Способ получения антрациклиновых гликозидов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК КОМИТЕТОТНРЫТИЯМ ГОСУДАРСТВЕННЫПО ИЗОБРЕТЕНИЯМПРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ АТЕНТ Л рлоЭрба С. п, А (1 Т ччи, Мауро Гиг рнандо Джулиа 88,8) Л". 1181983 122711982 ии ф31,17 Ф6495505, 85 Н Т РАЦИКЛИНОВЫХ ся антрацикл ности новых нений дов, в ч ико щей с 1 -он)-с) о) -с1- сР с - онг ---СН ИНи обладаю жет быть и ль - созда что ицине, ос РЗ 88 и 5 табл пользовано ние,новых,и менее ток ктив оле(57) Изобретение кас ЯО 155301 51)5 С 07 Н 15/24//А 61 К 31/70 В.М.НУРЕТЕНИЯ,.ь-о;,2сичных веществ указанного класса, Синтезз ведут ре акцией агликона (вме сто группы СНгК в соединении ф-лы 1 находится метил) с 1-хлор- Л),О-ди(триЬфторацетил)даунозамином в среде безводного СН С 1 г в атмосфере азота при 15 С в присутствии трифторметансульфоната серебра. Затем удаляют защитную группу: СР -С(0)-О, обработкой метанолом в течение ночи при комнатной температуре,проводят отделение 7 (Б), 9 (Б), Л)-трифторацетильного антрациклонового гликозида от 7 (К), 9 (К) - антрациклинового гликозида хроматографией на колонке с силикагелем с элюированием смесью СНгС 1 - СНС(0)ОСН- -СНзС(0)ОН (с отношение объемов 90:10: :1). Далее удаляют с МН-группу СН -С(О)- щелочным гидролизом с помощью 0,1 н. Л)аОН. Выделяют целевой продукт в виде хлоргидрата путем обработки основания раствором НС 1 в метаноле. При необходимости полученное соединение бромируют в положение 14 с последующей обработкой водным раствором формиата натрия, получением соединения ф-лы 1 с К =ОН и выделением его в виде гидрохлорида. Новые соединения более активны, чем известный даунорубицин, в отношении асцитной лейкомиирассеянной Гросс-лейкемии.19 1553015 20 Таблица 5Активность в организме против Гросс-лейкемии и СН рака молочной железы Молочная железа (под кожей) "Гросс Соединение Т/С файф, 7 Токсичес- Доза, кая мг/кг смерть Доза, мг/кг Ин гибирояаннероста оп.коли,7 6,0 7,5 100 100 ДХ 15 8,8811,5415 Гросс-лейкемию инокулировали внутривенно в день О, Обработка -внутривенно в 1-й день.Обработка внутривенно, количество 7 дх 4, начиная с момента, когдаопухоль прощупывается пальцами.Отношение среднего времени выживания обработанных мышей к среднемувремени выживания контрольных животных х 100Оценена на основании данных. Со став итель Г, Коннов аРедактор Н, Рогулич Техред Л,Олийнык Корректор Н, Ревская Заказ 343 Тираж 302 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 1 О 13 16,9 29,6 38,5 50 158 200 200 200 242 142 О/10 О/10 4/20 О/10 О/10 О/1 О 96 100 100Изобретение относится к способу получения новых производных ацтрациклиновых гликозидов общей формулы О 3 о5 СН 2 В 1 О НС 2 Н вод гин иэ и К - гидроксильная группа;другой из В и К - цитрогрупп од или гидроксильн группа,щих противоблада ностью левой актив Цель изобретения - получение вых антрациклиновых гликозидов, обладающих бопьшей противовирусной активные аналоги - до-, цин, и меньшей 3 ицтеэа укаэанных стью структ орубицин и даунолксичностью путемединений,)4-де П р и м е р 1. Получение етокси-деокси-цитродауном(с.оединен ие 5 ) .