Способ получения гидрохлорида антрациклингж5ида

(31) 53454/76 (33) ИталияОпубликовано 300481 Бюллетень М 16 р 1)щ, кл,з С 07 Н 15/24// А 61 К 31/70 1 осударственный комитет СССР по делам изобретений и открытийДата опубликования описания 300481 ИностранцыДжузеппе Кассинелли, Федерико Аркамоне н Аурелио ди Марко : (Йталия). Иностранная фирма Сочиета Фармасьютичи Италиа) Заявитель 54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИДРОХЛОРИДА АНТРАЦИКЛИНбой 9 сИз зе ". и чающийся в конденс а, растворенного в 1 тИ 2 1 ии дауноми" сухом мети зак цин Изобретение относится к способу получения новых соединений, обладающих противоопухолевой активностью, антрациклингликозидов, получаемые в виде гидрохлоридов.Цель изобретения - получение новых полезных соединений, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм.Поставленная цель достигается путем синтеза, основанного на известной реакции Кенигса-Кнорра 111 .Предлагаемый способ получения гид ромлорида нового антрациклингликозид формулы лендихлориде с хлоридом 3-трифторацетамидо,3,б-тридеокси-0.-метилликсогексоопиранозила или с хлоРщом З-трифторацетамидо,3,6-тридеокси-О-метиларабиногексопиранознла при комнатной температуре в течение 1-2 ч в присутствии катализатора трифторметансульфоната10 серебра в эфирном растворе и дегидратирующего агента молекулярного ситас последующим мягким щелочным гидролизом в ацетоне полученного М-защищенного гликоэида действием 0,1 и.водной гидроокисью натрия и обработкой полученного свободного гликозидного основания метанольным растворомхлористого водорода,Изобретение иллюстрируется примерами, в которых используемые блоки 20 рованные амидодезоксигалоидсахараполучают следующим обраэом,Получение в качестве промежуточного продукта 3-тряфторацетамидо,3,6-тридезокси-0-метил.-ликсоюгексопиранозилхлорица.Раствор метил-трифторацетамидо,3,б-тридезокби-Аликсогексопиранозида (2,57 г, 10 ммоль) в сухомметилендихлориде (45 мл) подвергают30 обработке при 0 С эфнратом трехфто 82695620 50 ристого .бора (0,1 мл), В период времени, пока температура поддерживается на уровне 0 С, добавляют диаэометан в метилендихлорид до появленияустойчивой слабожелтой окраскиСпустя 90 мин при ООС путем фильтрацииудаляют твердое белое вещество (поли 5метилен), а фильтрат последовательнопромывают 10-ным водным растворомбикарбоната натрия, а также водой ипросушивают над безводным сульфатоммагния. Остаток, полученный при испарении, выделяют кристаллизацией издиэтилгексанового эфира, в результа.те чего получают чистый метил-триФторацетамидо,3,б-тридезокси-0-метил-Ф.-ликсогексопиранозид 15(СО СВ 1) имеет поглощение на 1,23(сс, СН, -С); 3,23 и 3,40 (два 5-ОСН) и 4,70 е (широкое 5, С-Н).Раствор указанного 4-О-метильногосоединены (2,17 г, 8 ммоль) в уксусной кислоте (40 мл) добавляют к 5воде (160 мл) и разогревают до 100 Св течение 1 ч. Кристаллизация остатка, полученного путем испаренияиз ацетонгексана дает 3-трифтор-ацетамидо,3,6-трйдезокси-0-метил- З 0(СДС й) имеет поглощения на 1,23(д, СНЗ-С), 3,50 (5, СНБО) и 5,405 (широкое 5, С-Н),Раствор указанного пиранозногосоединенны (1,68 г, 6,53 ммоль) вбезводном пиридине (48 мл) энергично перемешивают при 0 С п-нитро"обензолхлоридом (2,52 г). Спустя 14 чпосле пребывания при комнатной температуре смесь, полученную в результате реакции, переливают в охлаждаемую 45льдом воду, а выпавший осадок отфильтровывают и промывают водой до ней тральной реакции. Получающийся п-нитробензоат (смесь ОС- и-мономера)растворяют в хлороформе и просушивают над сульфатом магния. Остаток,получаемый в результате выпаривания, дает 2,4 г 3-трифторацетамидо,3,6-тридеэокси-0-метил-0-п-ннтробенэоил.-ликсогексопираноэы=240 (И-Р-нитробензоильный гидроксид).