Способ получения комплексов включения 7 изопропоксиизофлавона

57472 А СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛ ИСТИЧ Е СКИХРЕСПУБЛИК 19) (И) 16//А 61 К 31 1.(53) 8 НИЯ К ПАТЕНТУ ети Терме Ведье еф Сей аи, Кат ютш (Н ли, Виктор лин Калон, О)8, опублик,9/ новного мг ч/мл 3,19 ра ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Хиноий Дьедьсер ешкек Дьяра РТ(НО)(72) Агнеш Штадлер, ЙожВайсфайлер, Золтан ВаргВера Гергели и Тамаш С(56) Патент 6 В М 1360461,кл, 311/30, опублик. 1974,ЕР М 129893, кл. А 611984. Изобретение относится к клатрату 7- изопропоксиизофлавона (иприфлавона), который может найти применение в медицине для лечения остеопороза и остеомаляции; :.,: Известные препараты, содержащие иприфлавон, имеют недостаточную терапевтическую эффективность из-за слабой растворимости и всасываемости.Известен способ получения субстанции иприфлавона.Характеристики соединения следующие:мол.м. 280,3, т.пл. 113-118 С, раство-:., римость в воде при 25 С 1-.42 мг/мл, Она слабо растворимо в ацетоне, но хорошо-в хлороформе и диметилформамиде.Известно; что всасываемость и растворимость фармацевтических составов, обладающих слабой растворимостью, повышается, если их. перемалывают с инертными носителями, Например, перемалыва 2(54) СПОСОб ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСОВ ВКЛЮЧЕНИЯ 7-ИЗОПРОПОКСИИЗОФЛАВОНА(57) Использование: вмедицине для лечения остеопороза и ос(теойЪЪяции, Сущность: 7- изопроксиизофлавон йодвергают взаимодействию с а,ф у -циклодекстрином, гептакис,6-0-диметил- или 2-гептакис,3,б-три-О-метил- р -циклодекстрином или циклодекстриновым полимером с мол. м.4000 в водной или водно-органической среде. Малярное соотйошение 7-изопропоксиизофлавон;циклодекстрй(йовый компонент равно 1;2 - 3,5; Целевой продукт выделяют и сушат. 6 табл,(МФц ние равных количеств йприфлавона, аэросила (или активированного угля, активированной глины, акти(вйрованной окиси алюминия) в вибромельницес использоваавек нием стальных шариков позволяет получить 4 составы, растворим(ость которых вь)ше, чем (Л исходного пирифлавбна. Так, продукт с азросилом имеет растворимость 20,4 мг/мл ф, в 50;-ном водном метаноле через 30 мин, при 37 С, в то время как растворимость не- измельченной смеси составляет только 15,0 мг/мл, т.е, растворимость и чего увеличивается в 1,36 раза. Анализ уровней содержания в крови собак. после перорального бд введения показывает, ч(то иприфлавон нельзя обнаружить в крови. Перемалывание с аэросилом увеличивает всасываемость осметаболита с 0,152 мг ч/мл до 0,485, что соответствует увеличению вЦель изобретения - получение вещества, содержащего 7-изоп ропоксииэофлавон (иприфлавон) и обладающего Способностью всасывания в фармакологически активной концентрации. 5Указанная цель достигается тем, что согласно способу получения комплексов включения 7-изопропоксиизофлавона, имеющего формулу10 СНСН 2 - О15 заключающемуся в том, что 7-изопропоксиизофлавон подвергают взаимодействию с а, Щ -циклодекстрином, гептакис,6,0-диме тил- или 2-гептакис -2,3,6-три-О-метил-Рциклодекстрином, или циклодекстриноаым. полимером с мол. м, 4000 в водной йлй водно-органической среде, прй молярном соот- . ношении 7-изопропоксиизофлавона и 25 циклодекстриновога компонента 1:2-3,3, с последующим выделением и сушкой целевого продукта. ,Установлено, что растворимость полученного соединения включения и чтго а 10 30 раз выше по сравнению с растворимостью иприфлавона введенного регэе, а уровень содержания а крови основного метаболита выше в 15-20 раз. Установлена всасывав мость пирифлавона в неизменйой форме и, . в фармацеатически эффективной концентрации. Одним из доказательств образования соединения включения является увеличение растворимости иприфлавона а 40 водных растворах.