с) Получение 4-цеметокси-деокси 7, 9, 1 1- т риаце т ил - даун ом иц ин о н а (промежуто чно го соединения 2),4-деметокси- б-деокси-дауномицинон 4(соедицение 1), (1,7 г 4,8 ммоль) нагревают при 90 С при перемешиваниивме с те с ук сусным ан гидридом (25 мл)и пиридином (25 мл), После 2-часовогонагревания реакционную смесь выливают в смесь льда с водой и оставляютстоять в течение 30 с при перемешиван ии, Тле рдое веще ство отфильтровывают,промывают водои и кристаллизуют из метанола, получая названное соединение2 (выход 2,19 г (94%), т, пл, 225226 С),ИК (КВЛ) см : 1770 (ароматическийсложный эфир), 1740 (алифатический сложный эФир), 1720 (алифагцческий кетон),1675 (ароматический кетон), 1590 (Аг),5У 1(Г 1 еОН) х цм: 210,258 334,Г 1 асс-спектрометря гысокого разрешен ця; гг/7. 478 (100, г ),4%) новым гнанн осле высушивани я получают ца ход 123 г (7 ение ч ( 263-264 (КВг), с 1635, 15 оеди п.гИК 75, 172 10 ) раз(220 мл) и метилене (110 мл), Раствор1 и. морфолина в метаноле (18 мл,4 эквивалента) добагляют и рас;вороставляют стоять при 40 С н течениео,5 ч, После нейтрализации водным1 ц. раствором НС 1 растворитель удаляют под вакуумом и остаток кристаг,изуют иэ метанола, получая наэвацнцоесоедгггее 3 (выход 1,7 г (90%), т. и,265 С с разложением),ИК (КВг), см ; 3440 (фенольныйОН ); 17 ч 5, 1720, 1670 (ехелатировагцый хигон)1630 (х .атиронанцый хицон), 1590.Г 1 асс-спектрометря высокого разрешен ия: гг/Л 436 (Г 1),УФ и в идгмый сп кт и гл г;цще н ия(промежуточное соедгегие 4),К смеси полученноо соединения 3(1,6 г, 3,66 ммоль), Гг 4 ГО(1,6 г,20 ммоль) и (СР СО) (18 мл) добавляют безводный СН С 1 (300 мл) в атмосфере азота и при энергичном перемешивации при комнатной тгмпературе, Поистечении 90 с добавляют метанол (3 л),получая желтый осадок, который оттвеж. перь(сии гле т, ЗН, СОСН ), 2, 44 (син глет,ЗН, Аг - ОСОСН), 2,44 - 3,39 (мультиплет, 4 Н ),6,46 (уширенный пик, 1 Н,7-Н), 7,75-8,.3 (мультиплет, 5 Н).Е) Голучение 4-деметокси,9-диаце т ил-де ок с и-даун ом иц ин она (промежуточного соединения 8).Полученное соединение 7 (0,83 г,1,74 ммоль) обрабатывают способом,описанным н примере 1 б, получая названное соединение 8 (выход 0,67 г(мультиплет 4 Н), 13,59 (синглет, 1 Н,11-ОН) .Полученное вьппе на стадии Ь соединение 4 (1,1 г, 2,3 ммоль) растноряютв ТГФ (220 мл).К раствору добавляют 0,1 н. ГаОН(220 мл) при комнатной температурев атмосфере азота и при перемешивании. После 1 ч растнор доводят до рНпримерно 7 с помощью 1 и, раствораНС 1 и растворитель удаляют под вакуумом. Остаток растворяют с помощьюСНС 1 з, раствор промывают водой дотех пор, пока смесь не нейтрализуется,20высушивают над Га 50 и растнорительвыпаривают. После хроматографиронанияна силикагеле получают названныйпродукт реакции - соединение 5 (выход0,77 г (90/), т.пл, 233-234 С с раэложением) .ИК (КВг), см-: 3570, 3470, 1710,1680, 1630, 1585, 1535.Масс-спектрометрия высокого разрешения: гп/2 398 (МНф), 397 (М ).УФ и нидимый спектры (МеОН), хнм: 216, 260, 341, 384, 401.ПМР (200 МГц, СРС 1 ); д 2,23-3,22(1 О мл) и пиридином (10 мл) прикомнатной температуре, Спустя 24 чреакционную смесь обрабатывают такЭкак описано н примере 1 а, получаяназванное вьппе соединение 7 (выход0,88 г (93/), т.пл, 220-222 С).ИК (КВг), см : 1780, 1730, 1720,1675) 1590,УФ (МеОН), х, нм; 210 258334,ф мыксфъ ф Масс-спектрометрня высокого разрешения: т/Е 481 (М).