Патенты с меткой «моноклональных»

Номер патента: 1710576

Опубликовано: 07.02.1992

Авторы: Ионов, Юрин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...жидкости 30 мкг/мп, в асцитной жидкости 12 мг/мл. Стабильностьпродуцирования антител сохраняется напротяжении 20 пассажей в культуре и 7пассажей на животных, если гибридомаперевивается.Контаминация. Бактерии и грибы. в культурах не обнаружены при длительном наблюдении ипосевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и тимидиновом промечиванин культуральной среды.Консервация клеток.Клетки штаммов замораживают после2 и 3 клонирования на 10 .и 15 пассажахв культуре и после роста в внде.асцитной опухоли в мышах. Криозащитная среда 50% ростовой среды, 40% эмбриональной телячьей сыворотки и 10% диметилсульфокеида,Режим замораживания: клетки в кри-озащитной среде помещают на сутки...

Номер патента: 1710577

Опубликовано: 07.02.1992

Авторы: Ионов, Юрин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...на мышах, Титр антител в культуральной жидкости составляет 1:128 а в асцитической1:100000.Продуктивность.Концентрация антител, продуцируемых5 штаммом 04 В 8, составляет в культурапьнойжидкости 50 мкг/мл, е асцитной жидкости20 мг/мл, Стабильность продуцированияантител сохраняется на протяжении 20 пассажей в культуре и 7 мпассажей на живо 10 тных, если гибридома перевивается.Контаминация.Бактерии и грибы в культурах не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение15 микроплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и тимидиновомпромечивании культуральной среды.Консервация клеток.Клетки штаммов замораживают после 220 и 3-го клонирования на 10 и 15 пассажах екультуре и после роста в виде...

Номер патента: 1711657

Опубликовано: 07.02.1992

Авторы: Аксель, Александер, Карл-Хайнц, Людвиг

МПК: A61K 43/00

Метки: антител, меченных, моноклональных

...йримерно в 8 млраствора пертехнетата (примерно2000 ИВ 1). После 10-минутной реакции 11,1 мл раствора следующего состава, мкг: ваЪ 25, Ба 4 Р 07 2,25, оло-воО,75, буфер ИаНРО 4, вводятвнутривенно здоровым крысам. Распределение по органам спустя 2 М ч после.инъекции показано в табл.2. Из данных табл.2 следует, что накопления в костях, щитовидной железе и желудке оцень незначительные, а в остальных органах меченные иодом антитела сравнимы. Для иммунореактивности (см,табл,1) в случае меченного технециемш антитела ВИ 494/32 измерено более высокое значение, чем в случае мечения иодом или индием П р и м е р 3, 50 мг также направ" ленйого против СЕА моноклонального антитела ВЧ 431/2 б частично восстанавливают путем обработки...

Номер патента: 1712411

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Талло

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, иммуноглобулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, павианов, продуцент, штамм

...и вирусами:контаминации бактериями, грибами и микроплазмы нет.Один из родительских клеток продуцируют эндогенный ретровирус С-типа мышей;11, Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом; мон-АТ дО -класса, направленные к классоспецифической детерминанте тяжелых цепей, дО павианов: специфичность оцениваласьиммуноферментным методом и вестернблотин гом.12, Концентрация полезного продухта (моноклональных антител) в среде около 10 мкг/мл, в асцитной жидкости около 10 мг/мл;Титры данных антител при определении с помощью твердоазного иммуноферментного метода около 2 х 10 (среда/ и 2 х 10-6/асцит при концентрации антитенэ 1 мкг/мл.Определение антител можно проводить также иммунофлюоресцентными и радиоимму нологическими методами....

