Способ получения пептидов или их уксуснокислых солей

Фт 1 но тахнн,к .к : .,иЮс Ы МЬ/. ОПИСАНИЕ Сеоэ Советсмих Социалистических РеспубликБюллетень37 (нсання 10.10, 79 та опубликования .о остранцыштванШен, Винце Варрожеф Нафради(ВНР) 2 йош Кишф Авторы изобрет о Вар Иностранное предприятиеРихтер Гедеон Ведьесети Дьяр РТф(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕПТИДО УКСУСНОКИСЛЫХ СОЛЕЙ ИЛ ся к .способуов, обладающиью, которыев медицине,при конденсацрокс использэфиров (11А-хР5где А - как указано вьше;х - пентафтор- или пентахлорфеноксигруппа, с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде уксуснокислой соли.Исходные тетрапептиды получаютизвестным образом путем конденсациифрагментов, путем постепенного удлинения цепи с помощью способов, использующих:азиды, смешанйые ангидриды,дициклогексилкарбодиимид .(дЦГКд) исложные активные эфиры, или с помощьюпрочих известных способов активации.Ме участвующие вреакции Функциональные группы в случае необходимости защищают, в Особенности группы,удаляемые путем гидролиза, ацидолиэаили каталитического гидрирования.Карбоксильную группу можно, наПример,защитить путем зтерификаций с бенэиловым спиртом, трет-бутанолом илии-хлорбензиловым спиртом. Для э тыаминоокси- и аминогрупп могут пняться следующие группы Формил З 0 эил, тритил (трифенилметил), тр орю- получение н интересными ствами. достигается йдов общей фх зобретени обладающ ескими св ленная це учения пе ЦельпептидомакологПостсобом плы споорму ри -Всо -фен -ВНВ ОС-О-Гл где. Ъ - Н-О-Гли, ВОС и-О-Ала,ВОС-Ь-О-Ала, ВОСВ - метиоиил, лейцил,норвалил, 2-аминодУ - водород или О-Глиили их уксуснокислых солейющимся в том, что тетрапеформулы р-О-Ала;норлейцил,еканоил;-ОН,заключатиды общей В-Асп-Фен-БН Визжим азанные выше зна.Изобретение относит олучения новых пептид иологической активнос могут найти применение В синтезе пептидов ептидных фрагментов ши т метод активированных(2 х 20 мл), упаринают н вакууме, умЕ, твердый остаток после разбавлемасдообраэный остаток кристаллизуютния эфиром отФильтровывают и получапри охлаждении и получают 6,21 г (81) ют 1,67 г (98.) Н-Трп-Нарвал-Асп-.Вено о. чВОС-НоРвал-ОПФФ, .т, пл. 60-62 С; , -ИН- НС 1, т. пл. 202 С; В0,25;З 0,70 р с(.) 1 = -32, 3 (с1,0, ди-" сС)р = -300 (с = 1,0, ДМФА),оксан).: . . . . 5 2-Э-(трет-Бутилоксикарбониламино ВычиСлено, Ъ: С 50,14Н 4,73; окси)-пропионил-Ь-триптофил-Ь-норваР 24,78, - . лил-Ь-аспарагил-Ь-Фенилаланин-амидС 6 Н 8 Р БО 4 (383,32)"1,55 г (2,52 ммоль) Н-Трп-Норнал Найдено, Ъ: С 50,06," Н 4,64; -Асп-Фен-ИН 2 НС 1 в 20 мл ДМФА вР 24, 63,. 0 присутствии 1, 06 мл (7, 56 ммоль) триЯ-трет-Бутилоксикарбонил"Ь-нарва- . этиламина и 1,14 г (2,52 ммоль) ВОСлил-Ь-аспарагил(трет-бутилоный . -П-О-Ала-ОПХФ выдерживают в течениесложный эфир)-Ь-фенилаланин-амид.ночи, упаривают в вакууме, разбавляРаствор 1,68 г (5,0 ммоль) Н-Асп- ют водой,отФильтровывают, осадок-(О-трет-бутил)-Фен-БН 2 в 10 мл ДМФА . (2,36 г), хроматографируют его на кон присутствии 0,70 мп (5 ммоль) три- лонне с силикагелем, элюируя смесью-(О-трет-бутил)-Фен-БН 2 в течение 1 ч 2,94 г (16,0 ммоль) НО-ПФФ растнаряобрабатывают 10 мл 4 н.солянокислой . ют н 40 мл этилацетата, добавляютуксусной кислотй, упаривают и твердый 2,99 г (14,5 ммоль) ДЦГКД при ОС,остатокпосле разбавления эфиром от- перемешивают 1 ч при комнатной темпе-.фильтронывают. Получают 1,45 г (98,3)35 ратуре, затем 1 ч при 0 С, ДициклоН-Норвал-Асп-Фен-БН НС 1, т, разл. " гексилйочевину отфильтровывают и филь 204 С; В0,15 1 сЦ 1, = - 15,0 (с "трат упаривают в вакууме, Маслообраз 1,0, ДМФА), , ный остаток растворяют в 40 мл н-гекИ-трет-Бутилоксикарбонил-Ь-трипто- саиа, обрабатывают сначала 5-нымФил-норвалил-Ь-аснарагил-Ь-фенилаларастворам бикарбоната натрия (5 хх 20 мл), затем водой (2 х 20 мл).раствор 124 г (3,0 ммоль) Н-Нарвал- Органическую Фазу высУшивают и УпаАсп-Фен-ИЙ БС 1 в 15 мл дМФАн при- ривают н вакууме. Маслянистый остатоксутствии О, 84 ммл (6,0 ммоль) триэтил- кристаллизуют при охлаждении. Получа-.амййа и 1,20 г (3,0 ммоль) ВОС-Трп-О- ют 5,82 г(87,5) НОС-Ь-Адек-ОПФФ,-Сук оставляют на ночь и упаривают н т. пл. 45-46 С; Н0,85, , ) = - 8,вакууме, остаток отверждают водой, (с : 1,0, диоксан).Отфильтровывают бсадок, тщательно Вычислено, Ъ: С 55,63; Н 6,22;пройывают водой, 2,0 г сырого продук- .Р 20,95та перекристаллйзовывают из 80-ного, С 2 Н 8 Р ИО 4 (434,45) .этанола (30 мл) и получают 1,47 г 50 Найдено, Ъ; С 55,56; Н 5,96;-1 -фенилаланин-амид-гидрохлорид. щ 90 мин упаривают в вакууме, остаток1, 80 г (2, 72 ммоль) ВОС-Трп-Нор- отверждают эфиром, .отфильтровываютвал-Асп-Фен-Йн 2 в присутствии 0,98 мл пРи Охлаждении и получают 1,65(1,36 ммОль) ВОС Трп (Фор)-ОПФФ в . 2015 мл ДМФА добавляют 0,52 мл (72 мМоль)триэтиламина, оставляют на ночь, упаривают в вакууме иостаток отверждают водой, Фильтруют, осадок пройыэают водой и эфиром. Получает 1,20 г 25-Ь-Адек-Асп-Фен-ИН в присутствии0,49 мл (7,0 ммоль) меркаптоэтаиолаобрабатывают 10 мл 4 н.солянокислого 46диоксана, через 15 мин выпаривают ввакууме, остаток после разбавленияэфиром отфильтровывают и получают0,91 г (99) Я-Трп-Ь-Адек-.