Патенты с меткой «культивируемых»

Номер патента: 1458385

Опубликовано: 15.02.1989

Авторы: Афанасьева, Литвинова, Любимов, Сенин

МПК: C12N 5/00

Метки: norvegicus, rаттus, антител, базальных, гибридных, гликопротеиду, животных, используемый, клеток, культивируемых, мембран, моноклональных, штамм, энтактину

...подвергают электрофорезу в градиентном полиак" риламидном геле (5-15%) в присутствии додецилсульфата натрия и высушенный гель подвергают авторадиографии. Положительная реакция проявляется присутствием на автографах меченой полосы 150 КД.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды.Криоконсервирование. Клетки штамма ресуспендируют в эмбриональной телячьей сыворотке, содержащей 10% диметилсульфоксида, в концентрации 1-,3 10 клеток в 1 мл, разливают вьстерильные пластиковые ампулы при 4 С и замораживают в жидком азоте по программе со снижением температуры на 1 С в минуту с последующим переносом в жидкий азот. Размораживание: 1 мин. при 37 С. Клетки разво" дят в 5-10...

Номер патента: 1463756

Опубликовано: 07.03.1989

Авторы: Демченко, Кекух, Кирюхина, Стусь

МПК: C12N 5/00

Метки: sаigататаriса, вирусологических, исследований, клеток, культивируемых, почки, штамм

...активности приходится на 3-и сутки культивирования и составляет 40-457,.При посевной дозе клеток 10 /мл сплошной монослой Формируется в матрасах, флаконах и пробирках на 2- 3-и сутки культивирования.формирование клеточного монослоя возможно и при пересеве 1:6,1:8, при этом монослой образуется на 5-7-е сутки культивирования.Клетки снимают со стекла 0,02 Е- ным раствором версена, подогретого до 37 (25 ч.), с добавлением 0,257 трипсина (1 ч,). При этом предварительно старую питательную среду удаляют, клеточный монослой промывают раствором Хенкса и в сосуд добавляют версен с трипсином в укаэанномсоотношении, Сосуды оставляют в тер-; мостате при 37 С на 5-10 мин, После разобщения клеток монослоя (наблюдение ведут визуально или с помощью...

Номер патента: 1472497

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, еsснеriснiа, животных, используемый, клеток, культивируемых, липополисахариду, мusсulus, моноклональных, штамм

...клетки пассировали один раз в 2-3 дня, кратностьрассева - 1:б - 1:8. Культура суспенэионная,Культивирование в организме животных. Для выращивания асцита пригоднымыши Ва 1 в/с. Мышам эа 7-30 дней доинъекции клетокштамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по 2-5 х 10 клеток в 1 мл среды 1 МДМ. Асцит формируется через 12-14 дней.Продуктивность штамма.Секреция моноклонального антитела(МкАТ) на 2-3 день культивированиясоставляет 40-45 мкг в 1 мл культуральной среды и 15-20 мг в 1 мл асцитной жидкости при определении иммуноферментным методом.Характеристика полученного продукта. Штамм продуцирует моноклональноеантитело с изотипом 1 Ы. Специфичность - антиген Е.со 1 небелковойприроды,.содержащийся в...

Номер патента: 1472498

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Беляев, Казенных, Лунев, Несмеянов, Овчинников

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерлейкину-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...по 0,5 мл пристана. Осцит образуется через 10-14 дней после введения 2-5 млн. клеток,Продуктивность штамма,Концентрация специфических иммуно.глобулинов в культуральной жидкостиболее 75 мкг/мл, в асцитной жидкости 5-10 мг/мл.Характеристика полученного продукта, Штамм продуцирует иммуноглобулин О субкласса 1, В твердофазномиммуноферментном анализе антителавзаимодействуют с препаратами 1 Ь 2из линии 1 г 1 аС и рекомбинантного1 Ь 2.Стабильность продуцирования ан тител сохраняется на протяжении 25пассажей в культуре.Криоконсервирование.Среда для замораживания - 90 . ЗТС,10 . ДМСО. Плотность клеток 1-510 ь кл/мл. Ампулы с клетками в пенопластовой коробке выдерживают прио-70 С в течение 1 дня и переносят вдюары с жидким азотом. Режим...

