Способ получения хинолинтиоэфиров или их фармацевтически пригодных солей присоединения кислот

СОЮЗ СОВЕТ СОЦИАЛИСТ РЕСПУБЛИК ИХ(51)5 С 07 П 215/38 САНИЕ ИЗОБРЕТЕН Н ПАТЕНТ идг оей активност обретения ние относи ся к способу х хинолинтиоевтически при ения кислот, апевтическими ревосходяшитой же акт руктурныистью. вых прость пол эфи год ов или 1 м сол и фарма соеди ми те,62 г (О, ла раство гидроксид моль) яют нате нижеобладающим ценн своиствами Цель из соединенийЯ температу г (0,15 у хи ол) ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯРИ ГКНТ СССР(72) Йожеф Кнолл, Каталин Будаи,Эдит Береньи, Илдико 11 иклиа,Иартон Фекете, Габриелла Билла,Берта Кнолл, Аттила Ианди,Луиза Петец, Иштван Дьертиани Иштван Гачальи (НЦ)(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХИНОЛИНТИОЭФИРОВ ИЛИ ИХ ФАРИАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИГОДНЫХСОЛЕЙ ПРИСОЕДИНЕНИЯ КИСЛОТ(57) Изобретение касается холинтиоэфиров, в частности получения соединений общей ф-лы Б-В,"КН,2где К = С 1-С-алкил, С-С-алкенил (или алкинил); Х и Х (равны или различны) = Н, галоген, при условии,что если К = этил, то по меньшей мере один из 11., Х и Х ф Н, или их фармацевтически пригодных солей присоединения кислот, обладающих анксиолитическим действием, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых, более активных веществ указанного класса, Синтез ведут введением группы К в соответствующий тиол с помощью Р.-Х, где Х - удаляемая группа, с последующим выделением целевого продукта или переводом его в нужную соль, Новые вещества в сравнении с известным хлордиазоэпоксидом значительно активнее, например, 3-амино-этилтио-хлорхолин гидрохлор в 20 раз активнее при дозе 10 мг/к и токсичности 465 мг/кг (для ЛД ) при меньшем в 5 раз седативном эффек-, те. 6 табл. Пример 1. 1 . 3-амино-хинолинти в 50 мл 2 И раствора рия, после чего при 40 С добавляют 21,2метилиодида. Реакционную смесь перем.шивают час при 40 С. Продукт экстрагируют хлороФормом, осветляют активным углем и концентрируют, Полу 5 чают 18,6 г 3-амино-метилтиохинолина. Вы 1 сод 94,67,. Т.пл. 96-98 С (из метанола) .19 г (О,1 моль) указанного основания растворяют в 150 мл этилацета та, после чего добавляют солянокислый этанол. Получают 21 г 3-амино- . метилтиохинолин гидрохлорида. Выход 957., т.пл. 228-229 С (разложение).П р и м е р ы 2-11, По аналогии с 15 примером 1 получают следующие, перечисленные в табл.1, соединения. П р и м е р 12. 21,06 г (0,1 моль) 3-амино-хлор-хинолинтиола раст воряют в 100 мл 2 И раствора гидроксида натрия. После добавки 23,3 О г (0,125 моль) этилового эйира бензолсульФокислоты реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в те чение 2 ч.ФОбразовавшийся продукт экстрагируют хлороФормом. Хлороформный раствор осветляют активным углем, высушивают и подкисляют солянокислым спиртом, Получают 24,0 г 3-амино-этилтио-хлорхинолин гидрохлорида, Выход 85. После кристаллизации из метанола продукт плавится при 212 216 С (разложение). Продукт идентичен полученному в примере 5 соединению.П р и м е р 13. 22,67 г (0,1 моль) 3-амино-метилтиохинолин гидрохлорида или 19,02 г (0,1 моль) соот ветствующего основания растворяют в 125 мл пиридина, после чего при 10-150 С добавляют 10,7 г (О,105 моль) уксусного ангидрида, Когда желтая окраска раствора исчезнет, реакцион ную смесь выливают в 1000 мл воды, Выделившиеся белые кристаллы отфильтровывают, Получают 20,9 г .3-ацетиламино-метилтиохинолийа. Выход 90 Е. Т,пл. 137-138 С (из этилацетата),П р и м е р ы 14-19, Но аналогии с примером 13 получают указанные втабл.2. соединения.