Патенты с меткой «культивируемых»

Номер патента: 1631077

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/06, C12P 21/08

Метки: альфа, антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, фетопротеину, человека, штамм

...антител,Коитамицация. Контаминация бактериями и грибами в щтамме не обнаружена. Криоконсервирование. Клетки штам.а ресуспендируют в среде для замораживания, состоящей из эмбриональной телячьей сыворотки, РЯЕИ или РРИ 1-1640 и диметилсульфоксида (5:4:1). 5 х 10 клеток ытяммг смешивают с 1 мп такой среды ка холоде н пластиковых пробирках, для чего последние держат на льду и сразу же помещают в хранилище с жидким азотом после программного замораживания материала.Характеристика целевого продукта.МонАТ, продуцируемые штаммом Р 2- 84, относятся к 180 классу и к1 подклассу мышиных иммуноглобулинов. Константа связывания антител штамма Р 2-84 с АФП равна 1,4 х 10 л/моль - определение проведено жидкофазным конкурентным радиоиммунологическим...

Номер патента: 1638160

Опубликовано: 30.03.1991

Авторы: Барышников, Дубинкин, Кадагидзе, Короткова, Тупицын

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: l-продуцент, антигена, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лейкоза, лимфобластного, мusсulus, моноклональных, общего, острого, против, штамм

...45 см в 5 мл среды заливают по 5 10 клеток штамма. Пассаж 1 раз в 2-3 дня той же дозой. Штамм выращивают при 37 С на среде МЕМ в модификации Дульбекко, содержащей 150 телячьей эмбриональной или оленьей сь 1 воротки, 2 мМ глютамина, 0,1 мг/мл гентамицина. Титр антител определяют в непрямой реакции поверхностной иммунофлюоресценции на живых лимфоцитах крови, В качестве источника антител используют культуральную жидкость, Титр антител в культуральной жидкости 1:50,5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Для выращивания штамма в виде асцитной опухоли пригодны самки мыши линии ВАВ/С. Интактным мышам за 7-14 дней до прививки опухоли вводят внутрибрюшинно раздражитель (вазелин), клетки штамма иньецируют внутрибрюшинно по 10 клеток7 на мышь в 4,0 мл...

Номер патента: 1640156

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Дегтярев, Костюк, Кочетков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, бактериофага, гибридных, днк, животных, зависимой, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рнк-полимеразе, штамм

...из крупных округлых клеток с крупными ядрами и тонким ободком цитоплазмы.Ядрьппки крупные, по 1-2 в ядре.Культуральнйе признаки. Среда для 5культивирования - среда ДИЕМ сыворотка эмбриона коровы (10%), сыворотка новорожденных телят (10%),глютамин (2 ммоль), пируват натрия(0,05 ммоль), пенициллин/стрептоцимин (1000 ед./мл). Характер ростастационарная суспензия. Метод снятиявстряхивание. Частота пассирования -2-3 раза в неделю. Посевная доза150 тыс. клеток на 1 мл. Кратностьрассева 5-10 раз.Контаминация, Бактерии, грибы и микоплазмы не обнаружены.Культивирование т.п чиччо. Культурапрививается и растет в виде асцитыв перитональной полости мьппей ВАЯВ/С,За 7 дней до введения клеток мьппамреципиентам вводят по 0,5 мл пристана, Асцит...

Номер патента: 1640157

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Дегтярев, Костюк, Кочетков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, бактериофага, гибридных, днк, животных, зависимой, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рнк-полимеразе, штамм

...признаки. Среда длякультивирования - среда ДМЕМ: сыворочка эмбриона коровы (10 ), сыворотка новорожденных телят (10 .), глютамин (2 ммоль), пируват натрия (1 ммоль), 2-меркаптоэтанол (0,05 ммоль), пеницилин/стрептомицин (1000 ед/мл).Характер роста - стационарная суспензия. Метод снятия - встряхнвание.Частота пассирования 2-3 раза в неделю. Посевная доза 150 тыс. клеток на 1 мл. Кратность рассева 5-10 раз.Контроль контаминаций. Бактерии, грибы и микоплазмы не обнаружены,Культура прививается и растет в виде асцита в перитонеальной полости мьппей БАЕВ/С, За 7 дней до введения клеток мышам-реципиентам вводят по 0,5 мл пристана. Асцит образуется через 10-15 сут после введения 1-5 млн клеток.Продуктивность штамма. Первичная...