Асп-Фен. ЯН,т. Пл, 240 фС (разл.) 1 ЯО, 40 аЦ-ацетил-Ь-триптофил-Ь-аминодеканоил-Ь-аспарагил-Т;Фенилаланин-амид.Раствор 0,85 г (1,22 ммоль) Н-Трп-а.Адек-Асп-.Фен-ИН НС 1 в .10 .мл ДИФА 5.в присутствии 0,51 мл (3,.66 моль) триэтиламина вводят во взаимодействие с0,54 г (1,22 ммоль) НОС-О-Гли-оПФФ.На следующий день упаривают в ваку-уме, остаток отверждают водой, отфильтровывают и промывают водой и эфиром. 0,95 г сырого продукта очищаютиа колонне с силикагелем, злюируясмесью растворителей 9 10, Элюат" упаривают и получают 0,43 г ВОС О-Гли-бутиловый эФир)-фенилаланнн-амид.1,20 г (3,37 ммоль) Н-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-ЯНв 10 мл ДМФА в присутствии 0,49 мл (3,5 ююль) триэтиламина вводят во взаимодействие с1,49 г (3,5 ммоль) ВОС-Р-Алек-ОПФФ.На следуквсФй день смесь упаривают ввакууме н остаток после разбавлениядиизопропиловым эфиром отфильтровывают. Получают 1,26 г (61,8) ВОС-О-Лдек-Асп-(О-трет-бутил)-фен-ИНт. пл. 168-170 С 1 йф. 0,80 а) Р =щ -36,9 (с а 1,0, ДМФА) .Вычйслено,С 63,55; Н 8,67;Я 9,27.Сз Н И 4 О (604, 77) .Найден,о, : С 63,70 р Н 8,80И 9,52.2-Р- Ажнодеканоил-Ь-ас пар а гил-Ь-Фенилалания-амид- гидрохлорид;1,10 г (1;а 2 ммоль ВОС-Р-Адек-Асп-. (О"трет-бутил)-Фен-ИН обрабатывают 12 мл 4 н.солянокислой уксуснойкислоты. Через 1 ч упаривают в вакууме и твердый остаток после разбавления эФиром отфильтровывают. Получают,0,87 г (99) Н-О-Адек-Асп-Фен-ИЯ(1,70 ммоль) ВОС-Трп-ОПФФ, Яа следующий день упаривают в вакууме, остатокпри.охлаждении отверждают эфиром, отФильтровывают и промывают сначалаэфиром, затем слабо подкисленной уксусной кислотой, водой и, наконец,чистой водой. Получают 1,01 г (83,8)ВОС-Трп-Р-Адек-Асп-фен-ЯН, т. пл.196 С (разл. ) 1 В ф О, 50; А)з = -55,6691082 Вычислено, : С 60,951 Н 7,11;Ю 12,13.Сд Н ЮО (808, 01)Найдейо,В: С 60,71; Н 7,20;Н 12,12Составитель В,ВолковаРедактор Т.Шарганова Техред М,Келемеш Корректор Г.Решетник Эаказ 5819/57 Тираж 513 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб.,д,4/5(трет-Бутилоксикарбониламиноокси) - -ацетил-Ь-триптофил-0-аминодеканоил-Ь-аспарагил-Ь -4 енилаланинамйд 0,69 г (1,02 ммоль) Н-Грп-йдекАсп-Фен-ЮНа НС 1 в 10 мл ДМФА в присутствии 0,42 мл (3,0 ммоль) триэтиламина вводят во. взаимодействие с 0,45 г (1,10 ммоль) ВОС-О-Гли-ОПХФ. На следующий день выпаривают в ваку уме; остаток отверждают водой, отфильтровывают, промывают сначала эфиром, затем водой. 0,63 г продукта хроматограируют на колонне, элюируя,смесью растворителей 9 10. Получают 0 45 г ВОС-О-Гли-Трп-0-Адек-АспРо,-Фен-МН , т. пл, 162.-165 .С (разл. )В 0,60 Р 0,40," Я)= -17,6 а (с с 1,0, ДМФА). Формула изобретенияСпособ получения пептидов общейформулыА-Трп-В-Асп-фен-ЯНУ,где А. - Н-О-Гли, ВОС-О-Гли; ВОС-О-О-Ала, ВОС-Ь-О-Ала, ВОС-О-Ала;В - метионил, лейцил, норлейцил,норвалил, 2-аминодеканоил;У - водород или О-Гли-ОН,или их уксуснокислых солей,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что тетрапептиды общей формулыН-Трп-В-Асп Фен-МНУ,где В и У имеют укаэанные выше значения, подвергают взаимодействию с,соединениями общей формулыА - Х,где А - к.ак указано выше;х - пентафтор- или пентахлорфеноксигруппа, с последующим выделениемцелевого продукта в свободном виде0 или в виде уксуснокислой соли.Источйики информации, принятые вовнимание при экспертизе1, О. Куем., Т. Зк 1 гев, Т. Бйоц01 е Чегепйцпф акоп Реп 1 аГ 1 цогрпепу 1 е 25 в 1 егп Ье 1 Рер 1 йвупСЬевеп, 1 цвцв11 еЫдв аппа 1 еп бег СЬеппе, 19 73,Ней 1, Б, 1421,(8;2),(312) ацетил, о-,нитросульфенил, фталил, ределения температуры плавления по б-хлоркарбобензокси,предпочтительно То 11 о.,1. (Вцспс) . Ирн ТСХ используют карбобензокси и трет-.бутилоксикарбо- пластины из силикагеля и злюируют нил. Атом азота в индольном .скелете смесью растворителей: триптофана защищают при необходимос- . М 1-хлороформ-метанол (95:5), ти формильной группой. 5 В 2-хлороформ-метанол (9;1),Благодаря соответствующей комбина- М 3-хлороформ-н-гексанции защитных групп можно достичь се- ,-уксусная кислота . (8:1:1), лективнагоили одновременного их уда-В 4-этилацетат-(пиридинлейия с использованием известных ме- . -уксусная кислюта-вода, тодов,например гидролиэа, ацидолиза, Щ " 20:6:1) . ;(9 1), каталитйческого гидрирования. ;: И 5-этилацетат-(пиридинЧаще всего для введения защищенной . -Уксусная кислота-вода, (аминоокси)-ацильной группы на амино-, 20,б;1)конце используют метод пентагалоидфе-, . . б-этилацетат"(пиридинниловых эфировактивный сложный. эфир 15 -уксусная кислота-вода, вводят во взаимодействие с:тетрапеп:6:1): : . (7:3),тйдамидом Н-трп-В-Асп-ОН-У, имеющимЯ 7-этилацетат-(пиридинконцевую Карбоксильную группу. :, .: -Уксусная. кислота-вода,Для полученияисходных тетрапеп-. 20:6 1)тидов,в которых у - вьдород,исходят , 8-этилацетат-(пиридин"из соединения. общей формулы Е.- Фен-ОН -уксусная кислота-вода,(Е - защитнаягруппа), из которого " ,20:6:1).. (1:1) получают известным образом соединение . Б 9-этилацетат-(йиридинобщей формулы Е -Фен-ЫН ,:и после уда- . "уксусная кислота-вода; лениязащитной группы:цосгепеннос по б:1): :. (2:3)или мощью защищенных и-оксисукцинимидных 25М 1 О-этилацетат-(пиридин(О-сук) и пентагалойдфениловцхэфиров . -уксусная кйслота-вода амййокислот достраивают до тетрапептыд- .20.:6.:1) ;.