C07K 14/62 — инсулины

Номер патента: 385436

Опубликовано: 01.01.1973

Автор: Иностранец

МПК: C07K 14/62

Метки: 385436

...на бумаге (6 час, 200 в, уксусная кислота - муравьиная кислота, рН 2, индч катор бромфеноловый синий); для контроляотцепления фенилаланина - электрофорез и анализ с аминокислотой.П р и м е р 1. К раствору 1 г (0.167 льяоль)инсулина свиньи в 70 лгг 80%-ного диметила цетамида добавляют 1,45 г (10,нлголь) трет3854 ол течение 1 час при 40 С получают 725 мг дезфенилаланин Внсулина (свиньи). 5 П р и м е р 5. Из 1 г смеси инсулина крупного рогатого скота и инсулина свиньи, как в пригмере 1, но при использовании 0,3 ммоль 4-нитрофенилизотиоцианата и проведении реакции в течение 2 час при комнатной темпе ратуре получают 780 мг дезфенилаланин В- инсулина.П.р и м е р 6, Как в примере 1, из 1 г ин.сулина крупного рогатого скота при использовании...

Номер патента: 469686

Опубликовано: 05.05.1975

Авторы: Каринская, Кривцов, Швачкин

МПК: C07K 14/62

Метки: дез-аланин-в-30инсулинов

...колонку (40(3,5 см) с Сефадексом 6-25, предвари. тельно уравновешенную 0,05 М раствором би. карбоната аммония, и алюируют этим же бу. ферным раствором, собирая фракции по 5 мл. Содержание белка во фракциях определяют спектрофотометрически при 278 нм. Фракции, содержащие белок, объединяют и лиофильно высушивают. Выход целевого продукта 1,15 г, При электрофорезе (750 в, 2 час) на бумаге в 0,1 М растворе лимонной кислоты, содержащем 4 моль мочевины, полученньш дез-аланинВзо-инсулин движется однородным пятноъ 1, подвижность которого аналогична подвижности исходного свиного инсулина. Дез-аланинВзо-инсулин выделен в аналитически чистом виде с выходом, близким к количественному.469686 Составитель Л. Фонина Техред Г. Дворина Корректор Л. Котова...

Номер патента: 488810

Опубликовано: 25.10.1975

Авторы: Ардемасова, Титов

МПК: C07K 14/62, C07K 7/06

Метки: гексапептида, инсулина, последовательности, цепи, человека

...последовательно 0,5 н,серной - кислотой, водой, 5%-ным бикарбонатом1 натрин, водой, сушат и упаривают досуха.,После кристаллизации остатка из атила рОдных инсуляноекпх аналогов. х синтетнчесщ. сж К ГОИзвестен способ пыученииЖФда Винсулина последова"Ифденсацией метилОБОГР зфира ВГзацппценяым 1 В 11 инок, слетами.Ю 1 ПИМ ВЫДЕЛЕНИЕМ ЦЗЛЕВОГО ПРвестнъ 1 м способом.Такой спосоо харЯктеризуетси ВыделеайБИЕМ Ц ЛЕВОГО ПРОД РКТВ В ВИДЕ .1 ЕТНЛОВОГО ЗфИРВ ПОСКОЛЬКУ ДЛИ ДВЛЬНЕйШЕГО Чсд",пользования пептида ь.в синтезеВ цепи инсулина для превращений метилОавого ефнра в гидразид необходима абра.ботка Гидразином, которВИ приводи 1 кчастичной деструкции молекулы и снижению выхода целевого продукта на 30%.Дли усовершенствовании процесса в,качестве...

Номер патента: 491617

Опубликовано: 15.11.1975

Авторы: Беспалова, Леонтьева, Титов

МПК: C07K 14/62, C07K 7/06

Метки: 15-20, в-цепи, виде, гексапептида, дисульфида, защищенного, инсулина, последовательности, симметричного, человека

...Заказ 120/8 Изд. М 1961 Тираж 529 Подписное ЦИИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 сушат, упаривают до объема 15 мл, К остатку добавляют 2 мл дициклогексиламина, выпавшие кристаллы отфильтровывают, промывают эфиром, сушат. После кристаллизации из этилацетата получают 6,1 г (78%) продукта.Найдено, %: С 67, 17; Н 8,24.С 48 Н 67 Х 409 Нг 0Вычислено, о/о, С 66,94; Н 7,96.Полученную таким образом дициклогексиламмониевую соль суспендируют в этилацетате и встряхивают с 0,5 н. серной кислотой до полного растворения. Этилацетатный слой отделяют, промывают водой, сушат. После упаривания получают 4,8 г (009/9) продукта с т. пл. 157 - 158...