Номер патента: 1472499

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Беляев, Казенных, Лунев, Михалева, Несмеянов, Овчинников, Оноприенко, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерлейкину-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...и вносят в лунку по 100 мкл препарата, содержащего антитела, После инкубации в течение одного часа при 37 С плашки отмывают ФСБТ и обрабатывают раствором антител к иммуноглобулинам мыши, конъюгированных с пероксидазой хрена (100 мкл на лунку, разведение 1:1000, 15 1 ч 37 С). Плашку еще раз отмывают и вносят 100 мкл раствора ортб-фенилендиамина (1 мг/мл) в 1%-ном цитратном буфере (рН 4,5), содержащем 0,05 НО. Реакцию останавливают через 15 мин добавлением 100 мкл на лунку раствора 2 М серной кислоты, Отрицательным контролем служат лунки плашки, не содержащие 1 Ь 2, а также лунки, в которые вместо антител к 1 Ь 2 25 вносят нормальный иммуноглобулин мыши.П р и м е р 2. Получение и очистка моноклональных антител.Получение и очистка...

Номер патента: 1479510

Опубликовано: 15.05.1989

Авторы: Криворутченко, Кривошеин, Попов, Червонский

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: h3n2, аленинград38580, антител, вируса, гемагглютинину, гибридных, гриппа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...в качестве конкурирующего агентаИспользование штамма АН-РСКНЯ иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Моноклональные антитела используют в иммуноферментном анализе, Для этого полихлорниниловые 96-луцочные платы покрывают препа 1ратом гемагглютинина вируса гриппа А(Ленинград)385/80 (НЗМ 2) или вирусными концентратами в забуференномфосфатами изотоническом растворе натрия хлорида (ЗФР) в концентрации30 мкг/мл по 50 мкл на лунку, Спустя8 ч, лунки промывают в трех сменахЗФР н течение 10 мин, В дальнейшемотмывают аналогично, Инкубируют вездепри комнатной температуре. Свободные валентности платы насыщают в течениеодного часа 17-ньгм раствором человеческого сывороточного альбумина в ЗФР, после чего лунки отмывают и добавляют...

Номер патента: 1493668

Опубликовано: 15.07.1989

Авторы: Арсеньева, Богачева, Ибрагимов, Лабазина, Рохлин, Черепахин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, иммуноглобулина, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тяжелым, цепям, человека, штамм

...антигенов используют иммуноглобулины человека, иммобилиэованные на пластике (твердофазный радиоиммунный или иммуноферментный анализ).Иммунохимические свойства МАТ 9 С 11 В 8-1. Для получения препарата МАТ в количестве, необходимом для проведения всех иммунохимических исследований, гибридомные клетки штамма-продуцента помещают в пластиковый флакон площадью 25 кв. см,%2 х 10 клеток в 5 мл среды КРМ 1-1640 с 10/ эмбриональной телячьей сывороткой, 4 мМ глютамина, 100 мкг-мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 0,05 мМ меркаптоэтанола. Клетки куль" тивируют 2-3 дня при 37 С в атмосфере 5/-ного СО. Полученный супернаТаким образом, приведенные примеры четко демонстрируют абсолютную специфичность ИЛТ 9 С 11 В 8-1, относящегося к 18 С...

Номер патента: 1495374

Опубликовано: 23.07.1989

Авторы: Арцыбашева, Березкина, Игнатова, Кожухарова, Плескач, Тарунина

МПК: C12N 5/00

Метки: гибридом, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, продуцент, ростстимулирующих, факторов, штамм

...кондиционированные клетками ЬеЬг 1/1-БГ, сохраняют полную ростстимулирующую активность по крайней мере в течение 3 мес храненияОпри - 20 С. Признак продукции фактора стабильно воспроизводится в течение более чем 100 генераций, Рост- стимулирующие факторы обнаруживают в культуральной среде. Концентрация общего белка через 2-3 сут в кондиционированной среде составляет 2-, 5 мкг/мл.Ростстимулирующую активность определяют в тестах: стимуляция включения Н-тимидина в стационарной культуре минимально трансформированных клеток И 1 Н ЗТЗ; индукция клонирования минимально трансформированных клеток МВК в среде с агаром; стимуляция размножения массовых культур гибридомнык клеток в среде с пониженным содержанием сыворотки крови и увеличение...