(85:5). айида Н-Трп-В-Асп-Фен-:БН,-.: . "Цля проявления беРУт раствор нин-.Для получения исходных тетрапЕтид- гиДрына.Пластины после нанесения на них амидов, в которых У - О+СН -СООН, нс вещества высушивают 5 мин при 105 С, ходят из Н-фен-О-Гли-ОН, получаемого помещают в атмосферу газообразного йутем ацилирования (амийоокси)-уксус- хлораи после аэРирбвания обрабатывают ной кислоты с. йомощью смешанного ан- .сйесью о-толуидин-КЮ. гкдрида или сложного эфираобщей фор- :. Для колоночной хроматографии примулы е - Фен-он, и из полученного променяют силикагель с (размер частиц дуктаудаляют защитную группу"оргработ-.62-20 ммк).кой бромйстым водородом в уксусйойкислоте. . . . :. . П р име Р .1. М-(Бенэилоксикар исходных 80 с-Фен-ин и нОС-Фен-бонил)-Ь-феиилаланинамид, -О-ГлиОЙ вос - защитную группу уда О к раствору 12,0 г (40 ммоль) е -ляют мягкой кислотной обработкой про- -Фен-ОН в 80 ил безводного тетрагиддукта.:..Рофурана (ТГФ) добавляют 5,60 млзащитную (-карбоксильную группу : (40 смоль) триэтилавщна,охлаждают аспарагиновой кислсты в дипептиде, до -10 фС и при этой температуре дотрипептиде или тетрапептиде удаляютбавляют 3,.80 мл (40 ммоль) этиловогоселективно или вместе с защищающей эфира хдоругольной кислотй перемеаминогруппу группой путем"ацидолиэа, . Шйвают 10 мин при -10 фС и при -10 Св случае, когда -Он, путем катали-в теченйе 1 .ч пропускают газообразтического гидрогенолиза,. ,ный аммиак, На следукщий день смесьпри использовании метода пентагало- упаривают в вакуумедосуха н кристалидфейилоных эФиров обычно .применяют Лический остаток растирают с 40 млпентахлорФенол (НО-ПХФ) и пентаФтор-. , водя при 40-50 С. Оярэй .продукт . :Фенол (нО-пфф). - (8,84 г) йерекрйсталлизовывают изцелевые продукты очищают путем, 7-кратного количества этанола. полукристаллизации;осаждения, колоночной :чают 6,55 г 55) Е-Фн-ИН ,т. пл.хроматрграйии на силикагела или ионооб1 165-. 166 С, В 0,75;меннойхроматограФии с помощью карбь- Ь-Фенилаланин-амйд-гидробромидксиметилцеллюлозы. К раСтвору 6,55 г (22 ммоль) ЕПатентуемые соединенйя получают в -Фей-ВН е в 13 мл уксусной кислоты довиде свободных кислот или солей бавляют ЗО мл 5 н.раствора бромистогоСоли с органическими или неоргани 60 водорода в уксусной кислоте, перемеческимй кислотами известными метода- шивают 5 мин, оставляют на 1 ч, разми или при очистке могут быть превра- бавляют безводным эфиром н фильтруют.щены во внутренние соли. . Сырой нродукт растворяют в 240 млтемпературу плавления :соединений этанола, осветляют и осаждают 740 млбпределяют с помощью Прибора для оп- Я эфира, ПолуЧают 4,90 г (91) белого,кристаллического, хроматографически однородного Н-Фен-ИН НВг, т. пл. 249- 250 С, В 0,50, В гйдробромида 0,35.И-(Бейзилоксикарбонил)-Ь-аспарагил - -(трет-бутиловый эфир)-Ь-фенилаланин-амид 5К суспензии 9,45 г (38,5 ммоль) Н-Фен-ИН НВг в 100 мл безводного ТГФ добавляют 5,40 мл (38,5 ммоль) триэтиламина, прибавляют 16,2 г (38,5 ммоль) Е-Асп-(О-трет-бутил)-О-Сук. Через сутки смесь упаривают., Остаток растворяют в 500 ил этилацетата и трижды встряхивают с 10-ным раствором лимонной кислоты и трижды с 5-ным раствором бикарбоната натрия. Затем раствор осветляют при нагревании с активированным углем и су- шат над сульфатом натрия.фильтруют, концентрируют в вакууме, остаток растворяют в 200 мпэтилацетата и после кристаллизации полу- чают 15,17 г (84) хроматографйчески однородного 3-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-ИН, т, пл. 160-161 С, Ву 0,70,Ь-Аспарагил(трет-бутиловый сложный,эфир)-1-фенилаланин-амид 7515,17 г (32,3 ммоль) Е-Асп-(О-трет-бутил)-фен-ИН растворяют в 1,0 л метанола и в присутствии 2,0 г палладия на активированном угле восстанавливают при перемешивании, пропуская 30 водород. Спустя 2 ч фильтруют, Фильтрат упаривают в вакууме. Твердый .остаток растирают с диизопропиловым эфиром, оставляют на ночь на холоду и Фильтруют. Получают 10, 40 г 35 (95,8) Н-Асп-(О-трет-бутил).-Фен-ИНд, т. пл, при 121,0-. 121,5; В 0,35.И-(трет-бутилоксикарбонил)-Ь-метионил-Ь-аспарагил- р в (трет-бутиловый сложный эфир)-Ь-фенилаланин-амид. . 4010,4 г (31 ммоль). Н-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-ИН и 11,1 г (32 ммоль) ВОС-Мет-О-Сук растворяют в 100 мп хлороформа, на следующий день трижды промывают водой при встряхивании. Органическую фазу отделяют, высушивают и упаривают в вакууме. Гелеобразный остаток растирают с эфиром, оставляют на холоду и фильтруютПолучают 14, 5 г (82, 7) сырого про; дукта, т. пл. 148-149 С, который раст воряют в 40 мп метанола, осветляют активированнцм углем, осаждают 40 мл эфира и получают 12,80 г (73) ВОС-Мет-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-ИН тпл. 151-152 С; В+ О, 65. 55Ь-Метионил"Ь-аспарагил-Ь-Фенилаланин-амид-гидрохлорид.Раствор 12,50 г (22,1 ммоль) ВОС-Мет-Асц-(О-трет-бутил)-Фен-ИН в2 25 мл уксусной кислоты охлаждают и Я смешивают с 30 мп, 7,4 н.солянокисло" го этилацетата. Через 5 мин смесь мутнеет и выделяется масло.