Растворимость иприфлавона в полученных соединениях включения приведена в табл, 1.Повышение растаорймости наблюдает ся при использовании всех исследованных циклодекстриновых компонентов.Суммируя результаты, представленные в табл. 1, можно сказать, что растворймость иприфлавонового клатрата в 4 раза выше 50 относительно активного ингредиента, чем растворимость иприфлавона регзе, и всасы ваемость его после перорального введенйя крысам минимумв 10 раз выше по сравнению с уровнем содержания в крови, изме ренном после введения свободного , активного ингредиента в той же дозе. Неизменный уровень содержания иприфлавона составляет по крайней мере 25% от общего количества материала, который всасывается.При получении предлагаемого соединения включения процесс взаимодействия реагентов осуществляют в водно-органическойсреде. В качестве органического растворителя можно использовать спирт или кетон,Предпочтительно используют 50-ный раствор этанола. Выделение целевых продуктовпроисходит при охлаждении реакционныхрастворов. Получают крйсталлические продукты. Можноосуществлять смешение в водном ацетоне одновременно с выпариваниемрастворителя, используя димеб или тримеб(диметил-циклодекстрин или триметил-циклодекСтрин), или растворимый циклодекстриновый полимер, из реакционной смеси можновыделить твердый порошкообразный продукттем выпаривания, сушки, распыления,сушки при темйературе ниже ООС; или в случае с димебом путем нагревания раствора.П р г м е р 1. Получение иприфлавон-циклоде,стринового клатрата, имеющегомолярное соотношение 1:2.11,0 г 39,2 ммоль) иприфлавона и 114,3г (338,3 ммоль) ф-циклодекстрина с содержанием влаги 12,36 ОД растворяют в 2,25 лводного раствора зтанола, составляющего50 об.;, при 80 ОС, интенсивно перемешивая, и дают остйть до комнатной температуры. Осажденный кристаллический продуктотфильтровывают и сушат а течение 24 ч при60 ОС, что дает 96,4 г продукта в виде рыхлого порошка белого цвета. Размер частицменее 90 ,и м. Содержание йприфлааона10,8 мас,о, иприфлааон: Р -циклодекстрин .1:2, выход относительно актйвного ингредиента 94,77 ь исходное соотношение иприфлафон: Р -циклодекстрин 1:2,3),Для того, чтобы доказать, что указанныйпродукт действительно является клатратом,проводят различные анализы: термоаналитический аналиЖ дифракцию рентгеновскихлучей и анализ растворимости,Термоаналитическое поведение механической смеси и свободных компонентовявляется почти одинаковым, но измененияв клатрате, происходящие иэ-эа нагревания,можно наблюдать только одновременно сразложением циклодекстрина. При испытании механической смеси дифференциальной сканирующей калориметрией ДСК) при115 С устанавливают, что эндотермическийпик соответствует точке плавления иприфлавона, но в случае с клатратом пик не наблюдается, Механическая смесьпоказывает непрерывную потерю массы - асоответствии с уровнем содержания иприфлавона в интервале между 130 С и 250 С, нои в случае с клатратами не наблюдают какой-либо потери в массе или высвобождении органических веществ в том жетемпературном интервале (анализ термического расширения, АТР). 