Способ получения, -дизамещенных ароматических и гетероароматических соединений

(71) Е.И,Дюпон де Немур энд Компани(57) Изобретение касается дизамещенных ароматицеских и гетероароматицеских веществ, в частности получения соединений общей ф-лы 1:.Х СН 2-НЕ 11СН;Не,н Джонес Никл 1 СН 2 где нее, и Негдил; группу выби ридил или 3"пирз: д НЗС о(М-пиперидино)пропан вещество обладает сп выделению в коре гол ацетилхолина, цто мо новоетью кмозгаь испол оломособн овног жет б д) 2 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЬППРИ ГКНТ СССР а) ц - Н,Х - фенил и а - двоиная связь; б) а - простая связь и Ч - Н или СН-О-С(О)-СНз, Х - -СН-фенил или ЪС" О-С (0) -СН , в) А " СН 7 или(СН), г) д 1, .18, Мс и М (независимы) - И или СН; д) А - О, Б или связь) 1 С 1 - Н, СН, СН Вг или ОСН, или их солей, оказывающих влия ние на высвобождение ацетилхолина из нервной ткани, цто может быть исполь зовано в медицине., Цель - созданиеболее активных веществ указанного класса, Синтез ведут реакцией соединения ф-лы 11:при а - двойная связь с основаниемв апротонном растворителе. Основаниевыбирают из гидрида натрия, бутиллития, диизопропиламида лития или гексаметилдисилазида с последующей обработкой соединением общей ф-лы 111:Р-СН "Нес где Р - галоид, основанием из вь 1 шеуказанной группь 1 соединением ф-лы 17; Р-СН -Недуг, Целевойпродукт выделяют в виде основанияили соли. При необходимости соединение ф-лы 11 при а - двойная связьвосстанавливают (до одинарной связи) или. окисляют и ацилируют досоответствующего диолдиацетата споследующим выделением целевого осования или соли. В сравнении с из- (естным " 1"фенил-циклогексил ос1750425 20 сцинтилляций, ликисцинт (ПЕП), и пробы исследовали на жидкостном счетчике сцинтилляций типа Паккард Трикарб. Никаких коррекций на добавление холодного продукта не делалиОтношение Б,Б (при сравнении с контрольными прббми, не содержащими лекарственный препарат в течение Б) служило мерой способности лекарственного препарата увеличивать или уменьшать стимулированное раздражением высвобождение ацетилхолина. Данные, полученные в лаЬоратор" ных экспериментах по АСЬ-высвобождению, приведены в таблице,Увеличение, , индуцированногораздражением высвобождения аце"тилхолина в коре головного мозга крысы в лабораторных условиях при концентрации, И Пример т т э30т тт35 еете тт 40 45 Приведенные результаты испытаний показывают, что соединения, полученные предлагаемым спосоЬом,можно использовать при лечении дефицитов умственных способностей и/или дефицитов нейрологических Функций и/ /или нарушений психологического состоянйя у пациентов, страдающих расстройствами нервной системы типа заболеваний Элзхоймора, заболевания Паркйнсона, старческого слабоумия, слабоумия, вызванного многократными кровоизлияниями, заболевания Хан-. тиннгтона, задержки умственного разгде А - СН Й) группь+90 вития, миастении и т.д. 8 отличие от известного противопархинсонног препарата 1-фенил-циклогексил- (М-пиперидино)пропанола, который не способен к увеличению высвобожде. ния ацетилхолина данные соединения обладают таким преимуществом,Формула изобретения Способ получения 0,0-дизамещенных ароматических и гетероароматических соединений оЬщей Формулы21 1750 й 25 где 11 18 Мф М а друг от друга - М или СН, или их солей, о т л и ц а ю щ и й с я тем, что осуществляют взаимодействие соединений формулы 10 15 где 20 25 30 Составитеь д. 1 лутицкийТехред М.Моргентал Корректор С.ЛисинаРедактор О.Юрковецкая Заказ 2606 Тираж ПодписноеРнИИПИ. Государственного комитета но изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР11303 5, Москва, Ж5, Раушская наб., д, 4/5 Производственно-ивдатепьский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,10 1имеет укаэанные значения при условии что а - двойная связь, с основанием в апротонном растворителе, причем основание выбирают из гидрида нат.