Через 10 мин после выделения масла разбавляют эфиром и фильтруют. Осадок (10,24 г) раствоРяют в 40 мп метанола, добавляют 200 мп этилаце" тата, гелеобразный продукт оставляют на холоду на ночь, отфильтровываютк получают 9,0 г(91) Н-Иет-.Ас-Фен-ИН НС 1, тпл. 187-189 С;В 0,27.И-(трет-Бутилоксикарбонил)-Ь-триатофил-Ь-метионил-Ь-аспарагил-. Ь-фенИЛ-. алании-амид. К суспензии 9,0 г (20,1 ммоль)Н-Жет-Асп - Фен-ИННСХ и 8,42 г(21 ммоль) ВоС-Трп.-О-Сук в 150 млдиметилформамида (ДМФА) добавляют2,.83 мл (20,1 ммоль) триэтиламина,перемешивают в. течение ночи и выпи-.вают в смесь из 1,0 л ледяной водыи 3,75 мл уксусной кислоты. Суспензию оставляют стоять до полного таяния льда и фильтруют. Гелеобразныйосадок тщательно промывают водой,затем эфиром.и получают 13, 3 г (95)сырого продукта, т. пл.- 203-204 С,который дважды перекристаллизовываютиз 30-кратного количества 80-ноговодного этанола при осветлении, Полу.чают 9,67 г (69) ВОС-Трп-Мет-Асп-Фен - ИН, т. пл. 212-214 С (разл.)В 0,45.Ь-Триптофил-Ь-метионил-Ь-аспарагил-Ь-Фенилаланинамид-моногидрат9,23 г (13,2 версоль) ВОС-Трп-Мет --Асп-Фен-ИН при 0 С и перемешивании вносят в,смесь 32 мл трифторуксусной кислоты, 8 мл воды и 4 мпаййэола, в течение 2 ч пропускаютазот, разбавляют 270 мл эфира, Фильтруют, осадок промывают эфиром и высушивают в эксикатбре, растворяют в60 мл метанола и осаждают трифторацетат 240 мл эфира, Трифторацетатрастворяют в смеси 340 мл воды и29 мп 1 н.едкого натра, добавляют13,2 мл уксусной кислоты. Осадок отфильтровывают и промывают.Получают б, 70 г (82,4) Н-ТрпМет-Асп-Фен-ИН Н О ,т,пл; 235-238 С.Н О, 35.Вычислено, : С 56,61 Н 6,2;И 13,7СН 6 И 6 О 8 Н 20 (614, 725),Найдено, : С 56,41 Н 6,2)И 13,6Пентахлорфениловый эфир трет-бутйлоксикарбониламинооксйуксуснойкислоты,Раствор 8,0 г (41,8 ммоль) ВОС-О-Гли-юН и 11,1 г (42,0 ммоль)НО-ЛХФ в 160 мл безводного диоксанаохлаждают до 5 С и смешивают с8,6 г (42.,0 ммоль) ДЦГКД, оставляютпри комнатной. температуре на ночь,дйциклогексилмочевину отфильтровыва"ют, фильтрат упаривают в вакууме иостаток перекристаллизовывают иэсмеси диоксанэтанол. Получают 13,7 г-ацетил-Ь-триптбфил-Ь"метионил-Ь-ас- си)-Ь-пропионил-Ь-триптофил-Ь-мети:парагил-Ь-фенилаланйнамид, :.:- " онил-Ь-аспарагил-Ь-фенилаланин-амид,01, 79 г (3,0 ммоль) Н-Трп-Мет-Асп- Смесь, содержащую 0,70 гфен-ин 1 00 и 1,18 г (3,3 ммоля)(122 ммоль) н-трп-Яет-Асп- фен-инд хВОС-О-Гли-О-ПХФ в. 30 мл ДМФА выдер х НО и 0,59 г (1,30 ммоль) ВОС-. Ь.живают 4 ч, упаривают в вакууме, ге-сО-Ала-ОПХФ в 50 мл ДМФА и 0,35 мллеобразный остаток .Растирают с этил- .(25 ммоль) триэтиламина оставляютацетатом. 2: 11 г (91%) продукта, 1. на ночь и затем упаривают в вакууме.т. пл. 178-184 С,растворяют в 20 мл, Гелеобразный остаток. смешивают с этилметанола, осветлйвт, осаждают водой 15 ацетатом, отфильтровывают осадоки .получают 1,50 г (б 4,8%) кристалли- . (0,69 г), смешивают с 15 мл этилацеЧЕСКОГО белого ВОС-О-Гли-Трп-Мет-Асп-тата, нагревают до кипения и фильтру-Фен-ЙНа т. Пл, 193-194 Су В", 0,40 у ют. Осадок (0,5 г) растворяют в не-(ср -16,2 (с 1;О, ДмФА). .:.. значительном количестве смеси раствоВычислено, Ъ С"56 11-"М 61; рителей 9 6, пропускают через колон В 4,16. ; . ну, заполненную 40 г силикагеля иСьН 47 ИО, В (769,85).:.элюйруют смесью растворителей М 5.найдено, Ь: С 56,4; Н 6,3;Из чистйх фракций. получают 0,30 гВ 4, 07." .: - -"хроматографически однородного ВОС-Ь-"П р и и ер 2, :в" , ,0-Ала-Трп-Мет-Асп-Фен-ИН, т. пл.-Мет-Асп-фен-ИНз при перемешивании Найдено, 3: С 56,50; Н 6,29;вносят"в смесь 4.мл трифторуксусной 30 ,И 12,34,кислоты, 1 мл воды и 0,5 мл анизола, П р и м е р 4.пропуска 10 т азот втечение 2 ч, .Раз- Ю-(Бензилоксикарбонил)-Ь-лейцилбавляют 40 мл" эФира, осадок (1,02 г .-т.-аспарагил-ф-(трет-бутиловый сложтрифторацетата) растворяют в смеси ный эфир)-Ь-фенилаланинамид,34 мл воды и 2,9 мл 1 н,едкого натра, 35 5,0 г (14,9 ммоль) Н-Асп-(О-третсвободный,аьщд осаждают, добавляя-бутил)-Фен-ЙЯ смешивают с 5,5 г1,.32 мй"уксусной, кислоты, Осадок от- (15,2 ммоль) е-лей-О-с.ук в 50 мл хлофильтроаывают, тщательно промывают роформа. Раствор постепенно превраша- "водой и высушивакт в эксикаторе. По- ется в гель. Гель разбавляют хлорофорлучают 0,6 г (69) Н-О-Гли-Туп-Мет мом и перемешиваютв течение йочи.-Ала-ОН и 5,32 г (20 ммоль) НО-ПХф в : И 9,73,20 мл ЛИМФА охлаждают до 0 С, смешива- Ь Лейцил-Ь-аспарагил(трет-бутиют с 4,12 г (20 ммоль) ДЦГКД, переме" ЛбвЫй славный эфир)"Ь-фенилаланиншивают 30 мин при 0 С и выдерживают М а 4 идв течеЮка ночи,при комнатной темпера- . 676 г (11,6 ммоль) Е-Лей-Асп-(Отуре. Дицйклогексилмочевину отфютьт -трет-бутил)-Фен-ИН растворяют вровывают, фильтрат упаривают в ваку мл метанола й восстанавливают воуме, остаток.обрабатывают безводным дОРадом при перемешивании в присутст;эфиром, отфильтровывают ооадоку вии 1,0 г палладия на активированном(6,25 г), перекристаллизовывайт ь Угле. Спустя 90 мин катализатор отэтанола и получают 5,80 г (63) ФильтРовывйот, фильтрат упаривают,ВЯС-ХМЭ-Ала-бПХФ, г. ПЛ. 122-124 аС гелеобразнйй остаток выделяют с помоВ 0,85; (Ы)68,87 ф (с10 ди- Фью н-Гексана и получают 52 г (99,5)оксан). ,ц Н-Лей-Асп-(О-трет-бутил)-фен-ИН 2,его з смеси растворителей М 5, вносят в колонну, заполненную 80 г силикагеля, и элюируют смесью растворителей 9 10. Из чистых фракций получают 0,58 г ВОС-О-Гли-Трп-Лей-Асп-Фен-ННд, т. пл. 187 С (разл,); В 1 0,7 1В 0,15; (с1 = -24,9 (с = 0,5,ДМФА),Вычислено, : С 59 р 11 Н 657;й 13,04.