Номер патента: 1640158

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Дегтярев, Костюк, Кочетков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, бактериофага, гибридных, днк, животных, зависимой, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рнк-полимеразе, штамм

...61.Консервация клеток. Клетки ИМБСзаморожены на 36-м пассаже. Общееколичествоампул 20, по 4 млн клетокв ампуле. Криозащитная среда - рос-.товая,П р и м е р 1. Культивированиегибридных клеток ИМБС, .Во Флаконы для культйвированияклеток вносят гибридные клетки в концентрации 100-200 тыс клеток в 1 млсреды ДМЕМ, содержащей 10% эмбриональной сыворотки коровы, 10% сыворотки новорожденных телят, 2 ммольглютамина, 1 ммоль пирувата натрия,0,05 ммоль 2-меркаптоэтанола,1000 ед,/мл пенициллина/стрептомицина. Клетки инкубируют 2-3 сутв стационарном состоянии при37 С в атмосфере 6% СО. Концентрацияклеток, превышающая 1 млн в 1 мл,неблаго"приятна для роста клеток ивызыв ает их,гибель. Культуральнуютометра.Моноклональные антитела, продуцируемые...

Номер патента: 1640159

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Агрба, Аравиашвили, Иванов, Инджия, Какубава, Лапин, Мамаева, Тимановская, Яковлева

МПК: C12N 5/00

Метки: papio, stlv-1, герпесвируса, клеток, культивируемых, лимфотропного, намаdryаs, павианов, продуцент, ретровируса, семейства, типа, штамм

...30 до 250 нм. Вирусные частицы локализовались в цистернах цитоплазмы или внеклетсчно,Наблюдались массивные скопления вирусных частиц. Вирус, обнаружнваемьщв клетках штамма ВПХ-П, имел структурное сходство с вирусами группы5 16; 01НТ 1 Л, В 0,5 Х клеток штамма Обнару;.живалксь также вирусные частицы сморфоло гиче ской структурой вирусагерпеса. Вирусная популяция, состояшая из незрелых и зрелых вирусньхчастиц, располагалась в ядре. цитоплазме, а зрелые частицы - в межклеточном пространстве,Трансформирующая активность, Транс формирующая активность была изученана лимфоцитах павианов гамядрклов(возраст животных 6-8 мес) и лкмфоцитах крови пупочного канатика человека. Культуральная жидкость штаммаВПЛ, взятая на 7-й день культивирования без...

Номер патента: 1641884

Опубликовано: 15.04.1991

Авторы: Березкина, Игнатова, Ковалева

МПК: C12N 5/00

Метки: гибридомы, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, штамм

...Бр 2/О Ая 14.Штамм клеток Бр ЕВКпри введе 40нии внутрибрюшинно мьнпам линииВа 1 Ь/с по 10 клеток на мышь в0,5 мл Хэнкса через 10 дней развивается в виде опухоли асцитного типа,45Жизнеспособность клеток поддерживается путем пересевов иа свежую питательную среду ДМЕИ с добавлением10% эмбриональной сыворотки, 1 мМзаменимых аминокислот, 1 мМ пируватанатрия, 2 мИ глютамина, 5 10 фмМ50меркаптоэтанола, 40 ед/мл гентамицина с добавлением ЕВ в концентрации50 мкг/мп. Метод снятия клетокпипетирование кратность рассеваУ41:4, посевная доза 5 10 кл/мп,насыщающая плотность 510 кл/мп. 55Время удвоения популяции 24 ч.Условия культивирования - на флаконах Карреля при 37 С или в пласти ковых флаконах в С 02-термостате при37 С и 5-7% СОКлетки штамма Бр...

