N-(3-этиладамантил-1)-этилкарбамат, обладающий противовирусной активностью, и способ его получения

(9) ОП БРЕТЕНИЯ АНИ ЕЛЬСТВУ ОМУ СВ АВ итут чно ого ла- КоЛ,С,нко гов,омитение относится к инениям адамантак М-(3-этиладаман к способу его полуил адам антил-эт новым химнового рятил)-этчения.илкарбам Изобре ческим саед конкретно карбамату и 1-(3-Эт формулыи- а,ат ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Самарский политехнический инстим. В,В. Куйбышева, Белорусскйй науисследовательский институт эпидемигии и микробиологии, Минсгосударственный медицинский институтИнститут вирусологии им, Д.И, Ивановс(56) Аггпе п)пе 1 Тогзсй, 1973, 23, М 5, с,АгсЬ РЬаггп, 1975, 308 М 10, с, 348.Патент Франции М 1588472,кл. С 07 С, 1950.Агге а Тогзс, 1973, 23, М 24, с, 5Патент Франции М 2224446, кл. С 07 С 103/19,1)5 С 07 С 269/06, 271/24. А 61 К 31/ Соп 1 аст Оегп)абаз, 1984, 10, М 5, с. 317. (54) М-(3-ЭТИЛАДАМАНТИЛ)-ЭТИЛ КАРБАМАТ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ(57) Изобретение относится.к замещенным карбаматам, в частности к получению И-(3- этиладамантил)этилкарбамата, обладающего антивирусной активностью, что может быть использовано в медицине, Цель - создание нового .более активного вещества указанного класса, Синтез ведут смешиванием эмульсии 1-этиладамантана с СНзС(О)ОН и НИОЗ при массовом соотношении 1:(1 - 1,5):(3,5 - 4,5) с последующим добавлением этилового эфира карбаминовой кислоты при 50 - 100 С, Выход 950, т, кип.173 - 174 С (11 мм рт.ст,), П д = 1,4998, противовирусная активность выше действия известного тромантадина в 2 раза в отношении вирусов герпеса и обладает активностью против вирусов осповакцины и аденовирусов З-типа, 2 с.п. ф-лы, 4 табл,обладает противовируснои активностью в отношении вирусов герпеса, осповакцины и аденовирусов и лечебным эффектом при а экспериментальном герпетическом кератоконъюнктивите лабораторных животных. Данное соединение, его свойства и способ получения в литературе не описаны.Известны соединения адамантанового ряда, обладающие противогерпетическим действием: эфиры адамантилгидроксиламина с этоксиуксусной и М-диметиламиноэтоксиуксусной кислотами; производные40 45 50 адамантилтиомочевины; диалкиладамантандикарбаматы.Однако в результате недостаточно высокой противогерпетической активности и сложности методов получения указанные соединения не применяют в качестве средств для лечения герпетических инфекций.В медицинской практике за рубежом широко применяют для лечения заболеваний герпетической природы эффективный препарат адамантанового ряда - тромантадин - гидрохлорид 1-(1-адамантил)-2 Я 2-диметиламино)этоксиа цетамида,Тромантадин обладает сходным с данным соединением механизмом противогерпетического действия.Однако тромантадин обладает целым рядом существенных недостатков;.недостаточная высокая противогерпетическая активность, отсутствие вирусингибирующего действия на вирус осповакцины и аденовирусы, сложная и многостадийная технология получения (из адамантана - шесть технологических стадий).Существуют данные о возможности аллергических дерматитов, вызываемых тромантадином.Все это обусловливает необходимость поиска новых, более эффективных противогерпетических препаратов адамантанового ряда.Наиболее близким к предлагаемому является способ получения 1-адамантилзамещенных карбаматов, заключающийся во взаимодействии адамантановых углеводородов с 10 - 25-кратным моля рным избытком азотной кислоты с последующим добавлением в реакционную смесь эфиров карбаминовой кислоты (4-кратный молярный избыток) при температуре не выше 30 С и выдержкой в течение 1 ч.