С Н 4, Я Ощ (751,85)Найдено, : С 59,281 Н 6,40;М 12, 75.Пример 5.Ь-Лейцил-Ь-аспарагил-Ь-Фенилаланин-амид-гидрохлорид.6,91 г (15,4 ммоль) Н-Лей-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-МН вносят в 50 млсолянокислой уксусной кислоты. Спустя45 мин разбавляют безводным эфиром,оставляют стоять на холоду непродолжительное время И Фильтруют. Осадоктщательно промывают безводным эфиром.Получают 6,20 г (94) Н-Лей-Асп-Фен-ВН НС 1В О, 2, который используютбез дальнейшей очистки.И-(трет-Бутилоксикарбонил)-Ь-триптофил-Ь-лейцил-Ь-аспарагил-Ь-фенилалани н-амид.6,2 г (14,5 ммоль) Я-Лей-Асп-Фен-МН НС 1 и 6,42 г (16,0 ммоль) ВОС-Трп-О-Сук в 70 мл ДИФА в присутствии2,24 мл (16,0 ммоль триэтиламина выдерживают 4 ч, выпаривают в вакууме,остаток растирают с водой и отфильтровывают, 10,6 г сырого продукта дважды кипятят со смесью метанол-этилацетат и отфильтровывают, Получают7,1 г (72,1) ВОС-Трп-Лей в А-Фен-ИН т. пл. 218-221 С (разл. ); ВО, 4,и используют без дальнейшей очистки.Ь-Триптофил-Ь-лейцил-Ь-аспарагил-Ь-фенилаланин-амид.7,1 г (10,5 ммоль) ВОС-Трп-Лей-Асп-Фен-МН вносят в 60 мл солянокислого диоксана. Спустя 3 мин смесьстановится прозрачной. Спустя еще10 мин раствор разбавляют безводнымэфиром, выделяющийся маслянистый продукт отверждают и отфильтровывают.Полученный гидрохлорид (6,96 г) растворяют при нагревании в 150 мл воды.При охлаждении добавляют твердый би.карбонат натрия до рН 7, фильтруют иосадок промывают тщательно водой. Получают 5,05 г (83,1) хроматографически однородного Н-Трп-Лей-Асп-Фен-ИНд, т. пл. 228-230 С (разл).Пентахлорфениловый эфир 2-(трет-бутилоксикарбониламиноокси)-Р-пропиЬновой кислоты.К охлажденному до О С раствору4,10 г (20 ммоль) ВОС-О-О-Ала-ОН и5, 32 г (20 ммолЬ) НО-ПХФ в 20 мл ДМФАдобавляют 4, 12 г (20 ммоль) ДЦГКД,перемешивают 30 мин при О С и оставляют на ночь при комнатной температуре. ДицикЛогексилмочевину отфильтро" Раствор 1,0 г (1,82 ммоль) Н-Трп-Лей-Асп-Фен-ЙН и 0,88 г (2,0 ммоль) ВОС-О-Гли-ОПХФ в 10 мл дМФА смешивают с 0,27 мл (1,82 ммоль) триэтиламина, оставляют на ночь, упаривают в вакууме, остаток растирают с эфиром, суспензию оставляют на холоду и фильт) руют. Получают 1,42 г сырого продукта, т. пл. 102-120 С (разл.), к которому добавляют 10-кратное количество этилацетата, кипятят и фильтруют горячим. Получают 1,06 г вещества, растворяют 65 Н 4 0,1, который используют без даль.нейшей очистки.Я-(трет-бутилоксикарбонил)-Ь-триптофил-Ь-лейцил-Ь-аспарагил-)Ъ-(трет-бутиловый сложный эфир)-Ь-фенилаланин-амид. 5Раствор 5,2 г (11,5 ммоль) И-Лей-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-ИН и 4,82 г(12,0 ммоль) ВОС-Трп-Оук в 100 млДИФА оставляют на ночь, упаривают ввакууме, остаток растирают с водой 1фильтруют, осадок (8,95 г) перекристаллизовывают из 70 мл 70-ного этанола при осветлении и получают 7,19 г-Асп-(О-трет-бутил 1-Фен-ЫН вносят всмесь 60 мл трифторуксусной кислотыи б мл анизола, перемешивают 2 ч прикомнатной температуре и разбавляютбезводным эфиром. Полученный послефильтрования мазеподобный остаток вы-сушивают в эксикаторе над едким натром и пятиокисью фосфора, растираютс водой и выделяют 5,61 г трифторацетата, т. пл, 178-186 С (разл,), который растворяют при нагревании в воде,содержащей немного этанола. При охлаждении поддерживают рН 7 с помощью1 н.едкого натра. Осадок отфильтровывают, промывают водой и этанолом, 404, 0 г сырого продукта растворяют в30 мл ДЫФА и осаждают 60 мл метанола,Получают 2,28 г хроматографически однородного а-Трп-Лей-Асп-фен-МНд,т. пл. 227-230 С (разл,); В 0,55,Вычислено, : С 62,26; Н 6,62;Б 14,52,СЭо НэвНь ь (578, 67) .Найдено, : С 62,02; Н 6,80;Б 14,38. 502-(трет-Бутилоксикарбониламиноокси)-ацетил-Ь-триптофил-Ь-лейцил-Ь-аспарагил-Ь-фенилаланин-амид.= +68,95 (с = 1,0, диоксан). Н 0,85сЦ р = +68,95 (с = 1,0,.диоксан).Вычислено, : С 37,10; Н 3,10;С 1 39,10,С 1 Н 14 С 15 НО 5 (453,537),:Найдено, ; С 37,16; Н 3, 29;С 1 39,01.2-0-(трет-.Бутилоксикарбониламиноокси)-пропионил-лейцил-Ь-аспарагил"Ь-фенилаланин-амид.1,74 г (3,0 ммоль) Н-Трп-Лей-Асн-фен-ИН вводят во взаимодействие с1,50 г (3,3 ммоль) ВОС-П-О-Ала-ОПхфв 20 мл ДМФА в присутствии 0,42 мл(З,О ммоль) триэтиламина,:На"следующий день смесь упаривают в вакууме,остаток растирают с эфиром; Продуктрастворяют в незначительном количестве смеси растворителей 9 5 и вносятколонйу, заполненную 100 г силикаеля. Элюируют смесью растворителейМ 5, выделенный из чистых фракцийкристаллический остаток перекристаллизовывают из 50 мл 80 ного зтанола.Получают 1,07 г (46,7) ВОС-О-О-Ала-Трп-Лей-Асп-Фен-ИН, т, разл. 210 С;В 0,15 В 0,40 р Щ В = -6,0 (с-фенилаланиламиноокси)-уксусная кислота.6,97 г .(40,5 ммоль) гидробромидааминоуксусной:кислоты вводят во взаимодействие с 14,68 г (40,5 ммоль)ВОС-фен-О-,Сук в 100 мл ДИФА в присутствии 6,3 мл (45 ммоль) триэтиламина.На следующий день смесь выпаривают ввакууме, остающееся масло растворяютв 100 мл хлороформа и трижды встряхивают е 1 н.