Патенты с меткой «моноклональных»

Номер патента: 1493668

Опубликовано: 15.07.1989

Авторы: Арсеньева, Богачева, Ибрагимов, Лабазина, Рохлин, Черепахин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, иммуноглобулина, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тяжелым, цепям, человека, штамм

...антигенов используют иммуноглобулины человека, иммобилиэованные на пластике (твердофазный радиоиммунный или иммуноферментный анализ).Иммунохимические свойства МАТ 9 С 11 В 8-1. Для получения препарата МАТ в количестве, необходимом для проведения всех иммунохимических исследований, гибридомные клетки штамма-продуцента помещают в пластиковый флакон площадью 25 кв. см,%2 х 10 клеток в 5 мл среды КРМ 1-1640 с 10/ эмбриональной телячьей сывороткой, 4 мМ глютамина, 100 мкг-мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 0,05 мМ меркаптоэтанола. Клетки куль" тивируют 2-3 дня при 37 С в атмосфере 5/-ного СО. Полученный супернаТаким образом, приведенные примеры четко демонстрируют абсолютную специфичность ИЛТ 9 С 11 В 8-1, относящегося к 18 С...

Номер патента: 1497213

Опубликовано: 30.07.1989

Авторы: Волгин, Волгина, Вотрин, Певницкий, Ходарев

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, зависимой, клеток, клеточных, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, селезенки, человека, штамм, эндонуклеазе, ядер

...скота,Для выращивания штамма используютстеклянную или пластиковую посуду,Во Флакон объемом 25 см в 5 мл средывносят 2 10 -10 клеток РИ, Пассажи б1 раз в 3-4 дня той же дозой клеток.Кратность рассева 1:4.Культивирование в организме животного.Для выращивания опухоли из штаммапригодны мыши линии ВАЬВ/с. Свежиммьппам за 7-30 (оптимально 14) днейдо инъекции штамма вводят внутрибрюшинно 0 5 мл пристана, Штамм инъециЭ6руют внутрибрюшинно по 3,2 х 10 клеток на мышь в 1 мл среды Игла. Асцитическую жидкость собирают по мерепоявления (на 10-15 день). Из асциташтамм перевивают на свежих мышей по1-5 х 10 клеток на мышь, 4-6 пассажей, 14972136Продуктивность штамма,Секреция монАТ на 4-й день культивирования 10-20 мкг в 1 мл среды и1-2 мг в 1 мл...

Номер патента: 1497214

Опубликовано: 30.07.1989

Авторы: Волгин, Волгина, Вотрин, Певницкий, Ходарев

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, зависимой, клеток, клеточных, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, селезенки, человека, штамм, эндонуклеазе, ядер

...иммунизации - 13 позитивных клонов из 200 первичных культур, Бсе стабильные позитивные линииклонированы и заморожены в жидкомазоте. Клон РЯ клонирован еще 5 раз.Для наработки антител клон Ы культивируют в условиях хп ч 1 чо в видеасцитной жидкости в брюшной полостисингенных мышей,Штамм депонирован под номеромВСКК (П) Р 117 Д и характеризуетсяследующими признаками.Культуральные признаки,Стандартные условия культивирования, Среда для культивирования - среда Дульбеко с добавлением 107. телячьей эмбриональной сыворотки., 4 ммЬ-глутамина. 80 мкг/мл гентамицинаОУ37 С. 57. СО, 967. влажности. Допустимо использование среды Игла.с добавлением 157 сыворотки крупного рогатого скота.Для выращивания штамма используютстеклянную или пластиковую...

Номер патента: 1389284

Опубликовано: 30.07.1989

Авторы: Ветрова, Сидоренко

МПК: A61K 39/00, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, в-лимфоцитов, гибридных, дифференцировочному, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...отношением, базофильной цитоплазмойФ грубой структурой хроматина. 84 4Культурдльлые призндки. Среда культивирования - среда КРАПб 40 или МЕМв модиФикации Дальбекко с 102 эмбриональной телячьей сыворотки, мК,-глутамина, 100 мгк/мл гентамицина при37 С в атмосфере 57, СО , оптимум рН2 зб, 8-7, 5.При росте на пластике клетки образуют плотный монослой, К стеклу клетки прикрепляются слабо и в стеклянных Флаконах ра.стут как в монослое,так и в суспензии. Посевная доза клеток 100 тыс,кл/мл, клетки пассируютодин раз в 3-4 дня, кратность рассева 1:7.Культивирование в организме животпьгл. Для получения асцита пригоднылишь мыши ВЛ 1.В/с. Мышам за 7-30 днейдо инъекции клеток штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана....

