Способ получения циннолинкарбоксамидов или их фармацевтически приемлемых солей

.ЯО 1563592 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯН ПАТЕНТУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Фармиталиа Карло Эрба С.п.А (1 Т)(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЦИННОЛИНКАРБОКСАМИДОВ ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫХ СОЛЕЙ(57) Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения циннолинкарбоксамидов общей ф-лыСН=СН-СН=СН-С=С в (ОН)=СК-Н Ы, где Изобретение относится к способу получения новых производных циннолинкарбоксамидов или их фармацевтически приемлемых солей, обладающих иммуномоделирующим действием. Цель изобретения - способ получения новых производных циннолинкарбоксамидов, по иммуностимулирующей активности превосходящих структурные аналоги, обладающих той же активностью.П р и м е р 1. 4-окси-Циннолин- карбоновую кислоту (4 г) подвергают взаимодействию с БОС 1 (33 г) при температуре обратного флегмообразования 2 ч, После охлаждения реакционная(я)5 С 07 0 237/28//А 61 К 3/50 2К - С(0)-ИКК; К- Н или С-С -алкил; К - фенил, пиридил, Не - , или моно-, или дизамещенный С, -С -алкилом, или их фармацевтически приемлемых солей., обладающих иммуномоделирующей активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса, Синтез ведут реакцией циннолинкарбоновой кислоты или ее активного функционального производного с амином ф-лы ННК,К , с последующим выделением в свободйом виде или в виде соли целевого продукта. Новые вещества можно использовать для лечения острых и хронических инфекционных заболеваний как бактериального, так и вирусного происхождения, а также при лечении неопластических заболеваний у животных, 1 табл. месь выпаривается досуха в вакууме,затем остаток (4-оксициннолин-карбонил-хлорид) суспензируют в дихлорэтане (700 мл) и подвергают взаимодействию с 3-аминопиридином (3,95 г)при перемешивании при комнатной температуре 2 ч, Осадок фильтруют и промывают дихлорэтаном и затем водойдо нейтрального состояния, Полученный продукт очищают на колонке с80 с использованием в качестве элюента смеси хлороформ:метанол:уксуснаякислота в соотношении 95:5:1, Послепромывки кипящим метанолом получают2,6 г чистого 4-окси-М-(3-пиридил)ценнолин-карбоксамида, т.пл, 326328 С, 1563592ЯРР-спектр (диметилсульфоксид,с 1 ), Р, м,д.; . 3,3 (м) (7 К, СиС-б пиридиловые протоны и фенильныепротоны); 8,87 (д.) (1 Н, пиридиловыйпротон)," 11,95 (широкий с.) (1 Н,СОИН-).Аналогичным образом, получают следующие соединения: 4-окси-И-Фенилциннолин"З-карбоксамид, т.пл. 335- 10о337 С; 4-окси-И-метил-И-фенил-циннолин-З-карбоксамид, т.пл, 264-266 С;4-окси-И-(4-метил-фенил)-циннолинокарбоксамид, т,пл. 335"337 С; 4-окси-И-(2,6-диметил-фенил)-циннолин-Зкарбоксамид, т.пл, 360-365 С (с разл.,П р и м е р 2. Сложный метиловыйэфир 4-окси-циннолин-карбоновойкислоты (6 г) подвергают взаимодействию с 2-аминопиридином (16,6 г,поэтапный ввод) в полифосфорной кислоте 300 г (160 г НЭРО,1 и 140 гР О ) при 150 С и одновременном перемешивании в течение 10 ч. После охлаждения раствора ледяной водой и 25нейтрализации 507-ным ИаОН осадокфильтруют и промывают водой, Послекристаллизации из диметилформамидаполучают 4,9 г 4-окси-И-(2-пиридил)циннолин-З-карбоксамида, т,пл. 341343 С.Осуществляя процесс аналогичнымобразом, получают следующие соединения: 4-окси-И-(4-пиридил)-циннолин 3-карбоксамид т.