Номер патента: 1495375

Опубликовано: 23.07.1989

Авторы: Кущ, Тугизов

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: гепатокарциномы, гибридизации, дефектный, клеток, культивируемых, тимидинкиназе, трансфекции, человека, штамм

...жидкость отсасывают, оставляя не более 50 мкл. Осадок разбива-,4 О ют поколачиванием по дну центрифужной пробирки. К осадку сразу же добавляют 0,5 мл 50 .-ного раствора полиэтиленгликоля (ПЭГ) с мол. массой 1550 и осторожно ресуспендируют клет ки пипеткой. Клетки выдерживают 1 мин без перемешивания, затем раствор ПЭГ быстро разводят, добавляя 10 мл среды без сыворотки.Суспензию клеток распределяют в чашки Петри по 2 10 кл/см . Через 30 мин осторожно отсасывают культуральную жидкость и, добавляют ростовую среду, содержащую 32 сыворотки . эмбриона коровы. Клеткиинкубируют при 37 С в атмосфере 7,5% СО. Через 24 ч среду заменяют на новую, содер- жащую 10 сыворотки эмбриона коровы. Еще через 24 ч клетки снимают: расту- . 5щие в суспензии -...

Номер патента: 1497213

Опубликовано: 30.07.1989

Авторы: Волгин, Волгина, Вотрин, Певницкий, Ходарев

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, зависимой, клеток, клеточных, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, селезенки, человека, штамм, эндонуклеазе, ядер

...скота,Для выращивания штамма используютстеклянную или пластиковую посуду,Во Флакон объемом 25 см в 5 мл средывносят 2 10 -10 клеток РИ, Пассажи б1 раз в 3-4 дня той же дозой клеток.Кратность рассева 1:4.Культивирование в организме животного.Для выращивания опухоли из штаммапригодны мыши линии ВАЬВ/с. Свежиммьппам за 7-30 (оптимально 14) днейдо инъекции штамма вводят внутрибрюшинно 0 5 мл пристана, Штамм инъециЭ6руют внутрибрюшинно по 3,2 х 10 клеток на мышь в 1 мл среды Игла. Асцитическую жидкость собирают по мерепоявления (на 10-15 день). Из асциташтамм перевивают на свежих мышей по1-5 х 10 клеток на мышь, 4-6 пассажей, 14972136Продуктивность штамма,Секреция монАТ на 4-й день культивирования 10-20 мкг в 1 мл среды и1-2 мг в 1 мл...

Номер патента: 1497214

Опубликовано: 30.07.1989

Авторы: Волгин, Волгина, Вотрин, Певницкий, Ходарев

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, зависимой, клеток, клеточных, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, селезенки, человека, штамм, эндонуклеазе, ядер

...иммунизации - 13 позитивных клонов из 200 первичных культур, Бсе стабильные позитивные линииклонированы и заморожены в жидкомазоте. Клон РЯ клонирован еще 5 раз.Для наработки антител клон Ы культивируют в условиях хп ч 1 чо в видеасцитной жидкости в брюшной полостисингенных мышей,Штамм депонирован под номеромВСКК (П) Р 117 Д и характеризуетсяследующими признаками.Культуральные признаки,Стандартные условия культивирования, Среда для культивирования - среда Дульбеко с добавлением 107. телячьей эмбриональной сыворотки., 4 ммЬ-глутамина. 80 мкг/мл гентамицинаОУ37 С. 57. СО, 967. влажности. Допустимо использование среды Игла.с добавлением 157 сыворотки крупного рогатого скота.Для выращивания штамма используютстеклянную или пластиковую...