П р и м е р 20. 21,06 г (0,1 моль) 3-амино-хлор-хинолинтиола раст 55 воряют в 100 мл 2 М раствора гидроксида натрия, после чего добавляют19,27 г (0,125 моль) диэтилсульФата. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч, затем охлаждают до комнатной температуры и экстрагируют дихлорэтаном, Дихлорэтановый раствор высушивают, осветляют и выпаривают. Получают 20,2 г 3-амино-этилтио-хлорхинолина. Выход 857,. После кристаллизации из метанола продукт плавится при 105-106 С.11,9 г (0,05 моль) указанного основания обрабатывают 150 мл этилацетата. После добавки солянокислого этанола отФильтровывают выделившиеся кристаллы, Получают 13,0 г 3-амино-этилтио-хлорхинолин гидрохлорида. Выход 957. Т.пл. 212-216 С. Продукт идентичен полученному в примере 5 соединению.П р и м е р 21. По аналогии с примером 20 получают 3-амино-хлор- метилтиохинолин гидрохлорид. Выход 80 Е. Т.пл. 235 в 237.П р и м е р 22. Описанным в примере 1 способом .получают следуюшие соенения: 3-амино-этилтио-хлорхинолин гидрохлорид (выход 85 Е, т.пл.250-252 С); З-амино-этилтио,7- диметоксихинолин гидрохлорид (выход 807., т.пл, 210-212 С),Фармакологический спектр действия предлагаемых в изобретении новых соединений общей Формулыдоказывается, руководствуясь тест-испытаниями типичного представителя. В качестве тест-соединения используется 3-амино-этилтио-хлорхинолин гидрохлорид (далее называется соединение А).Острая токсичность. Определяется на СРУ-крысах с весом тела 100-160 г. Используют по 1 О крыс на каждую подопытную группу. Соединение А вводится в объеме 10 мл/кг орально. Животных перед началом опыта в течение 16 ч не кормят. Каждую дозу вводят группе крыс, состоящей из 507. самцов и 50% самок животныхРегистрируют происшедшую в течение 48 ч гибель. ЛД 0-значения определяют с,помошью метода ЬхйсЫ 1 е 1 Й и И 1 сохоп; ЛД - 465 мг/кг перорально.Определение корреляций между анксиолитическим и седативным действием. Измерение анксиолитического действия тест-соединения основано на том принципе, что наблюдают проявляемую в конФликтной ситуации активность тест- соединения. Осуществляется награди- тельная реакция, после чего эту наступившую реакцию оттесняют благодаря-5 160 наказанию. Анксиолитическое действие измеряется на основании определения, вызванного за счет тест-соединения увеличения реакции наказания. В качестве меры седативного действия служит вызванное тест-соединением уменьшение реакции ненаказания.Подопытных крыс лишают корма в течение 96 ч; в течение этого периода времени, однако, животные получают питьевую воду для выживания. В течение четырехдневного периода отсутствия корма животные выпивают около 7 мл воды, причем прием воды крысами, которые получают сухой корм,возрастает до 35 мл/дн, Это означает, что если питьевая труба электрически связана с образующей дно клетки решеткой и животным, которое пытается пить, систематически подвергают удару электрическим током, то крысу, которая не может принимать корм без питья, максимально заставляют устранять препятствие на пути. Указанный тест представляет собой очень чувствительный метод определения анксиолитического действия.