Патенты с меткой «культивируемых»

Номер патента: 1756352

Опубликовано: 23.08.1992

Авторы: Зоделава, Самильчук, Сарсания, Хаджирисьян

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа-1-антитрипсина, антигенной, антител, гибридных, детерминанте, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, общей, человека, штамм

...же момента через день в каж- дой лунке меняют приблизительно половину средыКультивирование гибридных клеток в поисутствии ГАТ проводят в течение первых двух недель после слияния, затем еще 4 дня клетки культивируют в присутствии ГТ (без аминоптерина) и далее переводят на обычную среду без добавок. Отбор гибридсм, продуцирующих МКА требуемой специфичности, осуществляют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). В первом случае на твердой фазе адсорбируют ААТ человека, во втором - ААТ павиана гамадрила, Для реакции используют 96-луночные ИФА панели, в лунки которых вносят ААТ (2 мкг/мл, 100 мил на лунку), разведенный в 50 мМ карбонатном буфере, рН 9,5, Адсорбци;о ведут при 4 С в течение 16-18 ч, после чего панели трижды...

Номер патента: 1759872

Опубликовано: 07.09.1992

Авторы: Березкина, Завадская, Игнатова, Ковалева, Плескач, Синакевич

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, трансферрину, человека, штамм

...температуре. Затем промывают . водой и ФБР и добавляют в каждую лунку по 50 мкл конъюгата кроличьих антимышиных антител с пероксидазой хрена в разведении 1:500, Через 1 ч платы промывают водой и Ф БР и добавляют по 50 мкл субстрата (0,1 О(, ортофенилдиамин, 0,03Н 20 О, 0,2 М цитратный буфер, рН 4,5) в каждую лунку. По окончании ферментативной реакции расщепления Н 20 о в присутствии арто-фенилендиамина при наличии МКА развивается желтая окраска, которую регистрируют на спектрофотометре Мультискан при длине волны 450 нм. Связывание МКА с трансферрином человека обнаруживают при разведении супернатанта до 10Отсутствие взаимодействия полученных МКА с гемоглобином, альбумином и С- реактивным белком человека определяют следующим образом. В...

Номер патента: 1768635

Опубликовано: 15.10.1992

Авторы: Арэ, Галактионов, Гринчук, Корнилова, Соркин, Сорокин, Сорокина

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рецептору, роста, фактора, человека, штамм, эпидермального

...культивируемых гибридныхклеток штамма й 10 сингенным мышам /линия ВА в/с/ вызывает у них образованиеасцитной опухали. В асцитной жидкости содержатся МонАТ к рецептору зпидермэльного фактора роста. Способность кпродуцированию МонАТ стабильно сохраняется, по крайней мере, 16 пассажей вкультуре и 3 пассажа при перевивках нэмышах /срок наблюдения/,Кариологическая характеристика,В клетках с модальным числом хромосом /95-94 хромосом у 42% всех клеток/при рутинном окрашивании, кэк правило, присутствуют 4 хромосомы, меньшие по размеру, чем 19 хромосома, мыши и не менее 2 маркерных хромосом больших, чем 1-я хромосома стандартного набора, Обнаружены также 2 метацентрических маркера, отличающихся по размеру,Продуктивность штамма.При...

Номер патента: 1773938

Опубликовано: 07.11.1992

Авторы: Кенжебулатов, Муканов, Мукантаев, Соколова, Сырманов, Шегидевич

МПК: C12N 5/00

Метки: адгезивному, антигену, антител, гибридных, еsснеriснiа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...35 продуцировали антитела к К 99 адгезивномуантигену ЕзсЬегсЫа со, Штамм гибридных клеток продуцирует антитела в культуральную среду и в асцитную жидкость.Штамм гибридных клеток ЗР 60 хранит ся в специализированной коллекции перевиваемых соматических клеток позвоночных Института цитологии АН СССР под номером ВСКК(П) 519 Д. Штамм характеризуется следующими свойствами.45 Морфологические свойства, Гибридныеклетки представляют собой слабоприкрепляющиеся к носителю округлые клетки размером с исходную миеломную клетку, Ядро занимает большую часть клетки. Цитоплаз ма имеет вид тонкого ободка.Культуральные свойства. Гибридныеклетки выращивают в среде ЙРМ 1-1640, содержащей инактивированную нагреванием сыворотку эмбрионал коров (10-20%), -...