Номер патента: 1641885

Опубликовано: 15.04.1991

Авторы: Баранов, Галахарь, Дьяченко, Уфимцева

МПК: C12N 5/00

Метки: vison, гибридных, иммуноглобулина, клеток, культивируемых, легких, мusсulus, мusтеlа, межвидовых, моноклонального, мыши, норки, продуцент, цепей, штамм

...гибридных клеток контролируют при микроскопировании панелей,Из лунок, в которых площадь растущих колоний гибридных клеток достигает 1/3 и более площади лунки, исследуют культуральную среду на присутствие 18 норки или его цепей. Детекцию ТВ норки и его цепей проводятпри помощи иммуноферментного анализас использованием антисывороток к 18норки, его легким и тяжелым цепям.В качестве субстрата использовандиаминобензидин, Каждый иммуноферментный анализ (ЕЭБА) сопровождается калибровкой 18 норки и контролемкалибровкой мышиного 1 я и интактнойкультуральной среды, При первичномотборе выбирали колонии с более высокой продукцией Ь-цепей 18.,40При Ъостоянном контроле уровня испецифичности синтеза Ь-цепей норкипроводили клонирование...

Номер патента: 1645295

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Думалакене, Иванаускас, Маурицас, Микалаускене, Тамошюнас

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, в-лимфоцитов, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, штамм

...связанные белки элюируют0,2 И НС 1-глициповым буфером, элюатнейтрализуют 1 М НаОН и диализируютпротив ФСБ.Иодирование белков клеточной поверхности проводят с помощью лактоперокси;азы, В суспензию клеток5-Ох 0 в 1 мл ФБС добавляют100 мкл лактопероксидазы (2 мг/мп),40 ИБк На 3 и 100 мкл О,ОЗХ Н 0Смесь инкубируют 4 мин, осторожноперемешивая, и опять добавляют00 мкл О,ОЗХ ИО. Через 4 мин инкубации клетки 3 раза проьываютФСБ и лизируют 0,5 Х-ным растворомдезоксихолата натрия на боратномбуфере, рН 8,3, имеюцим 1 мИ РМЯГ(уенилметилсульфонилфторида). Эффективность мечения белков устанавливают с 10 Х-ной трихлоруксусной кислотой (ТХУ). Установлено, что иммуносорбент с М 1 А специфически связывает0,79 Х белков, снятых с НЛ, и 1,36...

Номер патента: 1645296

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Березкина, Волкова, Гринчук, Завадская, Игнатова, Ковалева, Милованов, Павличенко, Паншин, Паншина, Супрун

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, фактора, штамм, эритроцитов

...1 х 10 клеток/мп. Бизне 6способность клеток при размораживании 75-80%. Прививка клеток штамма264 сингенным иьппаи вызывает у них образование асцитной опухоли, сопровождаюце- ся выделением асцитной жидкости в 45 количестве от 1 до 8 мп. В асцитной ждкост содержатся специФические монАТ к Н- антигенному фактору крови быка. Способность в продукции монАТ клеткаи птамма Р 264 сохраняется на протяжении трех месяцев непрерывного культишрования клеток. После разораливаия клеток способность продуцировать монАТ сохраняется. Прививка мышам цтамма на разных пассажах культивирования стабильно вызывает обраэоваие асцитных опухолей у мышей с высоким титром ионАТ в асцитной жидкости. фя кариологического анализа клеток штаииа П 264 используют 100...

Номер патента: 1652338

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Адомайтене, Немейкайте, Рачкус, Садаускас

МПК: C12N 5/00, C12N 7/00

Метки: вируса, клеток, коровы, крупного, культивирования, культивируемых, лейкоза, почки, рогатого, скота, штамм, эмбриона

...после 2515 пассажей при определении ревертазной активности вирусной фракции культуральнойжидкости 7-суточной культуры М 18 по методу Ложа и др. обнаружена высокая вируспродуирующая активность, достигающая20 10 -10 вирусных частиц в 1 мл.Вирус лейкоза КРС и его антигены, выделенные клетками М 18 в культуральнуюжидкость, выявляются также с помощьюРИД в агаровом геле в варианте для опре 25 деления титра антигена,Наличие зкстрацеллюлярного вирусалейкоза КРС и его антигенов в культуральной жидкости клеток М 18 регистрируюттакже при помощи иммуноферментного30 анализа (ИФА), После осветления культуральной жидкости (5000 об/мин, 30 мин)вирус лейкоза КРС осаждают в 20-номградиенте плоскости сахарозы ультрацентрифугированием, лиэируют,...