Номер патента: 1723127

Опубликовано: 30.03.1992

Авторы: Булатов, Вербицкий, Григорьян, Осипова, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, соматотропину, человека, штамм

...РСЗ+ 10 ОМНО, замомона в фосфатном буфере (ФБ). Через три раживэние в пенопластовой коробке при -дняпослереиммунизацииумышейстериль С. Жизнеспособность клеток послено берут селезенку и готовят суспензию 25 размораживания 70-90 (оценка жизнеспленоцитов. Гибридомы получают путем способности клеток по исключению трипаслияния спленоцитов с клетками мышиной нового синего после 24 ч культивирования).миеломы Х.63.А 9.653 с помощью 50 поли- Определение специфичности моноклоэтиленгликоля с М.м, 1500, Соотношение нальныхантител Ф 17,клеток селезенки и клеток миеломы 5:1. Се Моноклональные антитела против солекцию проводят на среде НАТ, выполняют матотропиначеловека получены путем выдва клонирования методом лимитирующих деления их из асцитической...

Номер патента: 1726511

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Демчева, Носыркова, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антигенным, антител, гибридных, детерминантам, инсулина, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, общим, свиньи, человека, штамм

...клонируют вполужидком агаре, Клонирование гибридомы повторяли трижды, Клонированную гибридому 6 Е 66 2 А перевивают на мышах5 ВаЬ/с для получения асцитной жидкости,Полученный штамм гибридных клетокпродуцирующий моноклональные антителак общим антигенным детерминантам инсулина человека и свиньи, депонирован в спе 10 циализированой коллекции перевиваемыхсоматических клеток позвоночных Всесоюзной коллекции клеточных культур Институтацитологии АН СССР под М ВСКК (П) 420 Д ихарактеризуется следующими признаками,15 Культуральные свойства. Для выращивания штамма используют культуральныефлаконы. Во флакон с 3 мл среды ОМЕМ,содержащей 10 СПК, 3,5 мМ глютамина,17,5 мкМ пирувата натрия и 50 мМ 2-меркэп 20 тозтанола, засевают 250000 клеток...

Номер патента: 1726512

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Василов, Втюрина, Литвинова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, гибридных, глиальному, используемый, кислому, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, фибриллярному, человека, штамм

...16 ч; затем срезы промывали (по 5 мин) в 3 сменах забуференного физиологического раствора, рН 7,3, а затем инкубировали с антисывороткой к иммуноглобулинам мыши, меченным ФИТЦ или пероксидазой. Результаты реакции учитывали в люминесцентном или световом микроскопе в зависимости от природы используемой метки, Для клонирования отбирали гибридомы, которые продуцируют МКА, взаимодействующие с глиальными клетками в виде четкого фибриллярного свечения и не дающие реакций с другими клеточно-тканевыми структурами.Клонирование отобранных гибридом. Культуры гибридом, в супернатантах которых обнаруживаются антитела к ГФКБ, не дающие перекрестных реакций с другими тканевыми антигенами человека, клонировали методом предельных разведений из...

Номер патента: 1740415

Опубликовано: 15.06.1992

Авторы: Кулаков, Разина, Титова, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, близкородственным, возбудителем, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, реагирующих, сапа, штамм

...антител к видоспецифическому антигену Р.рзецбоааИе 1,Моноклональные антитела получаютлибо из культуральной жидкости (при культивировании "ин витро"), либо из асцитической жидкости (при культивировании гибридом "ин вива"). Для демонстрации их избирательной (в отношении возбудителя мелиоидоза) специфичности используют метод иммуноферментного анализа, прямой и непрямой иммунофлюоресценции,Иммуноферментный анализ.В качестве антигена на твердой фазе для сравнительного анализа в ИФА используют водно-солевые экстракты из взвесей инактивированных бактерий (двухсуточные культуры либо Р,щаИе либо Р.рзецбощаИе 1, типичных штаммов, обладающих полным набором антигенов, присущих каждому виду), подвергнутых обработке ультразвуком и осветлению...