пл, 358-360 С 4-акр е . еси-И-(5-метил-пиридил)-циинолинкарбоксамид, т.пл. 339-341 С.П р и м е р 3. 4-окси-Циннолинкарбоновую кислоту (8,8 г) растворяют в дихлорметане (600 мл)в присутствий триэтиламина (5,6 г). В этотраствор при перемешивании прикапываютэтилхлорформат (6 г), разбавленныйдихлорметаном (50 мл), при 0-5 С.Смесь реагирует при данной температуре 1 ч, затем вводят 2-метиламинопиридин (4,55 г). Реакционную смесьвыдерживают при 0-5 С в течение 1 ч,затем при комнатной температуре 2 чс одновременным перемешиванием.Органический раствор промывают2,57-ным ИаНСО и водой, затем выпаривают досуха в вакууме. Остаточныйпродукт выпаривания очищают на колонке с БхО с использованием в качестве элюентов этилацетата, затемсмеси этилацетат:метанол в соотношении 95:5. Получают 1,65 г 4-окси-Иметил-И"(2-пиридил)-циннолин-карбоксамида, т.пл, 237-239 С (из этанола) .ЯМР-спектр (диметилсульфоксид,с 1), У, м.д.: 3,43 (с.) (ЗН, СНу);7,0-8,3 (м,) (8 Н, Фенильные и пиридиловые протоны),П р и м е р 4, Сложный метиловыйэфир 4-окси-циннолин-карбоновойкислоты (0,6 г) подвергают взаимодействию с 2-аминопиридином(0,56 г)при перемешивании в ксилоле (120 мл)при температуре обратного флегмообразования 48 ч, В ходе данной реакциимедленно отгоняется 60 мл ксилола.После охлаждения осадок фильтруют ипромывают ксилолом. Получают 0,35 г4-окси-И-(2-пиридил) -циннолин-карбоксамида, т,пл. 341-343 С (из диметилформамида),Осуществляя процесс аналогичнымобразом, получают следующие соединения: 4-окси-И-фенил-циннолин-карбоксиамид, т,пл, 335-337 С; 4-окси-И(З-пиридил)-циннолин-З-карбоксамид,т.пл. 326-327 оС; 4-окси-И-(4-пиридил)-циннолин-З-карбоксамид, т.пл.358-360 С.П р и м е р 5. 4-окси-И-(3-Пиридил)-циннолин-карбоксамид растворяют путем .обработки эквивалентным количеством этилата натрия в этаноле.Растворы выпариваются досуха иостаточный продукт выпаривания обрабатывают простым изопропиловым эфиром, затем фильтруют и в результатеполучают натриевую соль 4-окси-И-(3 пиридил)-циннолин-З-карбоксамида,т,пл. ) 300 С, Осуществляя процессаналогичным образом, получают следующие соединения: 4-окси-И-(2-пиридил)-циннолин-З-карбоксамид, натриевая соль, т.пл. ) 300 С и 4-окси-Ифенил-циннолин-З-карбоксамид, натриевая соль, т.пл. ) ЗОО С.Биологические испытания.Иммуномодулирующая активность соединений, полученных по предлагаемомуспособу доказана, например, на томфакте, что эти соединения эффективныв усилении цитотоксического действиямикрофагов по отношечию к опухолевым клеткам в условиях "ин витра".Экспериментальнаяпроцедура дляоценки этого действия заключается вследующем: группы мышей по 4 шт. обрабатываются путем ввода в них внутри-,брюшинно испытываемых соединений, изатем, спустя 7 дней, перитониальные5 156 клетки собираются и высеваются на чашки в течение 2 ч при 37 С. По прошествии этого периода времени стенки промываются с целью удаления не подвергнутых связыванию клеток, затем вводятся опухолевые клетки, служащие мишенью, и инкубация. продолжается в течение 48 ч. В конце этого периода осуществляют оценку жизнеспособности клеток - мишеней колориметрическим методом и осуществляется количественная оценка при570 нм,В таблице суммированы данные иммуностимулирующей активности некоторых соединений, отвечающих данномуизобретению, получаемых согласно описанной экспериментальной прбцедуре,по отношению к опухолевым кЛеткамТБ 5 (Еиг, Л. 1 пппцпо 1 1982, ч. 12,р 320),совместно с данными известного соединения 4-амико-Б-фенил-циннолин-карбоксамид (внутренний кодРСЕ-К) по ЕР 205272, 3592 6 5 10 15 20 25 местно выращенных ТУ 5 и обработанных эксципиентом макрофагов; О,Э,З - оптическая плотность лишь от обработанных эксципиентом макрбфагов; О.