Патенты с меткой «культивируемых»

Номер патента: 1696473

Опубликовано: 07.12.1991

Авторы: Гумеров, Крылов, Матвеева, Хаертынов, Ялалтдинова

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: вирусов, выращивания, диплоидных, используемый, кишечника, клеток, коровы, крупного, культивируемых, пневмо, рогатого, скота, тонкого, штамм, эмбриона, энтеропатогенных

...времени и они имеют ба лее низкую себестоимость. Обоснованиеприведено в табл, 1: постоянство по кариологии в процессе пересевов, стабильностьчувствительности клеток в процессе пересевов к пневмо-энтеропатогенным вирусамкрупного рогатого скота, которая не уступа.ет первичным клеткам (табл, 2).1696473 Табли ца По известному способуПо предлагаемомуспособу Требуется Ие требуется Трипсинизация ткани необходима,расход трипсина ВЕССС мл Не требуется Требуется Смена среды Среда ИЕИ ++ 5-101 Фетальной сыворотки 5-10 матрасовна 1,5 л 30"35 матрасов на1,5 л Не требуется Требуется Таким образом, в вирусологических исследовэниях клетки ПТК:ЭК могут быть равноценным заменителем первичных клеток,П р и м е р 3. В отличие от известного 5 .штамма...

Номер патента: 1698287

Опубликовано: 15.12.1991

Авторы: Авдеев, Барышников, Жордания, Кадагидзе, Казачкина, Кармакова, Короткова, Якубовская

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антигену, антитела, гибридных, глобул, женского, животных, жировых, клеток, культивируемых, мusсulus, мембран, молока, моноклонального, продуцент, штамм

...специфичности, клонируют методом предельных разведений на фидере из клеток селезенки и тимуса мышей ВА 1 В/С:Для приготовления фидера кусочки тимуса и селезенки разрушают в стеклянном гомогенизаторе Поттера, Взвесь клеток фильтруют через 2 слоя марли, Суспензию клеток разливают по 0,1 мл в лунки 96-лу 40 45 50 роля используют сыворотку крови мыши,35 а также поликлональные антитела кроликаТитр антител в культуральной жидкостиопрсделяют в иммунофлюоресцентном тесте. Титр антител в культуральной жидкости равен 500,5 Для выращивания асцитной опухоли изштамма гибридных клеток пригодны мыши самки ВА 1 ВС. Интактным мышам за 1 - 7 дн дс прививки опухоли вводят внугрибрю. шинно по 0,5 мл 3%-ного пептона на вазели новом масле, Клетки гибо 7...

Номер патента: 1705343

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Бердова, Ветрова, Сидоренко, Шлапацкая

МПК: C12N 5/18

Метки: антигену, антител, гибридных, дифференцировочному, животных, клеток, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...в среде РРМ 1-1640 ("ОЬсо", Великобритания)с 10 6 инактивированной прогреванием при раэтилпентадеквна или вазелинового масла, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по 10 клеток в 5 мл среды Игла, Асцит формибруется через 12-14 дней в количестве 4 5 млБиосинтез полезного продукта, Секреция Мон-АТ, обозначаемого ИПО, на 3-4 день культивирования составляет 10-15 мкг в 1 мл культуральной среды и 5-10 мг в 1 мл асцитической жидкости. Продукция Мон-АТ сохраняется как минимум до 45 пассажей и ч 1 го и до 4-х пассажей в асцитной форме,Криоконсервирование, Для длительного хранения клеток штамма клетки замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10 ДМСО, Режим замораживания: 4/мин до+4 С, затем 1/мин до - 70 С, После замораживания...