Номер патента: 1652339

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Дьяконов, Куликова, Федоров, Феоктистова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: arginini, антигену, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсорlаsма, мембранному, моноклональных, продуцент, штамм

...в 96, 24, 12-луночных плашках, а затем в чашках Петри.Культуральную жидкость исследуют на содержание специфических антител. Титр1652339 Составитель А,МаныкинРедактор М.Петрова Техред М.Моргентал Корректор М.Пожо Заказ 1747 Тираж 380 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 специфических антител в иммуноферментном тесте составляет 1:128-1;256.Препараты моноклональных антителполучают 3-кратным осаждением раствором сульфата аммония 50;-ного насыщения с последующим диализом. Определяютклассовую принадлежность и специфичность моноклональных антител.Штамм клеток обладает следующими,...

Номер патента: 1652340

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Криворутченко, Кривошеин, Попов, Червонский

МПК: A61K 39/395, C12N 5/18, C12P 21/08 ...

Метки: антител, белку, вируса, гибридных, гриппа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, типа, штамм

...и посевах на питательной среде. Заражениямикоплазмой не выявлено по окрашиваниюкрасителями на ДНК и тимидиновой метке вкультуральной среде,Криоконсервирование.Клетки штамма ресуспендируют в культуральной бычьей сйворотке, содержащей10 длиметилсульфоксида (концентрацияклеток 5 х 10 - 10 в 1 мл), разливают в пла 5 6стиковые ампулы при 4 С, помещают в толстостенную коробку иэ полипеноуретана ипереносят на 24 ч в холодильник (70 С), Затем клетки хранят в жидком азоте. Возможно программное замораживание соснижением температуры на 1 С в 1 миндо - 40 С с последующим переносом в жидкий азот. Размораживание осуществляют втечение 3 мин при 37 С, Клетки разводят в10 мл среды для культивирования, осаждают центрифугированием, ресуспендируют в5...

Номер патента: 1657527

Опубликовано: 23.06.1991

Авторы: Балаян, Беркова, Иванов, Кожич, Кусов, Насташенко, Шамборант

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, вирусу, гепатита, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...1,6 х 10 М тимидина, 20 еМ .-глутамина, суспендируют 55клетки пинетированием и распределяют в96-луночные плейты по 50 х 10 клеток в 100мкл среды в лунки, в которые эа день догибридизации высаживают мышиные перитонеальные макрофаги (5 х 10 клеток в лунку). Клоны гибридных клеток становятся заметными через 10-12 дней. Тестирование клонов проводят, когда клоны заполняют лунку на 207 ь. Положительные культуры клонируют методом предельного разведения в 96-луночных панелях на фидерном слое перитониальных макрофагов, внося по 30. 300 и 30000 клеток на панель.Для получения асцитов самкам мышей ВаЬ/с за 10 - 14 дней до инъекции гибридных клеток внутрибрюшинно вводят по 0,5 мл пристана.При введении (2 - 4)х 10 гибридных клебток у мышей...

Номер патента: 1659477

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Демчева, Мантрова, Папковский, Пономарев, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, копропорфирину, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...пассажи 1 раэ в 4-5 дней с подсчетом клеток. Для получения асцита мышам ВаЬ/с эа 7 дней до введения гибридомных клеток вводят 0,5 мл 2,6 10,14-тетраметилпентадекана в/б. На 7 день штамм клеток иньецируют в/б в количестве 500000 клеток в мышь. Асцитную жидкость отбирают на 10-й день, Объем асцита 5-6 мл. Клетки иэ асцита иеревивают новым мышам в течение 9 пассажей беэ заметного изменения титра моноклонэльных антител в асцитной жидкости.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре не обнаружены. Тест на микоплаэму отрицателен.Кариологическая характеристика штамма: модальное число хромосом 90. Маркерных хромосом не выявлено.Продуктивность. штамма, Концентрация моноклональных антител в культуральной жидкости на 7-й день культивирования...