Номер патента: 1389284

Опубликовано: 30.07.1989

Авторы: Ветрова, Сидоренко

МПК: A61K 39/00, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, в-лимфоцитов, гибридных, дифференцировочному, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...отношением, базофильной цитоплазмойФ грубой структурой хроматина. 84 4Культурдльлые призндки. Среда культивирования - среда КРАПб 40 или МЕМв модиФикации Дальбекко с 102 эмбриональной телячьей сыворотки, мК,-глутамина, 100 мгк/мл гентамицина при37 С в атмосфере 57, СО , оптимум рН2 зб, 8-7, 5.При росте на пластике клетки образуют плотный монослой, К стеклу клетки прикрепляются слабо и в стеклянных Флаконах ра.стут как в монослое,так и в суспензии. Посевная доза клеток 100 тыс,кл/мл, клетки пассируютодин раз в 3-4 дня, кратность рассева 1:7.Культивирование в организме животпьгл. Для получения асцита пригоднылишь мыши ВЛ 1.В/с. Мышам за 7-30 днейдо инъекции клеток штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана....

Номер патента: 1507791

Опубликовано: 15.09.1989

Авторы: Войтенок, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панютич, Турецкая, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, некроза, опухолей-альфа, продуцент, фактору, человека, штамм

...Для длительного хранения клетки штамма замораживаат в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Режим замораживания: 1 С/мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот. Размораживание на водяоной бане при 37 С. Жизнеспособность клеток после размораживания 55-60% по окрашиванию трипановым синим.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре. не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и по характеру включения тимидиновой метки.П р и м е р 1, Тест на определение специфичности взаимодействия мои АТ с антигенами, иммобилизованными на пластине Р ФНО-с, Р ФНО- и БСА. в количестве...

Номер патента: 1513030

Опубликовано: 07.10.1989

Авторы: Адамова, Власик, Ковалева, Покровский, Трахт, Янушевская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, крови, культивируемых, липопротеидам, мusсulus, моноклональных, низкой, плазмы, плотности, человека, штамм

...штамм обозначен как .А-ЬВЕР 8, депонированв Банке клеточных культур Институтацитологии под номером ВСКК (11)Ф 1790 и характеризуется следующимипризнаками, 20.Стандартные условия культивирования - среда КРМ 1-1640 с добавлением10% телячьей эмбриональной сывороткии 10% лошадиной сыворотки, 4 мкМЕ-глютамина, 10 мкМ пирувата натрия,100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/млстрептомицина,аминокислоты для базальной среды Игла, витамины для среды Игла и 0,05 меркаптоэтанола, при37 С в атмосфере 5%-ной углекислоты,Для выращивания используют пластиковую посуду,Посевная доза 10 клеток в 1 мл.Клетки пассируют один раз в 3-4 дня.Кратность рассева 1:10, Культура полуприкрепленная. Культивирование ворганизме животных. Для выращиваниягибридомы в...

Номер патента: 1518370

Опубликовано: 30.10.1989

Авторы: Алпатова, Кармышева, Крючкова, Кудинова, Мартынова, Миронова, Попова, Преображенская, Стобецкий

МПК: C12N 5/00

Метки: диагностических, клеток, кожи, культивируемых, мышц, препаратов, человека, штамм, эмбриона

...используемых для изготовления медицинских вирусных вакцин, в связи с этим штамм может быть применен в вакцинном производстве,Контроль штамма Мна посторонние контаминанты.При обследовании клеток штамма Мна стерильность (наличие грибов, бактерий, микоплазм) получены отрицательные результаты на уровне 1-10 пассажей.При обследовании культуральной жидкости и самих клеток на уровне 10, 20, 30, 40 пассажей в чувствительных клеточных системах, а также в реакциях гемадсорбции вирусы контаминанты не выявлены.При обследовании штамма Мна уровнях 12, 21, 31, 41 пассажей в опытах на взрослых и новорожденных мьппах, кроликах, морских свинках, куриных эмбрионах, иммунодепрессированных мышах линии СВА посторонних агентов, в том числе и онкогенных, не...