ПМР (200 ИГц, СРС 1); д 2,06 и 2,04 (синглет, ЬН, ОСОСН з), 2,2 (синглет, ЗН, СОСН з), 2,42-3,03 (мультиплет, 4 Н), 6,50 (двойной дублет, ,1=1,7 и 5,5 ГЦ, Н, 7-Н), 7,8-8,4 (мультиплет, 4 Н), 13,50 (синглет,1 Н, Ь-ОН).Полученное на стадии Ь соединение 9 (0,45 г, 0,94 ммоль) обрабатывают 0,1 н, раствором ГаОН так, как это описано в примере 1 ь, получая продукт реакции - названное выше сое 1553015(три дублета), 7=1,8, 4,8 и 6,2 Гц,1 Н, 7 Н ), 7, 8-8, 4 (мультипле т, 4 Н),13,7 (син глет, 1 Н, 6-ОН) .11 р и м е р 3, 11 олучение 4-деме 20токси-дезокси-нитро-Г 1-трифторацетил-даунорубицина (соединение 11),К охлажденному раствору (15 С)рацемического 4-леметокси-дезокси 6-нитродауномицинона 5 (0,7 г, 251,76 ммоль) в безводном хлористом метилене (140 мл) одновременно и быстродобавляют при энергичном перемешивании и пропускании азота 1-хлор, Г 1,0 ди-(трифторацетил)-даунозамин (1,88 г, 305,28 ммоль) в безводном СИС 1(40 мл) и трифто рме тан суль фон ат се ре бра (1,4 г, 5,28 ммоль) в безводномэтиловом эфире (40 мл). После 20 сдобавляют насыщенный водный растворГаНСОз (100 мл) и смесь оставляютстоять при перемешивании в течение10 с. Смесь фильтруют через цеолит,органический слой отделяют, промываютводой, высушивают над Га 180 и раство ритель удаляют под вакуумом.Желтое вещество растворяют в ЖОН(300 мл) и оставляют стоять в течениеночи при комнатной температуре, чтобыудалить 0-трифторацетильную группу.Остаток, получающийся при выпаривании растворителя, хроматографируютна силикггеле эгюирующей системой:СН, С 1. -ЕСОАС-СН, СООН (90:10: 1) ч/ч)получая с 1-гликозиды 7(Я): 9(Я) с выходом 0,43 г (397.) и 7(К): 9(К) с выходом 0,43 г (392)Для 7(8):9(Б):Т.пл, 245-246 С.ИК (КВг), см : 3470 3450, 1720,1700 (Г 1-трифторацетил), 1680,1635,51590, 15 35.Масс-спектрометрия высокого разрешения: в/. 623 (ИН),УФ и видимый спектры (ГООИ),рим: 208,260,341,384,401,Гсс, а=+337 (с=0,5541 в МеОИ),К; (МеОН), д 226 им=+19,31,а270 нм=-9,94, 4 292 им=+5,67,д 340 им=+7,68,ГПГ 1 Р (200 МГц, СПС 1,): д 1,24 (дублет, 3=6,8 Гц, ЗИ, 5 - СИ ); 1,82(6 мл). При 0 С в атмосфере азота иперемешивании добавляют 0,1 н, раствора ГаОН (60 мл), После 2 ч ацетонудаляют под вакуумом и рИ доводятдо 4,5 с помощью 0,1 н. НС 1.Водный раствор экстрагируют с помощью СНС 1 доводят рН до примерно6,5-7,0 с помощью 0,1 и. ГаОН и экстрагируют с помощью СН,С 1,. Органический слой промывают водой, высушивают над Га ЯОи раст оритель выпаривают. Остаток раств яют в МеОН(5 мл), подкисляют не в лыс ими капля 9155 1 Оми раствора НС 1 в МеОН и при добавлении диэтилового эфира и н-гексана выпадает в осадок хлоргидрат. Твердоевещество фильтруют, промывают лиэтиловым эфиром до нейтрализации средыи высушивают, чтобы получить названное соединение 12 (выход 0,080 г(687), т, пл, 173 С с разложением),ИК (КВг), см : 3400,1710,1675,1630,1590,1540.Масс-спектрометрия высокого разрешения: ш/Х 527 (МН ),П р и м е р 5. Получение 4-деметокси-дезокси-нитро-Г 1-трифгораце 15тил-даунорубицина (соединение 13) .Рацемический аглюкон 11 (0,290 г,0,73 ммоль) превращают в соответствующий гликозид, как это описано впримере 3, Названный продукт реакции207(8):9(Б) 3 с выходом 0,1 г (247) иего диастереомер 7(Е): 9(К)Л с выходом 0,1 г (247.) получают после хроматографиче ского разделения,Для 7 (Я): 9 (8);Т, пл, 237-240 С с разложением.