Номер патента: 1661231

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Байтубаев, Булашев, Гоголев, Муканов, Надточей, Несмеянов, Соколова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/18

Метки: антитела, белку, гибридных, животных, клеток, коронавируса, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональные, поверхностному, продуцирующий, рогатого, скота, штамм

...гибридомы концентрация (МонАТ) достигает 10 мкг/мл в культуральной среде. В очищенной асцитной жидкости концентрация иммуноглобулинов.составляет 8 мг/мл.Характеристика полезного продукта, (МонАТ)относятся к иммуноглобултинам подкласса 62 Ь,(МонАТ)специфически взаимодействуют с гликопротеином (гликолизированная мономерная форма гемагглютинина) с м.мас.62 КДа. Спецйфичность определяют методом иммуноблотингэ,Контаминация.Контаминантов в клетках, включая бактерии, грибы, дрожжи и микоплазмы, не обнаружено.Криоконсервация.К осадку гибридных клеток добавляют эмбриональную сыворотку теленка, а затем диметилсульфоксид до конечной концентрации 10. Суспензию клеток разливают в стерильные пластиковые ампулы с завинчивающимися крышками по 2...

Номер патента: 1664842

Опубликовано: 23.07.1991

Авторы: Грабовская, Ночевный, Петручук, Шалунова

МПК: C12N 5/06

Метки: быка, вирусов, используемый, клеток, крупного, культивируемых, накопления, рогатого, скота, тестикул, штамм, эмбриона

...рассева 1:2 - 1:3. Монослой состоит из эпителиоподобных полигональных или окружных клеток, Цитоплазма хорошо выражена, ядра округлой формы, хроматин расположен равномерно, Почти в каждом поле зрения выявлены митозы. Клетки имеют четко выраженный модальный класс по числу хромосом (из 46 проаналиэированных клеток 28 содержали по 50 хромосом), Кариотип клеток содержит акроцентрические, мета- и субметацентрические хромосомы. В линии выявлено 18 различных маркерных хромосом, Наиболее постоянным для данной линии оказались 10 маркеров; М 1 - М 5, Мв, М 11, М 14-М 17. 5 10 15 20 25 ЗО 35 40 45 По результатам анализа иэоэнзима лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в исследуемой линии ТЭБ и в первично-трипсинизированных клетках почки эмбриона коровы (ПЭК)...

Номер патента: 1666531

Опубликовано: 30.07.1991

Авторы: Атанадзе, Красильников, Николаева, Новиков, Рубин, Сидорович

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, вируса, гибридных, гликопротеину, животных, клеток, клещевого, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм, энцефалита

...ГАТ на обычнуюсреду следующего состава: средаКРМ 1-1640 с 15 фетальной телячьейсьворотки и 2 мМ 1-глютамина. Дляисключения возможности бактериально-.го пророста в среду добавляют гентамицин в дозе 50 мкг/мп.Гибридома по типу роста являетсясуспензионной культурой и растет ввиде гроздей из 10-30 клеток и в виде единичных клеток, Характер ростаменяется в зависимости от качестваиспользуемого пластика или стекла.Пересев культуры осуществляют путемзнергичного встряхивания культурального сосуда или смьвом клеток скультуральной поверхности средой поддавлением из шприца в случае ростакультуры в виде монослоя. Морфологияклеток предлагаемого штамма .-клеткинеоднородны по форме и размерам,но преимущественно имеют округлуюФорму и неровные...

Номер патента: 1666532

Опубликовано: 30.07.1991

Авторы: Байтубаев, Булашев, Гоголев, Муканов, Надточей, Несмеянов, Соколова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антитела, белку, гибридных, животных, клеток, коронавируса, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональные, нуклеокапсидному, продуцирующий, рогатого, скота, штамм

...в культуральной среде. В очищенной ас-. цитной жидкости концентрация иммуно глобулинов составляет 4 мг/мп.Характеристика полезного продукта. ИонАТ относятся к иммуноглобулинам подкласса С 2 Ь, ИонАТ специфически взаимодействуют с нуклеокапсидным белком молекулярной массы 53 КДа. Специфичность определяют методом чммуноблотинга. Контаминация. Контаминантов в клетках, включая бактерии, грибы, дрожжи и микоплазму, не обнаружено.Криоконсервапия, К осадку гибридных клеток добавляют эмбриональную сыворотку теленка, а затем диметил-. сульфоксид до конечной концентрации 10%. Суспензию клеток разливают в стерильные пластиковые ампулы с за винчивакщимися крьппками по 2 10 клес 6 ток в объеме 1 мп. Ампулы помещают в коробку из пенопласта и...