Номер патента: 1774949

Опубликовано: 07.11.1992

Авторы: Агрба, Аравиашвили, Инджия, Какубава, Лапин, Тимановская, Чикобава

МПК: C12N 5/00

Метки: papio, антител, гамадрила, используемый, качестве, клеток, культивируемых, лимфотропного, моноклональных, намаdrylаs, павиана, павианов, ретровируса, т-клеточн, тест-объекта, типа, характеристики, штамм

...1,5 - 2 х 10 е кл/мл,Клетки штамма хорошо переносят криоконсервацию, В качестве криопротектораиспользуют 8%-ный диметилсульфоксид вэмбриональной сыворотке коров.Штамм представлен одиночными лимфоидными клетками и их небольшими скоплениями. При окраске препаратов клеток поРомановскому-Гимза выявляется морфологическая структура лимфоблэстов, Клетки восновном крупные с большим ядром и нежно-голубой цитоплазмой. В ядрах клеток определяются нуклеолы.гь,Цитогенетическая характеристика;Цитогенетический анализ; проводимыйметодом окраски хромосом на О-диски, выявил наличие нормального кариотипа павиана гамадрила (2 п = 42,хх) при модальном-классе хромосом, равным 42/30, и плоидности клеток (и = 300), равной 13,9%,З,Характеристика вирогенного...

Номер патента: 1776274

Опубликовано: 15.11.1992

Авторы: Бучин, Новокшенов, Серпокрылова

МПК: C12N 1/38

Метки: анаэробных, аспорогенных, бактерий, культивируемых, приготовления, роста, стимулятора, трудно

...технологической операции прибегают к получению почвенной закваски,С этой целью в серию с пептоннь 1 м молоком раздельно вносят бактериологической лопаточкой по 0,5 - 1 г разных образцов почвы, взятой с глубиной 1 - 2 см от поверхности (по опыту обычно бывает достаточно трех образцов),Посевы выдерживают при ЗО С в течение 18 - 24 ч.В качестве закваски используют содержимое только той пробирки, где произошло типичное свертывание и переваривание пептонного молока (часть пористого свертка казеина подброшена к пробке пробирки, а основная масса представлена мутноватым гидролизатом с почвенным осадком на дне),Удобно для и риготовления закваски пользоваться предварительно отобранным заведомо доброкачественным образцом почвы, сохраняемым в...

Номер патента: 1776691

Опубликовано: 23.11.1992

Авторы: Гервазиева, Климович, Крутецкая, Овсянникова, Пашкова, Полищук, Самойлович

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, человека, штамм

...МКАТ может быть проверена в твердофазном иммуноферментном анализе с помощью 1 дЕ, адсорбированного на твердой фазе. МКАТ связываются с белком А стафилококка, что может быть использовано при их очистке. При адсорбции на твер 20 25 30 35 40 45 50 55 дой фазе МКАТ способны связывать сывороточный 1 дЕ и могут использоваться в качестве захватывающих антител в системе двухдетерминантного иммуноанализа (в паре с мечеными 1 дЕ-специфичными антителами) или при афинном извлечении 1 дЕ иэ сывороточных препаратов. МКАТ Е/5 Д 4, сохраняя антиген-распознающие свойства после присоединения ферментной метки,могут также служить выявляющим реагентом в двухдетерминантном иммуноанализе,Антитела специфичны в отношении эпитопа на 1 дЕ, который не...