- рия, бутиллития, диизопропиламида лития или гексаметилдисилааида, полученный при этом анионный продукт обрабатывают соединением формулыЭСННег 1,где 0 - галоген;Не 1 1 - имеет указанное значение,с получением монозамещенного соединения, которое вновь обрабатываютоснованием, выбранным из указаннойгруппы, полученную при этом сольобрабатывают соединением формулыВСН не ,где 0 и Нес имеют укаэанные значения,и выделяют целевой продукт в видеоснования или в виде соли или, принеобходимости, соединение, где адвойная связь, восстанавливают доодинарной связи или Окисляют и ацилируют до соответствующего диолдиацетата с последующим выделениемцелевого продукта в виде основанияили соли,ПРиоРитет и о приз -н а к а мОЬ.10,87 - способ получения соединения по подпункту е формулы изобретения, где Л 1 и 1 являются И, аМ 1 и Мявляются СН или один иэМ и М 5 является М, а другой - СН;23.08.88 - способ получения всехостальных соединений по формулеизобретения,зовано для лечения дефицитов умственных способностей и/или нейроло 1750425гических функций и/или нарушений психологического состояния,табл, Изобретение относится к способуполучения новых биологицески активных ЫЫ -дизамещенных ароматическихи гетероароматических соединений, которые могут найти применение в медицине.Цель изобретения - способ получения с,0-дизамещенных ароматических и гетероароматических соединений, увеличивающих высвобождениеацетилхолина в нервной ткани.П р и м е р 1, Бис-метансульфонат 1-бис(4-пиридинилметил)-3-фенилН-индена,В охлажденный (-20 С)раствор 3 фенилН-индена (5,0 г, 26 ммоль) втетрагидрофуране (ТГФ) (70 мл) добавляли н-бутиллитий (1,1 эквивалента, 1,17 М, 28,6 ммоль), 24,5 мл(по каплям). После перемешивания втечение 30 мин добавляли раствор 4 пиколилхлорида (1,5 эквивалента,39 ммоль, 5,0 г) в ТГФ (70 мл). Этотраствор нагревали до 0 С и поддержиовали при этой температуре в течениец. Смесь снова охлаждали доо-20 С и добавляли дополнительно нбутиллитий и 4-пиколилхлорид, какописано. Затем раствор нагревалиОдо 0 С примерно 2 ч. Реакционнуюсмесь быстро охлаждали добавлениемнасыщенного раствора хлорида аммонияи разбавляли простым эфиром, Органическую фазу промывали водой, соляным раствором и сушили над сульфатоммагния. В результате удаления растворителя с помощью роторного испа"рителя получали масло, которое подвергали очистке на колонне для хроматографии (силикагель, дихлорметан,метанол от 60:. до 20:1), чтобы по"лучить 1,1-бис(4-пиридинилметил)-3 фенилН-инден в виде твердого вещества, 5,8 г 15,5 ммоль, выход603.ЯМР (200 МГц, СВС 1)Р: 3,18 (двойной дублет, 4 Н); 6,23 (синглет 1 Н);6,79 (дублет, 4 Й 3 = 6 Гц); 7,12(мультиплет, 4 Н); 7,29 (мультиплет,4 Н); 7,51 (дублет, 1 Н, Л = 7 Гц);8,28 (дублет, 4 Н,= 6 Гц),Масс-спекто 374.В раствор "бис(4"пиридинилме 5 тил)-3-фенилН-индена (1,0 г,2,7 ммоль) в дихлорметане добавлялиметан сульфокислоту (5,4 ммоль,0,52 г, 0,35 мл). Растворитель вы.,10паривали, а остаток подвергали перекристаллизации из смеси этилацетат:изопропанол, цтобы получитьбелые кристаллы, 0,8 г, т.пл. 250 С.тП р и м е р 2. Хлордигидрат 4"523-дигидро-фенил-(4-пиридинилнетил) - 1 Н-индел-илиетилЯ пиридина.В раствор 11 "бис(4-пиридинилметил)-3"фенилН-индена (5,8 г,15,5 ммоль) в 95/-ном этаноле(100 мл) добавляли 5-ный палладийна углеродном катализаторе (1,45 г)и смесь встряхивали в атмосфере водорода (3,5 кг/см 2) при комнатнойтемпературе в течение 2 ч, Катали 25 затор удаляли фильтрацией, а растворитель удаляли на роторном испари-.теле. Масло подвергали очистке наколонне для хроматографии ( силикагель, 103-ный метанол:дихлорметан)чтобы получить чистый 4- 23-дигидго-фенил-(4-пиридинилметил) -1 Пинден-илметил пиридин.ЯМР (200 МГц, СОО 1)Ю:205 (двойной дублет, 1 Н); 2,38.(двойной дублет Н); 293 (двойной дублет, 2 Н);3,15 (двойной дублет, 2 Н); 3,42(мультиплет, 1 Н); 6,67 (двойной дуб- лет, 4 Н) 7,00 (дублет, 2 Н); 7,107,34 (мультиплет,7 Н); 8,36 (дублет,2 Н= 5 Гц); 8,42 (дублет, 2 Н,- 5 Гц)Масс спектр: 376, 1937, (рассчитано для СН,И), 376, 1951 (найде но),Масло растворяли в метаноле идобавляли НС 1 в простом эфире, чтобы осадить соль. После перекристаллизации из смеси изопропанол:этилацетатполучали белое твердое вещество,6,2 г , т,пл 210 - 225 С,П р и м е р 3 Хлордиг идрат 3,3 бис(4-пиридинилметил)-2,3-дигидрофенилН-инден,2-диолдиацетата.