4-(3-метилпиразолил-4)-2, 6-диметил-3, 5-диэтоксикарбонил-1, 4 дигидропиридин, об ладающий гепатопротекторной активностью

, (19) ГОСУД АРСПО ДЕЛ ПИСАНИ ОБРЕ(54) 4-( ДИМЕТИЛДИГИДРОПИ ТОПРОТЕК (57) 4-( диметил- дигидроп юл. У 11ового Красного 3ганического синт з н И н 0 лик. 1981. Т 1 де СЬешд Селеш.Нет бладаю ивност ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Ордена Трудмени институт орАН ЛатвССР(56) Майоре А.Я., Зариня Л.А.,Дубур Г.Я., Берман Э,С. Действиетиоксиданта этидина на пораженнуюсернокислым гидразином печень крИзв. АН ЛатвССР, 1972, В 7, с.1112.Патент ФРГ У 3022030,клС 07 Р 417/04, опуб11.Гдзйег, Т.Кц 1 Ьап,гу од" РЖуйгоругЫдпез.1972, то 1,72, р.1,М.А.Кдга, М.Б.АЬоц 1 - Епедп.,М.,У.КогКог, Т 1 е Чд 1 зшедег - НаасВеас 1 доп, П .ВеасМоп оГ РИозр 1 доОхус Ыог Ые - ИшеС 1 ду 1 ГогшашЫеСИИ ЯешдсагЬазопез. Т,Не 1 ег,Селеш,1970, то 1.7, р.25-26.обладающему гепатопротекторной активностью,Указанное свойство позволяетпредполагать возможность применеФния его в медицине,Известен 2,6-диметил,5-диэтоксикарбонил,4-дигидропиридин;(зтидин), обладающий гепатопротекторной активностью.Наиболее близкими по структуреК предлагаемому соединению являются4-имидазолил и 4-тиазолил,5-диалкоксикарбонил,4-дигидропиридины,обладают кардиоваскулярной активностью. о менто Изобретение относится к новым кнмическим соединениям, конкретно к 4-(3 -метилпиразолил)-2,6-диметил,5-диэтоксикарбонил,4- дигидропиридину формулыЦель изобретения - изыскание в ряду 1,4-дигидропиридинов новых веществ, обладающих высокой гепатопротекторной активностью.Цель достигается описываемым 4-(3 -метилпиразолил)-2,6-диметил,5-диэтоксикарбонил,4- дигидропиридином приведенной форму" лы 1, обладающим гепатопротекторной активностью. Укаэанное соединение получают по известной методике. конденсацией этилового эфира ацетоуксусной кислоты с 3-метил-формилпиразолом и аммиаком в подходящем органическом растворителе при . повьппенной температуре.Исходный 3-метил-формилпиразол получают из семикарбазона ацетона./Пи м е р, 4-(3 -Метилпиразолил)-2,6-диметил,5-диэтоксикарб нил-,4-дигидропиридин (1).3 г 0,03 моль) 3-метил-формилпиразола, 7,8 г (006 моль) этилового эфира ацетоуксусной кислоты и 7,5 г (0,225 моль) 25%-ного водного аммиака растворяют в 20 мл эта 125957 2иола и кипятят 5 ч. Охлаждают, фильтруют, осадок промывают эфиром и кристаллизуют из.50% этанола, Получают2,25 г (25%) бесцветных кристалловфсоединения 1 с т.пл. 214-215 С.Найдено,%: С 60,9, Н 6,9,Ю 12,9.Вычислено,7: С 61,2, Н 7,0,И 12,6С Н 1,010 УФ-спектр (в СН ОН),Я д, нм(3 Н, с, 3 -СН), 4,00 (4 Н, кв,20 ОСНСН), 4,68 (1 Н, с, 4-Н),7,04 (1 Н, с, 5-Н), 7,71 ( Н, с,ИН пиридина), 12,0 (1 Н, с, ИН пиразола).Гепатопротекторная активность25 соединения 1 изучена в опытах пчего и хп чиччо на модели поражения печени крыс, вызванного четыреххлористым углеродом. В качестве препаратов сравнения в опытах п чегоиспользовали глутатион, витамин Е,цистеамин и этидин, в опытах пчто - витамин Е и этидин, Опытыпроводили на белых беспородныхкрысах - самцах массой 180-220 г,В опытах л чхСго гомогенизировали печень крыс, полученный гомогенат центрифугировали и супернатант вколичестве, содержащем 3,0 мг белка,вносили в инкубационные сосуды. Во40все пробы добавляли 0,2 мкМ НАДФН.В отдельные пробы вносили СС 1(1 О мкм ) и одно из исследуемых веществ: .глутатион - 0,4 мкМ, витамин Е, цистеамин, этидин и соединение 1 10 мкМ. Пробы инкубировали45при 37 С в течение 40 мин при переомешивании. Оценку перекисного окисления липидов (ПОЛ) проводили путем определения малонового диаль 50дегида (МДА), При добавлении в инку-бационную среду СС 1 наблюдалось резкое усиление процессов ПОЛ - количество МДА увеличивалось в 3 раза.