Выход составляет 59-84 ,Известный способ обладает следующими недостатками: недостаточно высоким выходом целевых продуктов и взрывоопасностью реакционной массы.В случае адамантана оптимальным с точки зрения детонационной способности является молярное соотношение адамантан: азотная кислота 1:11 по уравнению С 10 Н 16.+ 11 НМОз = 10 СО 2+ 5,5 Ы 2+ 13 Н 20. Таким образом, на первой стадии процесса образуется взрывчатая смесь. Высокая концентрация окислов азота в реакционной массе приводит к резкому тепло- и газовыделению при добавлении эфира карбаминовой кислоты за счет реакции нит 10 15 20 25 30 35 розирования, что усложняет технологическое оформление процесса; в продуктах реакции присутствует трудноотделяемая примесь - нитрат соответствующего адамантанола (до 3 - 5), так как известно, что в среде азотной кислоты происходит замещение уретановой (карбаматной) группы на нитратную. Все органические нитраты теримчески нестабильны, Таким образом, снижается стабильность целевых продуктов при хранении,Цель изобретения - получение нового соединения, обладающего более высоким противовирусным действием М-(3-этиладамантил)этилкарбамата и синтез его с высоким выходом по простой технологии.Согласно изобретению М-(3-этиладамантил)этилкарбамат получают взаимодействием эмул ьси и 1-этил адаманта на в уксусной кислоте с азотной кислотой в массовом отношении 1;1,0 - 1,5:3,5 - 4;5 соответственно, и далее с этиловым эфиром карбаминовой кислоты при нагревании при температуре 50 - 100 С и выделением целевого продукта.Использование уксусной кислоты как специфического растворителя при взаимодействии этиладамантана с азотной кислотой приводит к тому, что устраняется взрывоопасность реакционной смеси за счет резкого изменения стехиометрического отношения (для окисления уксусной кислоты до углекислого газа и воды также необходима азотная кислота); увеличивается выход целевого продукта (до 89 - 95 ) за счет снижения кислотности реакционной среды и, следовательно, повышения устойчивости образующегося карбамата, а также по причине более высокой регио- и хемоселективности реакции в мягких условиях(разбавление). Снижение количества уксусной кислоты приводит к утрате указанных преимуществ, Увеличение ее избытка экономически неоправданно. При уменьшении количества азотной кислоты ниже указанных пределов в реакционной смеси остается исходн ым 1-атил адаманта н. Снижение температуры ниже 50 С резко замедляет скорость реакции, и выход целевого продукта падает. Верхний температурный предел обусловлен точкой кипения реакционной массы,Положительный эффект изобретения заключается в получении й-(3-этиладамантал)этилкарбамата, обладающего более высокой активностью и широким спектром противовирусного действия, чем соединение, близкое по структуре и применению, тромантадин, а также в повышении выходаи обеспечении безопасной технологии получения данного соединения.П р и м е р 1. К эмульсии 20 мл(18,7 г)1-этиладамантана в 18,5 мл уксусной кислоты при температуре не более 30 С добавляют 43. мл (65 г) 96 - 100-ной азотнойкислоты, выдерживают 1 ч при 25-30 С идобавляют 50 г этилового эфира карбаминовой кислоты, следя за тем, чтобы температура не превышала 30 С, выдерживают 0,5 ч 10при 100 С и выливают в ледяную воду. Выпавшее масло экстрагируют гексаном, промывают 5 -ным раствором карбонатанатрия, водой, сушат б/в сульфатом натрия.Гексан отгоняют и остаток перегоняют в вакууме.Выход 26,2 г (92), т. кип. 173174 С/11 мм, по = 1,4998, В = 0,58(хлороформ),ИК-спектр ( Р, см "); 3385, 3010, 1710, 201520, 1290, 1220, 1045. Спектр ПМР (д, м,д.):0,69 г(ЗН); 0,86 - 2,16 м (19 Н); 3,86 к(2 Н); 6,53с (1 Н).Найдено,: й 5,40С 15 Н 25 М 02 ,25Вычислено, : М 5,58.