В раствор 1,1-бис(4-пиридинилме-тил)-3-фенилН-индена (1,0 г, 2,7ммоль) в сухом пиридине (10 мл) добавляли четырехскись осмия (1,0 г3,9 ммоль), растворенную в простомэфире, Смесь перемешивали при комнатной температуре и анализировалипри помощи ТСХ. После завершения реакции добавляли бисульфит натрия(5 мл). Смесь перемешивали в течение 1 ч и экстрагировали три разасмесью хлороформ: изопропанол (4:1).Соединенные экстракты промывалисоляным раствором, сушили над сульфатом магния и выпаривали, при этомполучали 3,3-бис(4-пиридинил-метил)2,3-дигидро-фенилН-инден,2 диол в виде желтого твердого вещества, 1,15 гСырой 3,3-бис(4-пиридинилметил)2,3-дигидро-фенилН-инден,2 диол снова растворяли в.пиридине(20 мл) и добавляли уксусный ангидрид (4 мл). Смесь нагревали до 50 Сна 2 дня. После охлаждения летучие.материалы удаляли под вакуумом, аостаток снова растворяли в дихлорметане и воде. Водный слой превращалив слегка .щелочной с помощью карбоната калия и экстрагировалй несколькораз дихлорметаном. Соединенные экстракты сушили над сульфатом натрйя, арастворитель выпаривали, чтобы получить масло. Этот материал подвергалиочистке на хроматографической колонне (силикагель, 103-ный метанол:дихлорметан), чтобы получить 3,3-бис(4 пиридинил-метил)-2,3-дигидро-фенил 1 Н-инден,2-диолдиацетат в видемасла.ЯИР(200 МГц, СЭС 1) У: 2,06 (синглет, 3 Н) .2,11 (синглет, 3 Н); 3,053,49 (2 двойных дуЬлета, 4 Н); 5,28(мультиплет, 5 Н); 7,60 (двойной дублет, 1 Н); 8,27 (дуЬлет, 2 Н, 1 =- 6 Гц)851 (дублет, 2 Н, 1 = 6 Гц),Масс-спектр: 492, 2049 (рассчитано для С, Н 81.1); ч 922041 (найдено)В раствор 3,3-бис(4-пиридинилметил)-2,3-дигидро-фенилН-инден 5 20 25 (6,56 г, 0,04 моль) в 100 мл воды, затем раствор подщелачивали бикар 30 35 40 1,2-диолдиацетата в дихлорметане добавляли избыточное количество НО в дихлорметане. Растворитель удаляли,а остаток подвергали перекристаллизации из смеси этанол; этилацетат, чтобы получить белое твердое вещество,0,42 г, т.пл.300 С.П р и м е р 4, 1,1-Бис(4-пиридинил.метил)-3,4-дигидро=7-метокси-(1 Н)нафталинон,В суспензию гидрида натрия (60 ная масляная дисперсия, 1,6 г, 0,04моль) в 30 мл сухого 1,2-диметоксиэтана добавляли по каплям раствор 7-метокси-тетралона (3,6 г, 0,02 ммоль) в 30 мл сухого 1,2-диметоксиэтана, Реакционная смесь становилась желтой и после того, как весь тетралон добавили, смесьмедленно нагрева. ли до температуры дефлегмации в течение 15 мин, Раствор хлорида 4-пиколила получали с помощью растворения хлоргидрата 4-пиколилхлорида бонатом натрия и экстрагировали свободное основание в простом эфире(200 мл). После сушки над сульфатомнатрия смесь фильтровали, а простойэфир удаляли на роторном испарителе,Остаток сразу же снова растворялив 1,2-диметоксиэтане (3.0 мл). Этотраствор по каплям добавляли в горячую реакционную смесь и смесь нагревал: до дефлегмации 6 ч. Реакционнуюсмесь охлаждали и добавляли метанол(10 мл), цтобы разложить избытокгидрида натрия. Растворители выпаривали, а коричневый маслянистый остаток растворяли в 200 мл дихлорметана, Органическую фазу промывали водой и сушили над сульфатом натрия,После фильтрации и обработки на роторном испарителе сырой продукт подвергали очистке на хроматографической колонне (силикагель, 10 г,-ный этанол в этилацетате). Полученный таким оЬразом продукт подвергали перекристаллизации из этилацетата, чтобы получить 1,1-бис(4-пиридинилметил)-3,4 дигидро-метокси(1 Н)-нафталинон ввиде Ьелого твердого вещества, 1,5 г,т,пл. 125-127ЯМР (200 МГц, СОС 1) Р; 3,13 - 3,19ИК, см 1: 1707, 1599,Масс-спектр,С 77,06; Н 618; м7,81;(рассчитано для СНд ЛО),С 77,21; Н 6,13; И 7,76 (найдено).П р и м е р 5. Хлоргидрат 11,11 бисд-лиридинилметил)-5 Н-дисенаса,й циклогептен(11 Н)-она.В суспензию гидрида натрия (603 ная масляная дисперсия, 1,6 г, 0,04 1 Омоль) в 30 мл сухого 1,2-диметокси.