Номер патента: 1513030

Опубликовано: 07.10.1989

Авторы: Адамова, Власик, Ковалева, Покровский, Трахт, Янушевская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, крови, культивируемых, липопротеидам, мusсulus, моноклональных, низкой, плазмы, плотности, человека, штамм

...штамм обозначен как .А-ЬВЕР 8, депонированв Банке клеточных культур Институтацитологии под номером ВСКК (11)Ф 1790 и характеризуется следующимипризнаками, 20.Стандартные условия культивирования - среда КРМ 1-1640 с добавлением10% телячьей эмбриональной сывороткии 10% лошадиной сыворотки, 4 мкМЕ-глютамина, 10 мкМ пирувата натрия,100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/млстрептомицина,аминокислоты для базальной среды Игла, витамины для среды Игла и 0,05 меркаптоэтанола, при37 С в атмосфере 5%-ной углекислоты,Для выращивания используют пластиковую посуду,Посевная доза 10 клеток в 1 мл.Клетки пассируют один раз в 3-4 дня.Кратность рассева 1:10, Культура полуприкрепленная. Культивирование ворганизме животных. Для выращиваниягибридомы в...

Номер патента: 1518369

Опубликовано: 30.10.1989

Авторы: Анджапаридзе, Баркова, Ведунова, Звонарев, Краснова, Кузнецова, Мальцева, Нагиева, Никулина, Ходоровская, Эткинд

МПК: A61K 39/42, C12N 5/00

Метки: musculis, антител, вируса, гемагглютинину, гибридных, животных, используемый, клеток, кори, моноклональных, штамм

...оценку монАТ в культуральных жидкостях на актинносгь и спец,фцчность, По данным проведенного исследования осуществляют выбор клоовдля их накопления в массовой кульгуре и криоконсервации,В результате слияния полу еца коллекция гибридов лро;,уцирующихаьАТк вирусу кори (штамм Л), Из нихпрактический питере представляюгибридома ВК,2, прод пирушал",;онАТ класса 1 яС а, напраленныек гемагглютинину вируса кори,. Характерисгик активности иммуцоглобула 1 он р продуцируемых Гибридомой ВК9 3 представлена в табл,1,Приведенные двиньте лозвс. ;,г заключить, что монАт, продуцируамиегибридомой ВК.2, обладают аднано .вои высокой реактивностью с двумяисследованными шта мами вируса кори(штамм Ли шгамм 1,ЕС-вирус кони)в различных тестах и не выявляют...

Номер патента: 1527257

Опубликовано: 07.12.1989

Авторы: Вотяков, Коломиец, Куницкая, Лучко, Малахова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: амиотрофического, антител, возбудителю, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лейкоспонгиоза, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...мьппи в среднем получают 3,0 мл асцитической жидкости. Асцитическую жидкость осветляют путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение10 мин. 18 С осаждают сульфатом аммония (ЭОХ насыщения) и чистят путем аффинной хроматографии. Штамм АЛМАна мышах не перевивается.Характеристика продукта.Класс продуцируемых иммуноглобу 50 линов - Тф 2 а. Продуцируемые антитела охарактеризованы в точечном иммуноферментном методе (ТИФМ),Изоферменты.Подвижность глюкоза-фосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогенаэы в клетках клона АЛМАхарактерна для мышиных клеток. Контаминация.Бактерии не.обнаружены, грибы и дрожжи не обнаружены, микоплазмы не обнаружены, вирусы - обнаружены частицы типа А и С, аналогичные частицам родительского штамма клеток Х 63-Ае...