Номер патента: 1778183

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Бауер, Беккерт, Белова, Оглоблина, Смирнов

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, ингибитору, используемый, кислотостабильному, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мочи, трипсина, человека, штамм

...разведений антител М 2 с концентрац ией от 2700 до 0,325 нг в 1 мл буфера Б и инкубируют 1 ч при комнат ной температуре. После этого панель отмывают три раза направленной струей водопроводной .воды и для проявления связавшихся в лунках МКА вносят в ячейки по 100 мкл раствора коньюгата 25 пероксидазы хрена с антителами кролика к иммуноглобулинам мыши, разведенного в 1000 раз буфером Б, и инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре, После трехкратного отмывания водой для определения связавшейся в лунках пероксидазы в лунки вносят по 100 мкл субстратной смеси (100 мкл раствора о-фенилдиамина 1 мг/мл в 1 О мл 0,02 М раствоое цитрата натрия, рН 4,5, с 10 мкл 303- ного раствора НО) и инкубируют при комнатной температуре до развития...

Номер патента: 1778184

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Аркина, Кускова, Лимарева, Менявцева, Мирютова, Ратнер

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, иммуноглобулинов, используемый, клеток, кролика, культивируемых, легким, мusсulus, моноклональных, цепям, штамм

...препаратом иммунохимицес.ки чистых легких цепей иммуноглобули"нов кролика, режим активации: концентрация белка - 40 мнг/мл, наслаивающий буферный раствор - карбонатбикарбонатный буфер рН 9,6, время инкубации - 18 ч при 4 С. После отмывания планшетов от несвязавшегося белка (6 раз поочередно водопроводнойводой и дистиллированной водой с0,053 твина) в лунки вносят исследуемые пробы культуральной жидкостис продуктами жизнедеятельности гибридного клона Я 5, а также положительный (сыворотка мышей, иммунизированных легкими цепями иммуноглобули нов кролика) и отрицательный (культуральная жидкость, не содержащаяпродуктов жизнедеятельности гибридом)контроли (К+ и К- соответственно).Проволят инкубацию в течениео37 С, спмывают...

Номер патента: 1791450

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Барков, Липницкий, Луговая, Свиридов, Синюкова, Фарбер, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, мелиоидоза, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, штамм

...ацзсццз 1. ВСКК(П)276 Д для получения моноклональных айотител.Моноклональные антитела к антигену 8возбудителя мелиоидоза получают из куль туральной жидкости среды), в которой клетки штамма выращивают вне организма ииэ асцитной жидкости мышей, которым клетки штамма вводят внутрибрюшинно,Для получения антител иэ культураль ной жидкости клетки штамма выращивают встандартных условиях: при температуре 37 С, влажности 98%, СО 2 - 5% в среде культивирования, Затем производят постепенный рассев культуры, Клетки выдерживают 0 для пролиферации без смены среды до достижения максимальной плотности, при которой клетки погибают. Культуральную жидкость осветляют центрифугированием и используют как источник антител.5Для определения титра...

Номер патента: 1791451

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Барков, Липницкий, Новицкая, Свиридов, Синюкова, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, маllеi, моноклональных, поверхностному, продуцент, рsеudомоnаs, сапа, типичных, штамм, штаммов

...выращивают вне организма и из асцитной жидкости мышей, которым клетки штамма вводят внутрибрюшинно. достижения максимальной плотности при которой клетки погибают. Культуральную жидкость осветляют центрифугированием и используют как источник антител.Титр моноклонэльных антител опреДеляют с помощью твердофазного .ИФА по общепринятой схеме. Для этого образцы культуральной жидкости титруют двукратным шагом с 1;10 до 1:5120 в лунках планшетов, сенсибилизированных водно-солевым экстрактом возбудителя сапа, В качестве отрицательного контроля используют нэдосадочную жидкость несекретирующей антитела миеломной клеточной линии РЗ-Х 63-Ац 8.653, в качестве положительного - сыворотку мышей, иммунизированных убитыми бактериальными клетками...