Самцов СРУ-крыс (вес тела 230 - 250 г) постоянно держат на стандартных кормовых гранулах; животные получают водопроводную воду для выживания, Животных в виде групп, состоящих из 10 крыс каждая, держат в течение 2 нед при стандартных условиях окружающей среды (при 22-24 С) вплоть до начала испытания. Содержащихся отдельно в клетках крыс лишают корма в течение 96 ч, с начала испытания животные получают водопроводную воду для выживания.После испытаний отбирают тех животных, у которых в период голодания уменьшение веса тела составляет не более, чем 80 г.Уменьшение веса тела используемых в вышеуказанном тесте 550 СРУ самцов крыс составляет в среднем 66 г.Другая точка зрения в. выборе живот. ных в том, что животные после периода голодания визуально обладают хорошим физическим состоянием и должны показывать нормальную активность. Из-за неудовлетворительного физического состояния нужно исключать менее чем 102 животных.Для испытания используют коробку (39 х 27 х 12 см), которая изготовлена из прозрачного плексигласа и снабже 9446 бна решетчатым дном (для кормовыхгранул) и трубой для питьевой воды.Решетчатое дно, труба для питьевойводы и электрический стимулятор(Ьгазз 48) электрически связаны сцепью тока, в интервалы времени 20 сосуществляются длительностью 10 сэлектрические удары током. Параметрытока (100 В, 25 Ом, 7,5 с, 5 Гц) эмпирически выбираются так, что электрические удары током в случае оченьголодных крыс уменьшают принятие водына одну треть по сравнению с контрольным значением (безнаказуемое значение).После 96-часового периода лишениякорма животных переправляют на часв устройство. Очень голодные крысы 20 спустя длительный период голодания.в первый час съедают 5-6 г кормовыхгранул. Поглощение воды очень голодными крысами измеряется в первый часпериода кормления, в ненаказуемой 25 группе крыс прием воды составляет6-7 мл. При воздействии наказанияприем воды снижается до величины ниже 3 мл.Тест-соединение вводится перенте рально в дозе 0,5 мл/100 г веса тела.Из-за длительного периода лишениякорма мы воздерживались от оральноговведения биологически активного вещества.Для статического анализа служитВйийеп 1 "С"-тест. Анксиолитическоедействие определяется на наказываемых, а седативная активность - наненаказываемых животных.40 Корреляция между анксиолитическими и седативными действиями хлордиазоэпоксида (действие на ненаказуемое и наказуемое поведение в"конфликтном тесте ) представлена в 45 табл.3,Хлордиазоэпоксид оказывает характеристическое анксиолитическое действие в дозе О,1 мг/кг подкожно,причем седативная доза составляет 50 10 мг кгТак как хлордиазоэпоксид оказывает свое действие как воздействующийна бензодиазепиновые рецепторы агонист, анксиолитическое действие этого биологически активного веществаантагонизируется за счет обозначаемых как "2 0-15-1788" селективныхантагонистов бензодиазепиновых рецепторов.Антагонизирование анксиолитическогс действия хлордиазоэпоксида благодаря "К 015-1788" в "конфликтном тесте" представлено в табл.4.5Анксиолитическая активность соединения А на ненаказуемое и наказуемое11поведение в конфликтном тесте дана в табл.5,В этом тесте соединение Апоказывает примерно в 20 раз усиленное 10 анксиолитическое действие, чем хлордиазоэпоксид.Антагонизирование анксиолитической, активности соединения А за счет антагонистов "К 0-15-1788" в "конфлитном 15 тесте" показано в табл,6.1 35 Найдено, что соотношение седативных и анксиолитических доз для хлордиазоэпоксида составляет 10:0,1100 (см. табл.3), причем в случае соединения А это соотношение составляет 2,5:0,005 = 500 (см. табл,5).