этана добавляли по каплям раствор5,11-дигидроН-дибензо(а,й циклогептен-она (4,16 г, 0,02 ммоль)в 30 мл сухого 1,2-диметоксиэтана., 15После того, как весь кетон был добавлен, смесь медленно нагревали додефлегмации 1 ц, Раствор 4-пиколилхлорида получали растворением хлоргидрата 4-пиколилхлорида (6,56 г, 200,04 моль) в 100 мл воды, подщела"чивая раствор бикарбонатом натрияи экстрагируют свободное основаниеэфиром (200 мл). После сушки надсульфатом натрия смесь фильтровали,а простой эфир удаляли на роторномиспарителе. Остаток сразу же сноварастворяли в 1,2-диметоксиэтане(30 мл). Этот раствор по каплям до. бавляли в горячую реакционную смесь 30и смесь нагревали до температурыдефлегмации 6 ч. Реакционную смесьохлаждали и добавляли метанол (1 О мл),чтобы р-рложить избыток гидрида натрия. Растворители выпаривали, а остаток растворяли в 200 мл дихлорметана.Органицескую фазу промывали водойи сушили над сульфатом натрия, ПослеФильтрации и обработки на роторномиспарителе сырой продукт подвергали фочистке на хроматографической колонне (силикагель, 103-ный метанол:дихлорметан), Полученный таким образом продукт представлял собой вязкоемасло.,45ЯМР (200 МГц, СЭС 1 ); 3,43-3,491 дуолет, 1 Н); 3,7 Ь.- 3,Ы (дублет,1 Н); 4,16 - 4;19 (дублет, 1 Н); 4,424,49 (дублет, 1 Н); 4,86 - 4,93 (муль"типлет, 2 Н); 7,02 - 7,88 (мультиплет, 508 Н);.8,52 (дублет, 2 Н); 8,55 (дублет,2 Н) . ИК-спектр, см : 1675, 1598.Это масло растворяли в простом эфире и обрабатывали раствором хло" ристого водорода в эфире, чтобы получить указанную хлордигидратную соль в виде аморфного гигроскопичного твердого вещества, т.пле ) 300 С.Аналогично получено соединение,где А - -СНСН-, т.пл.300 С.П р и м е р 6, 9,9-Бис(4-пиридинилметил)ксантан,Растворяли 5,1 г (0,028 моль)ксантана в 50 мл сухого тетрагидрофурана и охлаждали до -30 С. Затем3,11 г (0,029 моль) диизопропиламида лития взвешивали в делительнуюворонку и растворяли в 30 мл тетрагидрофурана. Этот раствор по каплямдобавляли в тецение 30 мин в ксантановый раствор при -30 С, После завершения добавления раствор нагревали до комнатной температуры и выдерживали при этой температуре15 минЗатем его снова охлаждалидо "30 С и по каплям добавляли5,05 г (0,03 моль) 4-пиколилхлорида в 15 мл тетрагидрофурана в тецение 30 мин при -30 С. После завершения добавления реакционную смесьнагревали до комнатной температурыи выдерживали при этой температуре30 мин. Снова смесь охлаждали доо-30 С, добавляли по каплям в течеоние 30 мин при -30 С еще одну порцию3,11 г (0,029 моль) диизопропиламида лития в 30 мл тетрагидрофурана,Послезавершения добавления смесьнагревали до комнатной температурыи выдерживали при этой температурев течение 15 мин, После охлажденияоснова доС по каплям в течение30 мин при -30 С добавляли еще однупорцию 4-пиколилхлорида.(0,03 моль)в 15 мл тетрагидрофурана. После завершения добавления реакционнуюсмесь нагревали до комнатной температуры и выдерживали при ней до техпор, пока с помощью тонкослойнойхроматографии не будет установлено,цто реакция закончилась, примерно10 ч. Избыточный анион аккуратно.разрушали добавлением 50 мл насыщенного раствора хлорида аммония, атетрагидрофуран выпаривали под вакуумом. Остаток переносили в метиленхлорид и продукт экстрагировалиЗА 00 мл 0,5 н,раствором хлористоводородной кислоты. Соединенные порции хлористоводородной кислоты делали щелочными с помощью 504-ного раствора гидрата окиси натрия до рН 12и продукт экстрагировали метиленхлоридом. Экстракты метиленхлорида сое9-(4-Пиридинилметил)тиоксантен,Растворяли 4,96 г (0,025 моль)тиоксантана в 25 мл ТГФ и охлаждалидо -20 С. При перемешивании по каплямов течение 30 мин добавляли 18 мл 55 диняли, промывали водои, сушили сульфатом магния, фильтровали и выпаривали. Сырой продукт растирали с эфиром, чтобы получить 2,0 г продукта,Этот материал подвергали хроматографии на двуокиси кремния с использованием смеси гексан: .этилацетат(70:30). Фракции, содержащие продукт,соединяли и выпаривали, чтобы получить 1,7 г дизамещенного продукта.