Номер патента: 1791453

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Белкина, Дерюгина, Лапенков, Недорезов, Носырев, Оловникова, Удалов, Чекнева, Чертков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, н-антигена, растворимой, формам, человека, штамм

...свойства.Среда культивирования: ДМЕМ с добавлением 3 мм . глутамина, 1 мМ пируватанатрия, 20 мМ Хепес - буфера, 5 х 10М 2 - меркаптоэтанола, 10 ЭТС илиоленьей сыворотки и антибиотиков, Частотапассирования 1:2 - 1:3 через 2-3 сут. плотностьклеток вжидкойсреде 3-4 х 10 кл/мл.6Клетки выращивают при 37 С, 6-ном содержании СО 2 в воздухе и 95 - 100-нойвлажности. При культивировании 1 п чиччоМышам линии ВА 1 В/с внутрибрюшинно за7-30 сут. до введения гибридных клетоквводят пристан (0,25 мл), Гибридные клеткиинъецируют в количестве 2-3 х 10 /мышь,6асцитные опухоли образуются через 12-16сут,Морфологические признаки.Слабоприкрепленные к субстрату клетки с обычной для гибридом морфологией, 20 среда: 25 30 35 40 ного донора 50 55 5 10 15...

Номер патента: 1794949

Опубликовано: 15.02.1993

Авторы: Авдиенко, Капина, Куликовская, Литвинов, Черноусова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, массой, микобактерий, молекулярной, моноклональных, продуцент, тuвеrсulоsis, типа, человеческого, штамм

...10 М2-меркаптоэтанола, 50 ед/мл гентамицина,Характер роста: стационарная суспензияМетод снятия; встряхиваниеЧастота пассирования:2-3 суток Посевная доза: 2-3 10 клеток/мл5Кратность рассева: 1;2-1:3Консервация клеток: клетки заморожены после 1,3, 10, 15 и 25 пассажей в культуре и после роста в виде асцитной опухоли в мышах, Общее количество ампул - 30, по 4-5 млн клеток в ампуле, Криозащитная сре"да: эмбриональная телячья сыворотка с 1020 одиметилсул ьфоксида, Режимзамораживания: клетки в криозащитнойсреде хранили 1-3 сут при -70 С, после чегопомещали в жидкий азот. Выживаемостьпри размораживании - 80 о ,5 Сведения о контаминантах линии: бактерии - нет,грибы - нет,микоплаэма - нет,дрожжи - нет,Морфология культуры; культура...

Номер патента: 1798372

Опубликовано: 28.02.1993

Авторы: Агапов, Локтев, Перебоев, Святченко

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, вирусу, восточного, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лошадей, мusсulus, моноклональных, продуцент, протективных, штамм, энцефаломиелита

...Е 2 вируса ВсЭЛ в реакции иммуноблотинга. Активность МКА в реакции нейтрализации вируса ВсЭЛ на культуре клеток Чего составляет 1;200. МКА 1 В 2 эффективно защищают мышей от введения летальной дозы вируса ВсЭЛ. Индекс разистентности составляет 6,5 д. Титр МКА в ИФА составляет 1:5000 для культуральнойжидкости и 1:300000 для асцита. Стабильная продукция МКА сохраняется на протяжении не менее 30 пассажей и чего.5 Криоконсервирование. Среда для замораживания - среда ДМЕМ(М) -500 , фетальная сыворотка - 40%, диметилсульфоксид -10, 0,5 мл клеточной суспензии переносятв пластиковые криопробирки и помещают в10 пенопластовый контейнер с толщиной стенок 1,5 см, Контейнер вносят в пары жидкого азота, Через сутки пробирки переносят...