Номер патента: 1527260

Опубликовано: 07.12.1989

Авторы: Ардемасова, Калихевич, Лившиц, Попов, Попова, Салова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, тимозину, штамм

...состава должно быть в 10 разбольше. При росте в указанных условиях штамм образует круглые клетки,слабо прикрепляющиеся к твердой подложке и снимающиеся с нее ресуспендированием супернатантом. Времяудвоения популяции 30 ч. Кратностьрассева 1:3 3-4 раза в неделю.Культивирование в организме животных, Внутрибрюшинное введение клеток сингенным мышам, сенсибилиэированным пристаном или вазелиновыммаслом, вызывает образование асцитной опухоли. В сыворотке крови и асците таких животных содержатся антитела к Ы., -тимоэину, Способность кпродукции монАТ сохраняется при последовательных перевивках клеток отодного животного другому, а такжепри культивировании клеток асцитической жидкости п чдСто,Продуктивность штамма.При стандартных...

Номер патента: 1528791

Опубликовано: 15.12.1989

Авторы: Гуртовой, Дерюгина, Дризе, Леменева, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00, C12P 21/00 ...

Метки: антигену, антител, гибридных, группоспецифическому, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, системы, человека, штамм, эритроцитов

...су,Морфология клеток: штамм представ 35лен слабо прикрепляющимися к субстрату клетками с обычной для антителообразующих клеток морфологией.Видовая принадлежность штамма доказана цитогенетическим методом.Кариотип соответствует виду Мыв.шцзсо 1 цв. Модальное число хромосом89, генетические маркеры - 2 метацентрические хромосомы. 45Сведения о комтаминации линии:не обнаружена контаминация Ьактериями, грибами и микоплазмой, Вирусы нетестированы.Характеристика полезного вещества,продуциируемого штаммом; 1 ВИ анти-Мантитела, агглютинирующие эритроцитычеловека, содержащие М антиген. Методтестирования - агглютинация в солевойсреде или на плоскости.Характеристика биосинтеза полезных55продуктов: титр антител культуральнойжидкости в реакции солевой...

Номер патента: 1460994

Опубликовано: 30.01.1990

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Оганян, Размадзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, высших, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, человека, штамм

...присутствии ПЭГ(реакциявстречной и радиальной иммунодиффузии). Константа ассоциации МКА с1 яА человека составляет 2,2 10 М,с 1 яА обезьян - 510М.Контаминация.Бактерии, грибы и микоплазмы .отсутствуют. Родительская линия Х 63-Ар8.653 продуцирует эндогенный ретровирус С-типа мышей.Криоконсервирование.5-6 млн. кл, замораживают в жидком азоте в присутствии 90% сыворотки плода коровы и 10% ЭМЯО. Жизнеспособность клеток после размораживания составляет 90% (по включениютрипанового синего).Использование штамма иллюстрируется следующими поимерами.Пример 1,Навески иммуноглобулинов всехклассов человека в количестве 15 мкг50на трек кипятят в течение 5 мин наводяной бане в буфере для нанесениясодержащем меркаптоэтанол. При этомпроисходит...

Номер патента: 1541253

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Алексеева, Козловский, Новохатский, Соколов, Черепахина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, голарктической, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, поверхностному, расы, туляремии, штамм

...при 37 С в пластиковой или стеклянной посуде при посевной дозе 150200 тыс./мл в течение 3-4 дней доплотности насыщения 800 тыс./мл.Клетки пассируют один раз в 3-4 днятой же дозой Коэффициент рассева1;4-1;5. Культивирование ведут напитательной среде ВРМ 1 1640 илиДМЕМ, содержащей 10 Е эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глютамина,8-10 мМ буфера НЕРЕЯ. Культивирование штамма в организме экспериментальных животных, Индукцию асцитных опухолей у интактных беспородных белых мышей и инбредныхмышей линии Ва 1 Ь/с, внутрибрюшиннопраймированных за 14 дней до введения гибридомы пристаном в дозе0,5 мл/мышь осуществляют путем ино/кулирования 10 10 гибридных клеток на одно животное в 3 мл среды. Иммунную асцитическую жидкость собирают по мере...