соляной кислотой. Органическую фазу высушивают и выпариваютв вакууме. Маслянистый остаток отверждают диизолропиловым эфиром,растворяют вэтилацетате и осаждают дииэопропиловым эфиром. Получают 9,60 г-бутилоксикарбонил) -1,-аспарагиновой кислоты.11,45 г (39,7 ммоль) маслянистого ВОС-Асп-(О-трет-бутил)-ОН и 4,6 г (40 ммоль) И-оксисукцинимида растворяют в 100 мл безводного диоксана, охлаждают и смешивают с 8,25 г (40 ммоль) ДЦГКД, перемешивают в течение ночи при комнатной температуре,дициклогексилмочевину отфильтровывают и фильтрат упаривают. К остаткудобавляют смесь гексан-диизопропиловый эфир, осадок (13,8 г,т. пл. 98102 С) отфильтровывают, перекристаллиэовывают из 3-кратного количестваизбпрбпанола и получают 12,1 г (78,3)белых крйсталлов ВОС-Асп-(О-трет-бутил)-О-Сук, т. пл. 103-105 С; с)о- -25, 6 (с: 1, О, диоксан) ..ная кислота-гидрохлорид.25 к раствору 5,8 г (17,1 ммоль) ВОсФен-О-Глй-Он в 10 мл этилацетата дЬбавляют 60 мл 4 н.солянокислого зтилацетата,. перемешивают 4 ч и растворитель сливают с маслообразного вещест ва, которое отверждают свежеперегнанным этилацетатом, Получают 4, 53 г(96,6) Н-.фен-О-Гли-ОН . НС 1. Продуктгигроскопичен и хроматограически однороден, т. пл. 75-80 С й 0,2.352-(И-трат-бутилоксикарбоНил)-Ь-аспарагил-ф-(трет-бутиловый сложныйэфир)-(Ь-фенилаланиламиноокси)-уксуснаяя,сйслота. ".К раствору 7,0 г (25,5 ммоль) Н-Фен-О-Гли-ОнНС 1 в 150.Мл ДМФА до. бавляют 7,15 мл (51 ммоль) триэтилаМича, вносят. 9,30 г (2.4 мМоль) ВОС-Асп-(о-трет-бутил)-О-Сук. После полного растворения смесь оставляют наночь, затем упаривают в вакууме, 45 маслянистый остаток растворяют в хло. роформе," раствор встряхивают триждыс 1 н. соляной кислотой и водой, затем высуьжвают и выпаривают в вакууме. Остаток отверждают диизопропило 50 вймэ 4 иром. 10,35 г сырого продуктадважды переоааждают из смеси эфирн-гексан, Получают 8,63 г (70,7) ВОС-Асп-(О-трет-бутил)-фен-О-Гли-ОН,.т. пл. 83-85 С (разл.); В 0,45;И Щ э = -30,6 (с = 1,36, этанол).хроматограмеа показывает наличе незначительного количества примесей.2-(Ь-Аспарагил-Ь-фенилаланиламиноокси)-уксусная кислота - гидрохлорид, щ 8,50 г (16,7 ммоль) ВОС-Асп-(О-трет-бутид)-Фен-О;.Гли-ОН при перемешивании растворяют в 70 мл (350 ммоль) 5 н.солянокислого этил. ацетата. Спустя 5 мин из раствора на чинает выделяться кристаллический136910814 гидрохлорид. Через 75 мин суспензию ют ,17 г (58,8) ВОС-Трп-Мет-Аспфильтруют, осадок промывают этилаце- -фен-о-Гли-ОН, Н 0,3 М 1 = - 19,9 татом и получают 6,22 г (95,8) крис- (с : 0,75, ДМФА), Продукт содержитталлического Н-Асп-Фен-О-Гли-ОН " НС 1, небольшое количество примесей. т.пл. 160-163 С; 29 0,25.о2-(Ь-Триптофил-Ь-метионил-Ь-аспа 2-Н-(трет-ьутилоксикарбонил)-Ь рагил-Ь-фенилаланиламиноокси) -уксус-метионил-Ь-аспарагил-Ь-Фенилаланил- ная кислота.аминоокси)-уксусная кислота. 2,17 г (2,81 ммоль) ВОС-Трп-МетК раствору 6,1 г (15,6 ммоль) .Н- "Асп-Фен-О-Гли-ОН при перемешивании -Асп-Фен-О-Гли-оН НС 1 в 50 мл ДМФА вносят в смесь 8 мл трифторуксуснойдобавляют 6,55 мл (46,8 ммоль) тр%- 10 кислоты, 2 мл воды и 1 мл анизола,этиламина, затем 6,38 г (15,6 ммоль) в течение 2 ч пропускают азот, разВоС-Мет-О-Сук. После полного раство- бавляют 60 мл эфира, продукт отфильрения смесь выдерживают в течение но- тровывают и "высушивают в эксикаторе.чи при комнатной температуре, упари- Получают 2,0 г трифторацетата, раст.вают в вакууме и маслянистый остаток 15 воряют их в 8 мл 2 н,едкого натра иотверждают диизрпропиловым эфиром. подкисляют 10-ной соляной кислотойосадок (6,3 г, 69) растворяют в не- до рН 4. осадок отфильтровывают изначительном количестве смеси раство- промывают водой, Получают 1,34 грителей 9. 7 и вносят в колонну, запол- (71) Н-Трп-Мет-Асп-фен-О-Гли-ОН,ненную 110 г силикагеля. Элюируют сме- В 1 0,1. Продукт аморфный. Хроматограмсью растворителей Р 7 со скоростью 0 ма показывает,.что продукт слегка за 8-10 мл/ч. Чистые фракции собирают и грязнен.упаривают в вакууме. Полученное мас - Бромпропйоновая кислота.лянистое вещество отверждают диизо- К раствору 44,0 г (0,49 ммоль) пропиловцм эфиром, продукт (4,4 г) -аланина и 200 г (1,68 моль) бромирастворяют в 15 мл метанола и осажда да калия в 1,0 л 2,5 н,серной кислоют 10-кратным количеством .безводноготы при комнатной температуре, порцияэФира. получают 3,26 г (35, 7) аморф-ми добавляют 42,4 г (0,76 моль) ннного, хроматографйчески однородного трита натрия, перемешивают при комВоС-Йет-Асп.-фен-О-Гли-ОН, В 0,30; .натной температуре в течение 2 ч исЧ = -37,2 (с = 1,0, этанол). 30 дважды встряхивают с 200 мл эфира,Вычислейо, : С 51,36; Н 6,21 Эфирйый раствор промывают трижды во)6 9,58; 8 5,48, , . дой и после высушивания выпаривают вС Н Й ОЯ, вакууме. 19,8 г сырого продукта пеНайдейо, : С 51,50; Н 6,07; , - Рекристаллизовывают из 30 мл н-гекН 9, 43; 8 5, 47, . 35 сана при осветлении.и получают 18, 1 г2-(Ь-Метионил-Ь-аспарагил-Ь-фе- (24) 3-бромпропионовой кислоты,Онилаланиламиноокси)-уксусная кислота- т. пл, 59-60 с.