Номер патента: 1707073

Опубликовано: 23.01.1992

Авторы: Артюков, Булгаков, Журавлев, Козыренко, Писецкая, Старун, Федореев

МПК: C12N 5/00, C12N 5/04

Метки: liтноsреrмuм, siев, клеток, культивируемых, продуцент, растений, сryтнrоrнirоn, шиконина, штамм

...культивирования - выращивание в накопительном режиме приотсутствии освещения при 25 + 1 "С, относительной влажности воздуха 70 . 107 ь напитательной среде следующего состава,мг/л воды;МН 4 ИОз 350 - 450КМОз 1500 - 2300КН 2 Р 04 150 - 190СаС бН 20 590 - 68099504 7 Н 20 350 - 400НзВОз 4,2 - 8,0ГЛ и 5044 Н 20 15,6 - 26,7Со С 22 Н 20 0,02 - 0,03Со 5045 Н 20 0,07 - 0,082 п 504 7 н 20 6,0 - 10,3а 2 Уо 04 2 Н 20 0,2 - 0,3К 0,53 - 0,90-е)04 7 Н 20 25,0 - 30,5Гидрохлорид тиамина 0,15 - 0,25Гидрохлорид пиридоксина 0,4 - 0,6Никотиновая кислота 0,4 - 0,6мезо-Инозит 80 - 120Индолилуксусная кислота 0,15 - 0,25Кинетин 1,5 - 2.5Сахароза 25 - 35 гАгар 5,8 - 6,2 гДинатриевая соль ЭДТА 33,6 - 41,0причем рН сред до аетоклаеирования 5,6 -5,8.Номер пассажа...

Номер патента: 1708836

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Альшевская, Артюков, Бабкина, Булгаков, Гацура, Журавлев, Кочергина, Левандовский, Попов, Розонов, Сернов

МПК: C12N 5/04

Метки: аrisтоlоснiа, активностью, используемый, кардиотропной, клеток, ком, культивируемых, маnsнuriеnsis, обладающего, препарата, растений, штамм

...Р 04 170СаС 126 Н 20 665Мд 304 7 НгО 370НзВОз 6,2Мп 504 4 Н 20 22,30,5 10015 Оценка профилактического антиангинального действия. В опытах на бодрствующих кроликах самцах породы Шиншилла массой 2,5 - 3,0 кг изучают влияние настоек 50 биомассы штамма Аг и стеблей кирказона на порог возникновения ишемии миокарда, вызываемой сужением коронарной артерии. С этой целью за 2 - 3 сут до проведения эксперимента под нембутэловым наркозом 55 проводят имплантацию приспособления, позволяющего осуществить медленную окклюзию коронарной артерии с последующим восстановлением ее просвета. Порог Сц 304 5 НгО 0,025 СоОг 2 НгО 0,025 Еп 304 7 НгО 8,6 йагМо 04 2 НгО 0,25 К 083. 5 Ее 304 7 НгО 27,8 йагЕОТА 2 НгО 37,3 Тиамина гидрохлоридПиродоксинэ...

Номер патента: 1710576

Опубликовано: 07.02.1992

Авторы: Ионов, Юрин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...жидкости 30 мкг/мп, в асцитной жидкости 12 мг/мл. Стабильностьпродуцирования антител сохраняется напротяжении 20 пассажей в культуре и 7пассажей на животных, если гибридомаперевивается.Контаминация. Бактерии и грибы. в культурах не обнаружены при длительном наблюдении ипосевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и тимидиновом промечиванин культуральной среды.Консервация клеток.Клетки штаммов замораживают после2 и 3 клонирования на 10 .и 15 пассажахв культуре и после роста в внде.асцитной опухоли в мышах. Криозащитная среда 50% ростовой среды, 40% эмбриональной телячьей сыворотки и 10% диметилсульфокеида,Режим замораживания: клетки в кри-озащитной среде помещают на сутки...

Номер патента: 1710577

Опубликовано: 07.02.1992

Авторы: Ионов, Юрин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...на мышах, Титр антител в культуральной жидкости составляет 1:128 а в асцитической1:100000.Продуктивность.Концентрация антител, продуцируемых5 штаммом 04 В 8, составляет в культурапьнойжидкости 50 мкг/мл, е асцитной жидкости20 мг/мл, Стабильность продуцированияантител сохраняется на протяжении 20 пассажей в культуре и 7 мпассажей на живо 10 тных, если гибридома перевивается.Контаминация.Бактерии и грибы в культурах не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение15 микроплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и тимидиновомпромечивании культуральной среды.Консервация клеток.Клетки штаммов замораживают после 220 и 3-го клонирования на 10 и 15 пассажах екультуре и после роста в виде...