Номер патента: 1541254

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Алексеева, Бичуль, Бурлакова, Новохатский

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, вибриона, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, о-антигену, огава, серовара, термостабильному, холерного, штамм

...клетки ГХ-В 7/Ог представляют собой крупные оКруглые клетки с узким ободком базофильной цитоплазмы. Ядрагиперхромные, неправильно-овальнойформы, крупные, с грубой структурой ядерного хроматина, В значительной части клеток цитоплазма имеетвыросты.Культуральные признаки типичныдля перевиваемых клеток мышиныхплазмоцитом. Клетки ГХ-В 7/Ог культивируют в виде стационарной суспензииопри 37 С в пластиковой или стеклянной посуде при посевной дозе 1001500 тыс./мл в течение 3-4 дней доплотности насыщения 800-900 тыс.кл./мл,Клетки пассируют один раэ в 3-4 дня.той же дозой. 1(оэффициент рассева1:4-1:5, Культивирование ведут на питательной среде ВРМХ 1640 или ДМЕМ,содержащей,10 эмбриональной телячьейсыворотки, 2 мМ глютамина, 8-10 мМбуфера...

Номер патента: 1551737

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Дерюгина, Дризе, Лапенков, Леменева, Носырев, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигена, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, растворимой, формам, человека, штамм

...клетокморфологией.Кариологические признаки. Кариотип соответствует Мця. пшяси 1 ця. Модальное число хромосом 78 с интервалом варьирования 74-80. С помощью Сокрашивания выявляются две большиеметацентрические хромосомы, 30Культуральные признаки. Среда длякультивирования ВРМ 1 1640 или ДМЕМс 207. эмбриональной телячьей сыворотки, 4 мМ Ь-глютамина, 17 пируватанатрия, 1-2% НЕРЕЯ-буфера, 510М2-меркаптоэтанола, антибиотики. Характер роста - стационарная суспензия. Метод снятия - резиновым "полисменом". Частота пассирования 2-3 сут.Кратность рассева 1:3-1:4,40При введении мышам ВАЬВ/с предварительно обработанных пристаном 2-5 "10 клеток асцит образуется черезб20 сут, Стабильная продукция антителнаблюдается в течение 2 пассажей на 45мышах, титр...

Номер патента: 1551738

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Дерюгина, Дризе, Лапенков, Леменева, Носырев, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, н-антигена, форме, человека, штамм

...выявляются большой и малыйметацентрики и один большой акроцент.рик,Культуральные признаки. Среда длякультивирования КРМ 1 1640 или ДМЕМс 20/ эмбриональной телячьей сыворотки, 4 миф 1.-глютдмина, 1 Е цируватанатрия, 2 К НЕРЕЯ-буФера, 5 10 2-меркаптоэтанолд, антибиотики. Характерроста - стационарная суспензия. Ме -тод снятия - резиновым "полисменом",Частота пассирования 2-3 сут. Кратность рассева 1:3-1;4,При введении мышам ВЛ 1.В/с предварительно обработанным пристаном(2-5) 10 клеток асцит образуется6через 9-14 сут. Стабильная продукция 45антител наблюдается н течение 2 пассажей на мышах, титр антител н асцитной жидкости н реакции агглютинации в солевой среде с эритроцитамиФенотипа 0 составляет 1:256-1:512 тыс,50в культуральной...

Номер патента: 1551739

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Дерюгина, Дризе, Леменева, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, группоспецифическому, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, системы, человека, штамм, эритроцитов

...2 большие метацентрические хромссомы.Продуктивность штамма. Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом: анти-Б антитела,агглютинирунудие эритроциты человека,15 20 25 30 35 40 45 50 55 содержащие М-антиген. Метод тестирования - агглютинация в солевой среде или на плоскости,Характеристика биосинтеза полезных продуктов: титр антител в культуральной жидкости в реакции солевой агглютинации в круглодонных микроплатах 1:64-1:256, титр антител в асцитной жидкости в реакции агглютинации на плоскости 1:1600-1:12800. Стабильность антителопродукции сохраняется втечение 13 пассажей в культуре и 2пассажей в мыши.Криоконсервирование клеток, Ростовая среда, 107. ДМСО, 407. любой сыоворотки, сутки при -70 С, затем -жидкий азот,...

