Патенты с меткой «культивируемых»

Номер патента: 1555360

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Вербицкий, Папазов, Фидлер

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гонадотропных, гормонов, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, субъединице, человека, штамм

...37 С, газовая фазавоздух +5% СО, Способ культивирования - в пластиковых флаконах на 50-." 25250 мл, посевная доза 500.000 клеток/мл, кратность рассева 1:2времясубкультивирования 3-4 дня,В организме животного - .мьппь ВАЯВ/собработанная пристаном (0,5 мл.в/бр.за 5-40 дней до инокуляции), доза,инокуляции 3-8 млн клеток, время образования асцита 10-20 дней,Характеристика продуцируемого продукта, Штамм гибридных клеток продуцирует монАТ 1 яС класса, направленныепротив,Ы-ХГЧ с-ЛГ, о(-ФСГ и с(-ТТГчеловека. Концентрация полезного продукта (монАТ против Ы-ХГЧ. с-ЛГ,Я-ФСГ и ТТГ человека) в культуральной среде около 10 мкл/мл,.в асцити"ческой жидкости - около 7 мг/мл, титры данных антител при определении спомощью твердофазного...

Номер патента: 1555361

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Вербицкий, Папазов, Фидлер

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гонадотропину, гормону, животных, клеток, коровы, культивируемых, лютеинизирующему, мusсulus, моноклональных, продуцент, свиньи, специфичных, хорионическому, человека, штамм

...воздух + 5 СО .Споооб культивирования в пластиковых флаконах на 50-250 мл, посев,ная доза 500000 клеток/мл, кратностьрассева 1:2, время субкультивирования 3-4 дня,Культивирование в организме животного, В организме животного -мышьВИ В/с, обработанная приставом(0,5 мп в/бр, за 5-40 дней до инокулицин)доза инокуляции 3-8 млн.кле- .ток, время образования асцита 1020 дней,40Продуктивность штамма, Концентрация полезного продукта (монАТ против р-ХГЧ, р-ЛГЧ, р-ЛГС, р-ЛГК) в. купьтуральной сРеде около 10 мкг/мл,в асцитической жидкости - около7 мг/йл.Титры данных антител при определении с помощью твердофазного иммуноферментного метода: 1:3000 - в культуральной среде, 2 х 10 - в асцитичес-кой жидкости, при концентрации антигеяа при нанесении в...

Номер патента: 1560549

Опубликовано: 30.04.1990

Авторы: Буларгина, Ездакова, Катруха, Сологуб, Федоров, Феоктистова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рогатого, скота, штамм

...активность.В культуральной жидкости монАТнакапливаются в титрах 1:500 - 1:1000(ИАФ) или 1:8 - 1:16 (РДП - реакциядиффузионной преципитации).В. асцитной жидкости титры в ИФА0,5 (10 -10 ), в РДП 1:160 - 1:640,Контаминация, Иикоплазмы, бакте 50рии, плесневые грибы и дрожжи невыявлены,Криоконсервирование, Среда для замораживания; 45% среды Игла, 457 эмбриональной сыворотки к,р.с., 107ДМСО, Режим замораживания до -30 Со 55со скоростью 1 град/мин до "ЗООС соскоростью 2 град/мин, далее - жидкийазот. Раэмораживают при 40 С, центрифугируют при 1000 об/мин в течение1 О мин, ресуспендируют в ростовойсреде до концентрации 0,510 кл/мл.Использование штамма и продуцируемых монАТ иллюстрируется следующимипримерами,П р и м е р 1. Клетки клона...

Номер патента: 1562353

Опубликовано: 07.05.1990

Авторы: Демчева, Папковский, Савицкий, Чередникова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, копропорфирину, культивируемых, мusсulus, моноклональных, штамм

...вводят 0,5 мл 2, 6, 10, 14-тетряметилпентядекана в/б. На 7 день штаммклеток инъецируют В/б в количестве500000 клеток в мышь. Асцитную жидкость отбирают на 12-4 день. Объемасцита 4-5 мл. Клетки из асцита перевиваются новым мышам в течение 8 ОО пассажеи без заметного изменениянТИТРЯ МОНОКЛОНЯЛЬНЫХ ЯНТИТЕЛ В ЯСЦИТНОЙ ЖИДКО С Ти еПродуктивность штаьола,Концентрация моноклональных антлтел в культуряльной жидкости на7 день культивирования 100 икг/мл,а в аситной жидкости 10-2 мг/мл приопределении по методу Лоури и методомтвердофязного иммуноферментного анализа.Контаминация: бактерии и грибы вкультуре не обнаружены, Тест на микоплазму отрицателен.Кариологическая характеристикаштамма: модяльное число хромосом 100.Маркерых хромосом не...

