C12N 15/09 — метод рекомбинантных ДНК
Способ получения рекомбинантной плазмидной днк и способ получения зимогенной формы белка с человека
Номер патента: 1838411
Опубликовано: 30.08.1993
МПК: C12N 15/09, C12N 15/15, C12P 21/02 ...
Метки: белка, днк, зимогенной, плазмидной, рекомбинантной, формы, человека
...типичных эукариотических клеток, включая клетки линии АУ 12, и к векторам экспрессиинастоящего изобретения,30 Клетки 293 были получены из АТСС (подномером СР 1573) в 25-мм -колбе, содер 2жащей сплошной монослой около 5,5 х 10клеток в минимальной поддерживающейсреде Игла (ОЬсо) с 10; термо-инактивиро 35 ванной лошадиной сывороткой, Колбу инкубировали при 37 С, а среду меняли два разав неделю. Среда состояла из ОМЕМ (ОЬсо),дополненной 10 оь околоплодной сывороткой,.теленка, 50 мкг/мл гентамициа, и 1040 мкг/мл витамина К 1, фитонадиона АкваМефитон В Мегс: ЯЬагр В ОоЬпе, Мегс В СоЗлс., ЧЧезт Ропс, РА, 19486). Клетки суб культивировали путем удаления среды, промывания сбалансированным голевым45 раствором Хэнкса (ОЬсо), добавления в течение...
Способ встраивания днк в геном аденовируса и рекомбинантный аденовирусный вектор celopuc 19
Номер патента: 1490962
Опубликовано: 10.04.1995
Авторы: Бендукидзе, Грабко, Фодор
МПК: C12N 15/09, C12N 7/01
Метки: celopuc, аденовируса, аденовирусный, вектор, встраивания, геном, днк, рекомбинантный
1. Способ встраивания ДНК в геном аденовируса, включающий гидролиз ДНКрестриктазой Xbal и трансфекцию ДНК, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, проводят гидролиз рестриктазой Xbal плазмидной ДНК и ДНК генома аденовируса CELO с последующим неполным гидролизом рестриктазои Bgli ДНК генома аденовируса CELO, затем смешивают Bgli фрагменты ДНК с мол.м. 12 мегадальтон, и два Xbal фрагмента Ad CELO с мол.м.18 и 2,4 мегадальтон, которые предварительно последовательно лигируют в Xbal сайте с линейной плазмидной ДНК, смесью указанных фрагментов проводят трансфекцию куриных эмбрионов и выделяют рекомбинантный вирус.2. Рекомбинантный аденовирусный вектор CELO/pVC 19 мол.м. 3,2