Способ получения стероидных гормонов

О П И С А Н И Е ( 492 О 78 Союз Советских Сонианнотицесних Республик;,3) Италия Государственнцн комнте Совета Министров СССР(53) УДК 615.361(088.8) юллетень Ъое 42 убликовано 15.11,7 обретений о дел и отсрытни ата опубликования описания 05.07 172) Авторыизобретен анцыКаноникия)я фирмаС. Д.ария) Инострли 1 О орджио Ферра 1) Заявнтел ностранн Даутен(ШВЕИ 1 ИЯ СТЕРОИДНЫХ ГОРМОН 4) СПОСОБ ПОЛ 2 ся к области медицин гормональных препара Каладана (20 кг) мельнице, имеющей на 1 см. Измельчен- ство обезжиривают П р и м е р 1. Семенаизмельчают на дисковоисекцию с 30 отверстиямное лекарственное ср Изобретение относит ы и касается получениятов.Известен способ получения стероидных веществ из листьев Рос 1 осагрцз гпасгор 11 уПцз, согласно которому метанольный экстракт сухих листьев обрабатывают водой, удаляют осадок, экстракт обрабатывают этилацетатом, упаривают, осадок хроматографируют на активированном угле и окиси алюминия для выделения целевых продуктов.Предложен способ получения стероидных гормонов из растения Са 1 опус 11 оп 1 рогпаеа (с)то 1 ву) На 111 ег 1.". сем. Сопчо 1 чц 1 асеае, заключающийся в том, что исходный материал измельчают, при необходимости обезжиривают и экстрагируют смесью хлорированного алифатического углеводорода (например, хлороформа), алифатического спирта с 1 - 4 атомами углерода (например, метанола), и органического основания (например, аммиака), экстракт концентрируют и отделяют целевой продукт, причем экстракцию осуществляют смесью хлороформа, метанола и аммиака в соотношении 9: О, 9: 1. посредством экстрагирования холодным лигронном (т. кип. в пределах 60 - 90 С), Трех последовательно проведенных экстрагпрований оказывается достаточно. Каждое экстра гирование проводят с 35 л бензина при перемешивании в течение 5 ч. Обезжиренный материал затем экстратчтруют прн парсмешнвапии, последовательнс два раза 60 л смеси хлороформа, метанола п водного раствора 10 аммиака в объемных соотношениях 9: О, 9: О,1. Каждую ступень экстрагировання проводят в течение 12 ч прп коматной температуре.После этого проводят два последовательных экстрагированпя по 3 ч каждое, прн пс ремешнванин с 50 л хлороформа. Какду 1 оступень проводят прн комнатной температуре.жидкость, применяемую для экстрагирования, Отделяют от лекарственного средства каждый раз фильтрование 1 прн п 01 пжснном 20 давлении, Все полученные экстракты объединяют н концентрируют при пониженном давлении и температуре, не превыш 1 нощсй 40 С, до объема 10 л, Концентрат выдерживают в холодил 1 Н 1 И 1 оз несколько дней до тех пор, по ка перестает выделяться кристаллическийпродукт. Отделанный материал собирают па фильтре путам тсасыванпя, промывают небольшим коли 1 естьом хлоп. форма. затем петроле 11 ным эфнро;1 н высш;1 ва 1 от в в 11 й Э ме. Дополнительное коли 1 ество сырого про 4920;Я60 65 3дукта может быть получено за счет выпаривания маточных растгоров н последующего выдерживания и холодильнике. Получен выход 140 г.Хроматографический тонкослойный (силнкагель марки 6) анализ с применением в качестве растворителя смеси хлороформа, этапола и воды (80: 19: 1) и проявителя пятен в виде реагента ванилин - серная кислота, при нагревании до 120 С в течение 10 мин показал наличие пятен.Для указанных соединений были получены следующие значения Г:0,22 (синее пятно);0,20 (фиолетовое пятно) и 0,15 (желтое пятно). П р н м е р 2. 120 г общего кристаллизата (Т), полученного, как указано в примере 1, взмучпвают в 100 мл дистиллированной воды. Полученную суспензию механически перемешивают 1 ч при 25 С. Затем суспензию фильтруют при отсасывании. Фильтрат не учитывают. Полученную после фильтрования плотную массу подвергают новой обработке водой прп тех жс условиях, что указаны выше. Для последовательных обработок каждый раз приме яют 1000 мл воды,После четвертой обработки тонкослойное хроматографическое исследование, проведенное как указано выше, показало, что желтое пятно, обусловленное наличием крустекдизона в плотной массе после фильтрования (10 г) в результате промывок водой стало существенно слабее по сравнению с фиолетовым пятном, вызванном макистероном А, и синим пятном, вызванным экдизопом,К объединенным водным фильтратам (4000 мл) добавляют метанол (1600 мл) и полученный раствор упаривают в вакууме при максимальной температуре 35 С до объема около 1100 мл. Концентрат охлаждают на ледяной бане и выделившийся кристалличеокий продукт (30 г) собирают на фильтре.Данный продукт (В), по данным исследования методом тонкослойной хроматографии, состоит из макистерона А и крустекдизона. Маточные жидкости (В) затем высушивают в вакууме при температуре, не превышающей 35 С. Полученный остаток кристаллизуют несколько раз пз смеси метанола с ацетоном в отношении 1: 5 вплоть до достижения хроматографнческой чистоты.