Способ получения полиинозиновой кислоты

Номер патента: 644797

Авторы: Ансберга, Гравите, Каула, Шмите

ZIP архив

Текст

О П И С А Н И Е р)644 УИИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республик61) Дополнительное к авт, свид-ву22) Заявлено 03,08.76 (21) 2396368/23-04 51) М. Кл.С 07 Н 21/О с присоединением заявкиударственнын комитетриорит 1.79, БюллетеньСССР ло делам изобретений и открытий(45) Дата опубликован описания 30.01,79 СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИИНОЗИНОВОЙ КИСЛОТЫ та имеет коэффи 17 - 18, мол. вес Изобретение относится к усовершенствованному способу получения полиинозиновой кислоты, которая находит широкое применение в биологии, генетике и медицине,Известен способ получения полиинозино вой кислоты поликонденсацией компонента нуклеиновой кислоты - инозин-дифосфата, с ферментом - полирибонуклеотидфосфорилазой 1.Недостатками известного способа явля ются низкая степень поликонденсации инозин-дифосфата, коэффициент седиментации 3 о,чт 10 - 15, относительно низкий молекулярный вес целевого продукта 200000 - 280000, большие потери исходного сырья. 15Целью изобретения является улучшение качества целевого продукта, т. е. удлинение цепи, повышение молекулярного веса.Поставленная цель достигается путем использования в качестве исходного сырья 20 полиадениловой кислоты с последующим ее дезаминированием.Способ получения полиинозиновой кислоты (поли-И) заключается в том, что полиадениловую кислоту (поли-А) подвергают 25 воздействию дезаминирующего агента, предпочтительно нитрита натрия, в ледяной уксусной кислоте в присутствии стабилизатора - ионов Мд+ или Мп+ в буферной системе при рН 2,50 - 2,55, Образующая 30 полиинозиновая кислоциент седиментации 5360000 - 380000.П р и м е р 1, К 10 мл раствора полиадениловой кислоты, полученного в процессе биосинтеза полинуклеотидфосфорилазой из Е,со 11 и содержащего 60 мг поли-А, 10 - М ацетата магния и 0,1 М трис-НС 1, после отделения, ферментативного белка прибавляют 0,12 мл ледяной уксусной кислоты, 0,1 М раствора этилендиамин-И,Х,Х,К - тетрауксусной кислоты (ЭДТА) до конечной концентрации 10 -(рН 2,5 - 2,55), При непрерывном перемешивании небольшими порциями в течение 3 ч прибавляют 0,12 г сухого нитрата натрия, Перемешивание продолжают до тех пор, когда отношение оптических плотностей Дзо,/Дм, достигает 1,6 - 1,7.Поли-И осаждают 20 об, 96% -ного этилового спирта и проводят очистку известным способом.Степень дезаминирования 98%, Яо,г 18, выход 56 мг поли-И.П р и м е р 2. 60 мг поли-А, полученных в процессе биосинтеза полинуклеотидфосфорилазой из Е.со 11, растворяют в 10 мл воды, прибавляют 0,1 М раствора МпС 1, до конечной концентрации 10-М 0,2 мл ледяной уксусной кислоты и 0,1 М ЭДТА до конечной концентрации 10-М, рН 2,5 - 2,55, В тече3 Формула изобретения Составитель Л, Никулина Техред С, Антипенко Корректор Р. Беркович Редактор Л. Новожилова Заказ 2645/7 Изд.143 Тираж 520 Подписное НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Типография, пр, Сапунова, 2 ние 3 ч при непрерывном перемешивании и небольшими порциями прибавляют 0,2 г сухого нитрата натрия. Далее процесс дсзаминирования, выделения и очистки поли-И проводят как показано в примере 1. Язю,ч 17. Выход 58 мг поли-И.Пример 3. К 10 мл раствора поли-А, содержащего 60 мг поли-А, 10-М ацетата магния, 0,1 М трис-НС 1, после отделения ферментного белка прибавляют 0,2 мл ледяной уксусной кислоты, ЭДТА до 10 -М (рН 2,5 - 2,55), 2 см нитрозилхлорида в течение 3 ч. Далее выделение и очистку поли-И проводят, как показано в примере 1. Степень дезаминирования 98%, 52 ю,ч 18, выход 45 мг поли-И.Целевой продукт получают с мол, вес.360000 - 380000 и коэффициентом седиментации Язю,ч 17 - 18. 1. Способ получения полиинозиновой кислоты из компонентов нуклеиновых кислот,5 отличающийся тем, что, с целью улучшения качества целевого продукта, полиадениловую кислоту подвергают воздействию дезаминирующего агента в присутствии стабилизатора - ионов Му+2 или Мп+10 в буферной системе при рН 2,50 - 2,55,2. Способ по п. 1, о тл и ч а ю щ и й с ятем, что в качестве дезаминирующего агента используют нитрит натрия в присутствииледяной уксусной кислоты.15Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Патент США3594278, кл. 195 в ,опубл. 1971.

Смотреть

Заявка

2396368, 03.08.1976

ПРЕДПРИЯТИЕ ПЯ М-5043

ГРАВИТЕ ДАЙНА ЭДУАРДОВНА, ШМИТЕ ИЕВА АЛЕКСАНДРОВНА, КАУЛА ВИЯ ПЕТРОВНА, АНСБЕРГА СКАЙДРИТЕ ЭРНЕСТОВНА

МПК / Метки

МПК: C07H 21/00

Метки: кислоты, полиинозиновой

Опубликовано: 30.01.1979

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-644797-sposob-polucheniya-poliinozinovojj-kisloty.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения полиинозиновой кислоты</a>

Похожие патенты