П р и м е р 2. К эмульсии 20 мл (18,7 г)1-этиладамантана в 28 мл ледяной уксуснойкислоты при температуре не более 30 С добавляют 56 мл (84 г) 96 - 100-ной азотной 30кислоты, выдерживают 15 мин при 25 - 30 Си добавляют 65 г этилового эфира карбаминовой кислоты, выдерживают 3 ч при 50 С ивыливают в воду. ВыдеЛение целевого продукта аналогично примеру 1. Выход 25,4 г 35(89 ). Физико-химические характеристикиидентичны примеру 1,П р и м е р 3. К эмульсии 20 мл(18.7 г)1-этиладамантана в 25 мл уксусной кислотыпри 25 - 30 С добавляют 50 мл (75 г) 96- 40100 -ной азотной кислоты, выдерживают0,5 ч при 25 - 30 С и добавляют при 20-30 С60 г этилового эфира карбаминовой кислоты. Выдерживают 1 ч при 75 С и выливаютв воду, Выход 27,1 г (95 ). Выделение и 45физико-химические свойства аналогичныпримеру 1.Влияние соотношения реагентов на выход продукта.Нижние значения. К эмульсии 20 мл 50(18,7 г) 1-этиладамантана в 18,5 мл ледянойуксусной кислоты при температуре не более20 С добавляют 43 мл (65 г) 96 .-ной азотной кислоты, выдерживают 0,5 ч при 20 -25 С и при 25-30 С добавляют 50 г 55этилового эфира карбаминовой кислоты,выдерживают 0,5 ч при 50 С и выливают вводу. После экстракции гексаном, отгонки растворителя и перегонки в вакууме получают 25,7 г (90) целевого продукта,Средние значения. К эмульсии 20 мл(18,7 г) 1-этиладамантана в 23 мл ледянойуксусной кислоты при 20 - 25 С добавляют50 мл (75 г) 98 ф-ной азотной кислоты, выдерживают 1 ч при 25 С и при 25-30 С добавляютт 60 г этилового эфира карбами новойкислоты, выдерживают 45 мин при 70 - 75" Си выливают в воду. После выделения выход25,9 г(91).Верхние значения. К эмульсии 20 мл(18,7 г) 1-этиладамантана в 28 мл ледянойуксусной кислоты при 25 С добавляют 56 мл(84 г) 100;-ной азотной кислоты, выдерживают 1 ч и при 25 - 30 С добавляют 70 г этилового эфира карбаминовой кислоты,выдерживают 1 ч при 100 С и выливают вводу. После выделения выход 26,2 г (92 ),При этом получить целевой продукт безиспользования уксусной кислоты невозможно, а при проведении процесса при комнатной температуре продукт получают только свыходом 45,9 ,й-(3-Этиладамантил)этилкарбамат -бесцветная вязкая жидкость с легким желтоватым оттенком, хорошо растворимая вгексане, вазелиновом масле, бензоле, хлороформе,ацетоне, спирте,диметилсульфоксиде, устойчивая на свету и при длительномхранении,Биологические испытания данного соединения показывают, что оно обладает выраженным антивирусным действием вотношении вирусов герпеса, превосходящим в 2 раза действие известного противовирусного соединения тромантадин, атакже противовирусной активностью против вирусов осповакцины и аденовирусовЗ-типа,й -(3-Э тил адама н т ил) этил кар ба маттакже обладает лечебным эффектом приэкспериментальном герпетическом кератоконъюнктивите лабораторных животных(морские свинки, кролики).При проведении испытаний использованы тканевые культуры первично-трипсинизированных фибробластов эмбрионов кури клеток почки эмбрионов человека, вирусыгерпеса простого 1-типа(Штаммы 1 С и "Коптев"),Токсические свойства й-(3-этиладамантил)этилкарбамата исследованы на указанных культурах, Данное соединениеявляется малотоксичным соединением.Максимальная толерантная концентрация50 мкг/мл.ЮБо = 1830 мг/кг, для тромантадинаЦ)ио = 71 кг/кг (на мышах).Определен химиотерапевтический индекс (ХТИ) как отношение максимальной толерантной концентрации к минимальноактивной концентрации (МТД/МАК),Установлено, что данное соединение 5обладает выраженной способностью подавлять размножение вирусов герпеса и осповакцины в тканевой культуре,В табл. 1 показаны результаты игибирования размножения вирусов в 10фибробластах эмбрионов кур й-(3-этиладамантил)этилкарбамата (1) и тромантадина (11),При этом ХТИ М-этиладамантилэтилкарбамата в 2 раза выше, чем у.