Номер патента: 1564184

Опубликовано: 15.05.1990

Авторы: Баев, Зеленин, Капник, Прудовский, Рубцов, Скрябин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гормону, животных, используемый, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рогатого, роста, скота, штамм

...замораживания - на программномзамораживателеС/мин до -70 С, затем перенос в жидкий азот и хранениев нем.При размораживании клеток послехранения в жидком азоте ампулы быстро 40опереносят в водяную баню при 37 С,слегка покачивая. Содержимое ампулыстерильно переносят в подогретую питательную среду в ячейки платы с макорофагамн, инкубируют при 37 С. После 4520-24 ч инкубации среду сливают идобавляют свежую подогретую питательную среду,Жизнеспособность после размораживания - 70%.50Контроль контаминаций.Проверку на микоплаэменное и бактериальное заражение осуществляли сиспользованием флуорохромов Хехст33258 и ДАПИ и посевом культуральной55среды на мясопептонный; агар. Заражения не обнаружено.Прививаемость животным изогенногопроисхождения -...

Номер патента: 1567624

Опубликовано: 30.05.1990

Авторы: Антропова, Барловская, Воробьев, Галактионов, Иванов, Маргулис, Пинаев, Фридлянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерферону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...проводят в смесиравных объемов в кондиционированнойростовой среды и 20-ного диметилсульфоксида на ростовой среде приконцентрации 0,5 10 кл. в 1 мл. Режим замораживания: 1 град в 1 мин от+20 до минус 60 С, 1 О град в 1 минот минус 60 до синус 100 С, 50 градв 1 мин от минус 100 до мину: 150 С,Клетки хранят в жидком азоте. Отогревают при 40 С в течение 1-2 мин,одалее разбавляют 10-кратным объемомсреды, центрифугируют 5 мин при1000 об/мин и высевают в ростовуюсредуЖизнеспособность клеток штамма 1580 после размораживания, определенная по включению трипановогосинего, составляет 60-701,Контаминация.Бактерии и грибы в культуре не обнаружены. Микроплазма не выявлена по включению тимидиновой метки,П р и м е р, Каждая мышь...

Номер патента: 1571063

Опубликовано: 15.06.1990

Авторы: Антропова, Барловская, Воробьев, Галактионов, Иванов, Маргулис, Пинаев, Фридлянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерферону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...проводится в смесиравных объемом кондиционированной ростовой среды и 20%-ного диметилсульфоксида на ростовой среде при концентрации0,5 -1 10 клеток в 1 мл. Режим заморажи 6вания: 1 амин от 20 до минус 60 С, 10 вмин от минус 60 до 100 С, 50 в мин отминус 100 доминус 150 С. Клетки хранят вжидком азоте. Отогревают при 40 С в течение 1-2 мин; далее разбавляют 10-кратнымобъемом среды, центрифугируют 5 мин при10 1000 об/мин и высевают в ростовую среду, Жизнеспособность клеток штамма 159 Д после размораживания, определенная повключению трипанового синего, 60-70%.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре не обнаружены, Микоплазма не выявлена по включению тимидиновой метки.П р и м е р, Каждая мышь линии ВА В/с...