Номер патента: 1671687

Опубликовано: 23.08.1991

Авторы: Власик, Калантаров, Миткевич, Самохин, Стрельцова, Трахт

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, продуцент, с-концевому, участку, фибриногена, цепи, человека, штамм

...инкубируют при комнатной температуре. Через 1,2, 10,30 и 60 мин расщеплениеостанавливают добавлением апротининадо 100 калликреиновых единиц на 1 мп.Полученные препараты фибриногена различных степеней расщепление разделяют 40гель-электрофорезом, переносят на нит-.роцеллюлозу и окрашивают методом иммуноблоттинга с использованием антител 5 А 2. При этом наблюдают окрашивание полос с мол .массами 340,45,22, 4520,17 и 15 кД. Первая из них соответствует интактному, нерасщепленномуфибриногену, остальные - продуктамего деградации. При этом через 30 миностается лишь полоса с мол.массой 5015 кД, а через 60 мин и она практически исчезает. В соответствии с известными данными, что наиболее чувствительным к действию плазмина являетсяС-концевой...

Номер патента: 1671688

Опубликовано: 23.08.1991

Авторы: Агапов, Локтев, Перебоев, Разумов

МПК: C12N 5/18

Метки: антител, вируса, восточного, гибридных, гликопротеиду, животных, клеток, культивируемых, лошадей, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм, энцефаломиелита

...иммуноблотингаустановлено, что МонАТ 7 В 6 специфически реагируют с гликопротеидом Е 1вируса АсЭЛ. Титры МонАТ в асцитических жидкостях составляют 1:1000001;200000. МонАТ, синтезируемые гибридомой 7 В 6, являются специфичнымиисключительно к вир 1 су ВСЭЛ, что показано в ТРИА.П р и м е р 1. Получение МонАТ к вирусу ВсЭЛ путем культивирования клеток линии 7 В 6 п Ыо.1В культуральный сосуд емкостью 250 мл вносят 30 мл среды ДМЕМ с 157сыворотки плода коровы содержащей6Фбх 10 клеток гибридомы 7 В 6 и инкубиоУ руют при 37 С в течение 3 сут. Выращенные клетки снимают энергичным встряхиванием, Клеточную суспензию центрифугируют 5 мин при 600 Р, Клеточный осадок суспендируют в 3 - 5 млсреды ДМЕМ и определяют концентрациюклеток с помощью камеры...

Номер патента: 1673597

Опубликовано: 30.08.1991

Авторы: Василов, Данилова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, теофиллину, штамм

...отношению к метаболитам и аналогам теофиллина. Штамм депонирован под номером ВСКК(П) М 367 ДКлон продуцирует антитела, относящиеся к подклассу 1962 а.Для получения больших количествантител гибридные клетки вводят внутрибрюшинно мышам, предварительно сенсибилизированным пристаном.Антитела из асцитных жидкостей ионообменной хроматографией на ДЕАЕ - целлюлозе.Полученные моноклональные антитела используют в иммуноферментном методе определения теофиллина.Штамм характеризуется следующими признаками,Культуральные свойства клона 2634 типичны для гибридом. Клетки культивируют в монослое в концентрации 5-10 клеток/мл, время субкультивирования составляет около 48 ч,Продуктивность штамма. Штамм продуцирует специфичные к теофиллину монАТ с...