Номер патента: 1742324

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Булатов, Вайль, Василов, Втюрина, Мартынов, Осипова, Смирнова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, высокоспецифичных, гибридных, гормону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, тиреотропному, человека, штамм

...14 - 20 дн.Данные видовой принадлежности, мышиные клетки Ва в/с.Продукция М КА ста бил ьна на и ратяжении 25 пассажей в культуре и 5 пассажей на животных.Характеристика целевого продукта, Штамм гибридных клеток Тпродуцирует моноклональные антитела подкласса 01, высокоспецифичные к ТТГ человека. Специфичность оценивают иммунаферментным методом. УКА не реагируют с Л Г, ФСГ50 55 иммуноглобулинов мыши, коньюгированных с пероксидазой хрена, После трехкратного промывания планшетов фосфаты буфером с Твинв лунки добавляют 0,04 ф-ный раствор о-фенилендиамина в0,2 М фосфэтно-цитратном буфере (рН 5,0) с добавлением 0,012 перекиси водорода, После появления окраски реакцию в лунках останавливают раствором 2 М серной кислоты и проводят регистрацию...

Номер патента: 1742325

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Кириллова, Лесных, Мареев, Славянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, биотипа, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, холерному, штамм, эльтор, энтеротоксину

...иммуноферментном анализе (ИФА) и реакции преципитации (РП) по Оухтерлонии с ХТ 1310, понейтрализации специфического действияХТ 1310 в тесте кожной проницаемости поКрейгу и нейтрализации цитотоксическогодействия ХТ на овариальные клетки китайского хомячка (СНО), Класс иммунаглобулинов определяют в РП по Оухтерлони или вИФА с "НЬчЫогпа э 0 Ьзотурпц КИ, пзооэе,СаЬ 3 осЬегп" (США).Титр МКА в культуральной жидкости1/265-1/512 (ИФА); в асцитической жидкости 1/51200. (И ФА), 1/16 - 1/32 (РП); нейт-.рализации ХТ 1310 в пробе по Крейгу1/2000; нейтрализации ХТ 1310 на клеткахСН О 1/320 - 1/640,Стабил ьность п родукции антител сохраняется на протяжении пассажей в культуре и пассажей на животных в течение 18мес (срок...

Номер патента: 1742326

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Андросова, Владимирский, Ильиных, Погуляева, Трахт, Ходун, Шипина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, воvis, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, продуцент, штамм

...КРМ 1-1 640 с 20 телячьей эмбриональной сыворотки, 4 мМ-глутимина, 10 мМ пирувата натрия, аминокислотами для базальной среды Игла, витаминами для среды Игла, 0,05 мМ меркаптоэтанола и в атмосфере 5 углекислоты.Для выращивания штамма использу-. ют пластиковую посуду. Посевная доза 100 тыс,кл./мл. Клетки пассируют 1 раз в 3 - 4 дня, ратность рассева 1:10, Культура суспензионная.Культивирование в организме животных,Для выращивания опухоли пригодны мыши ВА.В/с, Свежим мышам за 3 - 30 дней до инъекции штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана или вазелина. Штамм инъецируют внутрибрюшинно по 4- 5 10 кл. в среде Игла, Асцит образуется через 20 - 25 дней. Штамм не перевивают.Продуктивность штамма: секреция моноклональных...

Номер патента: 1744107

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Амбарцумян, Завольная, Казаков, Климович, Машуров, Морозова, Швецова

МПК: C12N 5/00

Метки: f-системы, антигена, антител, видов, гибридных, ему, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, родственных, скота, штамм, эритроцитарного

...и м е р 1. 1 млн клеток штамма после криоконсервации освобождают путем центрифугирования (1000 об/мин в течение 10 мин) от среды криоконсервации; пипеткой (1 мл) распределяют клетки по 200 тыс. в лунки (2 мл) 24-ячеечного планшета (Еочч) на среду ПС, кондиционированную предварительно посеянными макрофагами. План. шет помещают в атмосферу 95% воздуха и 5% СО 2 при абсолютной влажности и 37 С. Через 48 ч клетки из каждой лунки переносят во флаконы Карреля в 4 - 5 мл среды ПС, соблюдая при этом оптимальную посевную дозу 200 - 300 тыс,клеток в 1 мл. При достижении культуральной плотности 600-700 тыс, клеток/мл их рассеивают в свежую среду(ПС) во флаконы. В третьем пассаже ПС заменяют НПС или НПС с добавлением КС,Культуру пассируют до...