Номер патента: 1576561

Опубликовано: 07.07.1990

Авторы: Барышников, Короткова, Тупицын

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, животных, клеток, кортикальных, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тимоцитов, человека, штамм

...КРИ 1 1640или среде МЕМ в 1 Х модификацииДульбекко, содержащей 15% телячьейзмбрйональной сыворотки, 2 мМ/мл глюгал 1 ина, 0,1 мг/мл гептамицина.Титр антител в культуральной жидкости определяют непрямой реакциейповерхностной иммунофлооресценции наживых тимоцитах, Интенсивность флюоресценции ацениваот на флюоресцентном микроскопе при увеличении объектива 40, окуляра 2,5-10.Титр антител в культуральной жидкости 1:50.Культивирование хп ч 1 чо. Для выращивания асцитной опухоли из штаммагибридных клеток пригодны мыши самкилинии ВА 1.В/С, Интактным мышам за 1-7днеи до прививки опухоли вводят внутрибрюшинно (в/бр) по 0,5 мл 3%-ногопептона на вазелиновом масле. Клеткигибридомы инъекцируют в/бр по 1 О кле 7так на мышь в 5 мл среды. Через...

Номер патента: 1583440

Опубликовано: 07.08.1990

Авторы: Алпатова, Баранова, Гольдрин, Кармышева, Кудинова, Миронова, Орлова, Попова, Стобецкий, Чернышев

МПК: C12N 5/00

Метки: африканской, вирусов, зеленой, клеток, кожи, культивируемых, мартышки, мышц, размножения, штамм, эмбриона

...имеет пластин" чатый характер, ядра округлые преимущественно с 1-2 ядрышками, На разных участках препаратов встречаются клет" ки с увеличенными ядрами, а также клетки с 2-3 и большим числом ядер (1-53), Среди митоэов имеются аномальные деления (многополюсные), с неправильным расположением и расхождением хромосом, местами неравномер- . ным делением ядер. Внутриядерных и цитоплазматических включений, вакуо" лизации и других признаков контами"нации клеток не обнаружено.Кариологическая характеристика,При кариологицеском изучении штамма 4 4921 на уровне 43 и 56 .пассажей уста"новлено, что штамм - гетероплоидный.Число хромосом колеблется от 57 до63. Модальный класс - с 61 хромосомой.Контроль штамма 4921 на посторонние контаминанть. При...

Номер патента: 1585329

Опубликовано: 15.08.1990

Авторы: Беркова, Добрынин, Коробко, Чувпило, Шамборант

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, некроза, опухоли, продуцент, фактору, человека, штамм

...4 С.Плашку отмьвает 0,1%-ным растворомтвина 20 в О, 01 М натрий-Фосфатномбуфере, содержащем 0,15 М МаС 1(ФСБТ), рН 7,2, инкубируют с 200 мкл1%-ного раствора бычьего сынороточного альбумина (БСА) в течение 1 чпри 37 С, Плашку отмывают 3-4 разаФСБТ и вносят в лунки по 50 мкл препарата, содержащего антитела. Послеинкубации в течение 1,5 ч при 37 Сплашку отмывают ФСБТ и обрабатьваютраствором антител к иммуноглобулинам мыши, конъюгиронанных с пероксидазой хрена (50 мкл в лунку, разведение 1:1000, 1 ч при 37 С). Затемплашку отмьвают и нносят 50 мклраствора ортофенилендиамина (1 мг/мл)н 1%-ном цитратном буфере (рН 4,5),содержащем 0,05% Н О. Реакцию останавливают добавлением 50 мкл влунку растнора 2 М серной кислоты.Взаимодействие...

Номер патента: 1585330

Опубликовано: 15.08.1990

Авторы: Карканица, Панютич

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: гемопоэтического, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, продуцент, ростового, фактора, штамм

...продукции,Продукция гемопоэтического ростового фактора мыши сохраняется как минимум до 60-ти пассажей 1 п ч 1 гго,Криоконсервирование,Для длительного хранения клеткиштамма эамораживают в эмбриональнойтелячьей сыворотке с добавлением 10%диметилсульфоксида. Режим замораживания; 1 С/мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкийазот, Размораживание на водяной банепри 37 С. Жизнеспособность клетокпосле размораживания 60-70% по ок"рашиванию трипановьм синим.Контаминация,Бактерии и грибы в культуре необнаружены при длительном наблюдениии посевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при.окрашивании красителями на ДНК и похарактеру включения тимидиновойметки.Использование штамма иллюстрируется...