Определение связывания соединения А с бензодиазепиновыми рецепто рами. Ин витра связывание соединения А, по сравнению с хпордиазоэпоксидом, определяется на препаратах мозговых мембран крыс. Кору головногомозга самцов СРУ гомогенизируют в 0,32 М сахарозе при применении снабженного тефлоновой ступкой стеклянного гомдгенизатора. Ядро (НШс 1 еиз) уплотняют (сжигают) в течение 15 мин при 1000 я. Надосадочную жидкость центрифугируют при 40000 ц в течение15 мин. Осадок после центрифугироваМия гомогенизируют в 5 мМ трис-цитратном буфере (рН=7,1) с помощью Политрона Р 10 и лизируют при О Св течение 5 мин. Смесь центрифугируют при 40000 я в течение 15 мин, осадок после центрифугирования обрабатывают в 50 мМ трис-цитратном буфере (рН = 7,1) и оставляют на ночь при -20 С. После размораживания иОцентрифугирования (при 40000 н, в течение 15 мин) осадок после центрифугирования промывают трижды 50 мМтрис-цитратным буфером (рН 7,1). Та 50ким образом, полученный осадок послецентрифугирования обрабатывают вобъемном соотношении 1:30 указаннымбуфером.Лиганд: 2 нМ Н-Диазепам (удель 9ная активность 86 С (миллимоль). Ин 55окубация: при 0-4 С, в течение часа, в 50 мМ трис-цитратном буфере (рН7,1). Конечный объем 0,25 мл. Последняя концентрация белка примерно 0,5 мг/мл.Связывание прерывают путем разбавления холодным буфером, и смесь быстро фильтруют через фильтровальнуюбумагу СР/В Ватман. Для вытеснениябиологически активное вещество используется в 6 различных концентрациях,причем осуществляют по 3 параллели.Опыты повторяют дважды. СоединениеА растворяется в концентрированнойуксусной кислоте и в дистиллированной воде и далее 10 М раствор разбавляется инкубационным буфером.Раствор .холостой пробы происходит ука -занным образом, но без биологическиактивного вещества.Хлордиазоэпаксид и соединение Авытесняют Н-Диазепам из рецепторовзависящим от концентраций образом.1 С -значения для обоих биологически активных веществ попадают в одинаковый концентрационный интервал.Принимая во внимание то, что холостая проба в концентрациях ниже-410 моль не вытесняет маркированныйФизотопом Диазепам, можно исключитьоказываемое на соединение А действиеуксусной кислоты.Действие соединения А на электрогенные и вызываемые лекарственнымисредствами судорогиСоединение А непредотвращает вызванную при оральнойдозе вплоть до 200 мг/кг пентаметаэолом, отрихнином и пикротоксином суорогу и показывает на крысах противвызванной электрошоком судороги только очень слабое защитное действие,Инъекцированная в количестве120 мг/кг подкожно доза пентаметазола на передних и задних конечностяхкрыс вызывает судорогообразные вывихи, и погибают 1002 животных. В случае, если животным до. инъецирования 120 мг/кг подкожной дозы пентаметазола вводят в дозе 10 мг/кг диазепам или фенобарбитал натрия, тосудороги облегчаются, животные остаются жить и не умирает ни одна таким.образом предварительно обработанныхкрыс, В противоположность этому,осуществленная с помощью 200 мг/кг соединения А предварительная обработкане облегчает силы вызванных за счетпентаметазола судорог, и ни одна кры.са не переживает опыт,Соединение А в дозе 200 мг/кг неоказывает никакого влияния на антиконвульсивное действие диазепама (10 мг/кг).