5Диаграмма, полученная в результатерентгеноструктурного анализа порошка механической смеси, состоит из добавочныхсумм диаграммпорошковых компонентов.Однако диаграмма порошка из клатрата содержит меньше пиков и новые пики (2 О =6.7; 7,8; 20,9), характеристические для клатрата и отличающиеся от характеристических пиков ф -циклодекстрина (2 О = 4,5; 10,6;12,3), а у иприфлавона составляют (2 О5,8; 11,5; 17,3; 22,0), указывая на новую кри-.сталлическую структуру и, таким образом,подтверждая косвенно образование клатрата.20Для того, чтобы провести испытания, 250мл дистиллированной воды помещают в колбу емкостью 500 мл и нагревают до 37 ОС.Затем продукт в количестве, соответствующем 50 мг активного ингредиента, добавляют, затем суспензию, полученную такимобразом, перемешивают при 100 об/мин,используя магнитную мешалку Через определенные интеРвалы отбирают образцьпроб по 2-6 мл и фильтруют на стеклянном 30фильтре, и после разбавления фильтратцисследуют фотометрически в смеси вода:этанол в соотношении 1:1.Полученные результаты приведены втабл. 2. : 35Растворение свободного активного ин-гредиента является относительно медленным, оно достигает величины насыщенияиприфлавона (около 1,5 мг мл) через 40-50мин. В случае с образцами, содержащими 40иприфлавон - р -циклодекстриновый клат-рат, максимальную концентрацию растворенного иприфлавона получают уже через 1мин, т.е. активный йнгредиент растворяетсясразу же - так же происходит мгновейное 45растворение и в начале концентрация активного ийгредиента может быть такой жевысокой, как идвойной уровень насыщейия."Растворение смеси иприфлавона и В-циклодекстрина является более медленным, 50концентрация растворенного активного ингредиента достигает величины, определен-ной тогда, когда растворяют клатрат, толькочерез 30-40 мин,Растворимость активного ингредиента" 55определяют также при различных уровняхсодержания рН. Полученные кривые растворимости при рН 1,3 (это соответствуеткислотности желудочного сока, НС) и прирН 7,6 (это соответствует величине рН кишечника, Фосфатнцй буфер) существенноне отличаются от величин растворимости,полученных в дистиллйрованной воде, соответственно растворимость активного ингредиента не зависит от рН в испытуемоминтервале рН,П р и м е р 2. Получение иприфлавона -Р -циклодекстринового клатрата, имеющего малярное соотношение 1;2,0,5 г (1,78 ммоль) иприфлавона раство-ряют в 50 мл 96(,-ного этанола, и раствор,полученный таким образом, добавляют покаплям к раствору из 8,0 г (5,35 ммоль) Р-циклодекстрина с содержанием влаги13,3% в 50 мл дистиллированной воды втечение 2 ч, затем смеси дают остыть докомнатной температуры, После интенсивного перемешивания еще в течение 16 чполученный продукт отфильтровывают и сушат в течение 24 ч при 60 С, чтобы получить5,5 г продукта.Содержание иприфлавона: 7,9 мас.%,молярное соотношение иприфлавон: Рциклодекстрин = 1;2,29. Выход относительно активного ингредиента 87. Продукттакже содержит свободный циклодекстрин .