Номер патента: 1445183

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Андросова, Владимирский, Ильиных, Погуляева, Трахт, Ходун

МПК: A61K 39/40, C12N 5/00

Метки: bcg, антител, воvis, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, штамм

...клеток 2 А 5 эамораживаютв эмбриональной телячьей сыворотке сдобавлением 10% ДМСО в жидком азотедля хранения. Другую часть используют для получения гибридной опухоли васцитной форме у мышей ВАЬВ/с введением внутрибрюшинно 10 клеток мы 7шам, подготовленным внутрибрюшиннойинъекцией 0,5 мл ваэелинового маслаэа 3-30 дней до инъекции клеток, Асцит образуется через 10-16 дней. Изасцнтической жидкости выделяют иммуноглобулины с помощью сульфата аммония, Штамм 2 А 5 хранится в Специализированной коллекции перевиваемьпссоматических клеток позвоночных Института цитологии АН СССР по номером600 и характеризуется следующимипризнаками,Культуральные признаки.Среда НРИ 1-1640 с 10% телячьей эмб-,риональной сыворотки и 10% лошадинойсыворотки, 4 мМ...

Номер патента: 1595902

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Барышников, Дубинкин, Заботина, Кадагидзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, кортикальных, культивируемых, мusсulus, моноклональных, сд38, тимоцитов, штамм

...и иэ положительной лун кй гибридому вновь клонируют. Колонки возникают на двенадцатый день в 58 из 96 лунок. Проводят скрининг на Т-клетках. Позитивные клоны поеле50 клонирования составляют 100% (58 иэ 58)Культивирование п чд 1 го. Для выращивания штамма используют пластиковую или стеклянную посуду. Во флаконобъемом 45 смэ в 5 мл среды запиваютпо 5 к 10 клеток штамма. Пассаж 1 разв 3-4 дня той же дозой, Штамм выращивают при 37 С на среде ВРМ 1-1640 илисреде МЕМ в 1 Х модификации Дульбекко,содержащей 15,0 оленьей или телячьейэмбриональной сыворотки; 2 мМ/мл глютамина; 0,1 мг/мл гентамицина,Культивирование п чиччо. Для выращивания опухоли из штамма гибридныхклеток пригодны мьппи самки линии;ВА 1 В/с, Интактным мьшам за 1-7 днейдо...

Номер патента: 1595903

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Гаврилова, Демчева, Егоров, Чередникова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...методу Лоури и в Е 1,1 БА,Криоконсервирование, Клетки штаммаресуспендируют в смеси, содержащей10% ДМСО, 30% Фетальной сыворотки и607. среды ДМЕМ, в концентрации 110клеток на 1 мл, разливают при 4 С впластиковые ампулы, помещают в полиуретановые контейнеры и переносят вхолодильник на -70 С на 18 ч, Затемклетки переносят в жидкий азот надлительное хранение. Размораживаниепроизводится при 37 С в водяной бане.Жизнеспособность клеток оцениваетсяс помощью трипанового синего и составляет 407,Концентрация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительг ном наблюдении. Тест на микоплазму отрицателен. П р и м е р, Моноклонапьные антитела используют для определения концентрации инсулина методом иммуноферментного анализа. В 96-луночные...

Номер патента: 1602866

Опубликовано: 30.10.1990

Авторы: Домогатский, Идельсон, Рудин, Трахт

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, коллагену, культивируемых, мusсulus, моноклональных, типа, человеческому, штамм

...канамицина, 5 мкг/мл фунгизона, 0,05 мИ 2-меркаптоэеанела при.37 С в атмосфере 5% углекислого газа. Характеристика полезного продукта штамма. Штамм продуцирует монокло-. нальные антитела - иммуноглобулины мыши класса Х. Эти антитела специфически евязываюшся с человеческими коллагеном 1 Ч типа, с незначительной переюрестной реакцией с коллагеном 1 типа. В пределах чувствительности использованных методов не обнаружено связывание с человеческими альбумином, фибувнойеном, фнбронектином и коллаге нами 1 И. и Ч типов. Присутствие плазмы иреви не влияет на взаимодействие мовокленальных антител с человеческим кэллагеном 1 Ч типа.Клетки штамма консервируют по 1 х х 106 клеток/мл сыворотки крупного рогатого скота с добавлением 10%...