Номер патента: 1521772

Опубликовано: 15.11.1989

Авторы: Баранов, Галахарь, Дьяченко, Таранин, Уфимцева

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: vison, гибридных, животных, иммуноглобулинов, класса, клеток, культивируемых, мusсulus, мusтеlа, многоканальных, норки, продуцент, штамм

...пред 45варительно иммунизированной суммарным 18 норки. В гибридизацию бралиВ-лимфоциты (10 ) селезенки норки.натретий день после последней инъекцииантигена (18 норки).50 Гибридизацию В-лимфоцитов норки иклеток миеломы мыши ИБО лри соотношении 10:1 соответственно проводят встандартной среде ДЕМЕ без сыворотки,с добавлением полиэтиленгликоля(М.в. 1500). После обработки в течение 3 мин полиэтиленгликолем клеткиосаждают центрифугированием при800 об/мин и суспендируют в средеДЕМЕ с добавлением 157 эмбриональнойсыворотки крупного рогатого скота,2 мМ глютамина, 19 мМ пирувате натрия, 4 10 аминоптерина, 10 гипоксантина, 16 10 М тимидина и антибиотиков. Суспензию (10 клеток в6мл среды) разливают по 0,1 мл в 96 луночные пластиковые плато и...

Номер патента: 1521776

Опубликовано: 15.11.1989

Авторы: Войтенок, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панютич, Турецкая, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: A61K 39/395, C12N 15/00

Метки: активность, антитела, биологическую, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, нейтрализующего, некроза, опухолей-альфа, продуцент, фактора, человеческого, штамм

...кроличьими антимьшгиными антителами. Все отмывкипроводят бидистиллированной водой.Контролем служит бычий сывороточныйальбумкц в качестве антигена.Стабильность продукции. ПродукцияьанАТ сохраняется как минимум до 15пассажей 1 п ч 7.сто, Б асцитной формештамм не пассировался более одногораза,Криоконсервирование. Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Режим замораживания: 1 С/миндо минус -70 С. После замораживанияклетки переносят в жидкий азот, Разморая(иванне на водяной бане при 37 С,Жизнеспособность клеток после размораживания 60-70% по Окрашиванию три"пановым синим,П р и м е р 1, Гибридамцые клеткипомеШаот в стеклянный Флакон объемомГ50 мл по...

Номер патента: 1527257

Опубликовано: 07.12.1989

Авторы: Вотяков, Коломиец, Куницкая, Лучко, Малахова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: амиотрофического, антител, возбудителю, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лейкоспонгиоза, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...мьппи в среднем получают 3,0 мл асцитической жидкости. Асцитическую жидкость осветляют путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение10 мин. 18 С осаждают сульфатом аммония (ЭОХ насыщения) и чистят путем аффинной хроматографии. Штамм АЛМАна мышах не перевивается.Характеристика продукта.Класс продуцируемых иммуноглобу 50 линов - Тф 2 а. Продуцируемые антитела охарактеризованы в точечном иммуноферментном методе (ТИФМ),Изоферменты.Подвижность глюкоза-фосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогенаэы в клетках клона АЛМАхарактерна для мышиных клеток. Контаминация.Бактерии не.обнаружены, грибы и дрожжи не обнаружены, микоплазмы не обнаружены, вирусы - обнаружены частицы типа А и С, аналогичные частицам родительского штамма клеток Х 63-Ае...

Номер патента: 1527260

Опубликовано: 07.12.1989

Авторы: Ардемасова, Калихевич, Лившиц, Попов, Попова, Салова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, тимозину, штамм

...состава должно быть в 10 разбольше. При росте в указанных условиях штамм образует круглые клетки,слабо прикрепляющиеся к твердой подложке и снимающиеся с нее ресуспендированием супернатантом. Времяудвоения популяции 30 ч. Кратностьрассева 1:3 3-4 раза в неделю.Культивирование в организме животных, Внутрибрюшинное введение клеток сингенным мышам, сенсибилиэированным пристаном или вазелиновыммаслом, вызывает образование асцитной опухоли. В сыворотке крови и асците таких животных содержатся антитела к Ы., -тимоэину, Способность кпродукции монАТ сохраняется при последовательных перевивках клеток отодного животного другому, а такжепри культивировании клеток асцитической жидкости п чдСто,Продуктивность штамма.При стандартных...

