Патенты с меткой «экспрессии»

Номер патента: 1622395

Опубликовано: 23.01.1991

Авторы: Маркелов, Павлова, Прасолов, Фролова, Чумаков

МПК: C12N 15/00

Метки: pps-4-neo, введения, вектор, генов, клетках, культивируемых, млекопитающих, соматических, экспрессии

...расщопляют ЕсоК 1 и Ньпд 111, меньший Фрагмент, содержащий промотор БЧ 40, ген устойчивости к ампициллину и огдрВК 322 выделяют электроФорезом в легкоплавкой агарозе (1 ЛРА) нлигируют с большим Фрагментом плазмиды ИИТ ЧВНРР, расщепленной ЕсоК 1 и НпдП 1, обработанной фосфатазой и очищенной электрофорезом в 1,ИРА. Е результатеполучают плазмиду р 1, содержащую ген РНРК под контролем раннего промотора БЧ 40Получение плазмиды р 2. Нлазмиду р 1 расщепляют Рщ 11, дефосфорилируют с помощью фосфатазы из тимуса теленка (С 1 Р), очищают электроФорезом в 1.ИРА и лигируют синтетическим 8-членным ЕсоК 1 линкером. В результате получают плазмиду рЗ, содержащую слева от промотора БЧ 40 сайт ЕсоК 1.Получение плазмиды рЗ. Плазмиду р 2 расщепляют Нпд...

Номер патента: 1622396

Опубликовано: 23.01.1991

Авторы: Маркелов, Павлова, Прасолов, Фролова, Чумаков

МПК: C12N 15/79

Метки: pps-5-neo, введения, вектор, генов, клетках, культивируемых, млекопитающих, соматических, экспрессии

...под контроль промоторацитомегалловируса. 20Конструирование ретронирусноговектора рРЯ-пео приницпиально состоит в следующем. В вектор рРБ-пеовводят сильный конститутивный промотор цитомегаллонируса с однонременной инактивацией одного иэ двух сайтов Ба 11 в полилинкерной области.Введение чужеродных генов в клетки млекопитающих с помощью векторарРБ-пео осуществляют в два этапа.1. ДНК, вектора рРБ-пео с встроенным н него геном внодят методомДНК-трансфекции в клетки, экспрессирующие структурные белки вируса лейкоза мьппей (клетки ( 2 или подобные).2. После селекции клеток, экспрессирующих ретронирусный конструкт, насреде с генетицином производят сборвирусоподобных частиц из среды культивирования клеток и заражают клетки, в которых...

Номер патента: 1705302

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Баранов, Морозов, Спирин

МПК: C07K 1/02, C12P 21/02

Метки: бесклеточной, генов, препаративной, системе, сопряженной, транскрипциитрансляции, экспрессии

...смесь вносят в резервуар, где и протекает процесс сопряженной транскрипции/трансляции, Для предотвращения остановки процесса из резервуара через полупроницаемую мембрану непрерывно отводят поодукты транскрипции (фосфата, АОР, 6 ОР, СОР, ООР) и трансляции (синтезированный полипептид, АМР, 6 ОР, фосфаты и пирофосфаты). Одновременно в резервуар подают алинокислоты, АТР, 6 ТР, СТР, ОТР для восстановления их исходной концентрации. Синтезированный полипептид собирают на колонке со специфическим сорбвнтом, а продукты транскрипции и трансляции собирают в специальном резервуаре для их последующей регенерации, Способ обеспечивает препаративную экспрессию генов в виде молекул ДНК в течение десятков часов с выходом синтезированного продукта...

Номер патента: 1780541

Опубликовано: 07.12.1992

Авторы: Барбара, Лайза, Роберт, Томас

МПК: C12N 15/13

Метки: антитела, химерного, цепей, экспрессии

...ОАСАТСАТЛЬ и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и СЛСТТССССС ТСАССОСАЛС СССТАТТАСА АЬЬЬЬССЯСО СТСТАСТЬТТ220 ггЬгго 240 220СОСТТССССС АААТАТТСТС ЬАЬТСАССТО ТТСАСААТТЬ АТСЛТССЬЛС пинии пинии пинии пинии пинии СССАЬССССС ТТТАТАДСАС ТТТАСТССАС ААСТСТТААТ ТАСТЛССТТС200 г 1 0 2 2 0 2 2 гТАСТТААСТА СТАСССААСТ ТСТССТАЛ БЬ ЬСССТЬТ пинии пинии иии 2 иииЯТСААТТСАТ СЛТСССТТСА ЯСЬССЛТТТТ ТСССЛТАСС"5 15Таким образом, для построения плазмиды РВС около 2 мкг плазмиды рКС 7 в 10 мклбуфера ТЕ прибавляют к 2 мкл 10 Х буфераС 1 а 1(0,5 М МаС 1, 60 мМ трис-НС 1, рН 7,9, 60мМ МдС 12 и 1 мг/мл БСА) и 6 мкл воды, 20Около 3 мкл (около 10 единиц) рестрикционного фермента С 1 а 1 прибавляют к растворуДНК плазмиды рКС 7, полученную реакционную...

