Х. Фракции, проявляющие РВсАд - активность, собирают и используют либо непосредственно, либо после концентрирования переосаждением 50-ным сульфатом аммония.3. Определение НВсАд - активности Методом РИД,Титр НВсАд определяют с помощью рэдиал ьной иммунодиффузии (Р ИД), Дл я этого готовят двукратные серийные разведения клеточного лизата и титруют против анти-НВс антител человека, В качестве 510 стандарта используют очищенный НВсАд, полученный из рекомбинантных бактерий (1 мг/мл). Результаты титрования методом х 0,75 мм, Злектрофорез проводят в теЗО чение 15 ч при силе тока 7 мА. После злектрофореэа белки переносят нэ нитроцеллюлозные фильтры, инкубируют с моноклональными...