(исходное соотношение иприфлавон; уциклодекстрин 1 3)П р и м е р 3, Получение иприфлавон-циклодекстринового клатрата, имеощегомолярное соотношение 1:2.0,5 г (1,78 ммоль) иприфлавона растворяют в 10 мл ацетона в роторной ступке идобавляют 4,0 г (3,70 ммоль) а-циклодекстрина с содержанием влаги 10 мас.;(, и 2 млдистиллированной водц. Легкую суспензию, полученную таким образом, гомогенизируют, растирая до.тех пор, пока невыпаривается растворитель, После этогопродукт, полученный таким образом, сушатв течение 24 ч при 60 С, Он содержит 11,1;активного ингредиента и также свободныйа -циклодекстрин. Молярное соотношениеиприфлавона к а -циклодекстрину составляет 1:1,1.Прймеры форм выйуска фармацевтических составов, содержащих иприфлавонциклодекстриновцй клатрат в качествеактивного ингредиента; и их биологическиеиспытания,П р и м е р .4. Получение комплексавключения иприфлавон-Димеб с молярнымсоотношением 1:21,2 г (1,03 ммоль) Димеба растворяют в10 мл дистиллированной водц и добавляют0,1 г (0,37 ммоль) иприфлавона. Полученнуюсуспензию взбалтывают 4 дня, затем фильтруют на фильтре 04 и после этого осушают,вымораживают с получением 1,25 г продукта, Он содержит 5,67% активного компонента. Выход по активному компоненту 71%(морярное соотношение иприфлавон: Ди-,меб равно 1:2,8),П р и м е р 5. Получение комплекса 5включения иприфлавон-Тримеб с молярнымсоотношением 1:2.2,03 г (1,73 ммоль) Тримеба растворяютв 250 мл 50%-ного этанола и.добавляют 0,14г(0,5 ммоль) иприфлавона. Полученный раствор перемешивают, затем высушиваютразбрызгиванием с получением 1,96 г продукта, Он содержит 6,9% активного компонента. Выход по активному компонентусоставляет 96,6% молярное соотношение 15иприфлавон:тримеб равно 1:3,5),П р и м е р 6. Получение комплекса:в кл ючен ия ип рифлавон-циклбКЬкстриновый полимер с, молярным соотношением.12. - .. 20. 2 г(0,2 ммоль) циклодекстринового полимера со средней мол. м. 4000 растворяютв 250 мл 50%-ного этанола, затем поступаютаналогично примеру 2. Количество полученного продукта составляет 1,85 г, содержание в нем активного компонента 7,2%.Выход по активному компоненту составляет95,1%.П р и м е р 7. Сравнивают растворимость известного препарата, содержащего 30йпрйфлавон-ямболана в таблетках, содержащих 200 мг иприфлавона (А), таблеткИ,содержащей 40 мг иприфлавона в формеф -циклодекстринового клатрата, полученного согласно примеру 1, и таблетки, содержащей 200 мг иприфлавона и 330 мг,в-циклодекстрина при 37 С в 500 мл желудочного сока. Кусочек таблетки помещают воборудование и определятот кдличестворастворенного материала путем спектрофотометрии при 247 нм.Составы испытуемых таблеток следующие: таблетка А (известная как таблетка ям болап, К), мг: иприфлавон 200;амилум максдис 36;. лактоза 60; ПВП 13; 45асма спренг 30; тальк 7; стеарат магйия 4,Таблетка В,Предлагаемый клатрат, содержащий,мг: 40 мг иприфлавона 370; ПВП (поливинилпирролидон) 15. 50Таблетка С, мг: иприфлавон 200;,В -циклодекстрин 330; ПВП 20.Результаты исследований приведены втабл. 3.Из результатов видно, что только 0,62 мг .