Номер патента: 1555360

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Вербицкий, Папазов, Фидлер

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гонадотропных, гормонов, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, субъединице, человека, штамм

...37 С, газовая фазавоздух +5% СО, Способ культивирования - в пластиковых флаконах на 50-." 25250 мл, посевная доза 500.000 клеток/мл, кратность рассева 1:2времясубкультивирования 3-4 дня,В организме животного - .мьппь ВАЯВ/собработанная пристаном (0,5 мл.в/бр.за 5-40 дней до инокуляции), доза,инокуляции 3-8 млн клеток, время образования асцита 10-20 дней,Характеристика продуцируемого продукта, Штамм гибридных клеток продуцирует монАТ 1 яС класса, направленныепротив,Ы-ХГЧ с-ЛГ, о(-ФСГ и с(-ТТГчеловека. Концентрация полезного продукта (монАТ против Ы-ХГЧ. с-ЛГ,Я-ФСГ и ТТГ человека) в культуральной среде около 10 мкл/мл,.в асцити"ческой жидкости - около 7 мг/мл, титры данных антител при определении спомощью твердофазного...

Номер патента: 1555361

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Вербицкий, Папазов, Фидлер

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гонадотропину, гормону, животных, клеток, коровы, культивируемых, лютеинизирующему, мusсulus, моноклональных, продуцент, свиньи, специфичных, хорионическому, человека, штамм

...воздух + 5 СО .Споооб культивирования в пластиковых флаконах на 50-250 мл, посев,ная доза 500000 клеток/мл, кратностьрассева 1:2, время субкультивирования 3-4 дня,Культивирование в организме животного, В организме животного -мышьВИ В/с, обработанная приставом(0,5 мп в/бр, за 5-40 дней до инокулицин)доза инокуляции 3-8 млн.кле- .ток, время образования асцита 1020 дней,40Продуктивность штамма, Концентрация полезного продукта (монАТ против р-ХГЧ, р-ЛГЧ, р-ЛГС, р-ЛГК) в. купьтуральной сРеде около 10 мкг/мл,в асцитической жидкости - около7 мг/йл.Титры данных антител при определении с помощью твердофазного иммуноферментного метода: 1:3000 - в культуральной среде, 2 х 10 - в асцитичес-кой жидкости, при концентрации антигеяа при нанесении в...

Номер патента: 1560549

Опубликовано: 30.04.1990

Авторы: Буларгина, Ездакова, Катруха, Сологуб, Федоров, Феоктистова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рогатого, скота, штамм

...активность.В культуральной жидкости монАТнакапливаются в титрах 1:500 - 1:1000(ИАФ) или 1:8 - 1:16 (РДП - реакциядиффузионной преципитации).В. асцитной жидкости титры в ИФА0,5 (10 -10 ), в РДП 1:160 - 1:640,Контаминация, Иикоплазмы, бакте 50рии, плесневые грибы и дрожжи невыявлены,Криоконсервирование, Среда для замораживания; 45% среды Игла, 457 эмбриональной сыворотки к,р.с., 107ДМСО, Режим замораживания до -30 Со 55со скоростью 1 град/мин до "ЗООС соскоростью 2 град/мин, далее - жидкийазот. Раэмораживают при 40 С, центрифугируют при 1000 об/мин в течение1 О мин, ресуспендируют в ростовойсреде до концентрации 0,510 кл/мл.Использование штамма и продуцируемых монАТ иллюстрируется следующимипримерами,П р и м е р 1. Клетки клона...

Номер патента: 1562353

Опубликовано: 07.05.1990

Авторы: Демчева, Папковский, Савицкий, Чередникова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, копропорфирину, культивируемых, мusсulus, моноклональных, штамм

...вводят 0,5 мл 2, 6, 10, 14-тетряметилпентядекана в/б. На 7 день штаммклеток инъецируют В/б в количестве500000 клеток в мышь. Асцитную жидкость отбирают на 12-4 день. Объемасцита 4-5 мл. Клетки из асцита перевиваются новым мышам в течение 8 ОО пассажеи без заметного изменениянТИТРЯ МОНОКЛОНЯЛЬНЫХ ЯНТИТЕЛ В ЯСЦИТНОЙ ЖИДКО С Ти еПродуктивность штаьола,Концентрация моноклональных антлтел в культуряльной жидкости на7 день культивирования 100 икг/мл,а в аситной жидкости 10-2 мг/мл приопределении по методу Лоури и методомтвердофязного иммуноферментного анализа.Контаминация: бактерии и грибы вкультуре не обнаружены, Тест на микоплазму отрицателен.Кариологическая характеристикаштамма: модяльное число хромосом 100.Маркерых хромосом не...