Номер патента: 1678830

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Гуртовой, Дерюгина, Оловникова, Удалов, Чертков

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антител, д-антигену, клеток, культивируемых, многоклональных, продуцент, резус, системы, человека, штамм

...С, 5"-;ь СОр в воздухе. Частота пассирования 3-4 сут, кратность рассева 1:2-1:3. Титрантител в культуральной жидкости, определяемой в прямой реакции агглютинации О+эритроцитов, обработанных бромелином,составляет 1;4096.Характеристика моноклональных антител, Моноклональные антитела, секретируемые штаммом 0-89/Н 6, выявляют, О-антиген эритроцитарной мембраны и егослабые формы (Ои); относятся к классу 6-иммуноглобулинов.Способ криоконсервирования. Криозащитная среда: 50, ростовой среды, 40;сыворотки, 10 Д диметилсульфоксида, Клетки в криозащитной среде помещают на сутки при - 70 С, после чего переносят вжидкий азот, Жизнеспособность после размораживания 85 - 90); культивирование после размораживания в плотности0,4 - 0,5 х 10...

Номер патента: 1682389

Опубликовано: 07.10.1991

Авторы: Лактионов, Нечаева, Рошке, Рыкова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, миоглобину, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...хромогена 4-хлор-нафтола. Наличие антител определяют по степени антенсивности окрашивания пятен фиолетового цвета. Для дальнейшей работы отбирают только высокопродуктивные и специфичныеклоны по наиболее интенсивно окрашенным пятнам,П р и м е р 2. Анализ неперекрываемости эпитопов связывания монАТ штамма 4 О 4 с Мч.Клетки штамма помещают в пластиковые флаконы с площадью дна 75 см в колисят в жидкий азот. Размораживают клетки втермостате при 37 С, Жизнеспособностьклеток после размораживания составляет70 У,5 П р и м е р 1. Получение штаммагибридных культивируемых клеток мышиМоз,Мцзсцвз, продуцирующего монАТк Мч,Мышам линии ВА 1 В/с вводят 100 мкл10 раствора Мч в концентрации 0,5 мг/мл в 100мкл полного адъюванта Фрейнда. С интервалом в 3...

Номер патента: 1682390

Опубликовано: 07.10.1991

Авторы: Лактионов, Нечаева, Рошке, Рыкова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, миоглобину, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...следующими признаками. Штамм 404 продуцирует монАТ, обладающие высокими константами связывания, которые не теряют способность к связыванию с Мч после модификации их хелатными соединениями редкоземельных металлов, Эти свойства позволяют использовать монАТ вдвухсайтн ых флуороиммунометрических тест системах на Мч.П р и м е р 1. Получение штамма гибрид ных культивируемых клеток мыши Мозтозсоцз, продуцирующего монАТ к Мч.Мышам линии ВА 1 В/с вводят 100 мклраствора Мч в концентрации 0,5 мг/мл в 100 мкл полного эдьюванта Фрейнда. С интер валом в 3 недели проводят еще 2 инъекциив неполном адьюванте Фрейндэ. Зэ 4 дня до гибридизации водят 100 кмг Мч в 200 мкл физиологического раствора внутривенно. В следующие 2 дня повторяют иньекции внут...

Номер патента: 1684338

Опубликовано: 15.10.1991

Авторы: Бердова, Ветрова, Сидоренко, Шлапацкая

МПК: C12N 5/18

Метки: антигену, антител, гибридных, дифференцировочному, животных, клеток, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...Овод, Наглочэ, йа)Р, Вагпоз, ЕВ(лимфома Беркитта), РРМ 1-8226 (множественная миелома), Т-клеточные линии МО -4, ССРЕНз В 2, ) Ог 1 Э 1, СЕМ, МТ 4, Н 9, эритробластоидная линия К, МеЧЧО (меланома), А(аденокарцинома шейки матки). Все линии клеток культивируют на среде БРМс 10; инактивированной эмбриональной телячьей сьРворотки. Кроме того, используют лимфоциты крови, стимулированные митогенами, клетки крови и кроветворных органов 10 практически здоровых людей, 66 больных с различными вариантами лимфоидных форм лейкоэов, 3 больных острым миелобластным лейкоэом (ОМЛ), 33 больных лимфогранулематоэом (Л ГМ) и неходжкинскими злокачественными лимфомами (НЗЛ), клетки миндалин 7 детей с хроническим тонзиллитом в фазе компенацииМонАТ ИПОне...