иприфлавона растворяются из обычной таб. летки, но в случае с таблеткой, содержащейодну пятую активного ингредиента в форме -циклддекстринового клатрата, по сравнению с количеством активного ингредиента,присутствующего в обычной таблетке, количество растворившегося активного ингредиента удваивается и количестворастворенного материала на 30 превышает максимальную величину, полученную прииспользовании обычных таблеток через 2мин. В случае с таблеткой, которая содер-.жит иприфлавон и а -циклодекстрин в форме механической смеси, растворениепроисходит несколько медленнее, но дажев этом случае количество растворенного активного ингредиента выше по сравнению собычной таблеткой.В испытаниях на всасываемость используют самцов крыс весом 170-200 г, Спустя 16 ч после обездвижения вводятиприфлавон в дозе 25 мг/кг (группа А), иприфлавон- ф -циклодекстриновый клатрат,приготовленный согласно примеру 1 (группа В) и иприфлавон- Р -циклодекстриновуюсмесь (группа С) - оба содержат 3-циклодекстрин в эквимолярном соотношении поотношению к активному ингредиейту, послеэтого животным дают пищу, для крыс воду(по желанию) ас Ышв.Материалы для испытания смешивают втечение 5 мин в 2 мл 1%-ного растворацеллюлозы и вводят через желудочную трубку.Образцы плазмы собирают через 10, 30 мини 1; 2 и 4 ч после лечения, используя кровь,которая вытекает из.1/епа 1 еаогаз после ееперерезывания у животных, которым проводят анестезию эфиром, Образцы крови помещают в пробирки с гепарином,центрифугируют, подвергают нутч-фильтрованию и хранят глубоко замороженными вампуле до последующего использования,Для того, чтобы отобрать образцы мочи,после обработки животнйх помещают в отдельные метаболические емкости, и собирают отдельно мочу и фекалии в течение 24 ч,Образцы мочи хранят до последующего использования, подвергнув глубокому замораживанию. Концентрацию неизменногоиприфлавона и его основных метаболитов(7-гидроксиизофлавон) в моче и образцахплазмы определяют с помощью жидкостнойхроматографии высокого давления,Для того, чтобы провести жидкостноехроматографирование высокого давления;используют жидкостной хроматограф типаВРи в колонке обратного тока .сЬгозогЬ(размер зерна в случае с образцами плазмы10 мм и в случае с образцами мочи 5 рм).Скорость потока элюента: 1,5 мл/мин, дли-.на волны УФ-детектора 254 нм, скоростьдвижения бумажной ленты 0,2 см/мин,В случае с образцами плазмы в качестве касается основного метаболита, то в каждом элюента используют смесь: 0,05 М ацетат- промежутке времени уровни плазмы в 10 - ный буфер(рН 3): ацетонитрил - 60:40 и в 20 раз выше в группе А по сравнению с случае с образцами мочи смесь ацетатный уровнями групп А и С, которые определены . буфер: ацетонитрил - 55: 45. Внутренний 5 через один и тот же отрезок времени, т.е. стандарт - этаноловый раствор 2-метил- величины группы В находятся между 3 и 20 метокси-нитроизофлавон (100,и г/мл); и р Г/мл, тогда как в случае с группами А и С для калибрования используют растворы, находятся винтервалеот 0,2 до 1,0,иг/мл. включающие 100,и г/мл и 10 р г/мл 7-гид- Во всех случаях второй пйк появляется в роксиизофлавона в метаноле., 10 кривой плазмы через 2 ч, что может бытьДля того, чтобы подвергнуть анализу об- . результатом интенсивйого энтерогепатитразцы плазмы, к 1 мл плазмы добавляют. 