Номер патента: 1602867

Опубликовано: 30.10.1990

Авторы: Домогатский, Идельсон, Рудин, Трахт

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, коллагену, культивируемых, мusсulus, моноклональных, типа, человеческому, штамм

...М. Эти антитела специфически связываются с человеческими коллагенами 1 и Т 11 типов, В пределах чувствительности использованных консервация. Клетки штамма консервируют по 1 х 10 клеток/мл сыворотки крупного рогатого скота с добавлением 10% диметилсульфоксида в пластиковых ампулах. Замораживание ампул проводят в коробке из вспененного полистирола с толщиной стенок 1 см. Коробку с ампуо лами оставляют при температуре -70 С и через 1 сут переносят ампулы в жидкий азот для хранения.Размораживание проводят быстро в водяной бане при 37 С Жизнеспособность после размораживания, оцениваемая по включению трипанового синего, составляет не менее 60%.Контаминация. Контаминация бактериями и грибами в культуре не обнаружена при длительном...

Номер патента: 1604848

Опубликовано: 07.11.1990

Авторы: Байтубаев, Булашев, Дмитриев, Касьянов, Муканов, Несмеянов, Ромахов

МПК: C12N 5/00

Метки: brucella, антител, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рода, штамм

...суспензия.Частота пассирования - через 2-3 сут,кратность рассева 1:3-1:4. Посевная55бконцентрация клеток 1-2 х 10 в 1 мл,Максимальная клеточная плотность0,5 мпн/мл.. Культивирование п чиччо.При внутрибрюшинной прививке мышам линии ВА 1 В/с штамм гибридомыобразует опухоль в асцитной форме на9-11 дни. Доза клеток при прививке2 х 10 кл . За 7 дней до введения6гибридомы необходимо инъецировать,животным пристан - 2, 6, 70, 14тетраметилпентадекан в дозе 0,5 млна головку. Штамм сохраняет способность продуцировать специфическиемоноклональные антитела в течение5 пассажей на сингенных мышах (времянаблюдения),Продуктивность штамма.На 3-4 день культивирования гибридомы концентрация МКА составляет45-50 мкг/мл в культуральной среде и8 мг/мл в...

Номер патента: 1604849

Опубликовано: 07.11.1990

Авторы: Байтубаев, Булашев, Дмитриев, Касьянов, Муканов, Несмеянов, Ромахов

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: brucella, антитела, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, рода, штамм

...-ние ночи. Полученные антителосодержащие материалы: супернатант и очищенную асцитную жидкость с конечнойконцентрацией иммуноглобулинов 8 мг/млиспользуют как реагенты для излученияспецифичности взаимодействия монАТ40 с тестируемыми антигенами с помощьюРМА и ТИФА,Характеристика полезного продукта,МонАТ относятся к классу 18 С подклассу 2 а. Они специфичны к эпитопу45 кор части полисахаридной цепи ЛПСбруцелл. Константа связывания 0,6 хх 10М.Методы оценки специфичности МКА:реакция микроагглютинации - (РМА) итвердофазный иммунофермвнтный анализ(ТИФА),Контаминация штамма. Контаминантовлинии, включая бактерии, грибы, дрожжи и микоплазму, не обнаружено.Криоконсервация. К осадку гибрид 55ных клеток добавляют .эмбриональнуюсыворотку теленка, а...

Номер патента: 1611930

Опубликовано: 07.12.1990

Авторы: Антропова, Балаян, Кусов, Маркова, Насташенко, Свердлов, Фридлянская, Царев, Чернова

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, вируса, гепатита, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рекомбинантному, человека, штамм

...Грибы, бактерии,микоплазма отсутствуют.Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом. Клеткисекретируют иммуноглобулины 18 С 6,взаимодействующие с рекомбинатнымбелком вируса гепатита А и цельнымвирусом в твердофазном иммуноферментном тесте. Эпитоп локализуется на .Фрагменте 171, 40Характеристика биосинтеза полезных продуктов. Титр антител в асцитной жидкости в иммуноферментном тесте при нанесении на твердую Фазу1 мкг/мл рекомбинатного белка виру-8са гепатита А составляет более 10Штамм стабилен около 30 пассажейп ухсго и 2 пассажа п чсго (срокнаблюдения),Криоконсервирование. Клетки замораживают в ростовой кондиционированной среде с 10% ДМСО. Режим замораживания и отогрева обычный для клеточных культур....