ИК (КВг), см : 3500,3400,1720,1675,1640,1540.Масс-спектрометрия высокого разрешения: т/Х 579 Г-СООН ) .УФ и видимый спектры (ГеОН),Лмыкс: 207 259 335 400КД (МеОН): ля 221 им=+11,1,6250 им=+4,0, Л289 нм=-5,1,6330 нм=+3,1, 6400 нм=+1,0.=18,2 Гц, Н, 10 акс - Н), 3,68 (двойной дублет, Л=З,О и 8,0 Гц, 1 Н, 4 -Н),4,15-4,30 (мультиплет, 1 Н, 3-Н),4,25 (квартет, Л=6,5 Гц, 1 Н, 5-Н,синглет, 1 Н, 9-0 Н), 5,30 (двойнойдублет, Л=2,2 и 4,3 Гц, 1 Н, 7-Н),5,47 (дублет, Л=4,5 Гц, 1 Н, 1 -Н),6,70 (дублет, 1=8,0 Гцю 1 Нэ Г 1 НСОСГэ)ь7,8-7,9 (мультиплет, 2 Н, 2-Н, З-Н),558,2-8,4 (мультиплет, 2 Н, 1-Н, 4-Н),13,72 (синглет, 1 Н, 6-0 Н).Для 7: 9(1):гГзсс-спектрометрия высокого разре-,шения: ш/7. 579 (100, М -СОСНЗ).МР (200 МГц, С 1)С 1 з); Б 5,35 (мультиплет, 1 Н, 1 -Н), 5,59 (двойной дублет, Л=2,0 и 3,5 Гц, 1 Н, 7-Н).П р и и е р 6. Получение хлоргидрата 4-деметокси-дезокси-нитродаунорубицина (соединение 14),Соединение, полученное по примеру 5(0,090 г, 0,145 ммоль), обрабатываюттак, как это описано в примере 4,получая названное соединение 14 (выход 0,061 г (753), т. пл. 212 С с разложен ием),ИК (КВг), см ф:3400,2900,1710,1670,1635,1590,1540.Гасс-спектрометрия высокого разрешения; ш/Е 527 (МН ).УФ и видимый спектры (ГеОН),гмыкс э нм: 208 222 256 402П р и м е р 7. 4-Деметокси-деокси-нитро-доксорубицин (соединение 15).4-Деме ток си-деок си-нитро-даунорубицингидрохлорид из примера 4(0,86 г, 1,52 ммоль) растворяют в50 мл метанола и 50 мл диоксана. К перемешиваемому раствору добавляют триэтилортофтормиата (1,5 мл) и 0,92 млраствора брома в хлористом метипене(ЗО мас.7 объема).После выдержинания в течение 4 чпри комнатной температуре раствор выливают в смесь диэтилового эфира(300 мл) и н-гексана (500 мл) и осажденный 4-деметокси-деокси-нитро 13-диэтилкеталь-бром-даунорубицинсобирают и промывают эфиром.Твердый материал растворяют в120 мл 0,25 н. бромистоводороднойкислоты и 120 мл ацетона, После выдерживания в течение 16 ч при комнатнойтемпературе добавляют 4,8 г формиатанатрия, растворенного в 50 мл воды,и спустя 24 ч при 50 С раствор обрабатывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия до щелочного рН среды.При встряхивании с хлористым метиленом реакционная смесь дает красноватый осадок 4-деметокси-деокси 6-нитро-броми-даунорубицина, который отфильтровывают и промывают водой, Маточный раствор экстрагируютнесколько раз хлористым метиленом,и растворитель удаляют в вакууме, получая вторую порцию неочищенногопродукта.20 40 Твердый материал растворяют в 25 мл 0,25 н, бромистоводородной кислоты и 25 мл ацетона и выдерживают в течение ночи при комнатной температуре, Добавляют 1,5 г (формиата натрия растворенного в 15 мл воды и%о температуру повышают до 50 С в течение 24 ч.15530Эти две порции объединяют и растворяют н метаноле, содержащем 107.