Номер патента: 1806188

Опубликовано: 30.03.1993

Авторы: Александрова, Гордонова, Соложенкин, Тулакин, Усманов

МПК: C12N 5/04

Метки: ungernia, viстоris, алкалоидов, галантамина, группы, клеток, культивируемых, ликорина, продуцент, растений, штамм

.... Каллусные клетки паренхимного типа,диаметр клеток 80-300 мкм, средний диаметр 184,3 мкм. Средний диаметр ядер 13,2мкм. Ядерно-плазменное отношение0,0850, Митотическая активность 60 в начале фазы стационарного роста, Кариологическая характеристика. Пределы варьирования по числу хромосом, модальный класс 18 - 24; 22. Размеры хромосом: 1-ая пара хромосом19,2 мкм, Х 11-ая пара 7,8 мкм, 1 Ч-эя и Ч 1-аяпары хромосом содержат спутники, Маркерные признаки: а) содержание гэлантамина - 6,6, ликорина - 58%, нарведина - 6,2 от суммыалкалоидов б) электрофоретический спектр неспецифических эстераз - 14 изоформ (чертеж). в) 1 Ч и Ч пары хромосом имеют спутники; г) свечение каллусной ткани в УФ. Способность к морфогенезу пониженная. Штамм...

Номер патента: 1808872

Опубликовано: 15.04.1993

Авторы: Белова, Винтер, Котляр, Махмутова, Хамаде, Шапиро

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, днказе, зависимой, используемый, клеток, крыс, культивируемых, мusсulus, моноклональных, печени, хроматина, штамм

...среды и осаждают, ресуспендируют в 5 мл той же среды и переносятв культуральный флакон. Выживамость после размораживания более составляет более 30%.30 Контаминация,Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды.Характеристика полезного продукта,Моноклональные антитела связывают2+Мп -зависимую ДНКазу, при этом они способны ингибировать нуклеазную активность данного фермента. Титр МКА вкультуральной жидкости, определенный с40 помощью ИФА, составляет 1:8, в асцитнойжидкости - 1.10,5П р и м е р 1, Для определения специфического взаимодействия моноклональ 2+ных антител с Мп -зависимой ДНКазойпроводят определение нуклеэзной активно 2+сти Мп -зависимой ДНКазы в присутствииантител,...

Номер патента: 1818342

Опубликовано: 30.05.1993

Авторы: Белун, Митин, Реутова, Сидоров, Черных

МПК: C12N 5/18

Метки: 7-го, антитела, вируса, гемагглютинину, гибридных, гриппа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, подтипа, продуцирующий, птиц, штамм

...вирусом ъ гриппа птиц шт.А(курица) СССР(С)Н 7 й 1, (ф Анализ моноклональных антител, продуци- . руемых гибридными клетками в культураль- рр ную жидкость, проводили микрометодом реакции задержки гемагглютинации - РЗГА. Клоны, дающие положительную реак- + цию, клонировали в "мягком" агаре. В результате было выделено несколько оубклонол, ив которых был выбран клон )фв ГАДЗЯр 84, стабильно продуцирующий мо- в ноклональные антитела. ный штамм гибридных кле имеет следующую характери1818342 Составитель Н.РитинТехред М.Моргентал Корректор Л.Ливринц Редактор Заказ 1925 Тираж Подписное ЙНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям ори ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г....

Номер патента: 1836421

Опубликовано: 23.08.1993

Авторы: Джеймс, Салли, Фрэнк

МПК: A61K 39/00, C12N 5/00

Метки: антител, антитела, гибридных, гибридомы, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, моноклональных, продуцирующей, рнyторнтоrа, рода, фиком, фикомицетам, штамм

...скота 200 мл.Первые клоны гибридных клеток начинают появляться спустя 7-10 дней, Скрининг гибридом осуществляют следующимобразом, 20 мкл содержащего глутаровыйальдегид буфера помещают в каждую лункукультуральной панели и инкубируют 3 ч при5 С,Панель охлаждают до комнатной температуры и оставшийся буфер отбрасывают.Панели промывают 4 раза дистиллированной водой, 200 мкл антигена, разбавленногов РВЯ, рН 7,2 (концентрация антигена 10мкг/мл) распределяют по отдельным лункам и инкубируют 24 ч при 4 С. Оставшийсяраствор отбрасывают, панели промывают 8раз с помощью РВЯ, Затем в каждую лункувносят 200 мкл раствора моноэтаноламинаи инкубируют следующие 20 ч при 4 С.Оставшийся раствор отбрасывают, а панели 8.раз промывают с помощью РВЯ,...