Номер патента: 1747484

Опубликовано: 15.07.1992

Авторы: Войтенок, Колесникова, Лях, Мисуно, Панютич, Петевка, Шидловская

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulusl, моноклональных, некроза, опухолей, рекомбинантному, фактору, человека, штамм

...После отмывания инкубируют с меченными пероксидазой к иммуноглобулинам мыши энтителами в разведении 1:2000 на ФСБ-БСА в течение 1 ч, Ферментную реакцию проводят в течение 10 мин. Раствор субстрата представляет собой 0,1 М цитратный буфер (рН 4,7) с 0,6 мг/млортофенилендиамина гидрохлорида и 0,01 % перекиси водорода. Реакцию останавливают через 10 мин 1 М серной кислотой и учитывают на спектрофотометре с вертикальным лучом при длине волны 492 нм,Результаты эксперимента по изучению специфичности связывания МКА, продуцируемого клетками штамма 10 ГИ, с антигенами, иммобилизированными на пластике, представлены в табл.1,Результаты исследований свидетельствуют о более высокой специфичности МКА, продуцируемых клетками штамма 1 ОРИ по...

Номер патента: 1752763

Опубликовано: 07.08.1992

Авторы: Гервазиева, Климович, Крутецкая, Овсянникова, Пашкова, Полищук, Самойлович

МПК: C12N 5/00

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...продуцируемых первичными культурами гибридом, в табл 3 - выявление дЕ с помощью двухдетерминантного твердофазного иммуноферментного анализа, в табл, 4 - титры МКАТ,продуцируемых клетками штамма 8 Е/4 Ф 4при выращивании в среде с низким содержанием сыворотки, в табл, 5- титры МКАТ, продуцируемых клетками штамма Е/4 Ф 4, в культуральной среде и в асцитической жидкости,в табл. 6 - содерджание ц Е в образцах сыворотки крови человека, определенное в двухдетерминантном иммунометрическом тесте с помощью меченых МКАТ Е/4 Ф 4, в табл. 1 - содержание 9 Е в образцах сыворотки крови человека, определенное в двухдетерминантном иммунометрическом тесте с помощью МКАТ Е/4 Ф 4, иммобилизованных на твердой фазе, в табл. 8 - выявление цЕ-антител против...

Номер патента: 1752764

Опубликовано: 07.08.1992

Авторы: Боровиков, Булашев, Дмитриев, Ескендирова, Шенжанов

МПК: C12N 5/00

Метки: brucella, антител, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рода, штамм

...60 и20 КД сооттветственно. Константа связывания 2 х 10 М,Методы оценки специфичности МКА:непрямой и "сэндвич" варианты ТИФА, иммуноблот.Контаминация штамма, Контаминатовлинии, включая бактерии, грибов, дрожжейи микоплазм не обнаружено,Криоконсервация, К осадку гибридныхклеток добавляют фетальной сыворотки теленка и диметилсульфооксида до конечнойконцентрации 10%. Суспензию клеток разливают в стерильные пластиковые ампулы сзавинчивающимися крышками по 1-5 млн.кл., помещают в коробку иэ пенопласта и1752764 10 20 40 табл, 2,55 ставят на 1 сут в морозильник при -70 С,после чего ампулы переносят в жидкий азот, Условия размораживания. Замороженные клетки штамма вынимают из сосуда с жидким азотом и быстро помещают в водя ную баню на 37 С, Как...