1 ного цикла и лучшей всасываемости в малом мл ацетатного буфера (рН 5) и фермент глю- кишечнике. куронидазу (арилсульфоназа) (100 Р/),раз- В табл. 6 показаны результаты жидкостбавив в 10 раз 10 мл дистиллированной 15 ной хроматографии высокого давлений обводы, и инкубируют при 37 С в течение 24 ч. разцов мочи, В интервале 0 - 24 ч в образцах После инкубирования добавляют 50 мл мочи не могут обнаружить неизменйый ип- : ЯаОН, смесь экстрагируют бензолом и цен-. рифлавон. Однако можно проследить вали-.трифугируют, Отделяюторганическуюфазу, чие основного метаболита(во всех случаях),водную фазу подкисляют 400 мл 1 Н НС 1, и 20 Средняя величина содержания 7-гидрокси после добавления 50 мл раствора внутрен- изофлавона 9526 аг, что соответствует него этанола, экстрагируют повторно 8 млтрехкратному повышению по сравнению с бензола. Органическую фазу центрифугиру- другими группами." Согласно опыту количеют, выпаривают остаток, растворяют в 100 ство основного метаболита составляет 50- .,ил элюента, используют для инъекции й 25 55 от общего количества метаболита, и измеряют 50,и л этого раствора,: " поэтому общее количество, выделившееся с. Уравнение кривой калибровки: у = 8,2 х мочой, в 2 раза выше; чем количество, кото - 0,08 коэффициент поправки 0,9999,: рое определено де Гасло,Для того, чтобы проанализировать об- Таким образом, в случае с группой В разец мочи; к 0,5 мл мочи добавляют 0,5 рл 30 4 ОК вто время как в случае с группами А и ацетатного буфера (рН 5) и 10 Рл фермента С только 10 - 140, введенной дозы выделяет/3 -глюкуринидазы (арилсульфатаза) (1000 ся с мочой.ЕЧ) и смесь экстрагируют 8 мл бейзола и После введения крысам иприфлавон - : центрифугируют. Органическуюфазу отде- Р-циклодекстринового клатрата определяляют, воднуюфазе подкисляют,добавив 400 35 ют, что можно достичь повйшения в 10-15 мл 1 Н НС, и после добавления 50 мл рас- раз уровня содержания в плазме и в 3 раза .твора внутреннего этанола его экстрагиру- ., повысить количество вещества, выделяюют еще 8 мл бензола. Органическую фазу . щегося с мочой, по сравнению с контрольцентрифугируют, выпаривают и остаток ной группой. растворяют в 100,ил элюента и инъекциру Ф о р м у л а и 3 о б р е т е н и я ют 10 мл этого раствора в жидкостный хро- Способ получения комплексов включематограф,: ; .: .: ния 7-изопропоксиизофлавона, имеющегоУравнение кривой калибровки; у = формулу 0,911 х - 0,09; коэффициент поправки 0,9995. ,: .;, 45. ,.".- ОВ табл, 4 показаны величины концентрации неизменного иприфлавона; в табл. 5- величины концентрации основного мета- н , 0 болита, определенные в крови животных,Группе А вводят иприфлавон рег ае, 50группе В - предлагаемый клатрат и группе . С - омесь иприфлавона и Д - циклодекстри- обладающих способностью всасывания в на. На каждом отрезке времени неизмен- фармакологически актйвной концентрации, ный иприфлавон можно обнаружить только заключающийся в том, что 7-изопропоксиив случае группы В и его количество состав зофлавон подвергают взаимодействию с ляет 50-500 нг/мл. В случае с группой А, а,В, у -циклодекстрином, гептакис,6-0- аналогично группе С, неизменный иприфла- . диметил- или 2-гентакис,3,6-три-О-метилвон можно обнаружить только через некото- Р -циклодекстрином, или циклодекстринорые периоды времени (через 2 и 4 ч). Что вым полимером с.мол. м,4000 в водной или1757472 12 водно-органической среде, при молярном последующим выделением и сушкой целесоотношении 7-изопропоксиизофлавона и вого продукта,циклодекстринового компонента 1:2 - 3,5 с Таблица 1 т е ю е еа е ю е в аююававвааваев юювееаввеваю вавааваева авиваае в ю е в ю е аа е а ае о.