Водонерастворимая часть оощего кристаллизата (А), как такового, то есть остающегося еще влажным от воды, поглощают чистым метанолом на водяной бане при 50 С. Затем массу охлаждают до комнатной температуры. Продукт, который был отделен, собирают на фильтре (Б). Метанольный фильтрат, от которого продукт (Б) был отделен, показывает, по данным указанного выше хроматотрафического исследования, что он содержит крустекдпзон и экдизон, Экдизон отделяют, упаривая фильтрат в вакууме досуха при низкой температуре (35 С). Полученный таким путем 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Р остаток затем подвергают повторной кристаллизации из дистиллированной Воды Цля пол 1- чения хроматографически чистого продукта требуется провести по меньшей мерс три кристаллизации. Для 7,5 г остатка нужно брать 1500 мл воды,Окончательная очистка продукта после высушивания его в вакууме достигается путем перекристаллизации из этилацетата. Полученный таким ооразом экдизоп имеет т. пл. 230 - 240 С. 15 г нерастворимого остатка (Б) сначала кристаллизуют из 50 мл метанола, затем из метанола, содержащего 1 об. /, воды до тех пор, пока не будет достигнута степень чистоты, приемлемая в хроматографическом отношении, Полученный при этом продукт является макистероном Л, Маточные жидкости, поступающие после всех кристаллизаций, объединяют и упаривают досуха в вакууме при температуре ниже 35" С. Полученный таким путем остаток (Г) объединяют с остатком (В) и все вместе растворяют в метаноле. Метанольный раствор упаривают в вакууме при низкой температуре. Г 1 олученный таким путем остаток (Д) затем подвергают новой операции разделения, один или вместе с новой партией общего кристаллизата (Т), 21 г остатка (Г), смешанного с 50 т силикагеля (размер частичек 0,05 - 0,2 мм) помещают в колонку, приготовленную с 600 г такого же силикагеля. Извлечение из адсорбента вымыванием осуществляют сначала смесью хлороформа с метанолом в соотношении 95: 5. Сухой остаток после этого вымывания отбрасывают. Последующие четыре фракции, полученные с применением смеси хлороформа с метанолом 90: 10, дают остаток, который по данным тонкослойной хроматографии содержит новое вещество, обнаруживаемое по зеленому пятну. Остаток вновь подвергают хроматографическому разделению на новой колонке, как указано выше, до тех пор, пока не достигается требуемая степень чистоты, Вымывание осуществляют только смесью хлороформа с метанолом 95: 5. Новые экстракты из адсорбента упаривают,досуха. Полученный остаток после перекристаллизации из этилацетата дает продукт, имеющий т. пл. 227 - 230 С (скор 1. ектпрованную) - муристерон. Данные инфракрасного исследования в бромистом калии: 3600 - 3200; 1660; 1630 см - . Данные ультрафиолетового исследования в метаноле: 236 нм. 0,994, 52,8 мл (в=9050). и)о =+49,6+.1 (С=1,02 в пиридине),Пример 3. Крустекдпзон-триацетат. 0,15 г крустекдизона (экдистерона), полученного по примеру 2, растворяют в 5 мл пиридина (безводного) и обрабатывают в 2 мл уксусного ангидрида при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор выливают в ледяную воду и обнаруженный осадок собирают на вильтре, высуцгивают и повторно кристаллизуют из смеси этилацетата с н-гексаном.492078 Формула изобретения Составитель С. ЩеневаТехрсд Г, Псдурушина Редактор Е. Хори.5 а Корректор О. Тгоринп Заказ 10828 Изд. М 2038 Тираж 529 Подписное Ц 1 ИИПИ Государственного комитета Совета Чиннс гров СССР по делам нзооретеннй и открыта:". 113035, Москва, )15,-35, Раугпскаи нао д. 45Типографии, нр, Сапунова. 2 Получают 0,056 мг твердого кристаллического вещества, имеющего т, пл. 153 - 157 С, который признан экдистерон-триаце гатом,Найдено, %: С 63,64; Н 8,36.Вычислено, %: С 63,46; Н 8,33.1 а) о =+59+1 (С=1 в метаноле), Литературные данные: т. пл, 198,5 - 199 С для полугидрата. Пример 4. Макистерон-триацетат. 0,2 г макистерона, полученного по примеру 2, обрабатывают, как описано выше для крустекдизона. После кристаллизации из этилацетата с ннгексаном получают 0,15 г макстерона-триацатата, имеющего т. пл. 237 С.Найдено, %: С 65,38; Н 8,40.С 34 Н 52010.Вычислено, %: С 65,80; Н 8,38.1 ао =+74+1 (С=1 в метаноле).,П р и мер 5. Экдизон-триацетат. 0,10 г экдизона, полученного по примеру 2, обрабатывают, как указано выше.Твердый остаток подвергают хроматографированию на силикагеле. Для вымывания из адсорбента применяют смесь хлороформа с метанолом (99: 1). Отдельные фракции объединяют и кристаллизуют из гексана; получают 45 мг твердого аморфного вещества, имеющего т. пл. 85 - 95 С,1 О 1. Способ получения стероидных гормоновпз растительного сырья, о т л и ч а ю щ и й с ятом, 1 то, с целью расширения сырьевой базы,части растения Саопус(1 оп 1 рогпаеа (с 1 то 1 зу)На 111 ег Г. сем. Соп о 1 цасеае измельчают,15 при необходимости обезхкирпвают и экстраги 1 оуОт смесью хлорированного алифатическогоуглеводорода (например, хлороформа), алифат 11;еского спирта (например, метанола) иорганического основания (например. аммиа 20 ка), экстракт концентрируют и отделяют целевой продукт,2. Способ по и. 1, отличающийся тем,то экстр акп О Осу ц 1 еств,1 51 ют смесьО хлорОформа, метанола и аммиака в соотношении25 9: О, 9: 1.