Его подвергали перекристаллизациииз хлорбутана, чтобы получить 1,1 г.:диалкилированного ксантана, т,пл212 - 213 С: -: .;: .".15П р и м е р 7. 9,9-.Бис(4-пириди-нилметил)флуорен,Растворяли 3,0 г (18,0 ммоль)флуорена в 20 мл тетрагидрофуранаи охлаждали до -20 оС в атмосфере 20азота, По каплям в течение 15 мин "добавляли н-бутиллитий (11,5 мл,1,57 М). После перемешивания в течение 30 мин его переносили в раствор18 0 ммоль 4-пиколилхлорида в 20 мл 25оТГФ при -78 С. После того, как смесидавали возможность нагреться докомнатной температуры, ТСХ (простойэфир: гексан 1:1) подтвердила, чтофлуорен отсутствует. Смесь снова 30о,охлаждали до -20 С по каплям в течение 15 мин добавляли вторую порцию11,5 мл н-бутиллития (1,57 М) . Послеперемешивания в течение 30 мин этуреакционную смесь переносили в раствор 18,0 ммоль 4-пиколилхлорида в20 мл ТГФ при -78 С. Полученную в ре-.зультате смесь выдерживали, чтобыона нагрелась до комнатной температуры, и затем ее перемешивали при : 40окружающей температуре в течение17 ч. Реакцию быстро прекращали насыщенным раствором хлорида аммонияи экстрагировали простым эфиром. Неочищенные соединенные экстракты подвергали хроматографии смесью метиленхлорид:метанол от (30:1) до (25:1),чтобы получить 2,9 гчислого указанного диалкилирьванного флуорена.Масс-спектр: 348, 1615 (М ); 256, 501131 (М-Сб Н 6 И)П р и м е р 8. 9,9-Бис(4-пиридинилметил)тиоксантен. 1,4 М раствора гексаметилдисилазида калия. После завершения добавления реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и выдерживали при этой температуре в течениео 15 "мин, Затем ее охлаждали до -20 С и по каплям в течение 30 мин при -20 С добавляли 4-пиколилхлоридо(28,0 ммоль), основание, в 20 мл ТГФ,"После добавления реакционную смесь" нагревали до комнатной температуры и выдерживали в течение 1 ч. Реакцию быстро прекращали добавлением 50 мл .насыщенного раствора хлорида аммония и выпаривали. ,Остаток экстрагировали метиленхлоридом, подвергали последовательной кислотной и щелочной промывке 0,5 н,раствором хлористоводородной кислоты и 50/- ным гидратом окиси натрияОрганический слой сушили (сульфат магния)и выпаривали, чтобы получить 5,1 гуказанного моноалкилированного продукта,9,9-Бис(4-пиридинилметил)тиоксантен,.Медленно добавляли 0,38 г (8,0ммопь) 503-ной маслянои дисперсиигидрида натрия в течение 15 мин в20 мл диметилсульфоксида при комнатной .температуре. После завершения добавления реакционную смесьнагревали до 45 С в течение 30 минЕе охлаждали до 15 С и раствор2,3 г (0,0 моль) 9-(4-пиридинилметил)тиоксантена в 10 мл диметилсульфоксида по каплям добавляли втечение 15 мин при комнатной темтературе. После завершения добавления реакционную смесь перемешивалив течение 30 мин при комнатной температуре. Затем по каплям в течение30 мин при окружающей температуредобавляли раствор 4-пиколилхлорида (8,75 ммоль) в 5 мл диметилсульфоксида. Затем смесь нагревали до40 оС 30 мин. Реакцию быстро прекращали добавлением воды (50 мл). Врезультате растирания осажденногомасла получали кристаллическое твердое вещество, которое выделялифильтрацией, промывали водой и сушили. Рыжевато-коричневое твердое вещество растворяли в бензоле и обесцвечивали при перемешивании с 1 гМагнезола в течение 30 мин, Послевыпаривания и фильтрации получали(мультиплет, 7 Н-аромат.); 8,0 (мультиплет, 4 Н)Масс-спектр высокого разрежения: 15362, 1783; рассчитано для Сдобн г 2 Б 2)362, 1779 (найдено),Хлордигидрат 9,9-бис(4"пиридинилметил)-2-бромфлуорена (в), т.пл,300 О С. 20ЯМР (200 МГц, СЭС 1)У:339 (двойной дублет, 4 Н); 6,48 (дублет, 4 Н);7,10 - 7,67 (мультиплет, 7 Н-аромат,);8,12 (дублет,Т = 5,7 Гц, 4 Н)Масс-спектр НКИД: 426,0758 (рассчитано, для С НВг 7 ь), 426, 0758.7 = 5,4 Гц, 2 Н),Масс-спектр: 348,1632 (рассчитанно для С Н ь ); 348, 1626 (найдено).П р и м е р 10. 