уксусной кислоты, 20 г силикагеля,добавляют в этот раствор и растворитель осторожно удаляют в вакууме.5Твердый материал загружают на верхколонки (5 х 30), приготовленной из силикагеля и хлористого метилена, атем элюируют смесью (80: 10 об/об)хло рис тый ме тиле н - 957,-ный этиловыйспирт, Чистые фракции собирают, ирастворитель удаляют в вакууме, Остаток растворяют в метаноле, охлаждают при 0 С, подкисляют 0,5 н. раствором НС 1 в метаноле до значения рНоколо 3,При добавлении диэтилового эфираобразуется желтый осадок, который отфильтровывают и промывают эфиром.После высушивания в вакууме получают0,45 г (суммарный выход 517) гидрохлорида 4-деметокси-деокси-нитродоксорубицина,ИК-спектр (КВг), см : 3400, 1710, 254 675, 1630, 1590, 1540,ФД-масс-спектр: м/е 543 (МН+),УФ видимый спектр (МеОН),нм; 208,260,341,384,401.К (пластина с кизельгелем Е 254(30 мас.7.).Спустя 4 ч реакционную смесь выливают в смесь из 150 мл диэтиловогоэфира и 300 мл н-гексана, образовавшийся осадок 4-деметокси-деокси 11-нитро-диэтилкеталь-бромдаунорубицина отфильтровывают и промывают эфиром. 15 2Добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия до щелочной среды и смесь экстрагируют хлористымметиленом.Органический слой сушат над сульфатом натрия и растворитель 4-деметокси 11-деокси-нитро-бромо-даунорубицина удаляют в вакууме, Неочищ нный материал очищают на хроматографической колонке с кизельгелем, Которуюзлюируют смесью хлористый метилен//метанол/уксусная кислота 160:20:8.Чистые фракции собирают, промываютнасыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой до нейтральности,затем продукт экстрагируют, промываяего раствором воды и 0,1 н, солянойкислоты при рН около 3,Водный раствор подвергают лиофильной сушке, получая 0,17 г (общийвыход 477,) гидрохлорида-деметокси 11-деокси-нитро-доксорубицина.ИК-спектр (КВг), см ; 3400,2900,1710,1670,1635,1590,1540.ФД масс-спектр: м/е 543 (МН ).УФ и видимый спектр (МеОН), Л,с:нм: 208, 222, 256, 402,К 1 (пластина с кизелы елем Р 254Ме рк"; хло рис тый мет иле н /ме тан ол/=0,407,Биологическая активность соединений по примерам 6 и 4,Соединения испытывали по сравнению с даунорубицином (ДНР) против клеток Не 1 а и Р 388 ин витро. Соединенияиспытывают путем растворения их в виде хлоргидратов в водеИн виво действие соединения противР 388 асцитной лейкемии представленов табл. 1.Активность указанных соединенийиспытывают про ив диссеминированной(распространенной) лейкемии Кросса.Результаты представлены в табл. 2.В этой системе два новых соединенияпри максеальной испытанной дозе(22,5 мг/кг и 50 мк/кг для соединенийпо пракерам 6 и 4 соответственно)были более активными, чем ДНР примаксимальной переносимой дозе(10 мг/кг),Данные по токсичности, приведенныев табл. 5, для соединения 15(пример 7)относительно лейкемии Гросса являютсяисключительно благоприятными, Никакойгибели от токсичности при дозировке29,6 мг/кг по сравнению с 4/10 факта(дп) сн в о яосни СН 2 Рс,2 О НС 2 где К - водоро один из В и В гидроксильнаягруппа, а другойиз В и В - нитрогруппа;или гидроксильна водоро группа а ю щ и Й форму й с я тем, что аготлич ликон обще О СН 1 О где лор-И,Оом форподвергают ди(трифтор мулы ми гибели от токсичности исхопного лекарства локсорубицина при дозировке 16,9 мг/кг Т/С=200% лля обоих лекарств,Следует также отметить более высокую активность соединения 16 (пример 8) относительно рассеянной Гросс- лейкемии: 275/233 при использовании почти эквивалентных доз испытуемого Соединения и контрольного лекарства. формула изобретения Способ получения антрациклиновых гликоз илов общей формулы К имеют указанные зна3чения,конденсации с 1-хцетил)-даунозамии СЕ С О1СОС в безводном хлористом метилене в агмосфере азота при 1 С в присутствии трнфторметансульфоната серебра с получением диастереомерной смеси 7(Я), 9 (Я) и 7 (К), 9 (В) антрациклиновых гликозидов формулы где В 1 ФК К 3 имеют указанные значения,затем удаляют защитную 0-трифтор-ацетильную группу взаимодействием с мета-.