Номер патента: 1712410

Опубликовано: 15.02.1992

Автор: Злобина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антитела, гибридных, железы, клеток, культивируемых, мusсulus, мол, моноклонального, поджелудочной, продуцент, штамм

...Режим замораживания; 1 градус в мин, до -70 С, далее клетки переносят в жидкий азот, Рэзмораживают гибридому при переносе ампулы с клетками изжидкого азота в водяную баню при 37 СЖизнеспособность клеток после хранения в жидком азоте около года не ниже 70%, судя по включению красителя эозина и трипа нового.синего,Использование. штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридому высевают при плотности 5 10 клеток/мл в пластиковый5флакон с минимальной средой Игла, модифицированной Дульбекко, содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки, 2 пМ 1:глютамина, 100 ед/мл гентамицина и 5 10 М 2-меркаптоэтанола, Клетки культи 20 вируют 3 - 4 дня при 37 ОС в атмосфере с 5% С 02, Далее культуральную жидкость соби-. рают,...

Номер патента: 1712411

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Талло

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, иммуноглобулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, павианов, продуцент, штамм

...и вирусами:контаминации бактериями, грибами и микроплазмы нет.Один из родительских клеток продуцируют эндогенный ретровирус С-типа мышей;11, Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом; мон-АТ дО -класса, направленные к классоспецифической детерминанте тяжелых цепей, дО павианов: специфичность оцениваласьиммуноферментным методом и вестернблотин гом.12, Концентрация полезного продухта (моноклональных антител) в среде около 10 мкг/мл, в асцитной жидкости около 10 мг/мл;Титры данных антител при определении с помощью твердоазного иммуноферментного метода около 2 х 10 (среда/ и 2 х 10-6/асцит при концентрации антитенэ 1 мкг/мл.Определение антител можно проводить также иммунофлюоресцентными и радиоимму нологическими методами....

Номер патента: 1712412

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Панютич, Петевка, Фомин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антитела, гибридных, еsснеviнiа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, пирофосфатазе, продуцент, штамм

...пирофосфат, 30 - ,50 мкМ в 0,05 М Трис-НС циллина и стрептомицина, 0,05 мМ меркап буфере, рН 9,0, 0,5 мМ МдС 2 и инкубируют тоэтанола. Клетки культивируют при 37 С в 20 мин при 37 С, Окрашивание лунок учитыатмосфере 5% С 02. Посевная доза 2 10 вают после добавления раствора, содержа- клеток в мл, щего молибдат аммония и малахитовыйДля выращивания гибридомного Штам- зеленый на спектрофотометре при длине ма в асцитной форме пригодны мыши 30 волны 620 нм.ВаЬ/с. Мышам за 7 - 30 дней до инъекции Результаты опыта по определению клеток штамма вводят внутрибрюшинно по специфичности связывания МКА, продуци,5 мл пристана. Клетки инъецируют внутри-руемого клетками штамма РГВ с пирофосбрюшинно по 2 - 5 миллионов в 0,5 мл среды . фатазой Е.со,...

Номер патента: 1716250

Опубликовано: 28.02.1992

Автор: Рудой

МПК: F21S 3/00

Метки: культивируемых, объектов, освещения, пробирках, растительных

...через которое проходит люминесцентная лампа 2. Штативы 4 выполняются разборными. По вертикали они разделены на две половины, с одного края соединенные петлями. В закрытом состоянии обе половины штатива 4 удерживаются скобой. Отдельные устроиства могут быть объеинены в единую устойчивую конструкцию, апример четырехламповую (фиг,З).Для используемых в производстве стандартных пробирок диаметром 16 мм и высотой 160 мм в штативе имеется 8 отверстий на расстоянии 5 мм от светящейся поверхности лампы, где обеспечивается освещен ность 10000 л (19 Вт/м ), и 14 отверстий в следующем ряду на расстоянии 25 мм от светящейся поверхности лампы, где обес. печивается освещенность 6000 л (12 Вт/м ), считывающаяся оптимальной для культиви рования...