5,5-Бис(4-пиридинилметил)-5 Н-циклопента(21-Ь:341:7 дипиридин,Соединение получали, следуя процедуре из примера 1, из 0,43 г(2,56 ммоль) 4,5-диазафлуорена,0,84 г хлоргидрата 4-пиколилхлорида , 29,0 мг хлорида бензилтриэтиламмония, 3 мл 50-ного гидрата окисинатрия и 30 мл толуола в результатевзаимодействия при 50 С в течение6 ч. Сырой продукт подвергали хроматографии (этилацетат; метанол 99:1)и рекристаллизации из изопропиловогоспирта,ЯМР (СПС 1200 МГц)Р: 342 (синглет, 4 Н); 6,52 (дублет, 7 = 5,7 Гц,4 Н)733 (двойной дублет, 2 Н);7,85 (дублет, 2 Н) 8,16 (дублет,,т = 5,6 Гц, 4 Н); 8,61 (дублет, 2 Н)П р и м е р 11. 9,9-Бис(4-пиридинилметил)инденоь 21-Ь пиридин.47,5 г (0,265 моль) 4-азафенантрена растворяли в 750 мл ледянойуксусной кислоты. При энергичномперемешивании добавляли 110 г(0,33 моль) пятиокиси йода. Смесьнагревали при спокойной дефлегмациии выдерживали в этом состоянии 6 ч.Затеи реакционную смесь охлаждалидо комнатной температуры, а избытокпятиокиси йода отделяли фильтрацией.Раствор обрабатывали на роторном испарителе, а остаток переносили в бензол. Этот раствор. промывали тиосульфатом натрия, чтобы удалить избытокйода. Гго затем сушили сульфатомнатрия, фильтровали и выпаривали,чтобы получить 20 г 4-фенантрен,Ь-диона. После рекристаллизации изэтанола получали 13,0 г чистого диона, т.пл. 262 С,Превращение 4-азафенантрен,6 диона в 1-азафлуорен-он,Раствор 4"азафенантрен,6-диона(10,76 г/51 ммоль) добавляли в200 мл 103-ного раствора гидратаокиси натрия в колбе Эрленмейера.Колбу помещали в ванну и нагревалидо 70 - 80 С 2 ч, Когда ТСХ показывали, что реакция завершилась, смесьохлаждали до комнатной температурыи экстрагировали хлороформом Еесушили сульфатом натрия и выпаривали,чтобы получить рыжевато-коричневыйпродукт. После оперативной хроматографии этилацетатом получали 4,79 г 10чистого 1-азафлуорен-она, т,пл.129 - 130 С.Восстановление 1-азафлуорен-онав 1-азафлуорен,4,6 г (25,4 ммоль) 1-азафлуорен9-она добавляли в раствор 9 мл(0,28 моль) гидразина и 50 мл диэтиленгликоля Нагревание начиналии температуру поддерживали на уровне100 С 15 мин, затем поднимали до 20195 С и выдерживали при этой температуре 1 ч, При помощи ТСХ устанавливали, что реакция завершилась. Реакционный раствор охлаждали до температуры ниже 100 С и сливали в 300 мло 25ледяной воды, Водную фазу насыщалисолью и экстрагировали 8100 мл простого эфира, Простой эфир сушили сульфатом натрия и выпаривали, чтобыполучить 3,73 г сырого продукта. Егорастворяли в гексане и обрабатывалиМагнезолом, .фильтровали, выпаривалии подвергали рекристаллизации из гексана, чтобы получить 2,83 г чистого1-азафлуоренаеПолучение 9,9-бис-(4-пиридинилметил)индено 2,1-Ь пиридина.2,0 г (42 ммоль) 501-ного раствора гидрида натрия суспендировали4-горлой колбе (250 мл) с круглым40дном, снабженной входом для азота,холодильником, термометром, дополнительной воронкой, магнитной мешалкой и содержащей 25 мл высушенногонатрием ТГФ и 2,5 г (15 ммоль)145азафлуорена, Смеси давали возможностьперемешиваться при комнатной температуре в течение 1 ч. 6,6 г (ч 0ммоль)хлоргидрата 4-пиколилхлоридарастворяли в минимальном количестве50.оводы и охлаждали до 0 - 5 С. Тщательно поддерживая температуру ниже5 С, его подщелачивали гидратом окиси аммония, быстро экстрагировалибензолом, сушили карбонатом калия ифильтровали. Бензоловый раствор 4 пиколилхлорида добавляли в реакционную смесь в течение 15 мин, После завершения добавления смесь нагревали до 60 ". до тех пор, пока с помощью ТСХ не было установлено, чтореакция завершилась (еЫлс-сН 011;90:10), В 0,13. Реакционную смесьохлаждали и разлагали насыщеннымраствором хлорида аммония. Слои разделяли и органическую фазу экстрагировали бензолом. Ее сушили карбонатомкалия и выпаривали, чтобы получить6,0 г сырого продукта., В результате оперативной хроматографии (этилацетат) получали 4,0 г продукта, который подвергали рекристаллизациииз бутилхлорида, чтобы получи рь2,49 г, тппл, 204,7 - 206,0 С.Масс-спектр: рассчитанная масса349, 1528) разница 0,0004; С,1 Н 1 .ЯМР (200 МГц, СРС 1 )1: 3,3943,718 (двойной дублет, 4 Н, -СН,-пиридил); 6437 (дублет, 4 Н,-пиридилы); 7,107 - 7,635 (мультиплет,6 Н, аромат.)