Номер патента: 1804480

Опубликовано: 23.03.1993

Авторы: Вилльям, Вильсон, Майкл, Томас

МПК: C12N 15/24, C12N 15/74

Метки: белка, еsснеriснiа, клеток, митогенного, человека, экспрессии, эндотелиальных

...альфа-ФРЭК, Вместо созда. ния смеси иэ олигонуклеотидов, охватывающих все возможные кодирующие последовательности (вследствие деградации генетического кода), конструируют длинный уникальный олигонуклеотид, Такие олигонуклеотид-затравки, кэк показано ранее, являются эффективными зондами при скриннинге комплекс-ДН К.При конструировании ФРЭК-зонда используют три критерия: (1) исключают динуклеотидную пару Сб, Данный подход основан на недостаточной встречаемости СО-пар динуклеотида в ДНК прокариота, В тех случаях, когда возможно, используют данные о предпочтительной утилизации кодона. Когда обэ эти подхода не информативны, возможно необычное связывание пар оснований, Этот подход основан на природной частотности пар оснований 6:Т, 1;Т, 1:А...

Номер патента: 1836424

Опубликовано: 23.08.1993

Авторы: Габриелла, Имре, Пал, Тамаш

МПК: C12N 15/70, C12N 15/72

Метки: белков, вектора, клетках, конструирования, промотора, экспрессии

...может оказывать неблагоприятное воздействие на метаболизмклетки-хозяина,9. Предпочтительными вектооами экспрессии настоящего изобретения являютсяописанные ниже векторы, которые отличаются тем, что они имеют: размер 2800 - 4500основных пар; ген устойчивости к ампициллину; оптимизированное расстояние междусигналами транскрипции и трансляции; известную полную ДНК-последовательность;Со Е репликативного типа; число копий20-30 на клетку(хотя были построены такжеварианты с высоким числом копий, в соответствии с патентной заявкой Венгрии,опубликованной под номером Т 35280); не 1836424сколько различных сайтов распознавания рестриктирующих эндонуклеаз для встраивания в зкспрессируемый чужеродный ген, причем чужеродный ген может быть встроен при...

Номер патента: 1838413

Опубликовано: 30.08.1993

Авторы: Поль, Стефен, Сьюллен, Томас

МПК: C12N 15/52

Метки: dacsdaocs, активности, еsснеriснiа, клетках, экспрессии

...в 2,8 л колбы ГогпЬасЬ и дополнительно инкубировались в течение часа при 30 С в тех же условиях выращивания, Температура воздушного встряхивателя затем повышалась до 42 С, инкубация продолжалась дополнительно в течение 6,5 ч. Чувствительный к температуре репрессор с 1857 лямбда р промотора, установленный таким образом, что обеспечивалась экспрессия ОАСЯ/ОАОСЯ на плазмиде рТ 507, был инактивирован при 42 С и, таким образом, допускал экспрессию ОАСЗ/ОАОСЗ. После инкубации клетки собирались путем центрифугирования и использовались как предпочтительный источник продуцирования активности ОАСЯ/ОАОСЗ.В. Иллюстрация активностей экспандазы и гидроксилазы в клетках Е.со 1 К 12 1 М 109/р 1 Т 507, выращенных при 42 С,Пример 14 г (сырая масса)...

Номер патента: 1264578

Опубликовано: 30.12.1994

Авторы: Долганов, Кафиани, Свердлов

МПК: C12N 15/70

Метки: pgdp3, вектор, генов, клетках, чужеродных, экспрессии

ВЕКТОР PGDP3 ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ ЧУЖЕРОДНЫХ ГЕНОВ В КЛЕТКАХEscherichia coli характеризуется следующими признаками: имеет длину около 4,6 тыс. п.о.; состоит из линейной формы векторной плазмиды pBRH4, фрагмента RFI ДНК фага размером 230 п.о., содержащего регуляторную область гена D и присоединенного к EcoRI-сайту плазмиды pBRH4;содержит в качестве генетических маркеров гены Apr и Tcr; сайты расщепления эндонуклеазами рестрикции, расположенные на следующих расстояниях от EcoRI-сайта: EcoRV 160 п.о. вправо, BamHI 350 п.о. вправо, Sal I 626 п.о. вправо, Bal I 1419 п.о. вправо, Pvu II 2041 п.о. вправо, Pst I 3584 п.о. вправо, сайты узнавания другими эндонуклеазами рестрикции, расположенные на следующих расстояниях от...

Номер патента: 1354709

Опубликовано: 27.02.1995

Авторы: Альтштейн, Анджапаридзе, Антонова, Баев, Бендукидзе, Городецкий, Захарова, Кряжевская, Пашвыкина, Фодор, Чернос

МПК: C12N 15/51

Метки: pvax2, антиген, антигена, вируса, гена, геноме, гепатита, днк, осповакцины, переноса, плазмидная, поверхностного, поверхностный, рекомбинантная, штамм, экспрессии, экспрессирующий

РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК PVAX2 ДЛЯ ПЕРЕНОСА И ЭКСПРЕССИИ В ГЕНОМЕ ВИРУСА ОСПОВАКЦИНЫ ГЕНА ПОВЕРХНОСТНОГО АНТИГЕНА ВИРУСА ГЕПАТИТА В И ШТАММ ВИРУСА ОСПОВАКЦИНЫ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИЙ ПОВЕРХНОСТНЫЙ АНТИГЕН ВИРУСА ГЕПАТИТА В.1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pV2x2 для переноса и экспрессии в геноме вируса осповакцины гена поверхностного антигена вируса гепатита В имеет размеры 5,8 т.п.о. и состоит из следующих элементов: Xho I - BamHI - фрагмента плазмиды pHBV320, содержащего ген поверхностного антигена вируса гепатита В (1,2 т.п.о.); вектора pVAR15 (4,5 т.п.о.), содержащего Hind III - Hind II фрагмент плазмиды pBR322 RI несущий ген устойчивости к ампициллину и репликон...