Номер патента: 1717147

Опубликовано: 07.03.1992

Авторы: Белкина, Дерюгина, Леменева, Оловникова, Проскурина, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антитела, гибридных, группоспецифическому, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, системы, человека, штамм, эритроцитов

...5 к 1 0 М 2-меркаптоэтанола, 5 О/-ной среды, кондиционированной спленоцитами мыши, антибиотики; 37 С, 6 СО в воздухе.г время роста гибридомы в форме асцитной опухоли 12 сут.Морфология клеток: штамм представ.лен слабо прикрепляющимися к субстрату клетками с обычной для антителопродуцирующих клеток морфологией.Видовая принадлежность штамма; доказана цитогенетическим методом, Кариотип соответствует виду Мцэ птцзсацз. Число хромосом составляет 83-92, генетические маркеры - 1 метацентрическая и 1 большая субметацентрическая хромосомы. Сведения о контаминации линии: контаминация бактериями, грибами, микоплазмами не обнаружена, вирусы не тестированы.Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом:.анти-Й антитела,...

Номер патента: 1721089

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Дамбинова, Калантаров, Орлова, Трахт

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, глутаматным, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мозга, моноклонального, продуцент, рецепторам, человека, штамм

...5. Моноклональное антитело, продуцируемое штаммом А-НОЯС 5, относится кизотипу 1 дО, подкласс О 1 и связывает надмембранный участок глутаматных рецепторов мозга человека. Специфичность взаимодействия антител с нейрорецепторами-глутамата выяв ляют с помощью иммуноферментного и иммуногистохимического анализов.Для получения препарата моноклональных антител в количестве. необходимом для проведения иммунохимических исследований, гибридные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см по 5 х 102 5 клеток в 5 мл среды ВРМ 1 1640 с 10эмбриональной телячьей сыворотки, 100 лошадиной сыворотки, 4 мМ глутамина, 10 мМ 510 пирувата йа, 100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 0,05 мМ меркаптоэтанола, Клетки культивируют 3 - 4 дн при...

Номер патента: 1721090

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Вербицкий, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лгч, лощади, мusсulus, моноклонального, продуцент, реагирующего, субъединицей, ттгч, хгч, штамм

...удаляют селезенку и готовят суспензию спленоцищв, Клетки селезенки сливают (гибридизуют ") с клетками. мышиной миеломы Х 63 А 9 8.653. Сливающий агент - ПЭГ(50-ный раствор). Селекцию проводят на среде НАТ, два клонирования методом лимитирующего разведения (1 клетка на 3 лунки), 100% позитивных клонов.;Стандартные условия выращивания: среда. ВРМ1640 с 10% фетальной сыворотки крупного рогатого скота (РСЯ), температура при культивировании 37 ОС, газовая фаза - воздух с 5;4 С 02.Способ культивирования в пластиковых флаконах на 50-250 мл, посевная доза 500000 клеток/мл, кратность рассева 1:2, время субкультивирования 3-4 дня. В организме. животного - мышь ВА В/С. обработанная пристаном (1,0 мл в/брюшинно эа 5-10 дней до инокуляции), доза...

Номер патента: 1721091

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Вербицкий, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, гонадотропного, гормона, животных, клеток, культивируемых, лютеинизирующего, мusсulus, моноклонального, продуцент, реагирующего, субъединицей, хорионического, человека, штамм

...агент - ПЭГ 1500 (50-ный раствор). Селекцию гибридных клеток проводят на среде НАТ, два клонированияметодом лимитирующего разведения (1клетка на 3 лунки), 100% позитивных клонов.Стандартные условия выращивания;среда ВРМ 11640 с 100 фетальной сыворотки крупного рогатого скота (гСЗ), газоваяфаза - воздух с 5 СО 2, Способ культивирования в пластиковых флаконах на 50-250мл, посевная доза 500000 клеток в 1 мл,кратность рассева 1:2, время культивирования 3-4 дня, В организме животного - мышьВА 1 В/С, обработанная пристаном (0,5 млв/брюшинно за 5-10 дней до инокуляции),доза инокуляции 3 - 8 млн клеток, время образования асцита 10-20 дней.Полученный штамм гибридных клетокмыши обозначен Ф 14, Штамм хранится вСпециализированной коллекции...