Номер патента: 1564184

Опубликовано: 15.05.1990

Авторы: Баев, Зеленин, Капник, Прудовский, Рубцов, Скрябин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гормону, животных, используемый, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рогатого, роста, скота, штамм

...замораживания - на программномзамораживателеС/мин до -70 С, затем перенос в жидкий азот и хранениев нем.При размораживании клеток послехранения в жидком азоте ампулы быстро 40опереносят в водяную баню при 37 С,слегка покачивая. Содержимое ампулыстерильно переносят в подогретую питательную среду в ячейки платы с макорофагамн, инкубируют при 37 С. После 4520-24 ч инкубации среду сливают идобавляют свежую подогретую питательную среду,Жизнеспособность после размораживания - 70%.50Контроль контаминаций.Проверку на микоплаэменное и бактериальное заражение осуществляли сиспользованием флуорохромов Хехст33258 и ДАПИ и посевом культуральной55среды на мясопептонный; агар. Заражения не обнаружено.Прививаемость животным изогенногопроисхождения -...

Номер патента: 1567624

Опубликовано: 30.05.1990

Авторы: Антропова, Барловская, Воробьев, Галактионов, Иванов, Маргулис, Пинаев, Фридлянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерферону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...проводят в смесиравных объемов в кондиционированнойростовой среды и 20-ного диметилсульфоксида на ростовой среде приконцентрации 0,5 10 кл. в 1 мл. Режим замораживания: 1 град в 1 мин от+20 до минус 60 С, 1 О град в 1 минот минус 60 до синус 100 С, 50 градв 1 мин от минус 100 до мину: 150 С,Клетки хранят в жидком азоте. Отогревают при 40 С в течение 1-2 мин,одалее разбавляют 10-кратным объемомсреды, центрифугируют 5 мин при1000 об/мин и высевают в ростовуюсредуЖизнеспособность клеток штамма 1580 после размораживания, определенная по включению трипановогосинего, составляет 60-701,Контаминация.Бактерии и грибы в культуре не обнаружены. Микроплазма не выявлена по включению тимидиновой метки,П р и м е р, Каждая мышь...

Номер патента: 1571063

Опубликовано: 15.06.1990

Авторы: Антропова, Барловская, Воробьев, Галактионов, Иванов, Маргулис, Пинаев, Фридлянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерферону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...проводится в смесиравных объемом кондиционированной ростовой среды и 20%-ного диметилсульфоксида на ростовой среде при концентрации0,5 -1 10 клеток в 1 мл. Режим заморажи 6вания: 1 амин от 20 до минус 60 С, 10 вмин от минус 60 до 100 С, 50 в мин отминус 100 доминус 150 С. Клетки хранят вжидком азоте. Отогревают при 40 С в течение 1-2 мин; далее разбавляют 10-кратнымобъемом среды, центрифугируют 5 мин при10 1000 об/мин и высевают в ростовую среду, Жизнеспособность клеток штамма 159 Д после размораживания, определенная повключению трипанового синего, 60-70%.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре не обнаружены, Микоплазма не выявлена по включению тимидиновой метки.П р и м е р, Каждая мышь линии ВА В/с...