гидрохлорид, . " : Дициклогексиламинная соль 3-(трет 0,50 г (0,85 ммоль) ВоС-Мет-Асп- -бутилоксикарбониламиноокси)-пропио-Фен-о-Гли-Оа обрабатывают В течение 40 новой кислоты.1 ч 5 мл солянокислого этилацетата, . 7, 7 г (О, 30 г-атом) натрия раствоФильтруют, осадок тщательно промыва- ряют в 450 мл эфира, добавляют 26,6 г , ют этилацетатом и высушивают в эксика-(0.20.моль) Н-(трет-бутилоксикарботоре. Получают 0,41 г (91) Н-Мет-Асй- йил)-гидроксиламина в 165 мп этанола. Фен-О-Гли-ОННС 1, Н 0,05; Н 0,2, 45 И 287 .г (0,188 моль) 3-бромпропионоПродукт аморфный, хроматограммапока- войкислоты в 165 мл этанола, перемезывает наличие незначйтельного коли- шивают при 50-55 С в течение двух чества примесей. . . дней, упаривают в вакууме и остаток2-Я-(трет-Бутилоксикарбонил)-Ь- . Растворяют в 350 мп воды. Водный ра-трипфтофил-Ь-метйонил-Ь-аспарагил- створ экстрагируют зтилацетатом (3 х в (Ь-Фенилаланиламиноокси)-уксусная х 100 мп),подкисляют до рн 3 лимонной кислота. кислотой, насьзаают хлоридом натрия и. экстрагируют этилацетатом (5 х 100 мл) .К суспензии 3,0 г (4,79 мюль) Обырдиненные этилацетатйые фазы трин-иет-Асп-фен-О-Гли-Он Нс 1 в 50 мл жды проьйвают водой, высушивают.и выДМФА при перемешивании добавляют 55 паривают в вакууме. К маслянистому14 мл (10 ммоль) триэтиламина и 2,35 г остатку (27,25 г) в 100 мл н-гексана(5,0 ммоль) ВОс-трп-Опфф, выдерживают порциями добавляют 23,3 мл (118 ммоль)90 мин и упаривают в вакууме. - дициклогексиламина при постоянном охостаток растворяют в этилацетате, лаждении, оставляют на холоду, осавстряхивают трижды с 1 н.соляной кис-Щ док отфильтровывают, промывают эфилотой, затем с водой, Органическую ром, 44,93 г подучейного сырого профазу высушивают, осветляют и концент- дукта, тпл. 128-135 С, растворяютрируют в вакууме до объема 10 мл, До- в 50 мп метанола, осветляют и осаждабавляют безводный эФир, оставляют ют 200 мл эфира. Получают 25,0 гстоять на холоду и Фильтруют. Получа (34) соли ВОСО-Ала-ОН дициклогек65 силамин, т, пл. 148-149 С; ВО, 5 тВ 1 0 25 Из маточного раствора выделяют еще 9,3 г (12,8) продукта,т, пл. 144-145 С.Вычислено, Ъ: С 62, 14; Н 9,9;И 7,25.С 2 о Н РВИО (38652) .Найдено, Ъ: С 61,99; Н 10 02 тИ 7,09,Пентафторфениловый эфир 3-(трет-бутилоксикарбониламиноокси)-пропионовой кислоты,1, 10 г (2,85 ммоль) соли ВОС-О. --Ала-ОН, дициклогексамин обрабатывают 40 мл эфира и 3 мл 2 н.серной кислоты. Эфирную фазу отделяют, встряхивают еще раз с серной кислотой,объединенные водные фазы, содержащиесерную кислоту, экстрагируют эфиром,ЭФирные Фазы объединяют, высушиваюти упаоивают в вакууМе Пелуча)от0,.34 г маслянистого вещества, котооое вместе с 0,31 г (1,8 ммоль) НОПфф растворяют в 10 мл безводного диоксана, При 5 С к раствору добавляютО, 37 г (1,8 ммоль) ДЦГКД, перемйаивают 90 мин при комнатной температуре,дициклогексилмочевину отфильтровывают,фильтрат упаривают в вакууме. Остатокрастворяют в н-гексане, трижды встря-.хивают раствор с 5-ным раствором би.карбоната натрия, высушивают и упаривают в вакууме. Маслянистый остаток отверждают н-пентаном. Получают0,33 г (55) ВОС-О-Ала-ОПФФ, т. пл.58-59 С; Н 0,65.Вычислено, Ът С 45,29; Н 3,80;И 3,77С Н Р 5 И 05 .(371, 27)Найдено, %: С 45,43; Н 3,65;И 3,90.2-3-(трет-Бутилоксикарбониламиноокси)-пропионил-Ь-триптофил-Ь-метионил-Ь-аспарагил-.Ь-фенилаланиламиноокси-уксусная кислота,К раствору 0,32 г (0,.48 ммоль)Н-Трп-Мет-Асп-Фен-О-Гли-оН и 0,23 г(0,.60 ммоль) ВОСО-Ала-ОПФФ в 10 мпДМФА добавляют О, 14 мл (1,0 ммоль)триэтиламина, Спустя 3,5 ч упариваютв вакууме, остаток отверждают эфиром.0,31 г сырого продукта растворяют внезначительном количестве смеси растворителей Р 6 и вносят в колонну, заполненную 20 г силикагеля, Элюируютсмесью растворителей Р б со скоростью5 мл/ч. Чистые фракции упаривают ввакууме. и остаток выделяют с помощьюбезводного эфира, Получают 0,14 г(34) ВОС-)т-О-Ала-Трп-Мет-Асп-Фен-ОГли-ОН, Вь 0,1; ВО, 3. Продуктхроматографически однородный и аморфный.Вычислено, : С 54,0 т Н 5,99;Ъ Я 11,45Сщ Нт Ит О Б . (85 7, 94),Найдено, т С 54,40 у Н 6,10 тИ 1127. Пример 7.2-2-(трет-Бутилоксикарбониламиноокси)-ацетил-Ь-триптофил-Ь-метионил-Ь-аспарагил-Ь-фенилаланиламиноокси- -уксусная кислота.5К раст вору О, 34 г Н-Три-Мет -Ас п-Фен-О-Гли-ОН в 10 мл ДМФА добавляютО, 14 мл (1 ммоль) триэтиламина и0,28 г (0,.6 ммоль) ВОС-О-Гли-ОПХФ,Спустя 3 ч упаривают в вакууме и остаток отверждают эфиром. 0,43 г сырого продукта растворяют в небольшом количестве смеси растворителей Р 6 ивносят в колонну с 20 г силикагеля,элюируя смесью растворителей Р 6 соскоростью 10 мл/ч, Чистые фракцииобъединяют и упаривают в вакууме. Получают 0,15 г (31%) ВОС-О-Гли-Трп Мет-Асп-Феи в -Гли-ОН, В 0,4, Продукт аморфный,Вычислено, Ът С 54,081 Н 5,85;И 11,61.СЗ 8 Н(9 Ит Оэ Я (845,98) .Найдено, Ът С 53,95 т Н 5,97И 11,70,25 и р и м е р 82-2-Р"(трет-Бутилоксикарбониламиноокси)-:пропиьнил-Ь-.триптофил-Ь-мети- онил-Ь-аспарагил-Ь-фенилаланиламиноокси-уксусная кислота.30 К раствору 0,23 г (0,60 ммоль)ВОС-О.-О-Ала-ОПХФ и 0,34 г (0,50 ммольН-Трп-Мет-Асп Фен-О - Гли-ОН в 10 млДМФА добавляют 0,14 мл (1,0 ммоль)триэтиламина, Спустя 3 ч упаривают35 в вакууме, остаток растирают с эфиром и отфильтровывают, 0,41 г сырогопродукта растворяют в небольшом количестве смеси растворителей Р 7,вносятв колонну, заполненную 40 г силикаге.4 О ля и элюируют смесью растворителейР 7 со скоростью 10 мл/ч. ЧистыеФракции упаривают,в вакууме, остатоквыделяют с помощью безводного эфира.