Номер патента: 1756352

Опубликовано: 23.08.1992

Авторы: Зоделава, Самильчук, Сарсания, Хаджирисьян

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа-1-антитрипсина, антигенной, антител, гибридных, детерминанте, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, общей, человека, штамм

...же момента через день в каж- дой лунке меняют приблизительно половину средыКультивирование гибридных клеток в поисутствии ГАТ проводят в течение первых двух недель после слияния, затем еще 4 дня клетки культивируют в присутствии ГТ (без аминоптерина) и далее переводят на обычную среду без добавок. Отбор гибридсм, продуцирующих МКА требуемой специфичности, осуществляют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). В первом случае на твердой фазе адсорбируют ААТ человека, во втором - ААТ павиана гамадрила, Для реакции используют 96-луночные ИФА панели, в лунки которых вносят ААТ (2 мкг/мл, 100 мил на лунку), разведенный в 50 мМ карбонатном буфере, рН 9,5, Адсорбци;о ведут при 4 С в течение 16-18 ч, после чего панели трижды...

Номер патента: 1759872

Опубликовано: 07.09.1992

Авторы: Березкина, Завадская, Игнатова, Ковалева, Плескач, Синакевич

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, трансферрину, человека, штамм

...температуре. Затем промывают . водой и ФБР и добавляют в каждую лунку по 50 мкл конъюгата кроличьих антимышиных антител с пероксидазой хрена в разведении 1:500, Через 1 ч платы промывают водой и Ф БР и добавляют по 50 мкл субстрата (0,1 О(, ортофенилдиамин, 0,03Н 20 О, 0,2 М цитратный буфер, рН 4,5) в каждую лунку. По окончании ферментативной реакции расщепления Н 20 о в присутствии арто-фенилендиамина при наличии МКА развивается желтая окраска, которую регистрируют на спектрофотометре Мультискан при длине волны 450 нм. Связывание МКА с трансферрином человека обнаруживают при разведении супернатанта до 10Отсутствие взаимодействия полученных МКА с гемоглобином, альбумином и С- реактивным белком человека определяют следующим образом. В...

Номер патента: 1768635

Опубликовано: 15.10.1992

Авторы: Арэ, Галактионов, Гринчук, Корнилова, Соркин, Сорокин, Сорокина

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рецептору, роста, фактора, человека, штамм, эпидермального

...культивируемых гибридныхклеток штамма й 10 сингенным мышам /линия ВА в/с/ вызывает у них образованиеасцитной опухали. В асцитной жидкости содержатся МонАТ к рецептору зпидермэльного фактора роста. Способность кпродуцированию МонАТ стабильно сохраняется, по крайней мере, 16 пассажей вкультуре и 3 пассажа при перевивках нэмышах /срок наблюдения/,Кариологическая характеристика,В клетках с модальным числом хромосом /95-94 хромосом у 42% всех клеток/при рутинном окрашивании, кэк правило, присутствуют 4 хромосомы, меньшие по размеру, чем 19 хромосома, мыши и не менее 2 маркерных хромосом больших, чем 1-я хромосома стандартного набора, Обнаружены также 2 метацентрических маркера, отличающихся по размеру,Продуктивность штамма.При...

Номер патента: 1773938

Опубликовано: 07.11.1992

Авторы: Кенжебулатов, Муканов, Мукантаев, Соколова, Сырманов, Шегидевич

МПК: C12N 5/00

Метки: адгезивному, антигену, антител, гибридных, еsснеriснiа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...35 продуцировали антитела к К 99 адгезивномуантигену ЕзсЬегсЫа со, Штамм гибридных клеток продуцирует антитела в культуральную среду и в асцитную жидкость.Штамм гибридных клеток ЗР 60 хранит ся в специализированной коллекции перевиваемых соматических клеток позвоночных Института цитологии АН СССР под номером ВСКК(П) 519 Д. Штамм характеризуется следующими свойствами.45 Морфологические свойства, Гибридныеклетки представляют собой слабоприкрепляющиеся к носителю округлые клетки размером с исходную миеломную клетку, Ядро занимает большую часть клетки. Цитоплаз ма имеет вид тонкого ободка.Культуральные свойства. Гибридныеклетки выращивают в среде ЙРМ 1-1640, содержащей инактивированную нагреванием сыворотку эмбрионал коров (10-20%), -...