Номер патента: 2002803

Опубликовано: 15.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, человека, штамм

...полость мышей БАВ/с, которым предварительно (за 7 - 10 сут) внутрибрюшинной иньецируют пристан. Время образования асцита 10-14 дней,Характеристика полезного продукта, МКА, продуцируемые штаммом А 5 В 8, относятся к 1 д 61 подклассу, специфически взаимодействуют с 1 ц 61, 1963, 1 ц 64 человека и их ЕаЬ- и Рс-фрагментами. Принадлежность к подклассу 1 ц 6 определяют при помощи преципитирующих сывороток против 1 ц 6 мыши разных подклассов (5 цва, США) методом радиальной иммунодиффузии по Оухтерлони. Взаимодействие антител с 1 д 61, 3, 4 человека определяют методом иммуноферментного анализа.Продуктивность штамма, стабильность антител,Концентрация МКА через 3 - 4 дня культивирования "ин витро" составляет 5 - 10мкг/мл, в асцитной жидкости 5...

Номер патента: 2003679

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, человека, штамм

...мл. Посевная доза 5 10 клеток на:1 мл. Кратность рассева 1:5, время субкультивирования 3-4 дня. Среда для культивирования - КРМИ 640 с добавлением 10фетальной бычьей сыворотки, 2 мМ глутамиЗО на, 2 мМ пирувата, по 100 ед./мл пенициллина и стрептомицина, 8 первые 3 неделилпосле гибридизации в среру добавляют 10М гипоксантина, 4 10 аминоптерина и1,6 10 5 М тимитидина, так как клетки ми 35 еломы Яр 2/О Ад 14 дефектны по ферментугипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазе. Клетки выращивают а атмосфере 56С 02 при 37 ОС.Культивирование в организме животно 40 го. Для выращивания гибридомы а асцитнойформе клетки (10 ) вводят в брюшную полость мышей ВА В/с, которым предварительно (эа 7-10 сут) внутрибрюшинно. иньецируют пристан. Время...

Номер патента: 2003680

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, преципитирующих, человека, штамм

...бычьей сыворотки, 2 мМ глутамина, 2 мМ пирувата, по 100 ед/мл пенициллина и стрептомицина, В первые 3 недели после гибридизации в сзеду добавляют 10М гипоксантина,4 10 М аминоптерина и 1,6 10 М тимидина, так как клетки мие-. ломы Яр 2/О Ад 14 дефектны по ферменту гипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазе, Клетки выращивают в атмосфере 5 С 02 при 37 С.Культивирование в организме животного. Для выращивания гибридомы в асцитной форме клетки (10 ) вводят в брюшную полость мышей ВА В/с, которым предварительно (за 7-10 сут,) внутрибрюшинно иньецируют пристан. Время образования асцита 10-14 дней.Характеристика полезного продукта, МКА, продуцируемые штаммом В 2, относятся к 962 Ь, специфически связывают дМ и (Ес)5 р -фрагменты 9 М человека и...

Номер патента: 2003681

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, цепям, человека, штамм

...в течение 30 пассажей в культуре и 25 пассажей на животных.Способ криоконсервирования. Для длительного хранения клетки штамма замора живают в фетальной бычьей сыворотке сдобавлением 10 одиметилсульфоксида. Режим замораживания: сутки при -70 С, затем ампулы с клетками переносят в жидкий азот.Размораживают клетки. перенося ампулу из 45 жидкого азота в водяную баню на 37 С.Жизнеспособность клеток после размораживания составляет 70-80(по окрашиванию трипановым синим).Контроль контаминации. Бактерии игрибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микроплазмой не обнаружено при окрашивании красителями на ДНК.55 П р и м е р 1, Гибридомные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см в 5...

