Способ выявления цибридов среди растений-регенерантов, полученных при соматической гибридизации

Номер патента: 1630709

Авторы: Глагоцкая, Глеба, Самойлов, Сидоров, Шевченко

ZIP архив

Текст

руют 3 мин при 80-100 д. Надосадочную жидкость удаляют. Процедуру повторяют дважды.П р и м е р 2. Источником прото- пластов берут асептически выращиваемые растения дикого вида картофеля Бо 1 апцш р 1 ппа 11 яесСцш. Протопласты выделяют указанным способом.П р и м е р 3Источником прото- .пластов служат асептически выращива . емые растения-регенеранты, полученные, в результате соматической гибридиза"ции протопластов сорта "Зарево" и протопластов дикого вида Б.рппаС- яес 1 цш.Интенсивность флюоресценции протопластов определяют на флюориметре. Плотность суспензий протоплас- тов уравнивают визуально по интенсивности окраски, добавляя среду И 5. Конечный объем суспензий 50-70 мп. Суспензию протопластов в объеме 5 мл сорта картофеля "Зарево" помещают в кювету флюориметра и возбуждают флю" оресценцию хлорофилла светом в широкой области спектра (400-640 нм). Снимают показания интенсивности флю- Ъ.оресценции хлорофилла (Фл) протопластов. Затем в кювету добавляют раствор, содержащий гербицид симазин, -.блокирующий фотосинтез, Конечная кон- -центрация симазина в кювете 1 хх 10моль/л, Снимают показания. По разнице показаний интенсивности флюоресценции хлорофилла протопластов до (Фл) и после добавления симазина (фл + симаз) определяют относительную интенсивность флюоресценции (Иф) по формуле(Фл + симаз) - ФлФл + симазИзмерения проводят в 3-4 кратной повторностях. Результаты измерений заносят в таблицу. Интенсивность флю- оресценции протопластов Б.рппаС 1 яесцш измеряют указанным способом.Затем измеряют интенсивность флюорес изобретения Способ выявления цибридов средирастений-регенерантов, полученныхпри соматической гибридизации, вклю 40 чающий идентификацию хлоропластов,характерных для растений-доноров,о т л и ч а ю .щ и й с я тем, что,с целью упрощения технологии выявле-,ния цибридов и сокращения длительнос45 ти процесса, для идентификации выделяют протопласты родительских форми растений-регенерантов и проводят.измерение интенсивности флюоресценции их хлорофилла, по которой ведутотбор цибридов,Ъценции хлорофилла протопластов растений-регенерантов.,Цибриды-растения с хлоропластамидикого вида Б.рппа 11 яесйцш имеютинтенсивность флюоресценции, сходнуюс протопластами дикого вида, и превышают интенсивность флюоресценциипротопластов сорта "Зарево", По раз-,нице в интенсивности флюоресценциипротопластов родительских форм растений и регенерантов отбирают цибридные линии,Б табл. 1 приведены данные интенсивности фотосинтеза родительскихформ растений и отобранных цибридов,линии Бр 10, Бр 13, Бр 21.Для контроля выявленные с помощьюуказанного способа цибриды линий:Бр 10, Бр 13, Бр 21, проверяют путемрестриктного анализа их хл ДНК,Из сравнения спектров хл ДНК можно отметить рестриктные спектрыхл ДНКБр 10, Яр 13, Бр 21.идентичные спект 25 рам хл ДНК Б.рппа 11 яесТцш, что свидетельствует о цибридной природеотобранных линий,Таким образом, предлагаемый способявляется достоверным способом выявления цибридов. Способ позволяет упростить технологию выявления цибридовсреди растений-регенерантов, полученных при соматической. гибридизации,сократить, затраты труда, времени исредств.Формула1630709 Параметры Фл Фл+симазрастений Иф Б ре 4 ЮХ = БеСэ Х =Б.р. 10 ХБ.р. 13 Х =21 БэрСоставитель В.ДемкииТехред М, МоргенталР Корректор Т.Палий Редактор С.Лисина Заказ 505 Тираж 362 Подпиеное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретенйям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская иаб., д. 4/5 ее в м

Смотреть

Заявка

4655694, 27.02.1989

ОТДЕЛЕНИЕ КЛЕТОЧНОЙ БИОЛОГИИ И ИНЖЕНЕРИИ ИНСТИТУТА БОТАНИКИ АН УССР

САМОЙЛОВ ВЛАДИМИР МИХАЙЛОВИЧ, СИДОРОВ ВЛАДИМИР АНАТОЛЬЕВИЧ, ШЕВЧЕНКО СЕРГЕЙ НИКОЛАЕВИЧ, САМОЙЛОВ АЛЕКСАНДР МИХАЙЛОВИЧ, ГЛАГОЦКАЯ ТАТЬЯНА ЦЕЗАРЕВНА, ГЛЕБА ЮРИЙ ЮРЬЕВИЧ

МПК / Метки

МПК: A01H 4/00, C12N 5/00

Метки: выявления, гибридизации, полученных, растений-регенерантов, соматической, средi, цибридов

Опубликовано: 28.02.1991

Код ссылки

<a href="https://patents.su/3-1630709-sposob-vyyavleniya-cibridov-sredi-rastenijj-regenerantov-poluchennykh-pri-somaticheskojj-gibridizacii.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выявления цибридов среди растений-регенерантов, полученных при соматической гибридизации</a>

Похожие патенты