Внесение в инкубационную среду,содержащую СС 1 исследуемых соединений предотвращало усиление ПОЛ(табл.1),В скобках указано число экспери- вТ а б л и ц а 1 Действие исследуемых соединений на прооксидантный эффект четыреххлористоготуглерода в опытах, п ч 3.гго.,Схема эксперимента М + ьр нМ/мг белкаемино 100 Контроль6,01 0,6 (30) 18,9+1,0 (30) 4,4+0,5. (8) 4,1+0,7 (5) 4,7+0,3 (5) 4,40 р 4 (20).81 74 5,5+Ор 6 (5) 91 х) Достоверно по отношению к контролю.хх) Достоверно по отношению к СС 1 . В скобках указано число экспериментов,В опытах дп ччо СС 1 инъецировали внутрибрюшинно в дозе 0,5 мл/кг в виде 103 раствора в оливковом масле. Исследуемые соединения вводи" ли перорально в виде водной суспензии с добавлением твинав дозе 200 мг/кг дважды - за 1 и 24 ч до инъекции СС 1; Контрольным животным вводили 4,5 мл/кг оливкового масла и водный раствор твина. Животных забивали декапитацией через 24 ч после введения СС 1Через 24 ч после введения СС 1 в сыворотке крови наблюдается резкое усиление активности аланинами- нотрансфераэы (АлАТ) и аспартатаминотрансфераэы (АсАТ) (табл.2), что указывает на серьезные повреждения печени, связанные с деградацией мембран гепатоцитов, Значительно уменьшается величина коэффициента де Ритиса, отражающего соотношенйя активности АсАТ и АлАТ. В печени наблюдается уменьшение количества белка и цитохрома Р(табл.3)./Применение витамина Е, этидинасоединения 1 предотвращает существенное изменение биохимических показателей сыворотки крови. Соедине". 25957 4ние 1 достоверно снижает уровеньактивности АлАТ и АсАТ, улучшаеткоэффициент де Ритиса, а также досто",верно препятствует снижению количества цитохрома Рв печени.Соединение 1 улучшает большинствобиохимических показателей сыворотки крови и печени при поражениичетыреххлористым углеродом в боль- О шей степени, чем витамин Е и этидин.Острая токсичность исследованапри внутрибрюшинном введении белыммьппам-самцам. ЛД, для соединения1 составляет 1350 (1000-1822) мг/кг.1 Таким образом, выявлено положительное действие соединения 1 наструктурно-функциональные нарушенияв печени, вызванныечетыреххлориотым углеродом. По гепатопротектор" 2 О ному действию соединениезначительно превосходит этидин-соединение того же химического класса,Низкая токсичность и высокая ге;патопротекторнев активность 4-Э Ъ25 метилпиразолил "2,6-диметил"3,5-диэтоксикарбонил,4-дигидропнридина указывают на возможностьего практического применения в медицине для лечения и профилактикизаболеваний печени.1125957 Таблица 2Активность сывороточных алайин" и аспартатамннотрансферазычерез 24 ч после. введения СС 1 и предварительного введенияисследуема соединений Схема зкспери- Колнчестмнта во вивотных АсАТ Коэффициент де Ритиса Х АсАТ/АлА Х М+щ, ед; 6410,11 , О 100 1,45310,099100 250,0 4,67+0,07 . 285 . 370 й 0,58 226 4,3 бфО,4 266 Зэ 06+Оэ 50 187 76 0,851+0,025, 58 41 0,908+0,110 62 СС 1 Ф витамин Е 1 О Щ+ зтндии 0,870+0,О СС 1 е+ соединение 1 17 0,9800 йвффвеф) Достоин) Дост но по отионенщф но по отиоаенив контроав л и Содержание белка и цитохрома Р через 24 ч после введения СС 14 ивведения исследуемых соединений в печени редварительнхема эксперимента Количество Белок М+в,животных мг/г печени ЦитохромР"450 М+в,нМ/мг белка 158,4+9 0 нтрол 23,2+6,843,0+3,3 4 34+0,02 СС 1 + витаминСС + этидин 115,7+5,9 44 73 О,7+0,06 80 0,2510,03 СС + соединение 126,0 ошению к контролюошению к СС 1) Достоверно по х)Достоверно по Редактор Л.Письман Техред Л.Олейник Корректор И.Шарош ака ПодписноеССР комитета С и открытий ушская наб.; д.4/5 иал ППП "Патент", г.ужгород, ул. Проектная,4 1339/3 Тираж 3 ВНИИПИ Государственногопо делам изобретении 13035, Москва, Ж, Р 3,9610,О 3,18+0,8 3,77+0,08 2,63+0,28 00 0,39+0,04 78 Д,17+0,04 90 О,