тромантадина. Кроме того, в экспериментах наклетках почки эмбрионов человека установлено; что М-(3-этиладамантил)-этилкарбамат подавляет развитие цитопатическогоэффекта аденовируса на 75в концентрации, соответствующей. МТД или 1/2 от нее,В экспериментах на животных данноесоединение применяют в виде 1-ной мазина стандартной глазной основе аптечногоприготовления с ежедневным 2 - 4-кратным 25закладыванием мази, В экспериментах наморских свинках применение мази М-(3-атил адама нтил)-этил ка рба мата обес печи ваетболее быструю регрессию всей суммы клинических признаков герпетического кератоконъюнктивита в сравнении с эффектом1 ,-ной мази тромантадина.В табл. 2 показаны результаты влияния1 /-ных мазей й-(3-этиладамантил)-этилкарбаматаи тромантадина (Н) на лечение 35экспериментального герпетического хератоконъюнктивита морских свинок,Противогерпетическая эффективностьИ-(3-этиладамантил)-этилкарбамата подтверждена также в экспериментах на краликах,В табл. 3 показаны результаты влиянияК-(3-этиладамантил)-этилкарбамата (1) натечение экспериментального герпетического кератоконъюнктивита кроликов, 45Выраженный ингибирующий эффектпредлагаемого соединения сохраняет приинфицировании клеток Чего вирусом герпеса 1-типа, устойчивым к ацикловиру, (АЦВ)препарату нуклеозидной природы. 50В табл, 4 показаны результаты ингибирования репродукции ВПГ(штаммы 1 С,АЦВР) данным соединением , тромантадином, ацикловиром и их сочетаний.Если при использовании ацикловира в 55отношении штамма вируса ВПГ, 1 С АЦВРне обнаружено снижения титра вируса, тосоединение в дозах 30 и 15 мкгlмл подавляет репродукцию вируса на 2,4 и 1,7 у ТОДБО/мл соответственно,Использование низких концентраций (практически не оказывающих влияния на ВПГ) й-(3-этиладамантила)-этилкарбамата и цикловира приводит к выраженному синергидному антигерпетическому действию,Комбинация тромантадина с ацикловиром показывает аддитивный эффект в отношении ВПГ,Таким образом, предлагаемое соединение Й-(3-этиладамантил)-этилкарбамат обладает выраженными п ротивовирусными свойствами, проявляя активность в отношении вирусов герпеса, осповакцины и аденовируса, высокоэффективно в отношении штамма вируса герпеса, резистентного к действию известного препарата цикловира, Полученное соединение имеет выраженный синергидный эффект в сочетании с ацикловиром,Таким образом, новое производное адамантана представляет собой перспективное действующее начало для разработки высокоэффективной формы нового противовирусного препарата с широким спектром действия. Формула изобретения 1, М-(3-Этиладамантил)-этилкарбамат формулы С,ИИНСООСрН обладающий противовирусной активностью.2. Способ получения М-(3-этиладамантил)-этилкарбамата формулыИНСООСН от л и ч а ю щ и й с я тем, что к эмульсии 1-этиладамантана в уксусной кислоте добавляют азотную кислоту при массовом соотношении 1:1,0 - 1,5;3,5 - 4,5 соответственно с последующим добавлением этилового эфира карбаминовой кислоты и нагревании при температуре 50 - 100 С и выделением целевого продукта,1721048 Таблица 1 Еоедине- Диаметр зон приние исследовании методомискринингтест", им В рус Исследование нетодом редукции бляшек Титр еи- Разность руса, с контро В БОЕ/мл лем,1 О БОЕ(мл ХТИ Концентра"ция,мкгlмл подавленияобраэоеаниябляшек токсичности Герпес 1 9 22 Оспоеакцина 1 18 18 НТДГерпес 18 11 О НТД Таблица 2 Таблица 3 Таблица 4 25 титр вируса ВПГ - 11 С 6,1 1 ЯТЦЦ 50/мл, ВПГ1 С А МЛ 50 25 12,5 6,25 3,12 0 50 25 12,5 6,25 0 100502512,56,250 с 3,9 с 3,9 с 3,9 с 3,9 4 94 5,51 с 2,4 с 2,4 с 2,4 3, 18 4,02 с 4,0 с 4,0 с 4,0 5,28 5,50