Номер патента: 1528791

Опубликовано: 15.12.1989

Авторы: Гуртовой, Дерюгина, Дризе, Леменева, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00, C12P 21/00 ...

Метки: антигену, антител, гибридных, группоспецифическому, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, системы, человека, штамм, эритроцитов

...су,Морфология клеток: штамм представ 35лен слабо прикрепляющимися к субстрату клетками с обычной для антителообразующих клеток морфологией.Видовая принадлежность штамма доказана цитогенетическим методом.Кариотип соответствует виду Мыв.шцзсо 1 цв. Модальное число хромосом89, генетические маркеры - 2 метацентрические хромосомы. 45Сведения о комтаминации линии:не обнаружена контаминация Ьактериями, грибами и микоплазмой, Вирусы нетестированы.Характеристика полезного вещества,продуциируемого штаммом; 1 ВИ анти-Мантитела, агглютинирующие эритроцитычеловека, содержащие М антиген. Методтестирования - агглютинация в солевойсреде или на плоскости.Характеристика биосинтеза полезных55продуктов: титр антител культуральнойжидкости в реакции солевой...

Номер патента: 1530638

Опубликовано: 23.12.1989

Авторы: Войтенок, Панютич, Турецкая

МПК: A61K 39/395, C12N 15/00

Метки: альфа, антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, некроза, опухолей, продуцент, фактору, человека, штамм

...н жидкий азот, Размораживание на водяой бане при 37 С, Жизнео,способность клеток после размораживания 65-707. по окрашиванию трипаноным синим.П р и м е р 1. Гибридомные клеткипомещают н стеклянньп Флакон объемом50 мл по 1 х 10 клеток в 5 мл средыбс 107. ЭТС, 2 мМ со -глютамина,100 мкг/мл пенициллина и стрептомицина. 0,05 и меркаптоэтанола, Клетоки культивруют 2-3 дня при 37 С ватмосфере 5",. СО, Полученньй супернатант используют н качеств реагентан иммунохмических реякцях (как препарат монАТ). Тест н определение специфичностинзгимодействия монАТ с ацтигенами,иммобилизонанными на пласгик,Используемый метод: гм;уноферментный анализ.Р ФНО- К, Р ФНГ)-1." и бычий сывороточный альбумин (БСА) в количестве0,5 мкг н 50 мкл 0,1 М...

Номер патента: 1532582

Опубликовано: 30.12.1989

Авторы: Жданов, Ионова, Львов, Михеева, Новохатский, Парасюк, Скворцова, Урываев, Шуткова

МПК: C12N 5/00

Метки: антитела, вирусу, гибридных, животных, карельской, клеток, культивируемых, лихорадки, мusсulus, моноклонального, продуцент, штамм

...3 5120 АЖ У 1 10000 АЖ У 2 10000 АЖ Р. 3 5120 ОЖ Р 1 1280 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 й величины с ядрами, занимающимилысую часть клеток. Ядрышки крупе, встречаются двухъядерныеклетки.топлазма имеет вид тонкого ободкаи смещена ядром к одной из стенок.льтивирование гибридомын организменотного: мьпди ВАЬВ/с, доза клетокри прививке (1-2) х 10клеток,нотные предварительно сенсибилизионаны пристаном. Асцитная опухольбразуется через 10-12 сут.Специфичность и активность антиел: вирус карельской лихорадки,итр в РТГА 1:640000, РНИИФ 1:100000,онтаминация: бактерий нет, грибовдрожжей нет, микоплазмы нет, вируы - обнаружены частицы А и В, анаогичные частицам родственного штама клеток ИБО.Класс...