Номер патента: 520349

Опубликовано: 05.07.1976

Авторы: Беспалова, Леонтьевна, Титов

МПК: C07K 14/62, C07K 7/06

Метки: 21-30, в-цепи, декапептида, инсулина, последовательности, человека

...к полученному расгвору добавляют 1,0 г п-нитрофенилового эфира трикарбобензоксиаргинина в9 мл диметилформамида. Смесь оставляютна три дня при комнатной температуре, охолаждаюг до 0 С и разбавлят 0,5 н, сернойкислогой. Выпавшие кристаллы огфильтровываюг, промывают водой и сушат. Послекрисгаллизации из смеси метанол-эфир получают 1,8 г (77%) продукта, т. пл, 185- 4 О187 С д.1 - 24 о (с 1, ДМФА).Найдено, 4: С 61,22; Н 6,50,С Н 11 дг.Вычислено,%. С 61,58 Н 6 41,Карбобензокси- т ггрет.-бутиловый эфир-глугамил-аргинил-глицилфенилаланил-фенилаланил-тирозил-треонил-пролил-трет.-бутилоксикарбониллизил-треонин.0,77 г продукта П растворяют в 10 млметанола, к полученному раствору добавляют Я0,45 мл 1,0 и, серной кислогы и 0,3 г палладин на...

Номер патента: 577975

Опубликовано: 25.10.1977

Авторы: Масахико, Мицухиро, Сигехиса, Эйичиро

МПК: A61K 38/04, A61K 38/28, A61P 3/10 ...

Метки: полипептидов

...Дг( (ИО 1-еч- он.2,0 г - у - ДЬц - Дгд (МО )- ЦВОЕ 1растворяют в 20 мл ацетона, и охлаждаяна бане со льдом, добавляют 5,7 мл 1 н.водного раствора гидроокисн натрия. Смесьыремешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем добавляют 6 мл1 и. соляной кислоты и упарнвают апетонпри пониженном давлении, Выпадавшие кристаллы отфильтровывают и перекристаллизовывают из смеси этанол/вода, Выход продукта 1,86 г (98% от теоретического); т.пл.113-115"С; 143 -20,0 о (с1,1%;ДМФ),В. Получение 2- у- ДЬо-Аг(й 0 а 1-йЬ-Уйе-РЪе-тг- кнК 1,34 г Е-Рпе-РЪе-Тг-МНдобавляют небольшое количество анизолаи после этого 13 мл 25%-ного раствораНВИ в уксусной кислоте.После встряхивания смеси в течение45 мин при комнатной температуре к нейдобавляют диэтиловый...

Номер патента: 696011

Опубликовано: 05.11.1979

Авторы: Беспалова, Титов

МПК: C07K 1/06, C07K 14/62

Метки: в-цепи, инсулина, сульфоната, человека

...на Фильтре водой, упаривают фильтрат досуха, растворяютостаток в минимальном количестве диметилформамида и при -40 С добавляют к раствору, содержащему азид,Полученную смесь выдерживают три дняпри -5 С и два дня при комнатнойтемпературе, упаривают досуха, остаток растворяют в 30 мл трифторуксусной кислоты и в течение 2 ч пропускают через раствор сухой бромистый .водород. Раствор упаривают досухапри комнатной температуре, сушат остаток в вакууме над твердой щелочью Зри пятиокисью Фосфора, растворяют в10 мл диоксана и 6 мл 0,2 н.трис--буфера (рН 8,1). К полученному раствору добавляют 110 мг сульфита натрия и 60 мг тетратионата натрия,выдерживают 12 ч при комнатной тем-пературе и 2 ч при 37 С, диализируютб ч против...