р 8,027 - 8,057 (дублет4 Нф-пиридилы); 8,589 - 8,62 (двойной дублет, 1 Н,ф-СНЫ-азафлуорен),П р и м е р 12. 5 5-Бис(4-пиридинилметип)инденп 11,2-ьпиридин,Получение 1-а зафенантрен, 6-диона,Следуя процедуре, описанной впримере 11, 37,5 г (0,153 моль) 1 азафенантрена и 55 .г (0,165 моль)пятиокиси йода в 600 мл ледяной уксусной кислоты дефлегмировали 2 ч,Идентичная обработка давала 8,4 г,т,пл. 215 - 216 С,Превращение 1-азафенантрен,6 диона в 4-анафлуорен-он.Следуя процедуре, описанной впримере 11, 8,2 г (0,04 моль) 1-азафенантрен,6-диона и 165 мл 10 ного раствора гидрата окиси натриянагревали в ванне при 80 - 90 С вотечение 3 ч, Получали в резульатеидентичной обработки 3,88 г чистого,о.4-азафлуорен-она, тпл, 140 - 142 .Восстановление 4-азафлуорен-онав 4-азафлуорен. Следуя процедуре, описанной в примере 11, 3,45 г (19 ммоль) 4-азафлуорен-она, 6,8 г (0,213 моль) гидразина в 50 мл диэтиленгликоля соединяли и нагревали до 205 С 30 мин.оТСХ показала, что исходный материал отсутствует, Получали в результате идентичной обработки 2,33 г чистого(12,6 ммоль) 4-азафлуорена в присутствии 1,51 г (31,45 ммоль) 503-ногогидрида натрия с 5,0 г (30,4 ммоль) 1 О4-пиколилхлорида давало 2,8 г. Послеоперативной хроматографии с использованием этилацетата получали 2,0 гматериала, содержащего небольшое количество красящего вещества Послерекристаллизации из бутилхлоридаполучали 1,5 г чистого соединений,т.пл. 163 " 164 С,Масс-спектр: 3491579 (рассчитано для С 4. НИ ); 349, 1570 (найдено) . 0ЯМР (200 МГц, СВС 1) Я: 3,407(синглет, 4 Н, -СН-пиридил); 6,4986,529 (двойной дублет, 4 Н,-пиридилы); 7,149 - 7,770 (мультиплет, 6 Н,аромат.); 8137 - 8,167 (дублет, 4 Н,0("пиридилы); 8,437, - 8,469 (двойнойдублет, 1 Н, О-СНМ-озафлуорен),П р и м е р 13. 9,9-Бис(4-пиридинилметил) циклопента (2-Ь:34-Ь)дипиридин,30Получение 1,5-диазафлуорен-она,11,8 г (0,178 моль) гидрата окисикалия растворяли в 2000 мл воды в5-литровой многогорлой колбе с круг"лым дном. В этот раствор добавляли 3518,0 г (0,1 моль), 1,7-диазафенантролина. Смесь нагревали до кипения,при этом 1,7-диазафенантролин растворялся. В кипящий раствор по каплямпри энергичном механическом перемешивании добавляли 50,6 г (0,32 моль)перманганата калия в 800 мл воды,при этом перемешивание осуществлялис такой скоростью, цтобы капли перманганата сразу же распадались. Для45этого соединения добавление осуществляли 1 ч. Реакционную смесь подвергали дефлегмации еще 30 мин, затем ,горячую смесь Фильтровали. Фильтратохлаждали до комнатной температуры 50и экстрагировали хлороформом. Егосушили сульфатом натрия и хлороформвыпаривали на роторном испарителе.Сырой продукт подвергали рекристаллизации из воды, затем сушили в вакуумной сушилке над гидратом окисикалия. Выход чистого 1,5-диазофлуо-рен 9-она составил 3,3 г, т.пл. 158 - 159 С. Описанную реакцию повторяли и получали еще 3,3 г материала, который соединяли с первой порцией,Восстановление 1,5-диазафпуорен 9-она в 15-диазафлуорен.Следуя процедуре, описанной впримере 11, 6,0 г (33 ммоль) 1,5 диазафлуорен-она и 11,8 г (0,37моль) гидразина соединяли с 100 млдиэтиленгликоля и быстро нагревалиодо 200 С. Реакцию поддерживали приэтой температуре в течение 30 мин,затем в течение 3 ч при 180 С. Следуя описанной процедуре оЬраЬоткиполучали 4,69 г, т,пл, 85 С. В результате рекристаллизации из циклогексана получали 4,0 г чистого 1 5 диазафлуорена, т.пл. 99 - 100 С.Получение 9,9-бис(4-пиридинилме- дипиритил) -циклопента 1,2-.Ь:3 4-Ь идина.Следуя процедуре алкилирования,описанной в примере 11, 2,0 г(30 ммоль) 503-ного раствора гидрида натрия нагревали до 55 С в 10 млтетрагидрофурана и 25 мл бензоладо тех пор, пока ТСХ (этилацетат:метанол 90;10) не показывала появление продукта (Е 0,065) и исчезновение исходного диазафлуорена (В0,28).Сырой продукт растирали с простымэфиром, чтобы получить 2,90 г, т.пл.133 - 137 С, Его обрабатывали спомощью оперативной хроматографииэтилацетатом и подвергали рекристаллизации из бензола, используя древесный уголь для обеспечивания .Выход 2,4 г, т,пл. 139,8 - 140 С.