Номер патента: 1721092

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Аксенова, Иванов, Игнатова, Ковалева, Кожухарова, Плескач, Фель, Фирулина

МПК: C12P 21/08

Метки: активность, антитела, гибридных, гликопротеиду, головного, естественных, животных, киллеров, клеток, культивируемых, мusсulus, миелина, мозга, моноклонального, продуцент, угнетающего, человека, штамм

...гибридомной среды с удвоенным количеством ГАТ. Клоны гибридомных клеток появлялись на 5-7-е сутки после слия ния в 50-70 лунок. В эти сроки начинают .замену среды ГАТ. Тестирование наличия в среде МонАт к МАГ проводили иммуноферментным.методом через 12-18 сут после слияния. Идентифицированные клетки-про дуценты клонируют на питающих слоях макрофагов, культивируют ин.витро или замораживают жидким азотом в смеси 900 эмбриональной сыворотки и 10 ОМНО.Получение асцитной формы гибридомы.25, Мышам линии Ва 1 Ь/с вводят внутрибрюшинно по 0;5 мл пристана, Через 8-10 дней этим мышам внутрибрюшинно вводят культуру гибридомных клеток в растворе 0,14 М МаС 1 на 0,2 М фосфатном буфере рН .30 7,2 по 1 х 10 клеток на мышь. Через 7-8 суту мышей...

Номер патента: 1723127

Опубликовано: 30.03.1992

Авторы: Булатов, Вербицкий, Григорьян, Осипова, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, соматотропину, человека, штамм

...РСЗ+ 10 ОМНО, замомона в фосфатном буфере (ФБ). Через три раживэние в пенопластовой коробке при -дняпослереиммунизацииумышейстериль С. Жизнеспособность клеток послено берут селезенку и готовят суспензию 25 размораживания 70-90 (оценка жизнеспленоцитов. Гибридомы получают путем способности клеток по исключению трипаслияния спленоцитов с клетками мышиной нового синего после 24 ч культивирования).миеломы Х.63.А 9.653 с помощью 50 поли- Определение специфичности моноклоэтиленгликоля с М.м, 1500, Соотношение нальныхантител Ф 17,клеток селезенки и клеток миеломы 5:1. Се Моноклональные антитела против солекцию проводят на среде НАТ, выполняют матотропиначеловека получены путем выдва клонирования методом лимитирующих деления их из асцитической...

Номер патента: 1725756

Опубликовано: 07.04.1992

Авторы: Александрова, Данилина

МПК: C12N 5/04

Метки: rosea, rноdiоlа, адаптогенов, клеток, культивируемых, продуцент, растений, соединений, фенольных, штамм

...хромосом - 100-660при модальном классе, содержащем 11610 170 хромосом(фиг,2), Способность к морфогенезу отсутствует,Штамм культивируемых клеток Юобоагозеа ЗКМ 29 является продуцентом фенольных соединений-адаптогенов, Способ 15 ность штамма накапливать фенольныесоединения определяет его активность. Дляпредлагаемого штамма в воздушно-сухойткани на 25 сутки роста суммарное количество фенольных соединений в пересчете на20 салидрозид составляет 0,25-0,35 на АСВ(абсол ютно сухие вещества),фенольные соединения определялиспектрофотометрическим методом с использованием фиазореактива.25 Для хранения штамма используют метод пересевов (продолжительность циклавыращивания 25-28 суток).П р и м е р. Каллусную ткань в количестве 1,5 г высевают в сосуд с...

Номер патента: 1726511

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Демчева, Носыркова, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антигенным, антител, гибридных, детерминантам, инсулина, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, общим, свиньи, человека, штамм

...клонируют вполужидком агаре, Клонирование гибридомы повторяли трижды, Клонированную гибридому 6 Е 66 2 А перевивают на мышах5 ВаЬ/с для получения асцитной жидкости,Полученный штамм гибридных клетокпродуцирующий моноклональные антителак общим антигенным детерминантам инсулина человека и свиньи, депонирован в спе 10 циализированой коллекции перевиваемыхсоматических клеток позвоночных Всесоюзной коллекции клеточных культур Институтацитологии АН СССР под М ВСКК (П) 420 Д ихарактеризуется следующими признаками,15 Культуральные свойства. Для выращивания штамма используют культуральныефлаконы. Во флакон с 3 мл среды ОМЕМ,содержащей 10 СПК, 3,5 мМ глютамина,17,5 мкМ пирувата натрия и 50 мМ 2-меркэп 20 тозтанола, засевают 250000 клеток...