Номер патента: 1774949

Опубликовано: 07.11.1992

Авторы: Агрба, Аравиашвили, Инджия, Какубава, Лапин, Тимановская, Чикобава

МПК: C12N 5/00

Метки: papio, антител, гамадрила, используемый, качестве, клеток, культивируемых, лимфотропного, моноклональных, намаdrylаs, павиана, павианов, ретровируса, т-клеточн, тест-объекта, типа, характеристики, штамм

...1,5 - 2 х 10 е кл/мл,Клетки штамма хорошо переносят криоконсервацию, В качестве криопротектораиспользуют 8%-ный диметилсульфоксид вэмбриональной сыворотке коров.Штамм представлен одиночными лимфоидными клетками и их небольшими скоплениями. При окраске препаратов клеток поРомановскому-Гимза выявляется морфологическая структура лимфоблэстов, Клетки восновном крупные с большим ядром и нежно-голубой цитоплазмой. В ядрах клеток определяются нуклеолы.гь,Цитогенетическая характеристика;Цитогенетический анализ; проводимыйметодом окраски хромосом на О-диски, выявил наличие нормального кариотипа павиана гамадрила (2 п = 42,хх) при модальном-классе хромосом, равным 42/30, и плоидности клеток (и = 300), равной 13,9%,З,Характеристика вирогенного...

Номер патента: 1776691

Опубликовано: 23.11.1992

Авторы: Гервазиева, Климович, Крутецкая, Овсянникова, Пашкова, Полищук, Самойлович

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, человека, штамм

...МКАТ может быть проверена в твердофазном иммуноферментном анализе с помощью 1 дЕ, адсорбированного на твердой фазе. МКАТ связываются с белком А стафилококка, что может быть использовано при их очистке. При адсорбции на твер 20 25 30 35 40 45 50 55 дой фазе МКАТ способны связывать сывороточный 1 дЕ и могут использоваться в качестве захватывающих антител в системе двухдетерминантного иммуноанализа (в паре с мечеными 1 дЕ-специфичными антителами) или при афинном извлечении 1 дЕ иэ сывороточных препаратов. МКАТ Е/5 Д 4, сохраняя антиген-распознающие свойства после присоединения ферментной метки,могут также служить выявляющим реагентом в двухдетерминантном иммуноанализе,Антитела специфичны в отношении эпитопа на 1 дЕ, который не...

Номер патента: 1778183

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Бауер, Беккерт, Белова, Оглоблина, Смирнов

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, ингибитору, используемый, кислотостабильному, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мочи, трипсина, человека, штамм

...разведений антител М 2 с концентрац ией от 2700 до 0,325 нг в 1 мл буфера Б и инкубируют 1 ч при комнат ной температуре. После этого панель отмывают три раза направленной струей водопроводной .воды и для проявления связавшихся в лунках МКА вносят в ячейки по 100 мкл раствора коньюгата 25 пероксидазы хрена с антителами кролика к иммуноглобулинам мыши, разведенного в 1000 раз буфером Б, и инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре, После трехкратного отмывания водой для определения связавшейся в лунках пероксидазы в лунки вносят по 100 мкл субстратной смеси (100 мкл раствора о-фенилдиамина 1 мг/мл в 1 О мл 0,02 М раствоое цитрата натрия, рН 4,5, с 10 мкл 303- ного раствора НО) и инкубируют при комнатной температуре до развития...

Номер патента: 1778184

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Аркина, Кускова, Лимарева, Менявцева, Мирютова, Ратнер

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, иммуноглобулинов, используемый, клеток, кролика, культивируемых, легким, мusсulus, моноклональных, цепям, штамм

...препаратом иммунохимицес.ки чистых легких цепей иммуноглобули"нов кролика, режим активации: концентрация белка - 40 мнг/мл, наслаивающий буферный раствор - карбонатбикарбонатный буфер рН 9,6, время инкубации - 18 ч при 4 С. После отмывания планшетов от несвязавшегося белка (6 раз поочередно водопроводнойводой и дистиллированной водой с0,053 твина) в лунки вносят исследуемые пробы культуральной жидкостис продуктами жизнедеятельности гибридного клона Я 5, а также положительный (сыворотка мышей, иммунизированных легкими цепями иммуноглобули нов кролика) и отрицательный (культуральная жидкость, не содержащаяпродуктов жизнедеятельности гибридом)контроли (К+ и К- соответственно).Проволят инкубацию в течениео37 С, спмывают...