Номер патента: 1149603

Опубликовано: 23.11.1985

Авторы: Волуйская, Иванова, Краснощекова, Никитина, Федотов, Швачкин

МПК: A61K 38/28, C07K 14/62, C12P 21/04 ...

Метки: активностью, гипогликемической, обладающий, полипептид

...в осадок, центрифугированием, растворяют его в минимальном объеме 10%-ной уксусной кислоты и образовавшийся,раствор пропускают для окончательного обессоливания через колонку (2,2 х 38 см) с сефадехсом С, применяя в качестве элюента 10%-ную уксусную кислоту, После лиофилизации получают 15 мг целевого полипептида3 11496Аминокислотный анализ: Азр З,ОО (3), ТЬг ,80 (2), Бег 3,80 (4), С 1 й 7,06 (7), Рго 1,00 (1), С 1 у 4,00 (4), АЕа 1,02 (1), Суз 4,60 (6), Ча 1 3,60 (4), 11 е 1,80 (2), Ьец 6,00 (6), Туг 3,50 (4), РЬе 2,90 (3), Н 1 з 2,00 (2), Ьуз 1,00 (1), Аг 8 0,95 (1).Результаты определения С-концевых аминокислот: Бег 0,98 (1), Азп .0,97 (1)0Проведены биологические испытания описываемого полипептида.Испытания проводили на мышах (самцы)...

Номер патента: 1147010

Опубликовано: 15.12.1985

Авторы: Зуянова, Рябцев, Фунтова, Швачкин

МПК: A61K 38/08, C07K 14/62, C07K 7/06 ...

Метки: октапептида

...(Уа).В раствор 1,42 г (2,40 ммоль) трет-бутилового эфира-бензилоксикарбонил-Б -трет-бутилоксикарбониллизил-третбутилтреонина (см, и. П.З) в 25 мл метанола вносят 50 мг палладиевой черни и смесь перемешивают в атмосфере водорода .в течение 5 ч. Затем катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме, остаток сушат в вакууме.Выход 1, г (100 %), масло. В 0,35 (хлороформ-метанол 9:1), ВГ 0,80 (2-бутанол%-ный аммиак 3:1) (ТСХ).П.5. трет-Бутиловый эфир Б-бензилоксикарбонилпролил, -трет-бутилоксикарбониллизил-трет-бутилтреонина (У 1).К 1,1 г (2,4 ммоль) трет-бутиЕлового эфира И -трет-бутилоксикарбониллизил-трет-бутилтреонина (см. п. П.4) в 5 мл ТГФ добавляют раствор 0,56 г (2,4 моль) И-бензилоксикарбониппролина...

Номер патента: 1301319

Опубликовано: 30.03.1987

Автор: Брюс

МПК: A61K 38/28, C07K 14/62

Метки: бычьего, проинсулина, свиного, человеческого

...С обеспечивает выход проинсулина 477. по.еп 4,0 3,87 Туг 3,0 2.,96 2,0 1,91 2,0 1,96 4,0 3,95 Аг 8 Остаточные значения являются средними для трех определений (30 ч гидролиза), А 1 а = 1,0,П р и м е р 5, Влияние концентрации протеина на выход продукта,Процедуру примера 1 используютдля определения влияния концентрации протеина на выход бычьего проинсулина из линейного цепного Я-сульфонатного бычьего проинсулина в ряде реакций, проводимых одновременно.Условия реакций: буфер - 0,05 Мглицин; рН 9,5; меркаптан - 2-меркаптоэтанол в количестве, обеспечивающем 4 экв, - ЯН на - ЯЯО - вреомя 18 ч; температура Ь С,По данным НН 2 Р 2 С изменение концентрации протеина следующим образом влияет на выход проинсулина:Концентрация про- Выход, 3теина,...

