Способ получения производных гризеоловой кислоты

(0)ОЯ табл вазы (Р онофосф особ ского адедиэесте новик-и П р и м е р И, М, О,О-т 17,8 г дибе растворяют в б этому раствору добавляют 18,5 смесь оставляю ной температуреЕ) циклич та (сАМР). 1. Дибенз трабензоил згидрид гри зводном пирвой кис"вных идриприэеолат.зеолата ти при мидине получе- овой чность Фонг ГССУДАРСТВЕКНЬЗЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГККТ СССР(46) 15.10.90. Бюл. Кф 38 (71) Санкио Компани Лимитед (1 Р) (72) Масакатсу Канеко, Мисако Кимура Есинобу Мурофуси, Митсуо Ямазаки, Нобуеси Ивата и Фумио Накагава (1 Р) (53) 547,857.1,07(088.8)(56) Вейганд-Хильгетаг. Современные методы эксперимента в органической химии. М.: Химия, 1964, с.432. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ГРИЗЕОЛОВОИ КИСЛОТЫ(57) Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности спо соба получения производных гризеоловой кислоты обшей формулы 1, где К бензоил, неэамешенный или замешенный 1 Изобретение относится к сполучения производных гриэеолоты - новых биологически аксоединений, которые могут наменение в медицине,Цель изобретения - способния новых производных гриэеолкислоты, обладаюших пизкой тстью н и более высокой способбировать активность ф ЯО 1600632 А 07 Н 19/16, С 07 0 493/04,5/06 (С 07 В 493/04, 473:00, 307: 7) в и-положении галоидом, метилом,метокси- или нитрогруппой; К- бензгидрид, обладающих биологическойактивностью, что может быть использовано в медицине. Цель - созданиеновых более активных и менее токсичных соединений указанного класса. Синтеэ ведут реакцией соединения Формулы 11, где Р. - бензгидрид, с ацилируюшим агентом К-Х,где Х - галоид, Р г - см.выше, в присутствии агента, связываюшего кислоту, такого какпиридин, предпочтительно при комнатной температуре. Новые соединения обладают способностью ингибировать активность фосфодиэстеразы циклическогоаденоэин-монофосфата (1 бо 158177 мкмоль) и циклического гуанозин монофосфата (1 б 11 " 153-177 мкмоль)протчв соответственно 360 и 196 мкмоль при охлаждении льдоммл бензоил хлорида.стоять при комнатв течение 16 ч с пре 1600632 4дохранением ее от влаги, Продукт реакции затем охлаждают льдом и добавляют 10 мл воды. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, Остаток растворяют Э смеси 100 мл этилацетата и 50 мл Цоды, органический слой отделяют, промывают разбавленной соляной кисЛотой, водой, водным раствором бикарбоната натрия, насыщенным водным раствором хлористого натрия. Органический раствор отделяют, сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, бледно-же тый остаток растворяют в небольшом количестве хлористого метилена, к которому затем добавляют этанол. Растворитель отгоняют при пониженном давлении медленно с использованием аспиратора в остатке - желтоватое порошкообразное вещество, Вещество отфильтровывают, промывают этанолом, сушат. По лучают 9,1 г целевого продукта в виде желтоватого порошка (выход 92,5 ) .Пробу для анализа сушат модификациейбензолом после очистки хроматографией на колонке с силикагелем, для элюирования использукт 10 -ный раствор ацетона в бензоле (по объему).