Номер патента: 1726512

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Василов, Втюрина, Литвинова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, гибридных, глиальному, используемый, кислому, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, фибриллярному, человека, штамм

...16 ч; затем срезы промывали (по 5 мин) в 3 сменах забуференного физиологического раствора, рН 7,3, а затем инкубировали с антисывороткой к иммуноглобулинам мыши, меченным ФИТЦ или пероксидазой. Результаты реакции учитывали в люминесцентном или световом микроскопе в зависимости от природы используемой метки, Для клонирования отбирали гибридомы, которые продуцируют МКА, взаимодействующие с глиальными клетками в виде четкого фибриллярного свечения и не дающие реакций с другими клеточно-тканевыми структурами.Клонирование отобранных гибридом. Культуры гибридом, в супернатантах которых обнаруживаются антитела к ГФКБ, не дающие перекрестных реакций с другими тканевыми антигенами человека, клонировали методом предельных разведений из...

Номер патента: 1740415

Опубликовано: 15.06.1992

Авторы: Кулаков, Разина, Титова, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, близкородственным, возбудителем, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, реагирующих, сапа, штамм

...антител к видоспецифическому антигену Р.рзецбоааИе 1,Моноклональные антитела получаютлибо из культуральной жидкости (при культивировании "ин витро"), либо из асцитической жидкости (при культивировании гибридом "ин вива"). Для демонстрации их избирательной (в отношении возбудителя мелиоидоза) специфичности используют метод иммуноферментного анализа, прямой и непрямой иммунофлюоресценции,Иммуноферментный анализ.В качестве антигена на твердой фазе для сравнительного анализа в ИФА используют водно-солевые экстракты из взвесей инактивированных бактерий (двухсуточные культуры либо Р,щаИе либо Р.рзецбощаИе 1, типичных штаммов, обладающих полным набором антигенов, присущих каждому виду), подвергнутых обработке ультразвуком и осветлению...

Номер патента: 1742324

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Булатов, Вайль, Василов, Втюрина, Мартынов, Осипова, Смирнова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, высокоспецифичных, гибридных, гормону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, тиреотропному, человека, штамм

...14 - 20 дн.Данные видовой принадлежности, мышиные клетки Ва в/с.Продукция М КА ста бил ьна на и ратяжении 25 пассажей в культуре и 5 пассажей на животных.Характеристика целевого продукта, Штамм гибридных клеток Тпродуцирует моноклональные антитела подкласса 01, высокоспецифичные к ТТГ человека. Специфичность оценивают иммунаферментным методом. УКА не реагируют с Л Г, ФСГ50 55 иммуноглобулинов мыши, коньюгированных с пероксидазой хрена, После трехкратного промывания планшетов фосфаты буфером с Твинв лунки добавляют 0,04 ф-ный раствор о-фенилендиамина в0,2 М фосфэтно-цитратном буфере (рН 5,0) с добавлением 0,012 перекиси водорода, После появления окраски реакцию в лунках останавливают раствором 2 М серной кислоты и проводят регистрацию...

Номер патента: 1742325

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Кириллова, Лесных, Мареев, Славянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, биотипа, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, холерному, штамм, эльтор, энтеротоксину

...иммуноферментном анализе (ИФА) и реакции преципитации (РП) по Оухтерлонии с ХТ 1310, понейтрализации специфического действияХТ 1310 в тесте кожной проницаемости поКрейгу и нейтрализации цитотоксическогодействия ХТ на овариальные клетки китайского хомячка (СНО), Класс иммунаглобулинов определяют в РП по Оухтерлони или вИФА с "НЬчЫогпа э 0 Ьзотурпц КИ, пзооэе,СаЬ 3 осЬегп" (США).Титр МКА в культуральной жидкости1/265-1/512 (ИФА); в асцитической жидкости 1/51200. (И ФА), 1/16 - 1/32 (РП); нейт-.рализации ХТ 1310 в пробе по Крейгу1/2000; нейтрализации ХТ 1310 на клеткахСН О 1/320 - 1/640,Стабил ьность п родукции антител сохраняется на протяжении пассажей в культуре и пассажей на животных в течение 18мес (срок...