Раствор этого и-нитробензоильногосоединения (1 05 г, 2,5 ммоль) в 60безводном метйлендихлориде подвергают насыщению при ООС безводным хлористым водородом. Выпавшую восадоки-нитробензойную кислоту в безводномсостоянии подвергают отфильтровыва1 нию, а фильтрат выпаривают до сухого остатка. Получающийся 3-трифторацетамидо,3,6-тридезокси-0-метил.- -ликсогексопиранозилхлорид (0,69 г) используют для реакции сочетания беэ дальнейшей очистки.Получение З-трифторацетамидо, З,б-тридезокси-0-метиларабиногексопиранозилхлорида в качестве промежуточного продукта.Обработка метил-трйфторацетамицо,3,6-тридезокси(.-арабиногексопиранозида (2,57 г, 10 .ммоль) в жтилендихлориде с помощью диазометана и эфирата трехфтористого,бора, как указано выше, дает соответствующее 4-О-метилпооизводное (1,7 г, 63), т. пл. 185 еС,М =101 (С=1, в хлороФорме), Данные масс-спектрометрии л/е 271 (И ).Спектр парамагнитного резонанса (СДС 1) имеет поглощение при: 1,31 (д, СН 3 -С), 3,30 и 3,43 (два 5, ОСЙ ) и 4,70, б (широкое 5, С-Й).3идролизом в кислой среде 4-О-метильного соединения (1,63-,г, б ммоль), получают З-трифторацетамидо,3,6- -тридезокси-0-метил.-арабийоексоиираноэу (1 51, 98); т.пл. 201 С, М 3.О -12,7 (С=0,48, в хлороформе). Данные масс-спектрометрического анализа в/е 257 (М+).Обработка пиранозного соединения (1,41 г, 5,5 ьмоль) с помощью и-нитробензоильного хлорида в пиридине дает соответствующее 1-О-и-нитробензоильное производное (1,78 г, 80); т.пл, 159-160 фС,ОБАД=33,5 (С=0,47, в хлороФорме). Данные масс-спектрального анализа, щ/е=240 (м-п-нитробенэойный гидроксид).Раствор укаэанного п-нитробензоильного соединения (1,6 г, 4 ммоль) в безводном метилендихлориде подвергают насыщению при ООС с помощью безводного хлористого водорода. После отфильтровывания выпавшей в.осадок п-нитробензойной кислоты, раствор подвергают выпариванию до сухого остатка с получением 3-трифторацетамндо,3,б-тридезокси-0-метил -1.-арабиногексопираноэилхлорида (1,1 г). Спектр его парамагнитного резонанса (СДС 1 з ) имеет поглощение при 1,34 (д, СН -С), 3,44 (5, СН-О-С-Н) и при 6,17 8 (широкбе 5, С-Н),П р й м е р 1. 4-О-Иетилдауномицин (1 М 1-69) .Раствор дауномицинона (1 г,.2,5 ммоль) в безводном метилендйхлориде (100 мл) вводят в 3-трифторацетамидо,3,б-тридеэокси-0-метил.-ликсогексопираноэилхлорид (О,ф 9 г) и 7 г молекулярного сита (4 А) и обрабатывают с помощью Ад 50 СГ (0,78 г) в безводном диэтиловом эфире при энергичном перемешивании.и З-трифторацетамидо,3,6-тридезокси-О-метиларабнногексопиранозилхлорид и осуществляют этот синтезв соответствии с процедурой примера 1.4-Эпи-О-метилдауномицин получают в виде гидрохлорида в форме оранъОжево-красных кристаллов; т. пл. 192 С=0,047,в метаноле).Соединения 4-0-метилдауномицин,14-0-метиладриамицин, и 4-эпи-.4-0-ме 1тилдауномицин и.4-эпи-О-метиладриамицин, проявляя антимототическуюактивность, являются полезными терапевтическими средствами прн леченииэкспериментальных туморов у животных.Соединения подвергают испытаниюна ьышах ВОЕ,1 (С 57 В 1./6 ДВА) 1, которым делают инъекции 1 п р. (в пахо-.вую область) дозы 10 клеток на мааьЬасцетической лейкемии Р 388. Лечениеначато в виде инъекций в паховуюобласть спустя 1 день .после появленияпрививки новообразования, лекарственные препараты растворены в дистил-лированной воде в виде гидрохлоридов.Дауномицин и производные дауномицина испытаны в отношении их действияйротив лейкемии Р 388, которая оченьчувствительн: к антитуморному воздействию антрациклинов.Данные, приведенные в табл, 1, показывабт, что 4-0-метилдауномицин,ври дозе 4,4 мг/кг имеет большую активность, чем дауномицин; 4-эпи- 0-метилдауномицин при целом ряде доэировок (от 4,4 до 20 мг/кг) проявляет активность и имеет меньшую токсичность, чем дауномицинПри-оптимальных нетоксйчных дозах1дауцомицин (2,9 мг/кг) и 41-эпн-0 метмддауномицин (20 мг/кг) имеютодинаковую антитуморную активность.