Номер патента: 1791450

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Барков, Липницкий, Луговая, Свиридов, Синюкова, Фарбер, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, мелиоидоза, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, штамм

...ацзсццз 1. ВСКК(П)276 Д для получения моноклональных айотител.Моноклональные антитела к антигену 8возбудителя мелиоидоза получают из куль туральной жидкости среды), в которой клетки штамма выращивают вне организма ииэ асцитной жидкости мышей, которым клетки штамма вводят внутрибрюшинно,Для получения антител иэ культураль ной жидкости клетки штамма выращивают встандартных условиях: при температуре 37 С, влажности 98%, СО 2 - 5% в среде культивирования, Затем производят постепенный рассев культуры, Клетки выдерживают 0 для пролиферации без смены среды до достижения максимальной плотности, при которой клетки погибают. Культуральную жидкость осветляют центрифугированием и используют как источник антител.5Для определения титра...

Номер патента: 1791451

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Барков, Липницкий, Новицкая, Свиридов, Синюкова, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, маllеi, моноклональных, поверхностному, продуцент, рsеudомоnаs, сапа, типичных, штамм, штаммов

...выращивают вне организма и из асцитной жидкости мышей, которым клетки штамма вводят внутрибрюшинно. достижения максимальной плотности при которой клетки погибают. Культуральную жидкость осветляют центрифугированием и используют как источник антител.Титр моноклонэльных антител опреДеляют с помощью твердофазного .ИФА по общепринятой схеме. Для этого образцы культуральной жидкости титруют двукратным шагом с 1;10 до 1:5120 в лунках планшетов, сенсибилизированных водно-солевым экстрактом возбудителя сапа, В качестве отрицательного контроля используют нэдосадочную жидкость несекретирующей антитела миеломной клеточной линии РЗ-Х 63-Ац 8.653, в качестве положительного - сыворотку мышей, иммунизированных убитыми бактериальными клетками...

Номер патента: 1791453

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Белкина, Дерюгина, Лапенков, Недорезов, Носырев, Оловникова, Удалов, Чекнева, Чертков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, н-антигена, растворимой, формам, человека, штамм

...свойства.Среда культивирования: ДМЕМ с добавлением 3 мм . глутамина, 1 мМ пируватанатрия, 20 мМ Хепес - буфера, 5 х 10М 2 - меркаптоэтанола, 10 ЭТС илиоленьей сыворотки и антибиотиков, Частотапассирования 1:2 - 1:3 через 2-3 сут. плотностьклеток вжидкойсреде 3-4 х 10 кл/мл.6Клетки выращивают при 37 С, 6-ном содержании СО 2 в воздухе и 95 - 100-нойвлажности. При культивировании 1 п чиччоМышам линии ВА 1 В/с внутрибрюшинно за7-30 сут. до введения гибридных клетоквводят пристан (0,25 мл), Гибридные клеткиинъецируют в количестве 2-3 х 10 /мышь,6асцитные опухоли образуются через 12-16сут,Морфологические признаки.Слабоприкрепленные к субстрату клетки с обычной для гибридом морфологией, 20 среда: 25 30 35 40 ного донора 50 55 5 10 15...