Номер патента: 1742326

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Андросова, Владимирский, Ильиных, Погуляева, Трахт, Ходун, Шипина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, воvis, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, продуцент, штамм

...КРМ 1-1 640 с 20 телячьей эмбриональной сыворотки, 4 мМ-глутимина, 10 мМ пирувата натрия, аминокислотами для базальной среды Игла, витаминами для среды Игла, 0,05 мМ меркаптоэтанола и в атмосфере 5 углекислоты.Для выращивания штамма использу-. ют пластиковую посуду. Посевная доза 100 тыс,кл./мл. Клетки пассируют 1 раз в 3 - 4 дня, ратность рассева 1:10, Культура суспензионная.Культивирование в организме животных,Для выращивания опухоли пригодны мыши ВА.В/с, Свежим мышам за 3 - 30 дней до инъекции штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана или вазелина. Штамм инъецируют внутрибрюшинно по 4- 5 10 кл. в среде Игла, Асцит образуется через 20 - 25 дней. Штамм не перевивают.Продуктивность штамма: секреция моноклональных...

Номер патента: 1744107

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Амбарцумян, Завольная, Казаков, Климович, Машуров, Морозова, Швецова

МПК: C12N 5/00

Метки: f-системы, антигена, антител, видов, гибридных, ему, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, родственных, скота, штамм, эритроцитарного

...и м е р 1. 1 млн клеток штамма после криоконсервации освобождают путем центрифугирования (1000 об/мин в течение 10 мин) от среды криоконсервации; пипеткой (1 мл) распределяют клетки по 200 тыс. в лунки (2 мл) 24-ячеечного планшета (Еочч) на среду ПС, кондиционированную предварительно посеянными макрофагами. План. шет помещают в атмосферу 95% воздуха и 5% СО 2 при абсолютной влажности и 37 С. Через 48 ч клетки из каждой лунки переносят во флаконы Карреля в 4 - 5 мл среды ПС, соблюдая при этом оптимальную посевную дозу 200 - 300 тыс,клеток в 1 мл. При достижении культуральной плотности 600-700 тыс, клеток/мл их рассеивают в свежую среду(ПС) во флаконы. В третьем пассаже ПС заменяют НПС или НПС с добавлением КС,Культуру пассируют до...

Номер патента: 1744112

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Мечетнер, Сахаров, Степанова

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, продуцент, тюленя, фосфатазе, штамм, щелочной

...40 45 2 клонирования 1000 субклонов продуцируют антитела к щелочной фосфатазе тюленя, Продукция антитела сохраняется как минимум в течение 10 пассажей в культуре.Гибридомные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см по 5 х 10 в 5 мл среды ВРИс 100 эмбриональной телячьей сывороткой, 4 мМ глютамина, 10 мМ пирувата натрия, 40 мкг/мл гентамицина и культивируют 4 дня при 37 С в атмосфере, содержащей 5% С 02. Для получения асцитной опухоли 5 х 10 гибридомных клеток вводят в брюшную полость мышей ВА В/С, обработанных пристаном. Через 2 - 3 недели собирают асцитную жидкость и иммуноглобулины осаждают сульфатом натрия, Осадок растворят в 0,2 М боратном буфере (рН 8,1) с 0,15 М КаС и диализуют против того же буфера.Культуральную...