Номер патента: 2003682

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, иммуноглобулинов, клеток, культивируемых, легким, моноклональных, продуцент, цепям, человека, штамм

...Средадля культивирования - среда ВРЬОсдобавлением 10 фетальной бычьей сыво"5 ротки, 2 мМ глутамина, 2 мМ пирувата, по100 ед/мл пенициллина и стрептомицина.Посевная доза 10 клеток в 1 мл. Через 2-3дня концентрация антитела в культуральнойжидкости достигала примерно 40 мкг/мл.20 Контаминации бактериями, грибками имикроплазмами на обнаружено,Для длительного хранения гибридомные клетки могут быть заморокены в фетальной бычьей сыворотке с добавлением100 диметилсульфоксидэ. Способ криоконсервирования -сутки при -70 С, затем клетки переносятся в жидкий азот.Размораживают клетки, перенося ампулужидкого азота в водяную баню на 37 С.30 Для выращивания гибридомы в асцитной форме клетки вводили в брюшную полость мышей 8 А 1 В/с...

Номер патента: 2003683

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: apis, mellifera, musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мелиттину, моноклональных, продуцент, пчелы, штамм, яда

...сывороткой, 2 мМ глутамина, 2 мМ пирувата, по 100 ед/мп пенициллина и стрептомицина, Посевная доза - 10 клеток5в 1 мл. Через 2-3 дня концентрация антител в культуральной жидкости достигала примерно 40 мкг/мл.Контаминации бактериями, грибками имикроплазмами не обнаружено.Дпя длительного хранения гибридомные клетки могут быть заморожены в фетальной бычьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Способ криоконсервирования - 1 сут, при -70 С, затем клетки переносятся в жидкий азот.Размораживают клетки, перенося ампулу из жидкого азота в водяную баню на 37 С, 40 Для выращивания гибридомы в асцитной форме клетки водили в брюшную полость мышей ВАВ/с (предварительно обработанных пристаном) в количестве 107 клеток на мышь. Опухоли...

Номер патента: 2003684

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Тэтин

МПК: C12N 5/00

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, моноклональных, продуцент, фрагменту, человека, штамм

...в течение 25 пассажей в культуре и 20 пассажей на животных. Среда для культивирования - среда ВРМс 10 добавлением 10 фетальной бычьей сыворотки. 2 мМ глутамина, 2 мМ пирувата, 100 ед./ мл пенициллина и 100 мкг/ мл стрептомицина. Посевная доэа 10.клеток в 1 мл.Через 2-3 дня концентрация антитела в "5 культуральной жидкости достигала примерно 40 мкг/мл.Контаминации бактериями, грибками имикоплазмами не обнаружено.Для длительного хранения гибридом ные клетки могут быть заморожены в фетальной бычьей сыворотке с добавлением 100 диметилсульфоксида. Способ криоконсервирования - 1 сут при -70 С, затем клетки переносятся в жидкий азот.Размораживают клетки, перенося ампулу из жидкого азота в водяную баню на 37 С,Для выращивания гибридомы в...

Номер патента: 2003685

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...- 10 клеток в 1 мл. Через 2-3 дня концент 5рация антител в культуральной жидкости достигала примерно 40 мкг/мл.Контаминации бактериями, грибками имикроплазмами не обнаружено.25 Для длительного хранения гибридомные клетки могут быть заморожены в фетальной сыворотке с добавлением 110диметилсульфоксида. Способ криоконсервирования - 1 сут, при -70 С, затем клетки30 переносятся в жидкий азот. Размораживают клетки, перенося ампулу из жидкого азота в водяную баню на 37 С.Для выращивания гибридомы в асцитной форме клетки вводили в брюшную по 35 лость мышей ВА 1.В/с, предварительнотобработанных пристаном, в количестве 10клеток на мышь. Опухолиразвивались у мышей через 10-14 дней. Секреция антителклетками гибридомы, выращиваемыми в ас 40...