Номер патента: 1327790

Опубликовано: 30.07.1987

Авторы: Джеймс, Рональд

МПК: A61K 38/28, C07K 14/62

Метки: аналогов, инсулина, человеческого

...через 24-27 ч проведения реакции при 6 С с использованием аликвот, разбавленных ледяной уксусной кислотой 1:2. Рассчитаны действительные выходы в реакции соединения цепей. Зависимость от рН обнаруживает четкий оптимум около рН 10,5.Вывод: в реакции соединения А+В+ +цистеин обнаружен четкий оптимум при рН 10,5.Исследование рН: соединение А+В.Цель: пбдробная оценка интервала рН около значения рН 10,5 в начале реакции соединенияцепей А+В для определения критических отклонений в значении рН и точного значения оптимального рН, приводящего к оптимальному выходу инсулина.Методика: 120 мг свиного А (ЯЯО 3) и 60 мг человеческого В (ББО ), полученного из Е. со 11 (игр Е), растворяют соответственно в 12,0 и 6,0 мл О, 1 М глицинового буфера с рН...

Номер патента: 1531858

Опубликовано: 23.12.1989

Авторы: Джеральд, Ричард

МПК: C07K 1/107, C07K 14/62

Метки: пептидов

...вторичном образовании дикетопипераэина.В этом отношении ММП представляетсобой наиболее желательный растворитель, поскольку в его присутствииуровень образования дикетопипераэиназначительно выше, чем в случае ДИСО,и близок к значениям, достигаемым вДМФА на поздних стадиях реакции. Учитывая повышенную стабильность гормона роста в ММЛ по сравнению с ДМФА(табл. 5), можно сделать вывод, чтопервое иэ указанных веществ является 58 6желательным растворителем по крайней мере для данного применения,Оптимальное водное расщепление МеС - Рго - С 1 у - С 1 у в ,МН достигается в результате растворения 1 мг пептида в 1 М натрий-фосфатном буфере при рН 8,0. С целью ускорения расщепления температуру в течение 24 ч подо,держивают равной 55 С. Степень...

Номер патента: 1611217

Опубликовано: 30.11.1990

Авторы: Бреддам, Видмер, Ехансен

МПК: A61K 38/28, C07K 1/36, C07K 14/62 ...

Метки: инсулина, человека

...карбоксипецтидазы - У обьгчнониже, чем ее пептидазцая активность,обрдзющийся пецтицдмид 1 значительной мере стдбизген, поскольку цик 1сооттзетстгзует примерно 202 всего количества ицсулицовой пробыВ процессе реакции превращаетсяпример(го 75 Е исходного свиного ицсу:тицд. Однако, хотя содержание треоцинд гз пике 1 (3(з 5) больше, чем 3,0соответствуо(г(е( инсу;тину человека,ОЧЕГ 1(Г(11 О, ЧтО ПЕРВОЦДЧДЛЬЦЬтй ПРОДУКТтранспептидирования (-про-пиз-тре-Н Бце является достаточно стдбильцггм длятого, чтобы це ггроисходгггд опигоме -ризация с обрдзовацием (-про-лиз-тре 11 гБ"На первый взгляд образование смесипромежуточных амидов может говоритьо том, что в результате описанной ранее стадии дезамидирования посредством карбоксиг(ептидагзьгУ не...

Номер патента: 1839446

Опубликовано: 27.04.1996

Авторы: Беляев, Вульфсон, Гаврюченкова, Громова, Коршунов, Куликов, Леонова, Мальцев, Мелехов, Михлин, Морозов, Хрущева, Цуканова

МПК: C07K 14/62

Метки: белка, последовательность, проинсулина, рекомбинантного, содержащего

...М,й-диметакрилата этиленгликоля (ДМЭГ)с 2-гидрокси-диэтиламинопропилметакрилатом (ГДЭПМ) с сорбцией белка 0,007- 0,013 М уксусной кислотой, содержащей 0,15-0,30 М ацетата натрия, и элюцией рБПИ 0,8-1,1 М уксусной кислотой, При этомсорбент, получивший наименование ДЕАПСферанит-ОН, получают радикальной сополимеризацией ДМЭГ с ГДЭПМ в присутствии наряду с водным раствором хлористого натрия 11-13 от массы моно 5 10 152030 й,й-диэтиламиноэтилметакрилата с Н,М- метилен-бис-акриламилом в присутствии персульфата аммония и 0,3-3,0 н. водного раствора хлористого натрия.Процесс идет в узком диапазоне всех перечисленных условий, изменение которых приводит к ухудшению условий разделения.П р и м е р 1. На колонку (9 х 45 см), содержащую 3 л...