-ЦЛДимеб Тримеб Циклодексти рин, И г/мл твеетеютта иваавиаееаеае и аа ю ю ааи т ав в ав и е а а е т ав ав и ю ю в аа в е ве ю в е аа т и е е е а в т 22,0 40,6 59,1 77,5 96,2 114,8 191 3 284,4 416,8 588,2 761,0 1118 1142 1654 1824 2012 2024 150ю и а т в ю в а а т ю ею ав юа в в в а вею е м в ю ее е в в а в в в е и аа е в е в е ве ае е В в т в в е вв в в е а в в в аав е а е Таблица 2 е т а аеава ю а е а а е Е ве в е в е а е е е е Ве ае ав е а аа ю е ВВ а в а ее е е ееа а 1(онцентрация растворенного вона, рг/млиприфлаВремя,мин Иприфлавон (505 мг) + циклодекст" рйн (444,7 мг)юаеаеаветававаа и а а е аа ю аа авва аввае ее ВамИприфлавон / вцИКЛОе декстриновцй клатрат 471,5 мг Иприфлавон 51,5 мгиею титааюавеееввюеав авваееавава аюеве еюи атииеев ааеев еевеюВееавваивва тии а3 5 7 911 13 15 20 30 40 50 70 90 100 110 120 1 2 3 5 10 15 20 30 40 60 90 120 4,12 4,68 5,08 6,10 8,19 9,63 10,61 14,77.18,24 21,63 19,02 23.65 0,435 Оф 327 0,4010,507 0,882 1,123 1,197 1,423 1,508 1,62 1,525 1,482 2,52 7,03 11,44 15,93 19,51 15,22 15,48 15,75 13,46 7,59 6,20 5,44 6,08 6,93 6,64 5,66 2,02 2,052,16 2,38 2,74 3,26 3,04 3,64 4,51 4,76 5,12 5 48 13,219,268,037,367,62 .:7,437,89897,116,816,896,94 0,442 0,462 0,726 1,20 2,28 3,21 4,69 5,86 6,07 6,27 637 8,23 9,88 11,32 14 71 26,82 43,91 61 3 96,2 127 5 179 у 0 218,8269,3 435,60,80 0,21 1,05 0,45 1,10 О;58. 1,15 0,56 1,15 0,61 1,30 0,60 1,30 0,62 1,40 60120180 в В ЩвеюеееювеВвааТаблВ е е в ВВ В в ти а а в в в 1 и ВВ в Ъе ЧВе е т т е е е В а вв в вт в е вв ремя латрат,по иприфлав. лученныи с во гласно прмеру 1) ееаю е и ю и т ве 0 О 0,5 0 0 09 4 0 0 0 0 0 О 0Е Е В Е т и е вт в в таЕЕ еев е е е в в юв ееВвт теи Г 0 О 20070 0)065 0,055 0,073 0,468 0,149 а,94 0,271 0",354 0,514 0,402 0,214 О,148 0,363 0,054 0,50 0,60 0,65 0,75 1,00 1,15(клатрат,полую ценный согласно примеру 1) Сив вю е в аа е еЕ а е в а а е а а ю юии е иа е ююие е ив а ю е ие аю е е иа Е еи е еваммамаевав ив 0,17 0,5 24 в т е аа иааи ю а иа а июи т а в ю ию юв м е ивв е Е е ее а е е юа е т е е а в виа Ье ю ви ив ек ав м ив юаЕ Е в е ив в е а и Таблицабее еюаваев Мамаеа ю ив в аа аю ие т ю иа а юи а и е аю е ви авКомпонентв Се е м Е е м аи м е аа ю ие аа иа е а ве а еи еюа Общее коли"цество выКоличество 0 ь У животного выделившеегося матери"ала в 4 ДОзуОЖ делившего" ся материаЛа, ЙГ. с ии а в ваи а ив е ии м иа ю м М в ю юа ю еа е еиа а ае ае е Е е в ев иа ю е ю тввивеюивиюаиииви12335 11,34 9,4413,7710,8139, 16 236,1 344,4 270,4 978,9 А (иприфлавон) 3809 В (клатрат согласнопримеру 1)С (смесь иприфлавоиа и /-циклррекстриие 341,6494,3163,9 13,6619;776,56 иа авивв ииюииютем тааеа ив юаваеватемиввамвеюеиюевМаве ем ювеюва вютекМаива Составитель О,РокачевскаяТехред М,Моргентал Корректор ЛЛукач Редактор А. Козарец Заказ 3103 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР .113035,Москва,Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 0,156 0,265 0,195 0,860 0,591 0,365 0,239 0,790 0,340 1,218 0,715 1, 093 0,220 0,237 0,235 0О 0 2,4503,65012,2704,84012,1904,3303,87022,0403,7801,740аю2520ООО2,080014570,7670,304:0,3740,358:0,306ав0,274:0,2700,358:0,826ю0,1300,3300О0