Представленные результаты показывают, что замена гидроксильной группы в положении 4 аминосахара наметоксиальную группу обеспечиваетувеличение аититуморной активности,придание эпиконфигурации замещающему радикалу в положение 4, приводик общему уменьшению токсичности, какэто можно заключить на основе,наблюдений за мыами с привитыми новообразованиями. В табл. 1 приведена активность против лейкемии Р 388.В табл, 2 приведена активность против лейкемии 1. 1210. После 2 ч выдерживания при комнатной температуре реакционную смесьнейтрализуют с помощью водного раствора бикарбоната натрия и органическуюфазу выделяют испарением под вакуумом, .5Осуществляют хроматографическуюочистку получаемого осадка на колонке с окисью кремния, в качествеэлюента используют смесь хлороформа с ацетоном в отношении 99:1, полу- (0чают 0,9 г 4-О-метил-й-триторацетилдауномицина; т.пл, 151-162 С.ЫО(СДС 1) имеет поглощение при 1,33. раствором гидроокиси натрия (30 мп) 25при активном перемешивании в атмосФере азота, Спустя 1 ч рН реакцион-.ной смеси доводят до 3,5 за счетдобавления 1 н. водного раствора хлористого водорода, затем чтобы устранить некоторые загрязняющие примеси, производят экстракцию хлороформом.Экстракцию проводят иэ водной Фа зы после установления рН 8,5 хлорофор.з 5мом (порциями 50 и 30 мл). Органическую экстрагированную часть просушивают над безводным сульфатом натрия,концентрируют до небольшого объемаи подвергают окислению при рН 4,5 спомощью 0,5 н. метанольного раствора 40хлористого водорода. Добавление избытка диэтилэфира дает в осадке 4-О-метилдауномицин в виде гидрохлорида (0,4 г, 90); т.пл, 1730 С (с разложением), ос,Д=+2100 (С=О,04, в 45метиловом спирте), тонкослойная хроматография на пластине марки Кизельгур Г с использованием смеси раст 254ворителей хлороФорм-метанол-вода даетй 0,40 (дауномицин й0,25). ЯП р и м е р 2. 4-Эпи-О-метилдауномицин (1 М 1 - 74) .Для синтеза препарата, имекщегоданное наименование, в качестве исходного соединения берут дауномицинПрепарат Доза, мг/кг Число погибюихпри отравленииживотных (к общему числу) 2,9 169 4,4 169 6,6 160 Дау номицин 2/10 7/10(4-О-Иетилдауномицин, НС 1 2,9 156 4,4 191 6,6 139 3/77/10 4-Эпи-О-метилдауномицин НС 1 9/9 П р и м е ч а н и е. Среднее время выживания мы 4шей, подвергнутых лечению, посравнению со средним временемвыживания контрольных выоей,умноженное на 100 Таблица 2 Доза, мг/кг Число погибкихживотных приотравлении (кобцему числу) епар 4 4 6,6 амици(4-Эпи-О-м тиладри амицин НС 1 187 181. 8 рмула изобретения чення гндрохлорида Способ полу нтрациклингликози мулыО Ф 3 ще-Ае 0 Ффц Ш ефим 3 аотличающийся тем, чтодауномицинон, растворенный в сухомметилендихлориде, подвергают взаимо 5 действию с хлоридом 3-трифторацетамиб,б 10,0 15,0 22,5 4,4 150 10,0 143 20,0 174 40,0 34 де В представляет собой радикал ф826956 Составитель О. СкородумоваРедактор А. Герасимова Техред С.Мигунова Корректор Н. Швыдкая Заказ 2581/85 Тираж 397 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретенийи открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул. Проектная, 4 до,3,6-.тридеокси-0-метиллнксогексопираноэкла или с хлоридомЗ-трифторацетамидо,3,6-тридеокси-0-метил-Ф.арабиногексопираноэила при комнатной температуре в, те-.чение 1-2 ч в присутствии катализатора трифторметансульфоната серебрав эфирном растворе и дегидратирующегоагента молекулярного сита с последующим мягким щелочным гидролизом вацетоне полученного й-защищенного 1 Огликозида действием 0,2 н. воднойгидроокисью натрия и обработкойполученного свободного гликоэидногооснования метанольным растворомхлористого водорода. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1. Фиэер Л., Физер М; Реагенты для органического синтеза. М., фйир,1970, с. 187 (прототип),