Номер патента: 1685997

Опубликовано: 23.10.1991

Авторы: Вайль, Василов, Втюрина

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, гормону, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тиреотропному, человека, штамм

...по ,явления окраски в лунках реакцию останав ливаЮт раствором 2 н, серной кислоты,Спектрофотометрическое определение реакции проводят при 492 нм, Из результатов следует, что монАТ Тспецифичны только к тиеотропному гоомону, Культуры гибридом, в супернатантах которых обнаружены антитела против ТТГ, не реагирующие с ФСГ, ХГЧб, СТГ и ЛГ человека, клонируют методом предельных разведений из расчета 0,3 клетки на лунку в среде ВРМ 3 1640 с 100 эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глутамина,5 х 105 М 2-меркаптоэтанола в присутствии гипоксантина (10 " М) и тимидина , (1,6 х 10 М).Штамм характеризуется следующими свойствами.Купьтуральные свойства, Клетки культивируют в монослое в концентрации 5 х 105 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 10 кл/мл,...

Номер патента: 1693044

Опубликовано: 23.11.1991

Авторы: Алпатова, Гольдрин, Кармышева, Кашликова, Кудинова, Кузнецова, Миронова, Мирютова, Попова, Стобецкий, Хороших, Чернышев

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: аетнiорs, вирусов, выращивания, используемый, клеток, культивируемых, сеrсорнiтнесus, сердца, штамм, эмбриона, языка

...крупные многоядерные клетки, миобласты и небольшие мышечные трубочки. Содержание их меняются на разных пассажах и неоднородно даже по монослою.В крупных многоядерных клетках число ядер варьировало от 3 до 15. Кроме того, в некоторых многоядерных клетках содержатся еще и многочисленные микроядра, В многоядерных клетках часто можно видеть многополюсные митотические деления с неравномерным расхождением группы хромосом к нескольким полюсам, Деление цитоплазмы при этом часто не наблюдается. Отмечены митотические деления с асинхронным вступлением ядер в процесс кариокинеза, что позволяет наблюдать в одной многоядерной клетке одновременно несколько фаз деления. В ряде многоядерных клеток отмечено образование крупных ядер неправильной формы. В...

Номер патента: 1693045

Опубликовано: 23.11.1991

Авторы: Северин, Фуралев

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, трансферрину, человека, штамм

...клеток мышей сенсибилизируют внутрибрюшинной инъекцией 0,5 млминерального масла пристан (2,4,10,14-тетраметилпентадекан), Время образованияасцитных опухолей 10-16 сут. Перевариваемость асцитов 100-ная,Маркерный признак: продукция специфических монАТ к трансферрину человека,Класс 1 у 19 61.Подвижность изоферментов глюкозофосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы характерна для мышиных клеток.Контаминантов штамма 1 С 10 р 2/О,включая бактерии, грибы, дрожжи и микоплазмы, не обнаружено.Характеристика монАТ,Штамм 1 С 10 Бр 2/О гибридом продуцирует мышиные моноклональные иммуноглобулины класса О, подкласса 61.Принадлежность иммуноглобулинов к данному классу и подклассу определена методом иммуноферментного анализа сиспользованием...

Номер патента: 1693046

Опубликовано: 23.11.1991

Авторы: Горностаев, Данилов, Нягулов, Окулов, Олимпиева, Папаян, Торопова, Хролова, Чистякова

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антитела, виллебранда, гибридных, животных, клеток, крови, культивируемых, мusсulus, моноклонального, продуцент, свертывания, системы, фактору, человека, штамм

...штамма на присутствие контаминирующих микроорганизмов, проведенная на культурах, постоянно выращиваемых без антибиотиков, показывает отсутствие бактерий, грибов, дрожжей и микоплазм,Клетки штамма 380 Ф 2 продуцируют в среду иммуноглобулины 96 класса, Это показано в твердофаэном иммуноферментном анализе с помощью серии моноспецифических кроличьих антисывороток к мышиным антителам классов 961, 962 а, 962 в, 96 З и 9 М. Специфичность антител оценивают в конкурентном иммуноферментном анализе с коммерческой сывороткой к фактору УШ й:А 9 и методом иммуногистохимического окрашивания эндотелиальных клеток пуповинной вены человека,Криоконсервирование штамма проводят в среде следующего состава, : среда МЕМ или ДМЕМ 50; сыворотка крупного...