Спектр ультрафиолетового поглощения (метанол) Я макс нм (Г): 273 1,22000), Спектр ЯИ (гексадейтерированный диметилсульфоксид), 8 , млн. дол.: 5,63 (1 Н, дублет, .1 = 3,3 Гц), 6.04 (1 Н, дублет, 3 = б,б Гц), 6,13 (1 Н, синглет),6,63 (1 Н, дублет дублетов, 3 = 3,0 и 6,6 1 ц),8,63 (1 Н, 40 синглет), 8,89 (1 Н, синглет); Соединения по примерам 2-5 получают аналогично примеру 1, причем выбирается соответствующий хлорангидрид кислоты или ангидрид кислотывместо хлористого бензила,Н р и м е р 2. Дибензгидрил7ИБб, Оф, О -тетра-и- толуолгризеолат,Спектр ультрафиолетового поглощения (метанол), 1 мокс, нм (":.): 247Спектр ультрафиолетового поглошения (метанол), 1 м о к, нм (с ):264 (53100), 273 (52400), 275 плечо(1 Н, широкий мультиплет); 8,65 (1 Н,синглет), 8,85 (1 Н, синглет),Проведены биологические испытания соединений, полученных в условияхпредлагаемого способа.Токсичность1Подопытными животными были самцыкрыс штамма Фишер. Крыс распределялипо группам по пять крыс для каждогоопыта. Введенное в дозе 200 мг/кгисйытуемое соединение (дибензгидрилЮ,Н ,Оф,О -тетрабензоилгризеолат)не проявляло никаких признаков токсичности.Гризеоловая кислота, введенная вдозе 100 мг/кг, в первые два дня былаО/5, после 3 дней -3/5.Таким образом, соединения по изобретению менее токсичны, чем гризеоло"вая кислота и могут быть отнесены ккатегории малотоксичных.ВгО 2 ОО ещенный или и-положении тилом, метоксипой,я тем, чт В 2 ОО ВгООС аблице ,45 Соеди где Кподвергаютщим агентом бенэгидрил,взаимодействию нени е приме илируюсСМР РВЕ сАМР РВЕ 177 о1 2 3 4 5 ео 4 жллин 69 58 53 60 96,0 е Х - галоид,К 1 имеют указаннь исутствии агента, с ту, такого как пири 6.5 Р 53 60 ча ения вщего кис вяэыва дпочти дин, и темп ер 5 лотел комнатно ре 5 1 б 0063Соединения по изобретению испытывались на фосфодиэстеразную (РВЕ) ингибиторную активность.Испытание осуществлялось при ис"5 пользовании в основном методе Ричард. В качестве соединения сравнения ис" пользован аналог по действию - теофиллин. В качестве источника сАМР РДЕ использовался неочищенный энэиматиче О ский раствор, взятый из мозга крыс.В качестве субстрата использовался меченый бф сАМР, он применялся в 0,2 М буферном растворе Трис-соляной кислоты (рН Р,О) в количестве, доста точном для получения конечной концентрации 0,14 мкМ. Трис представляет собой трис-(оксиметил)аминометан. Раствор субстрата смешивался с соответствуюпям количеством испытуемого 20 соединения, растворенного в 2-5 мкл диметилсульфоксида, и с 20 мкл раст вора змеиного яда и 40 мкл неочищенного раствора энэима. Добавлялось достаточное количество Трис-соляно кислотного буфера дня достижения общего объема 100 мкл. Смеси давали возможность реагировать при 30 С вю течение 20 мин. В конце данного периода времени реакционная смесь обрабатывалась смолой Амберлит (торговая марка) 1 РР, и определялсяуровень остаточной радиоактивностиаденоэина в продукте. Экспериментосуществлялся при ряде уровней концентрации каждого активного соединенения, по этим данным вычислялись,величины 503 ингибирования (1 эо) .Эксперимент повторялся эа исключением того, что вместе сАМР в качестве субстрата применялся циклический гуанозин-монофосфат (сСМР) . Также вычислялась величина 1 зр противсСМР РВЕ,Результаты показаны в т 26Иэ таблицы видно, что соединение по изобретению более эффективно чем теофиллин ингибируют сАМР РПЕ и сСМР РВЕ.Проведенные испытания показали, что соединения, полученные в условиях предлагаемого способа, малотоксичны и обладают более высокой Фосфодиэстеразной ингибиторной активностью чем аналог по действию - теофиллин. Формула изобретения Способ получения производных гризеоловой кислоты формулы где К - бензоил незамзамещенный вгалоидом, меили нитрогруР- бенэгидрил,о тли ч ающий ссоединение Формулы