Номер патента: 1794949

Опубликовано: 15.02.1993

Авторы: Авдиенко, Капина, Куликовская, Литвинов, Черноусова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, массой, микобактерий, молекулярной, моноклональных, продуцент, тuвеrсulоsis, типа, человеческого, штамм

...10 М2-меркаптоэтанола, 50 ед/мл гентамицина,Характер роста: стационарная суспензияМетод снятия; встряхиваниеЧастота пассирования:2-3 суток Посевная доза: 2-3 10 клеток/мл5Кратность рассева: 1;2-1:3Консервация клеток: клетки заморожены после 1,3, 10, 15 и 25 пассажей в культуре и после роста в виде асцитной опухоли в мышах, Общее количество ампул - 30, по 4-5 млн клеток в ампуле, Криозащитная сре"да: эмбриональная телячья сыворотка с 1020 одиметилсул ьфоксида, Режимзамораживания: клетки в криозащитнойсреде хранили 1-3 сут при -70 С, после чегопомещали в жидкий азот. Выживаемостьпри размораживании - 80 о ,5 Сведения о контаминантах линии: бактерии - нет,грибы - нет,микоплаэма - нет,дрожжи - нет,Морфология культуры; культура...

Номер патента: 1798372

Опубликовано: 28.02.1993

Авторы: Агапов, Локтев, Перебоев, Святченко

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, вирусу, восточного, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лошадей, мusсulus, моноклональных, продуцент, протективных, штамм, энцефаломиелита

...Е 2 вируса ВсЭЛ в реакции иммуноблотинга. Активность МКА в реакции нейтрализации вируса ВсЭЛ на культуре клеток Чего составляет 1;200. МКА 1 В 2 эффективно защищают мышей от введения летальной дозы вируса ВсЭЛ. Индекс разистентности составляет 6,5 д. Титр МКА в ИФА составляет 1:5000 для культуральнойжидкости и 1:300000 для асцита. Стабильная продукция МКА сохраняется на протяжении не менее 30 пассажей и чего.5 Криоконсервирование. Среда для замораживания - среда ДМЕМ(М) -500 , фетальная сыворотка - 40%, диметилсульфоксид -10, 0,5 мл клеточной суспензии переносятв пластиковые криопробирки и помещают в10 пенопластовый контейнер с толщиной стенок 1,5 см, Контейнер вносят в пары жидкого азота, Через сутки пробирки переносят...

Номер патента: 1808872

Опубликовано: 15.04.1993

Авторы: Белова, Винтер, Котляр, Махмутова, Хамаде, Шапиро

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, днказе, зависимой, используемый, клеток, крыс, культивируемых, мusсulus, моноклональных, печени, хроматина, штамм

...среды и осаждают, ресуспендируют в 5 мл той же среды и переносятв культуральный флакон. Выживамость после размораживания более составляет более 30%.30 Контаминация,Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды.Характеристика полезного продукта,Моноклональные антитела связывают2+Мп -зависимую ДНКазу, при этом они способны ингибировать нуклеазную активность данного фермента. Титр МКА вкультуральной жидкости, определенный с40 помощью ИФА, составляет 1:8, в асцитнойжидкости - 1.10,5П р и м е р 1, Для определения специфического взаимодействия моноклональ 2+ных антител с Мп -зависимой ДНКазойпроводят определение нуклеэзной активно 2+сти Мп -зависимой ДНКазы в присутствииантител,...

Номер патента: 1814074

Опубликовано: 07.05.1993

Авторы: Кадыров, Пирлеков

МПК: G01N 33/53

Метки: антител, иммунокомпетентных, использованием, исследования, клеток, микроскопического, моноклональных, подготовки, препарата

...разведении 1:20, Оценка полученных результатов показала, что уданного донора ИКР+ клетки составляют 22% от общего числа клеток в препарате, ИКО72%, ИКО 31 21% ИКО46%ИКО28%, МКО 88%. Полученные данные с помощью нашего способа согласуется с данными других авторов, которые. получили с применением поли- -лизина. Аналогичные параллельные исследования с применением поли- -лизина у данного же донора показали тот же результат. Через .8 дней повторяли исследование с препаратом, хранившимся в холодильнике, и получали идентичный результат, Признаков разрушения клеток и неспецифического окрашивания не наблюдали. В препарате с поли- -лизином по истечении 8 дней наблюдались прорось в препарате. большинство клеток было разрушено, некоторые разрушились...