Номер патента: 2003686

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12N 5/16

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...10 М тимидина. Гибридомы, выявленные иммуноферментным анализом к дб человека, клонировали 2 раза методом лимитирующего разведения (из расчета 1 клетка на 3 лунки 96-луночного планшета). После второго клонирования более 800 полученных субклонов продуцировали антитела к дб человека. Продукция антител сохранялась в течение 30 пассажей в культуре и 23 пассажей на животных, Среда для культивирования - среда бРМс 10% фетальной бычьей сывороткой, 2 мМ глутамина, 2 мМ пирувата, по 100 ед/мл пенициллина и стрептамицина. Посевная доза - 10 клеток в 1 мл, Через 2-3 дня5концентрация антител в культуральной жидкости достигала примерно 40 мкг/мл. Контаминации бактериями, грибками и микраплазмами не обнаружено,Для длительного хранения гибридомные...

Номер патента: 2003687

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/00

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, человека, штамм

...инъецируют тетраметилпентадекан, Опухоли образуются через 10-14 дней после прививки,Характеристика полезного продукта. МКА, продуцируемые штаммом А 4, относятся к 1 дС подклассу, специфически связы 40 вают 19 М и (Рс) 5,и-фрагменты дМ человека, Принадлежность к подклассу 1 дб определяют при помощи преципитирующих сывороток против 196 мыши разных подклассов(8 дща, США) методом радиальной иммунодиффузии по Оухтерлони, Взаимодействие антител с (Рс) Ци - и 1 дМ человека определяют методом иммуноферментного анэлиза. Продуктивность штамма, стабильность 50 .антител, Секоеция МКЛ через 3 - 4 дня культивирования "ин витра" составляет 5-10 мкг/мл, в асцитной жидкости - 5 мг/мл, Контроль продуктивности осуществляется с помощью...

Номер патента: 2004589

Опубликовано: 15.12.1993

Авторы: Вишняков, Малоголовкин, Новикова, Середа, Черных

МПК: C12N 5/00

Метки: musculus, антител, болезни, гибридных, диагностики, ибараки, используемых, клеток, культивируемых, моноклональных, продуцент, штамм

...получают иэ культуральной жидкости зараженной ВБИ культуры клеток почкисибирского горного козерога (ПСГК),В первый день вводят внутрибрюшинно200 мкл очищенного вируса (10вир,част,/мл) с равным объемом полного20 адаюванта Фрейнда. Через 10 дней инъекцию повторяют,.Спустя три недели вводят250 мкл вирусного препарата внутривенно.Гибридизацию проводят на 4-й день послевведения бустер-дозы, Слияние клеток миеломы с лимфоцитами осуществляют в соотношении 1;10 в присутствии 504полиэтиленгликоля с мол,м, 4000. Культивирование гибридных клеток ведут на среде,содержащей гиноксантин, аминоптерин, тиЗ 0 мидин, Продукцию специфических антителопределяют в непрямом варианте твердофаэного иммуноферментного анализа(ИФА) с антигенами вирусов болезни...

Номер патента: 1459238

Опубликовано: 15.10.1994

Авторы: Гуртовой, Дерюгина, Дризе, Леменева, Удалов, Чертков

МПК: C12N 5/18

Метки: musculus, антигену, антител, гибридных, группоспецифическому, животных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, человека, штамм, эритроцитов

Штамм гибридных культивируемых клеток животных Mus musculus ВСКК (П) 87Д, используемый для получения моноклональных антител к группоспецифическому антигену А эритроцитов человека.