й 0,16 этилацетат;метанол 90:10)ЯМР (200 МГц, СВС 1) В 33973,718 (двойной дублет, 4 Н -СН -пиридил); 6450 - 6, 475 (дублет, 4 НБиохимическая процедура испытаний.Действие соединений на высвобождение ацетилхолина (АСЬ) из срезов корыголовного мозга крысы испытывалис использованием процедуры суперфузии среза,Использовали самцов крыс ВистерЧарлз Ривер) весом 175 - 200 г. Ихсодержали в течение по крайней мересеми дней перед экспериментом вклетке для животных с 12 - 12-часовымциклом день - ночь (свет включалив 6.00 ц, выключали в 16,00 ц). Крысамдавали избыток корма и деионизированную воду,Крыс оЬезглавливали и сразу жеотделяли головной мозг. Стандартнымприемом приготавливали срезы (толщиной 0,3 мм) из теменной части коры 20головного мозга и затем разрезалина квадраты 0,25 х 0,25 мм.,Срезы (с влажным весом приблизительно 100 мг) инкуЬировали в 10 млсреды Кребса-Рингера (КК), содержа 25щей, мМ: МаС 1 116; КС 1 3; СаС 12 1,3;МкС 12 1,2; КН 2 РО 1,2; Иа 2501 1,2;БаНСО 3 25; глюкоза 11, в которюпредварительно добавляли 10 рС 1 Н-холина с удельной активностью приблизительно 35 С 1/ммоль, БЕК и 10 нмольнемеценного холина, цтобы получитьконечную концентрацию 10М. Инкубирование осуществляли в течение30 мин при 37 С в равновесном потоке 35. 953 О/5 Ж СО. При этих условияхчасть поглощенного радиоактивного,холина превращалась в радиоактивныйАСЬ под действием холинергетическихнервных окончаний, хранилась в синаптических пузырьках и высвобождалась при деполяризации с использованием среды с высокиМ содержаниемК+.После введения метки в хранящийся АСЬ срезы промывали 3 раза нерадиоактивной КК-средой и переносилив устройство для суперфузии для измерения действия препарата на высвоЬожденце АСЬ. Устройство для суперфузии содержало 10 термостатицеских стеклянных столбиков диаметром 5 мм, которые снабжали Фильтрами из стеклянного волокна типаСР/Р, цтобы поддерживать срезы (приблизительно 10 мг ткани/столбик), Суч /перфузию осуществляли КК-средои (0,;мл/мин), содержащей 10М полухолиния(НС), НСпредотвращает поглощение холина, образующегося в процессе суперфузии из фосфолипидов, и высвобождающегося АСЬ, который бы превращался в немеченный АС 1 и высвобождался вместо образованного ранее меченогоАС 1 т. Среду доставляли с помощью 25-канального перистальтического насоса и нагревали до 37 С в термостатированном змеевике из нержавеющей стали перед введением суперфузионного столЬика,Каждый столбик снабжали ч-позиционным подвижным клапаном, которому давали возможность быстро переключаться с КК- среды с низким К на среду с высоким К , и двумя 1 О-канальными 3-позиционными клапанами, которые использовали для переключения с КК- среды без лекарственного препарата на КК-среду, содержащую препарат, с низким и высоким К+,.Через 15 мин промывки от неспицифической связанной радиоактивности начали сбор ч-минутных фракций, После трех 11-минутных отборов КК-среду, заменяли на КЕ-среду, в которой концентрация КС 1 была увеличена до 25 мМ (КК-среда с высоким К ) (51 ).+ Раздражение, индуцирующее деполяризацию, высвобождения с помощью КЕ- среды с высоким К+ заканчивалось на ч-й минуте. Среду, не содержащую лекарственного препарата, с низким и высоким К +, затем заменяли на среду с лекарственным препаратом или растворителем, содержащим КК-среду с низким и высоким К , и суперфузию продолжали в тецение трех 11-ми - нутных промежутков, осуществляя от+ боры КК-среды с низким К , одного Б-минутного отбора среды с высоким К (Б ) и двух ч-минутных отборов2+среды КК с низким КЛекарственный прегарат добавляли в среду с помощью 100-кратного разбавления соответствующих концентраций лекарственного препарата (в0,9-ной ИаС 1/Н 20) КК-средой либо с низким, либо с высоким К+.Все фракции суперфузии собирали в ампулы для жидкостного сцетцика сцинтилляций, После суперфузии среду удаляли иэ столбиков для суперфузии и экстрагировали в 1,0 мл 0,1 н.раствора НС 1, В суперфузионные фракции и экстракты затем добав" ляли 12 мл.жидкости для счетчика