нолом в течение: ночи при комнатнойтемпературе, отделяют 7(Я), 9(8) Итрифторацетильный антрациклиновыйгликозид от 7(К), 9(К) антрациклинового гликозида хроматографией на колонке с силикагелем, элюируя смесью ме- ЗО тилендихлорид - этилаце тат - уксусная кислота в соотношении 90:1 О:1Ь/ч), удаляют М-трифторацетильнуюзащитную. группу из полученного 7 (Б),9(5) антрациклинового гликозида средним щелочным гидролизом 0,1 н, гидроокисью натрия с выделением целевогопродукта формулы (1), где К - водород, в виде его гидрохлорида путемвзаимодействия свободного основания 40 с метанольным раствором хлористоговодорода и в случае необходимостибромируют полученное соединение в14 - положении с последующе 11 обработкой полученного таким образом 14-бром производного водным раствором формиата натрия) с получением целевого продукта формулы (1), где К- гидроксильная группа, и выделением его ввиде его гидрохлорида.1553015 ТаблицаДействие против асцитной лейкемии Р 388 Сое дине и ие Доз а, Т/С,% мг/кгТок сиче ск ая сме рть ДНР14 Опыты были осуществлены на мышах вида СДГ,зараженных 10 клетками лейкемии внутрибрюшинно.Лечение внутрибрюшинно один раз в день после опухолевого инокулята.Среднее время выживания вылечиваемых мышей/среднее время выживания контрольныхмышей х 100.Оценивается на основе аутоптическихзаключений. Таблица 2Действие против лейкемии ГроссаТок сиче скаясмерть Т/С,7 Соединение Доза,мг/кг ДНГ14 12 Опыты были осуществлены на мышах вида СЗН, зараженных 2 х 10 клетками лейкемии внутривенно.Лечение внутривенно один раз в день послеинокулирования опухоли.Средняя продолжительность выживания вылечиваемых мышей/средняя продолжительность выживания контрольных мышей х 100.Оценивается на основе аутоптических (путемвскрытия трупа) заключений. 2,9 4 6 913,5 10 15 1 О 15 22,5 25 50 1 5) 157 132 162 171 124 158, 150 175,225 125 150 200 175 208 1/10 5/10 О/1 О О/1 О 1/10 9/10 О/20 3/20 О/10 О/10 О/10 О/10 О/101553015 Таблиц а 3Активность против клеток Йе 1 аи 1 О н, вне организма Сс единение И к г/мл ЛХ 16 ДХ 15 Испытание ингибирования колонии проводили после 24 ч обработки ИЛ - доза, вызываюшая 50 Х-ное ив гибированне,Таблица 4Активность в организме против асцитичной Р 388 и рассеянной Гросс-лейкемии Р 288 Гросс Соединение Т/С",У,Ток(и ескаясмерть",25 в день О, Обработка инокулирована внутрибрюшип- й день. утривенно в день О, Обработка - внутриокулировали времени выживания обработонтрольных животных х 100,и данных вскрытия. ых мышеи к среднем 182 209 391 195 223 209 Р 388 - лейкемиявнтрибрюшинно в 1 Гросс-лейкемию инвенно в 1-й день, Отношение средне гвремени выживания Оценена на основа О/10 О/10 О/10 О/10 О/10 9/10 Не 1 а19181 О ч36220 1 О116,917,322,5 183 225 233 275 308 117 О/10 О/О О/10 О/О 1/1 О 9/10