Получают О,11 г (25,6) ВОС-Р-О-Ала 45-Трп-Мет-Асп-фен-О-Гли-ОН, й, О, 2 5.Продукт аморфный,Вычислено, %: С 54, 60; Н 5,99;И 11,43.Сзе Ни Ит О ъ Б (857 94)Найдено, Ъг С 54,41; Н 5,87;И 11,32.Пример 9.2-2-Ь-(трет-Бутилоксикарбониламивоакси)-пропионил-Ь-триптофил-Ь-мети- онил-Ь-аспарагил-Ь-Фенилаланиламиноокси-уксусная кислота.Из ВОС-Ь-О-Ала-ОПХФ, как в примере 8, получают 0,38 г сырого продукта,После хроматографирования выделяют0,13 г однородного ВОС-Ь-О-Ала-Трпа -Мет-Асп-фен-О-Гли-ОН, В р 0,25,Вычислено, Ъг С 54,60; Н 5,99;И 11,43,С эН 51 Ит Отэ Б (857, 94) .Найдено, %; С 54,47; Н 6,04;И 11,41,.10,0 г (24,3 ммоль) соли ВОС-Нор- ночи и упаривают в вакууме, Иаслянис"лей-ОН дициклогексиламин в смеси- тый остаток отверждают водой, содер"75 мл эфира и 25 мл 2 н.серной кисло жаЦей небольшое количество уксуснойты встряхивают до полного растворения кислоты, фильтруют при охлаждении иэфирную фазу встряхивают сначала с промывают осадок водой, затеи эФиром,25 мл 2 .н. серной кислоты, затем с Получают 1,92 г (89,7) ВОС-фГрб Яорводой,. упаривают в вакууме, маслооб- лей-.Асп-Фен-КН т. разл, 196 С;разный остаток (5,44 г) и 4,42 г р В у 0.501 Ю = -28,8 (с = 1,0,(24 ммоль) НО-ПФФ растворяют в 30 мл ДИФА), Продукт перерабатывают безэтйлацетата, охлаждают до 0 С и сме- : дальнейшей очистки,шивают с 4,63 г (22,5 ммоль) ДЦГКД, Ь-Триптофил-Ь-норлейщил-Ь-аспараСуспензию оставляют на 1 ч на холоду гил-Ь-фенилаланин-амид-гидрохлорид,фильтруют фильтрат упаривают в ва (:5Раствор 1 85 г (2 73 ммоль) ВОСкууме, остаток растворяют в 50 мя 1 рп-Норлей-Асп-ФенН в 50 мл 8 н,н-гекеана и экстрагируют 5-нею раст-, солянокислого диоксана выдерживаютвором бикарбоната натрия (5 х 20 мл), 1 ч и упаривайт в вакууме,.гелеобраззатем водой (2 х 20 мп). Органическую ный остаток послеразбавления ацетофазу высушивают и упаривают в Вакууме. нса отфильтровывают и получаютИаслообразный остаток при охлаждении 2 О 1,17 г (69,7) Н-Трп-Норлей-Асп"Фензастывает. Получают 8,12 г (91) ВОС -КН НС 1, т. Разя. 235 С) (сЦ) в вНоРлей-ОРФФ, т. пл. 55-57 Су Нф 0.,80; = -28,4 (с : 1,0, ДИФА),В 0,85 у И)р = в .26,8 (с = 1,0, дй-О-(трет-Бутнлоксикарбониламинооксан) .- . окси)-пропионил-Ь-трицтофил-Ь-норлейВычислено, : С 51,39; Н 5,07 у 25 цял-Ь-аспарагил-Ь-фенилаланин-амид,Г 23,91.1,0 г (1,62 юэль) Н-Трп-НорлейСтт НроР НО (397 ф 35) : -Асп-фен.-ИН 2 НС 1 в 10 мл ДИФА в при-.Найдено, : С 51,51; Н, 4,681 сутствии 0,68 мя (4,8 б ммоль) три 24;06. ,этиламина и О, 74 г (1,62 ммоль) ВОСК-трет-Бутилоксикарбонил-Ь-Норлей -0-О-Ала-ОПХФ оставляют на. ночь, упацил-Ь-аспарагйл-Р-(трет-бутылочный .Ривают в вакууме,.гелеобразиый остасложйый эфир)-Ь-фенилаланин-амид,. ток после разбавления эфиром отфильтК раствору 1,68 г (5,0 ммоль)ровывают и промывают эфиром, затемН-Асп-(О-третбутнл)-Фен-ИН и 2,2 г. . водой. 1,36 г сырого продукта хрома(5,5 ьколь) ВОС-НоРлей-ОПФФ в 10 мл 35 тографируют на .силикагеле, элюируядИФА добавляют 0,70 мл (5,0 ммоль) смесью растворителей Р 10. Чистыетриэтиламина, спустя 3 ч упаривают в Фракции упаривают в вакууме. твердыйвакууме и твердый остаток отфильтро- остаток после разбавления 50-ным водвывают при охлаждении после разбавле- : ным этаиолом отфильтровывают. Полунияэфиром. Получают 2,23 г (81,8) ,О чают 0,25 г ВОС-Э-О-Ала-Трп-НорлейВОс-норлей-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-:" - Асп-феи-нн, т. пл. 217-218 с (разл) 1ЙН т, нл, 164-165 фС. После лере- "З0 30 ВО, 15 р о 1)1 = +4,3кристаллизацией из этилацетата т. пп.; (с " 1,0, ДМФА)165-167 фС; Н 0,701 Ц 1: +2,2 ф ВЫЧИСЛЕНО, : С 59,591 Е 1 6,71;(с е 1,0, ДЙФА) : .И 12,80,Вычислено, : С 61,29; Н 8,08; СщНЯ,О, (765,88).0 10, 24,. Найдейо, : .С 59, 40; Н 6, 55;Сза Н 44 М 40 (548,66) ..Я 12,83.Найдено : С 61,34; Н 7, 70; , . П Р и и е Р 11,Ы 10,40, : . - Пентафторфениловый эфйр Ы-трет.Ь-ЯОРЛЕйциЛ-Ь-аСПараГИП-Ь-фЕНИЛ- О -БутИЛОКСИКарбОНИЛ-Ь-НОРВаЛИИаалании-амид-гидрохларид,.. 8,0 г (20 ммаль соли ВОС-Норвал 1, 90 г (3,47 ммоль) ВоС-Норлей-Асп- оИ дициклогексиламин при встряхива-(О-трет-бутил)-Фен-нн растворяют в ййи растворяют в смеси 60 мя эфира и15 мл 4 н.солянокислой уксусной кис мл 2 н.серной кислоты. Эфирную фалотй, через 1 ч упаривают в вакууме 55 зу отделяют, промывают.20 мл , й.серн твердый остаток после разбавления ной кислоты и водой, высушивают и упаэФиром отфильтровывают. Получают : Ривают в вакууме. Остаюшееся масло1 г 48 г, (98) Н-Норлей-Асп-Фен-ЯН ЯС 1 вместе с 3,70 г (20 ммоль) НО-ПФФрат. Разл, 195 Су Н: 0,35 (сЦ-15,4 створяют в 35 мл этилацетата, при(с а 1,0, дМФА). 6 0 С добавляют 3,92 г (19 ммоль) дЦГКД,Н-трет-Бутилоксикарбонил-Ь-трипто- " вйщерживают 1 ч, фильтруют, фильтратфил"Ь-норлейцил-Ь-аспарагил-Ь-фенил- упаривают ввакууме и маслянистый ос"алании-амид, таток растворяют в 50 ил н-гексана,1,35 г (3,15 ммоль) Н-Норлей-Асп- Раствор промывают 5-ным раствором би-.Фен-ЙН НС 1 и 1,26 г (3,15 ммоль) бя карбоната натрия (5 х 20 мя) и Ъодой