Вызванные стрихнином (2,5 мг/кг подкожно) смертельные судороги антагонизируются отчасти благодаря5 дозе 50 мг/кг фенобарбитала натрия и дозе 1 О мг/кг диаэепама (размер гибели составляет 407 в сравнении с 807), в противоположность этому соединение А такке в дозе 200 мг/кг оказывается полностью неактивным.Вызванные пикротоксином (10 мг/кг подкожно) смертельные судороги легко антагонизируются дозой фенобарбитала натрия 50 мг/кг (размер гибели 807). В противоположность этому, у предварительно обработанных диазепамом или соединением А крыс действие судорог остается неизменным.На вызванные электрошоком смертельные судороги легко влияют благодаря дозе 200 мг/кг соединения А (707 животных умирают), причем осуществляемая с помощью дозы 30-50 мг/кг бено барбитала натрия предварительная обработка полностью защищает крыс от электрогенных судорог, а диазепам спасает жизнь 807 животных.Из указанного следует, что сог ласно испытаниям на животных соединение А - сильное и селективное анксиолитическое биологически активное вешество. Анксиолитическое действие вероятно связано с бензодиазепиновыми рецепторами. В процессе клинического применения, однако, соединение А в противоположность бензодиазепинам практически лишено седативных и антиконвульсивиых действий. 4 О Предметом изобретения являются фармацевтические препараты, которые в качестве биологически активного вещества содержит по меньшей мере соеФ45 динение общей формулы 1 или его фармацевтически пригодную соль присое-.динения кислоты и пригодные инертные, твердые или жидкие фармацевтические. носители.Биологически активное вещество можно приготовлять в. пригодной для орального (например, таблетки,покрытые оболочкой таблетки, драже, мягкие и твердые желатинавые капсулы, растворы, эмульстг или суспензии), парентерального (например, инъенируемые растворы) или ректального (например, свечи) введения форме. Предлагаемые согласно изобретени 9фармацевтические препараты можно приготовлять по известным способам путемсмешения биологически активного вещества с пригодными инертными, твердыми или жидкими, органическими или неорганическими, фармацевтическими носителями.При приготовлении таблеток, покрытых оболочкой таблеток, драже и твер-дых желатиновых капсул в качестве носителей (основ) можно применять, например, лактозу, кукурузный крахмал,картофельный крахмал, тальк, карбонатмагния, стеарат магния, карбонат кальция, стеариновую кислоту и се солии т.д. 11 ягкие желатиновые капсулы могут содержать в качестве носителей,.например, растительные масла, жиры,воски или многоатомные спирты пригодной консистенции. При приготовлениирастворов и сиропов в качестве носителей могут найти применение, например, вода, многоатомные спирты, полиэтиленгликоль,сахароза или глюкоза.Инъецируемые растворы могут содержатьв качестве носителей, например, воду,спирты, многоатомные спирты, глицерин или растительные маслаПри приготовлении свечей в качестве носителей можно использовать, например,масла, воски, жиры и многоатомные спирты пригодной консистенции.1 редлагаемые в изобретении фармацевтические препараты могут содержать обычные вспомогательные вещества (например, смачиватели, диспергаторы, консерванты, эмульгаторы,красители, подслащивакппие вещества, ароматизирующие вещества, соли для изменения осмотического давления, буферыи т,д.) и/или другие фармацевтические активные вещества,Соединения общей формулы 1 могутпредпочтительно вводиться в виде таблеток или капсул орально. Таблетки икапсулы с содержанием биологическиактивного вещества 2,5-50 мг оказались предпочтительными. Суточная доза соединений общей формулы 1 можетизменяться в широких пределах и зависит от многих факторов (например,активность биологически активноговещества, состояние и возраст пациентов, тяжесть заболевания и т.