Номер патента: 1460994

Опубликовано: 30.01.1990

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Оганян, Размадзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, высших, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, человека, штамм

...присутствии ПЭГ(реакциявстречной и радиальной иммунодиффузии). Константа ассоциации МКА с1 яА человека составляет 2,2 10 М,с 1 яА обезьян - 510М.Контаминация.Бактерии, грибы и микоплазмы .отсутствуют. Родительская линия Х 63-Ар8.653 продуцирует эндогенный ретровирус С-типа мышей.Криоконсервирование.5-6 млн. кл, замораживают в жидком азоте в присутствии 90% сыворотки плода коровы и 10% ЭМЯО. Жизнеспособность клеток после размораживания составляет 90% (по включениютрипанового синего).Использование штамма иллюстрируется следующими поимерами.Пример 1,Навески иммуноглобулинов всехклассов человека в количестве 15 мкг50на трек кипятят в течение 5 мин наводяной бане в буфере для нанесениясодержащем меркаптоэтанол. При этомпроисходит...

Номер патента: 1541253

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Алексеева, Козловский, Новохатский, Соколов, Черепахина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, голарктической, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, поверхностному, расы, туляремии, штамм

...при 37 С в пластиковой или стеклянной посуде при посевной дозе 150200 тыс./мл в течение 3-4 дней доплотности насыщения 800 тыс./мл.Клетки пассируют один раз в 3-4 днятой же дозой Коэффициент рассева1;4-1;5. Культивирование ведут напитательной среде ВРМ 1 1640 илиДМЕМ, содержащей 10 Е эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глютамина,8-10 мМ буфера НЕРЕЯ. Культивирование штамма в организме экспериментальных животных, Индукцию асцитных опухолей у интактных беспородных белых мышей и инбредныхмышей линии Ва 1 Ь/с, внутрибрюшиннопраймированных за 14 дней до введения гибридомы пристаном в дозе0,5 мл/мышь осуществляют путем ино/кулирования 10 10 гибридных клеток на одно животное в 3 мл среды. Иммунную асцитическую жидкость собирают по мере...

Номер патента: 1541254

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Алексеева, Бичуль, Бурлакова, Новохатский

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, вибриона, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, о-антигену, огава, серовара, термостабильному, холерного, штамм

...клетки ГХ-В 7/Ог представляют собой крупные оКруглые клетки с узким ободком базофильной цитоплазмы. Ядрагиперхромные, неправильно-овальнойформы, крупные, с грубой структурой ядерного хроматина, В значительной части клеток цитоплазма имеетвыросты.Культуральные признаки типичныдля перевиваемых клеток мышиныхплазмоцитом. Клетки ГХ-В 7/Ог культивируют в виде стационарной суспензииопри 37 С в пластиковой или стеклянной посуде при посевной дозе 1001500 тыс./мл в течение 3-4 дней доплотности насыщения 800-900 тыс.кл./мл,Клетки пассируют один раэ в 3-4 дня.той же дозой. 1(оэффициент рассева1:4-1:5, Культивирование ведут на питательной среде ВРМХ 1640 или ДМЕМ,содержащей,10 эмбриональной телячьейсыворотки, 2 мМ глютамина, 8-10 мМбуфера...

Номер патента: 1544797

Опубликовано: 23.02.1990

Авторы: Гвозденко, Дьяконов, Михайлова, Пухова, Соловьев

МПК: C12N 5/00

Метки: вирусов, выделения, используемый, клеток, кожно-мышечной, кролика, культивируемых, накопления, перевиваемых, ткани, штамм, эмбриона

...45 от 1 до нескольких в ядре. Питоплазма мелкосетчатая. Кариология линии на уровне 51 пассажа. Кариотип соответствует виду (2 п=44). Модальный класс 88-89 хромосом. Клетки имеют50 околотетраплоидный кариотип, отличаются большим разбросом числа хромосом. Имеется 3-4 микрохромосомы и непарная длинная субметацентрическая маркерная хромосома.Контаминанты.Бактерии, грибы, микоплаэмы и вирусы не обнаружены.Чувствительность к вирусам. Линия клеток представляет собой высокопродуктивный субстрат для кульивирования вирусов ринопневмонни (три штамма), артериита лошадей, реовирусу 3-го типа, инфекционного ринотрахеита, диареи крупного рогатого скота, парагриппа.П р и м е р 1. Культивирование вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого...