Номер патента: 1747484

Опубликовано: 15.07.1992

Авторы: Войтенок, Колесникова, Лях, Мисуно, Панютич, Петевка, Шидловская

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulusl, моноклональных, некроза, опухолей, рекомбинантному, фактору, человека, штамм

...После отмывания инкубируют с меченными пероксидазой к иммуноглобулинам мыши энтителами в разведении 1:2000 на ФСБ-БСА в течение 1 ч, Ферментную реакцию проводят в течение 10 мин. Раствор субстрата представляет собой 0,1 М цитратный буфер (рН 4,7) с 0,6 мг/млортофенилендиамина гидрохлорида и 0,01 % перекиси водорода. Реакцию останавливают через 10 мин 1 М серной кислотой и учитывают на спектрофотометре с вертикальным лучом при длине волны 492 нм,Результаты эксперимента по изучению специфичности связывания МКА, продуцируемого клетками штамма 10 ГИ, с антигенами, иммобилизированными на пластике, представлены в табл.1,Результаты исследований свидетельствуют о более высокой специфичности МКА, продуцируемых клетками штамма 1 ОРИ по...

Номер патента: 1751202

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Баранов, Бурдов, Глобенко, Давыдова, Иванющенков, Кирюхин, Кожаева, Молчанова, Спирин, Худяков

МПК: C12N 5/00

Метки: алье, антитела, вируса, гибридных, животных, клеток, компоненту, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, штамм, ящура

...Через 10 дней супернатанты гибридных клонов тестировали на наличие антител в ИФА. Позитивные клоны составляли 5 - 70 от общего количества гибридных клеток, Эти клоны дважды субклонировали методом лимитирующих разведений, Отобранный стабильный клон с наивысшим титром антител обозначали М 7 ГПЯА 5-89 и депониРовали во Всесоюзной коллекции клеточных культур (г, Ленинград) под регистрационным М ВСКК(П) 476 Д,Подученный штамм имеет следующие1 морфологические и культуральные признаки.Морфологические признаки.Клетки круглые, различной величины,Ядра занимают большую часть клетки,Кариология культуры,Кариотип соответствует виду (мышиный), Модальный класс 84 16;6), 86 10), 588 (16%) хромосом, Модальный класс дляродительской миеломной...

Номер патента: 1752763

Опубликовано: 07.08.1992

Авторы: Гервазиева, Климович, Крутецкая, Овсянникова, Пашкова, Полищук, Самойлович

МПК: C12N 5/00

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...продуцируемых первичными культурами гибридом, в табл 3 - выявление дЕ с помощью двухдетерминантного твердофазного иммуноферментного анализа, в табл, 4 - титры МКАТ,продуцируемых клетками штамма 8 Е/4 Ф 4при выращивании в среде с низким содержанием сыворотки, в табл, 5- титры МКАТ, продуцируемых клетками штамма Е/4 Ф 4, в культуральной среде и в асцитической жидкости,в табл. 6 - содерджание ц Е в образцах сыворотки крови человека, определенное в двухдетерминантном иммунометрическом тесте с помощью меченых МКАТ Е/4 Ф 4, в табл. 1 - содержание 9 Е в образцах сыворотки крови человека, определенное в двухдетерминантном иммунометрическом тесте с помощью МКАТ Е/4 Ф 4, иммобилизованных на твердой фазе, в табл. 8 - выявление цЕ-антител против...

Номер патента: 1752764

Опубликовано: 07.08.1992

Авторы: Боровиков, Булашев, Дмитриев, Ескендирова, Шенжанов

МПК: C12N 5/00

Метки: brucella, антител, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рода, штамм

...60 и20 КД сооттветственно. Константа связывания 2 х 10 М,Методы оценки специфичности МКА:непрямой и "сэндвич" варианты ТИФА, иммуноблот.Контаминация штамма, Контаминатовлинии, включая бактерии, грибов, дрожжейи микоплазм не обнаружено,Криоконсервация, К осадку гибридныхклеток добавляют фетальной сыворотки теленка и диметилсульфооксида до конечнойконцентрации 10%. Суспензию клеток разливают в стерильные пластиковые ампулы сзавинчивающимися крышками по 1-5 млн.кл., помещают в коробку иэ пенопласта и1752764 10 20 40 табл, 2,55 ставят на 1 сут в морозильник при -70 С,после чего ампулы переносят в жидкий азот, Условия размораживания. Замороженные клетки штамма вынимают из сосуда с жидким азотом и быстро помещают в водя ную баню на 37 С, Как...