Р.С - оптическая плотность от совместно выращенных Т 05 и обработанных соединением РСЕ макрофагов; О.Р.Р - оптическая плотность лишь от обработанных соединением РСЕ макрофагов.Тот же самый процент ингибирования был продемонстрирован соединениямипредлагаемого изобретения под кодомРСЕ 24089, ГСЕ 25008, ГСЕ 25051, ГСЕ 25273 и РСЕ 25512 в форме натриевой соли, Данные по активности, приведенные в таблице, показывают, что отдельный класс соединений в соответствии с предлагаемым способом является более активным в качестве иммуномодулирующего агента по сравнению с иввестными структурными аналогами (4 ф амино-З-циннолинкарбоксамидами), раскрытыми в ЕР 205272.В качестве предпочтительного приСоединение Дозавнутри- брюшинно,мг/кг Цитотоксическая активность макрофага, Еингибирования 30 10 50 50 50 10 50 РСЕ 24089 РСЕ 25008 РСЕ 25051 РСЕ 25273 РСЕ 25512 РСЕ-К 90 71 :80 70 . 84 15 35 40 В таблице РСЕ 24089 - 4-гщурокси- Н-(2-пиридин)-циннолин-З-карбяксамид, РСЕ 25008 - 4-гидрокси-Н-фенил-циннолин-З-карбоксамид, РСЕ 25051 в4- гидрокси-Б-метил-Б-(2-пиридил)-цин-45 нолин-З-карбоксамид, РСЕ 25273 - 4- гидрокси-М-(5-метил-пиридил)-циннолин-З-карбоксамид, ГСЕ 25512 - 4-гидрокси-Б-(2,б-диметил-фенил)-циннолин- З-карбоксамид, РСЕ-К - 4-амина-Б-фенил-циннолин-З-карбоксамид.Цитотоксическая активность рас- . считывается как процент ингибирования роста опухолевых клеток Т 115 с помощью следующей формулы: 55(О.РА-О,Р.В)О,Р.А - оптическая плотность от сов мера предлагаемых соединений, обладающих иммуномодулирующим действием,можно назвать соединение 4-окси-Н- (2-пиридил)-циннолин-карбоксамид (внутренний код РСЕ 24089).Соединения, отвечаюп;ие предлагаемому изобретению, могут быть безопасно использованы в медицине.Так, например, острая токсичность (1 Э) у мьппей, вызванная 4-окси-Н-(2- пиридил)-циннолин-З-карбоксамидом, определяемая (при вводе через рот) при одиночном вводе с возрастающими дозами и измеряемая на седьмой день после дня обработки, составляет более 800 мг/кг. Аналогичные данные токсичности были установлены и для других соединений, полученных предлагаемым способом, Соответственно, соединения РСЕ 25008, ГСЕ 25051, РСЕ 25273 и РСЕ 25512 имеют Щ 800 мг/кг рег 08:. Таким образом, предлагаемые соединения обладают иммуномодулирующимдействием и могут использоваться, вчастности, как иммуностимуляторы,например, при лечении острых и хронических инфекционных заболеваний какбактериального, так и вирусного происхождения, и при лечении неопластических заболеваний у млекопитающих животных,1563592 Формула изобретения Способ получения циннолинкарбоксамидов формулы ОН сох-" и 1 О подвер нием фармацевтически приемлемых г 1 д или С-С -алкил,или пиридильное кользамещенное или замеводо Фени цощенн ами а ю отли единение мул Составитель А.Свиридова Редактор Е.Папп Техред М,Дидык Корректор М,Пожаказ 1 О Тираж 32 Подписно ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5е однои С -С -а щийс или двумя г тем, что где Е - карбоксигруппа или его активное функциональное производное,гают взаимодействию с соедине- ормулы где К и К имеют укаэанные значения,с выделением целевого соединения всвободном виде или в виде фармацевтически приемлемой соли,