Номер патента: 1551737

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Дерюгина, Дризе, Лапенков, Леменева, Носырев, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигена, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, растворимой, формам, человека, штамм

...клетокморфологией.Кариологические признаки. Кариотип соответствует Мця. пшяси 1 ця. Модальное число хромосом 78 с интервалом варьирования 74-80. С помощью Сокрашивания выявляются две большиеметацентрические хромосомы, 30Культуральные признаки. Среда длякультивирования ВРМ 1 1640 или ДМЕМс 207. эмбриональной телячьей сыворотки, 4 мМ Ь-глютамина, 17 пируватанатрия, 1-2% НЕРЕЯ-буфера, 510М2-меркаптоэтанола, антибиотики. Характер роста - стационарная суспензия. Метод снятия - резиновым "полисменом". Частота пассирования 2-3 сут.Кратность рассева 1:3-1:4,40При введении мышам ВАЬВ/с предварительно обработанных пристаном 2-5 "10 клеток асцит образуется черезб20 сут, Стабильная продукция антителнаблюдается в течение 2 пассажей на 45мышах, титр...

Номер патента: 1551738

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Дерюгина, Дризе, Лапенков, Леменева, Носырев, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, н-антигена, форме, человека, штамм

...выявляются большой и малыйметацентрики и один большой акроцент.рик,Культуральные признаки. Среда длякультивирования КРМ 1 1640 или ДМЕМс 20/ эмбриональной телячьей сыворотки, 4 миф 1.-глютдмина, 1 Е цируватанатрия, 2 К НЕРЕЯ-буФера, 5 10 2-меркаптоэтанолд, антибиотики. Характерроста - стационарная суспензия. Ме -тод снятия - резиновым "полисменом",Частота пассирования 2-3 сут. Кратность рассева 1:3-1;4,При введении мышам ВЛ 1.В/с предварительно обработанным пристаном(2-5) 10 клеток асцит образуется6через 9-14 сут. Стабильная продукция 45антител наблюдается н течение 2 пассажей на мышах, титр антител н асцитной жидкости н реакции агглютинации в солевой среде с эритроцитамиФенотипа 0 составляет 1:256-1:512 тыс,50в культуральной...

Номер патента: 1551739

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Дерюгина, Дризе, Леменева, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, группоспецифическому, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, системы, человека, штамм, эритроцитов

...2 большие метацентрические хромссомы.Продуктивность штамма. Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом: анти-Б антитела,агглютинирунудие эритроциты человека,15 20 25 30 35 40 45 50 55 содержащие М-антиген. Метод тестирования - агглютинация в солевой среде или на плоскости,Характеристика биосинтеза полезных продуктов: титр антител в культуральной жидкости в реакции солевой агглютинации в круглодонных микроплатах 1:64-1:256, титр антител в асцитной жидкости в реакции агглютинации на плоскости 1:1600-1:12800. Стабильность антителопродукции сохраняется втечение 13 пассажей в культуре и 2пассажей в мыши.Криоконсервирование клеток, Ростовая среда, 107. ДМСО, 407. любой сыоворотки, сутки при -70 С, затем -жидкий азот,...

Номер патента: 1555359

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Егоров, Зеленин, Колобков, Крамерова, Филякина

МПК: C12N 5/00

Метки: китайского, клеток, культивируемых, продуцент, хомячка, человека, штамм, эритропоэтина

...клеток с овальными ядрами, содержащими мелкие ядрышки. По мере увеличения плотности слоя клетки уменьшаются в размерах и приобретают сферическую форму.Культуральные свойства. Штамм 25 СНО Еро,1 поддерживается на отечественных средах Игла(в отношении 1:1) с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота в виде монослойнойкультуры, Отделение клеток от стекла или пластика проводят смесью 0,25%-ного раствора трипсина и 0,02%- ного раствора версена (1:1 О), кратность рассева 1:6-1:8, посевная доза 2 х 10 ф -Зх 10 клеток на 1.см площади сосуда. Плотного монослоя культура достигает к 4-му дню после пассажа.Криоконсервация. Криоконсервирова-: ние проводят на среде Игла(1:1) с 20% сыворотки крупного рогатого скота и 7% диметилсульфоксида...