Номер патента: 1445184

Опубликовано: 23.12.1990

Авторы: Андросова, Владимирский, Трахт

МПК: A61K 39/40, C12N 5/00

Метки: антител, вскк, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, тuвеrсulоsis, штамм

...4 мМ Б-глютамина,10 мМ пи"увата а, 100 мкг/мл стрептомицина, 100 мкг/мл пенициллина,аминокислот для базальной среды Игла, витаминов для среды Игла и О 05 мм мер"каптоэтанола и выращивают при 37 Св атмосфере 5%-ной углекислоты. Посевная доза 10 клеток в 1 мл, Через53-4 дня концентрация антител в культуральной жидкости достигает 4555 мкг/мл. 0,95+ 0,05 О,3 .ь 0,02 0,04 + 0,03 с;.г 1 О ,а/Эти результаты свидетельствую о том, что полученные МЕА спе 1 ц.фически взаимодействуют с МусоЪасьегХцш 1 цЪегсц 1 оЫя, что позволяет получить на их основе эцафективгле диагносччческие препараты. 40 формула из обретения тамм гибридных культивируемых клеток животных Мця шаясц 1 пя ВСТЫК (П) И 62 В, используемый для получения моноклональных антител...

Номер патента: 1483946

Опубликовано: 30.12.1990

Авторы: Булычева, Данилевич, Митерев, Новикова

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, клеточного, культивируемых, лейкозам, лимфоидным, мusсulus, моноклональных, продуцент, ряда, т-лимфоцитам, человека, штамм

...установку при -70 фС, послечего переносят в жидкий азот, Оттаивание производят при 37 С в течение1,5 мин.,Жизнеспособность клетокпри размораживании составляет 7090 Ж.Сведения о контаминантах ликии,Бактерии, грибы, дрожжй и мико- уплазма не обнаружены.П р и и е р 1, Исследование спе"цифичиости. Специфичность МКА вкультуральной жидкости клеток гибридного штамма ВСА(1 Р 12) и асцитнойжидкости к антигеиам мембран различ"ных типок клеток определяют в микро"луночкой модификации реакции непрямой иммунофлюоресценции. На первом этапе реакции.1-2 х 10 живых клеток,прикрепленных к микролунке стеклаили находящихся в микролунке микротитраторной пластины, соединяют с20-30 мкл культуральной жидкости илиасцита в разведении 1:1.0 " 1:200 и инкубируют...

Номер патента: 1496266

Опубликовано: 07.01.1991

Авторы: Алликметс, Аточина, Данилов, Духанина, Молдобаева, Сахаров, Трахт

МПК: C12N 5/00

Метки: ангиотензин, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, легких, мusсulus, моноклональных, превращающего, продуцент, против, фермента, человека, штамм

...бактериями, грибками н микоплазмой не обнаружена,Использование штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридомные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см по 5 10 в 5 мл средыеВРМ 1-1640 с 10/-ной эмбриональнойтелячьей сывороткой, 10 ,-ной лошадиной сывороткой, 4 мМ глютамина,10 мМ пирувата натрия 100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицииаи 0,03 мМ меркаптоэтанола, клеткикультивируют 3-4 дня при 37 фС в атмосфере, содержащей 5 . СО . Для полу 6чения асцитной опухоли 2-5 1 О гибридомиых клеток вводят в брюшнуюполость мьппей ВАЯВ/С, обработанныхпристаном, Через 2-3 недели собираютасцитную жидкость, и иммуноглобулины осаждают сульфатом натрия. Осадок растворяют в 0,2 М боратном буфере...