д.),Суточная оральная доза составляет вобщем примерно 1-300 мг, причем суточная парентеральная доза в общем1609446 ет этил, то по меньшей мере один из радикалов К,Х 4 и Лг отличен от водорода5или их фармацевтически пригодных солей присоединения кислот, о т л и -ч а ю щ и й с я тем, что 3-аминохинолинтиол общей формулы,О 2%дгде К 1 - С - С, - алкил, С -С .-алкенйл,С -С -алкинил; где Х и Х имеют укаэанные значения, подвергают взаимодействию с соединением общей формулыК - Х)где К имеет указанные значения;Х означает удаляемую группу, с выделением целевого продукта или с переводом полученных продуктов в их фармацевтически пригодные соли. Х иХг 20 Таблица 1 Соединейне Выход,Е Т.пл., С Пример 3-Амино-(и-пропилтио)хинолин НС 13-Амино-бенэилтиохинолин НС 13-Амино-хлор-метилтиохино-лин НС 13-Амино-этилтио-хлорхинолинфНС 13-Амино"хлор-изопропилтиохинолин НС 1 80 16 8-1 7085 214-215 84 235-237 80 214-216 78 232-233 (разложение) 7 3-Амино-хлор-(н-пропилтио) хинолин НС 1 86 209-210(разложение) З-Амино-аллилтио-.хлорхинолин ф НС 13-Амико-хлор-проп аргилтиохинолинфНС 13-Амино-бензилтио-хлорхинолин НС 113-Амино-хлор-(4-хлор-бенэилтио)хинолинНС 1 10 85 215 (разложение) находится в пределах примерно 0,5 150 мг. Указанные интервалы только информативного характера, Фактическая доза может быть также .выше или ниже указанных пределов и всегда определяется врачом.Формула и з о б р е т е н и яСпособ получения хинолинтиоэфиров общей формулымогут быть оцинаковымиили разными и обозначаютводород или галоген приусловии, что если К 1 означа 82 210-212 84 222-223 80 228-230+ р 0,05;р 0,00.Хлордиазоэпоксид вводится за 30 мин до начала опыта подкожно. Число животных указано в скобках.Таблица 4 1788/кг ст 1:2, р(0,05 2:3, н.з 2:4, п.з 2:5, р 40,05 0,1 0,1 0,1 е. Хлордиазозноксид вводитсяподкожно, а веществоК 0 15-1788 - интраперитонеально за 30 дн до начала римеча к от опыта (числ но в скобк 1 02 0,053 О,4 0,255 0,56 17 2,58 59 10 5,8+0,32 (10)5 1+О 56 (1 О)5;8+0,42 (10)6,2+0,3 (10)7,4+0,77 (10)5,4+0,68 (1 О)5,20,72 (10)5,4+0,62 (15)1,8+0,30" (О) 2,810,44 (10) 4, 1+0,31 (30) 4,1+0,59 (10) 3,9 ф 0,43 (15) 2,8+0,49 (15) 2,8+0,44 (10) 3,5+0,47 (15) 4,1+0,31 (30) 3,5:0,62 (10) 3,1+0,54 (10) 2,7+0,58 (10) 4, +0,39(10) 2,4+0,31 (10) 1,6+0,26 (10)ненаказуемо поведение Наказуемо поведение 2, 7+0,35 2,2+0,32 3,8+0,19 3,7+0,44 3,0+0,27 1,94 0,35 1 0 2 2 р0,001.Соединениеопыта. Числ вводится за 30 мин до начал животных указано в скобках. Т а б л и ц а 6 Прием воды,мл,в наказуемом Значимость состоянии пыт за Соединение .А, К 0мкг/кг 15-178мг/кг 2,7+0,35 (21) 4,2+0,37 Л 9) 3,1+0,69 (8) 2,4+0,39 (9) 0 01020 2, р(0,01 3, р (0,05 4, р(0,01 3 Соединение А вводиа вещество Р. 0 15 неально за 30 мин дЧисло животных ука Примечание я подкожно88-интраперито начала опыта.но в скобках. Составитель Г.ЖуковаТехред М.Ходанич Корректор Н.Корол Данко Редакто П етениям иаказ 3627 Тираж 331НИИПИ Государственного комитета и113035, Москва, Жисно открытиям при ГКНТ СССР д. 4/5 изЭ шская н Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 7,2+0,84 (10)