Номер патента: 1576561

Опубликовано: 07.07.1990

Авторы: Барышников, Короткова, Тупицын

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, животных, клеток, кортикальных, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тимоцитов, человека, штамм

...КРИ 1 1640или среде МЕМ в 1 Х модификацииДульбекко, содержащей 15% телячьейзмбрйональной сыворотки, 2 мМ/мл глюгал 1 ина, 0,1 мг/мл гептамицина.Титр антител в культуральной жидкости определяют непрямой реакциейповерхностной иммунофлооресценции наживых тимоцитах, Интенсивность флюоресценции ацениваот на флюоресцентном микроскопе при увеличении объектива 40, окуляра 2,5-10.Титр антител в культуральной жидкости 1:50.Культивирование хп ч 1 чо. Для выращивания асцитной опухоли из штаммагибридных клеток пригодны мыши самкилинии ВА 1.В/С, Интактным мышам за 1-7днеи до прививки опухоли вводят внутрибрюшинно (в/бр) по 0,5 мл 3%-ногопептона на вазелиновом масле. Клеткигибридомы инъекцируют в/бр по 1 О кле 7так на мышь в 5 мл среды. Через...

Номер патента: 1585329

Опубликовано: 15.08.1990

Авторы: Беркова, Добрынин, Коробко, Чувпило, Шамборант

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, некроза, опухоли, продуцент, фактору, человека, штамм

...4 С.Плашку отмьвает 0,1%-ным растворомтвина 20 в О, 01 М натрий-Фосфатномбуфере, содержащем 0,15 М МаС 1(ФСБТ), рН 7,2, инкубируют с 200 мкл1%-ного раствора бычьего сынороточного альбумина (БСА) в течение 1 чпри 37 С, Плашку отмывают 3-4 разаФСБТ и вносят в лунки по 50 мкл препарата, содержащего антитела. Послеинкубации в течение 1,5 ч при 37 Сплашку отмывают ФСБТ и обрабатьваютраствором антител к иммуноглобулинам мыши, конъюгиронанных с пероксидазой хрена (50 мкл в лунку, разведение 1:1000, 1 ч при 37 С). Затемплашку отмьвают и нносят 50 мклраствора ортофенилендиамина (1 мг/мл)н 1%-ном цитратном буфере (рН 4,5),содержащем 0,05% Н О. Реакцию останавливают добавлением 50 мкл влунку растнора 2 М серной кислоты.Взаимодействие...

Номер патента: 1445183

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Андросова, Владимирский, Ильиных, Погуляева, Трахт, Ходун

МПК: A61K 39/40, C12N 5/00

Метки: bcg, антител, воvis, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, штамм

...клеток 2 А 5 эамораживаютв эмбриональной телячьей сыворотке сдобавлением 10% ДМСО в жидком азотедля хранения. Другую часть используют для получения гибридной опухоли васцитной форме у мышей ВАЬВ/с введением внутрибрюшинно 10 клеток мы 7шам, подготовленным внутрибрюшиннойинъекцией 0,5 мл ваэелинового маслаэа 3-30 дней до инъекции клеток, Асцит образуется через 10-16 дней. Изасцнтической жидкости выделяют иммуноглобулины с помощью сульфата аммония, Штамм 2 А 5 хранится в Специализированной коллекции перевиваемьпссоматических клеток позвоночных Института цитологии АН СССР по номером600 и характеризуется следующимипризнаками,Культуральные признаки.Среда НРИ 1-1640 с 10% телячьей эмб-,риональной сыворотки и 10% лошадинойсыворотки, 4 мМ...

Номер патента: 1595902

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Барышников, Дубинкин, Заботина, Кадагидзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, кортикальных, культивируемых, мusсulus, моноклональных, сд38, тимоцитов, штамм

...и иэ положительной лун кй гибридому вновь клонируют. Колонки возникают на двенадцатый день в 58 из 96 лунок. Проводят скрининг на Т-клетках. Позитивные клоны поеле50 клонирования составляют 100% (58 иэ 58)Культивирование п чд 1 го. Для выращивания штамма используют пластиковую или стеклянную посуду. Во флаконобъемом 45 смэ в 5 мл среды запиваютпо 5 к 10 клеток штамма. Пассаж 1 разв 3-4 дня той же дозой, Штамм выращивают при 37 С на среде ВРМ 1-1640 илисреде МЕМ в 1 Х модификации Дульбекко,содержащей 15,0 оленьей или телячьейэмбриональной сыворотки; 2 мМ/мл глютамина; 0,1 мг/мл гентамицина,Культивирование п чиччо. Для выращивания опухоли из штамма гибридныхклеток пригодны мьппи самки линии;ВА 1 В/с, Интактным мьшам за 1-7 днейдо...