Номер патента: 1622395

Опубликовано: 23.01.1991

Авторы: Маркелов, Павлова, Прасолов, Фролова, Чумаков

МПК: C12N 15/00

Метки: pps-4-neo, введения, вектор, генов, клетках, культивируемых, млекопитающих, соматических, экспрессии

...расщопляют ЕсоК 1 и Ньпд 111, меньший Фрагмент, содержащий промотор БЧ 40, ген устойчивости к ампициллину и огдрВК 322 выделяют электроФорезом в легкоплавкой агарозе (1 ЛРА) нлигируют с большим Фрагментом плазмиды ИИТ ЧВНРР, расщепленной ЕсоК 1 и НпдП 1, обработанной фосфатазой и очищенной электрофорезом в 1,ИРА. Е результатеполучают плазмиду р 1, содержащую ген РНРК под контролем раннего промотора БЧ 40Получение плазмиды р 2. Нлазмиду р 1 расщепляют Рщ 11, дефосфорилируют с помощью фосфатазы из тимуса теленка (С 1 Р), очищают электроФорезом в 1.ИРА и лигируют синтетическим 8-членным ЕсоК 1 линкером. В результате получают плазмиду рЗ, содержащую слева от промотора БЧ 40 сайт ЕсоК 1.Получение плазмиды рЗ. Плазмиду р 2 расщепляют Нпд...

Номер патента: 1622396

Опубликовано: 23.01.1991

Авторы: Маркелов, Павлова, Прасолов, Фролова, Чумаков

МПК: C12N 15/79

Метки: pps-5-neo, введения, вектор, генов, клетках, культивируемых, млекопитающих, соматических, экспрессии

...под контроль промоторацитомегалловируса. 20Конструирование ретронирусноговектора рРЯ-пео приницпиально состоит в следующем. В вектор рРБ-пеовводят сильный конститутивный промотор цитомегаллонируса с однонременной инактивацией одного иэ двух сайтов Ба 11 в полилинкерной области.Введение чужеродных генов в клетки млекопитающих с помощью векторарРБ-пео осуществляют в два этапа.1. ДНК, вектора рРБ-пео с встроенным н него геном внодят методомДНК-трансфекции в клетки, экспрессирующие структурные белки вируса лейкоза мьппей (клетки ( 2 или подобные).2. После селекции клеток, экспрессирующих ретронирусный конструкт, насреде с генетицином производят сборвирусоподобных частиц из среды культивирования клеток и заражают клетки, в которых...

Номер патента: 1627557

Опубликовано: 15.02.1991

Авторы: Адомайтене, Велецкайте, Дикинене, Иванаускас, Маурицас, Микалаускене, Тамошюнас

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белка, вируса, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, лейкоза, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, штамм

...рассевд 1:6. Клонцро 1 ац е клеток проводят в 96-ячеечцых ;латахс иг.пользованием в качестве пи гдющего:лоя макро 1 дгсн мынеь. сеци 11 ическая эффективность 3-го клонирования составляет 9871 1 окоцгерцдц, роноят н ыворотьо мбриоцов кор,в с доба. ление 1О диметпл уь Ьс ксидд, 507 сыор л ки эмбрион.,в крупного рогатогоа .когд при коццс.цтрции 1 х 10 клет кьмл. 1 иэнеспособцость сле; окшдыма после размораживация состав дет ЯОь.Пр,нивка по 10 клеток штамма111.Ч-р 24-Ч 1 сингенцым предобрдботаццьпмышам вызывает у цих обрдзовацедсцитцой опухоли, сопровождающе ся выделением асцитной жидкости г ко лычесгне 1-5 мл. В асцитцо;1 ждкост содержатся специфические моцЛТ к белку р 24 вируса лейкоза КРС, Способность продуцировать мо 1 Л 1...

Номер патента: 1631072

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Баринский, Грибенча, Клюшник, Свешников, Северин, Фуралев

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, бешенства, вируса, гибридных, гликопротеидному, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, структурному, штамм

...животных.В брюшную полость мышей линииВаТЬ/с, предварительно сенсибилизированных за 1-2 недели внутрибрюшинной инъекцией 0,3-0,5 мл минерального масла 2, 4, 10, 14 тетраметилГпентадеканом, вводят гибридные клетки, Время образования опухолей 912 сут; на протяжении десяти пассажей наблюдается 100%-ная перевиваемость асцитов.Морфология клеток.Культура состоит из слабо прикреп -ляющихся к субстрату округлых клетокразличной величины с крупными ядрами, Цитоплазма имеет вид тонкогоободка.Кариология.Кариотип соответствует виду (мышиный), С помощью окраски по С-методу три маркерные хромосомы, привнесенные в эту линию от родительскоймиеломной линии.Продуктивность штамма.Итамм гибридомы Крив-С 5 продуцирует моноклональные антитела...

Номер патента: 1631073

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Баринский, Василенко, Грибенча, Клюшник, Свешников, Северин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, бешенства, вируса, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, нуклеопротеидному, структурному, штамм

...(1 МФЛ), атакде в непрямой реакции иммуноФермецтцого анализа (НИФА) как в куль -туре клеток, так и в отпечатках головного мозга заражецного бегпенствомживотного.Класс иммуноглобулинов1 тамм гибридных клеток Крив-Л 7секретирует антитела класса Тг-;-1,Криоконсервирование, Клетки КривЛ 7 замораживают ца 8 пассажа,Общее количестг,о ампул 20 по 23 млн клеток, Криозащитцая среда с25 507. эггбриоггальггой телячьей сыворотки и 107.;ггСО-дгзметггзгсульФоксида,Выживаемость при размораживании 60707,.Контаминация. Бактерии, грибыи дрожжи це об 1 гаружены,Использование штамма цллгострируется следугогпгпг примером.В культуральцые матрасы вместимостью 250-500 мл засевают гибрцд 35цые к:гетки Крив-Л 7 в концентрации100-150 тыс/мл в...

Номер патента: 1631074

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, фетопротеина, человека, штамм

...Пассирование прово 15 дят один раз в 3-4 дня той же дозойклеток (без подсчета клеток их рассеивают из одного флакона на три).Титр антител в культуральной средепри определении иммуноферментным ме 20 тодом 2110 .Для культивирования 1.п ,1 о мышам БАЕВ/с, сенсибилизированнымпристаном (0,5 мл внутрибрюшинно) за7 дней до прививки гибридом, вводят25 внутрибрюшинно О 10 - 10 клетокб 7штамма С 9-8 ч в 2 мл среды КР.11 с гентамицином, Асцитическую жидкость забирают у живых мышей по мере ее накопления, повторяя забор асцита уодной и той же мыши не менее 3 раз.Асцитный штамм перевивают на свеюк6Фмышей (510 - 10клеток на мышь),проводя не более трех пассажей. В пулах асцитов, полученных От разныхживотных и в разных взятиях титр антител при...

Номер патента: 1631075

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, фетопротеина, человека, штамм

...2 мл среды НРИ 1 с гентамицином. Асцитическую жидкость забирают у живых мьпдей по мере ее накопления, повторяя забор асцита у одной и той же мыши не менее 3 раз, Асцитный штамм перевивают на свежих мышей( 10 - 10 клеток на мышь), проводяг, 6 7не более трех пассажей. В пулах асцитов, полученныхот разных животных ц в разных взятиях, титр антител приопределении иммуноферментным методом достигает значения 10Модальное число хромосом 79.Продуктивность штамма. В 1 млкультуральной среды содержится неболее 10-20 мкг антител, а в асцитической жидкости не менее 5 кг/мл антител.Контаминация. Контаминация бактериями и грибами в штамме не обнаружена.Криоконсервирование, Клетки штамма ресуспендируют в среде для замораживания, состоящей нз...

Номер патента: 1631076

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/06, C12P 21/08

Метки: альфа, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, фетопротеина, человека, штамм

...проводят один раз в 3-4 дня той же до - зой клеток (без подсчета клеток их рассеивают из одного Алакона на три), Титр антител в культуральной среде при определении иммунолерментным методом равен 2 х 10Для культивирования дп чьего мьппам ВАГАБ/с, сенсибилизированным пристаном (0,5 мл внутрибрюшинно) за 7 дней до прививки гибридом, вводят внутрибрюшинно 5 х 10 -10 клеток штамь 7ма 010-84 в 2 мл среды ЕР 1 П с гента - мицином. Асцитическую жидкость забирают у живых мышей, по мере ее накопления, повторяя забор асцита у одной и той же мыши не менее 3 раз.Асцитный штамм перевивают на свежих7мышей (5 х 10 -10 клеток на мышь), проводя не более трех пассажей. В пулах асцитов, полученных от разных животных и в разных взятиях, титр антител при...