Номер патента: 1595903

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Гаврилова, Демчева, Егоров, Чередникова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...методу Лоури и в Е 1,1 БА,Криоконсервирование, Клетки штаммаресуспендируют в смеси, содержащей10% ДМСО, 30% Фетальной сыворотки и607. среды ДМЕМ, в концентрации 110клеток на 1 мл, разливают при 4 С впластиковые ампулы, помещают в полиуретановые контейнеры и переносят вхолодильник на -70 С на 18 ч, Затемклетки переносят в жидкий азот надлительное хранение. Размораживаниепроизводится при 37 С в водяной бане.Жизнеспособность клеток оцениваетсяс помощью трипанового синего и составляет 407,Концентрация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительг ном наблюдении. Тест на микоплазму отрицателен. П р и м е р, Моноклонапьные антитела используют для определения концентрации инсулина методом иммуноферментного анализа. В 96-луночные...

Номер патента: 1602866

Опубликовано: 30.10.1990

Авторы: Домогатский, Идельсон, Рудин, Трахт

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, коллагену, культивируемых, мusсulus, моноклональных, типа, человеческому, штамм

...канамицина, 5 мкг/мл фунгизона, 0,05 мИ 2-меркаптоэеанела при.37 С в атмосфере 5% углекислого газа. Характеристика полезного продукта штамма. Штамм продуцирует монокло-. нальные антитела - иммуноглобулины мыши класса Х. Эти антитела специфически евязываюшся с человеческими коллагеном 1 Ч типа, с незначительной переюрестной реакцией с коллагеном 1 типа. В пределах чувствительности использованных методов не обнаружено связывание с человеческими альбумином, фибувнойеном, фнбронектином и коллаге нами 1 И. и Ч типов. Присутствие плазмы иреви не влияет на взаимодействие мовокленальных антител с человеческим кэллагеном 1 Ч типа.Клетки штамма консервируют по 1 х х 106 клеток/мл сыворотки крупного рогатого скота с добавлением 10%...

Номер патента: 1602867

Опубликовано: 30.10.1990

Авторы: Домогатский, Идельсон, Рудин, Трахт

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, коллагену, культивируемых, мusсulus, моноклональных, типа, человеческому, штамм

...М. Эти антитела специфически связываются с человеческими коллагенами 1 и Т 11 типов, В пределах чувствительности использованных консервация. Клетки штамма консервируют по 1 х 10 клеток/мл сыворотки крупного рогатого скота с добавлением 10% диметилсульфоксида в пластиковых ампулах. Замораживание ампул проводят в коробке из вспененного полистирола с толщиной стенок 1 см. Коробку с ампуо лами оставляют при температуре -70 С и через 1 сут переносят ампулы в жидкий азот для хранения.Размораживание проводят быстро в водяной бане при 37 С Жизнеспособность после размораживания, оцениваемая по включению трипанового синего, составляет не менее 60%.Контаминация. Контаминация бактериями и грибами в культуре не обнаружена при длительном...

Номер патента: 1604848

Опубликовано: 07.11.1990

Авторы: Байтубаев, Булашев, Дмитриев, Касьянов, Муканов, Несмеянов, Ромахов

МПК: C12N 5/00

Метки: brucella, антител, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рода, штамм

...суспензия.Частота пассирования - через 2-3 сут,кратность рассева 1:3-1:4. Посевная55бконцентрация клеток 1-2 х 10 в 1 мл,Максимальная клеточная плотность0,5 мпн/мл.. Культивирование п чиччо.При внутрибрюшинной прививке мышам линии ВА 1 В/с штамм гибридомыобразует опухоль в асцитной форме на9-11 дни. Доза клеток при прививке2 х 10 кл . За 7 дней до введения6гибридомы необходимо инъецировать,животным пристан - 2, 6, 70, 14тетраметилпентадекан в дозе 0,5 млна головку. Штамм сохраняет способность продуцировать специфическиемоноклональные антитела в течение5 пассажей на сингенных мышах (времянаблюдения),Продуктивность штамма.На 3-4 день культивирования гибридомы концентрация МКА составляет45-50 мкг/мл в культуральной среде и8 мг/мл в...