Патенты с меткой «антител»

Номер патента: 1516981

Опубликовано: 23.10.1989

Авторы: Дерябин, Каральник, Теплухин

МПК: G01N 33/53

Метки: антител, изотипов

...внесли0,2 мл растворителя (забуференный,рН 7,2, 0,0852-ный раствор хлориданатрия), во вторую - 0,2 мл смеси,содержащей анти- К (1:100) и анти(1;100) и анти- /и(1:100) сыворотки,в четвертую - 0,2 мл смеси, содержащей анти-(1:100) и анти- Ы.(1:100)сыворотки. Смеси выдерживали при 37 Св течение 2 ч. Затем в каждую смесьвнесли по 0,4 мл 37.-ного раствораполиэтиленгликоля 6000. Через 0,5 чпосле этого все четыре смеси центрифугировали при 20 тыс. об/мин в течение 20 мин. Надосадочную жидкостькаждой пробы титровали в одном рядус разведением 1:12 в объеме 0,05 мл.Во все разведения каждой сывороткивнесли по 0,025 мл 0,57-ного соответствующего антигенного эритроцитарного диагностикума. Результаты учли через 2 ч (табл. 3) . Исследование каждой...

Номер патента: 1518369

Опубликовано: 30.10.1989

Авторы: Анджапаридзе, Баркова, Ведунова, Звонарев, Краснова, Кузнецова, Мальцева, Нагиева, Никулина, Ходоровская, Эткинд

МПК: A61K 39/42, C12N 5/00

Метки: musculis, антител, вируса, гемагглютинину, гибридных, животных, используемый, клеток, кори, моноклональных, штамм

...оценку монАТ в культуральных жидкостях на актинносгь и спец,фцчность, По данным проведенного исследования осуществляют выбор клоовдля их накопления в массовой кульгуре и криоконсервации,В результате слияния полу еца коллекция гибридов лро;,уцирующихаьАТк вирусу кори (штамм Л), Из нихпрактический питере представляюгибридома ВК,2, прод пирушал",;онАТ класса 1 яС а, напраленныек гемагглютинину вируса кори,. Характерисгик активности иммуцоглобула 1 он р продуцируемых Гибридомой ВК9 3 представлена в табл,1,Приведенные двиньте лозвс. ;,г заключить, что монАт, продуцируамиегибридомой ВК.2, обладают аднано .вои высокой реактивностью с двумяисследованными шта мами вируса кори(штамм Ли шгамм 1,ЕС-вирус кони)в различных тестах и не выявляют...

Номер патента: 1525578

Опубликовано: 30.11.1989

Авторы: Власов, Левин, Молочко

МПК: G01N 33/53

Метки: антител, неполных

...РЕЗ при выо ванная 1 истцлчирволаДобавляют До 1 л гемагглютцнир астворРондее тр опрещей я положи- зультат тельн отк тсы(7) 11 елорусскцй научно-цсследовательскй институт переливания крови (72) В.11. Левцц, Л.Е. Рласови В.Л.1(олочко(56) 1 етоднческие указания по изготоцлегию больших количеств универсаль. цой стандартной сыворотки ацтцрезус с прцмеце(цем смешаццых коллоцдцых ра гцодтелей. Л., 1966.(57) Изобретение относится к илогцц. Цель изобретения - сниж1 еспецФической агрегации етреакции агглютццацци с неполными антцтелами, Гемагглютинируюшую антисыворотку разводят плазмозамещающимпрепаратом "Рондексп в соотнош2:1, добавляют испытчемую кровь ипосле пребывания в течение часа при37 0 регистрируют результаты реакцииагглютицации,...

Номер патента: 1527257

Опубликовано: 07.12.1989

Авторы: Вотяков, Коломиец, Куницкая, Лучко, Малахова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: амиотрофического, антител, возбудителю, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лейкоспонгиоза, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...мьппи в среднем получают 3,0 мл асцитической жидкости. Асцитическую жидкость осветляют путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение10 мин. 18 С осаждают сульфатом аммония (ЭОХ насыщения) и чистят путем аффинной хроматографии. Штамм АЛМАна мышах не перевивается.Характеристика продукта.Класс продуцируемых иммуноглобу 50 линов - Тф 2 а. Продуцируемые антитела охарактеризованы в точечном иммуноферментном методе (ТИФМ),Изоферменты.Подвижность глюкоза-фосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогенаэы в клетках клона АЛМАхарактерна для мышиных клеток. Контаминация.Бактерии не.обнаружены, грибы и дрожжи не обнаружены, микоплазмы не обнаружены, вирусы - обнаружены частицы типа А и С, аналогичные частицам родительского штамма клеток Х 63-Ае...

Номер патента: 1527260

Опубликовано: 07.12.1989

Авторы: Ардемасова, Калихевич, Лившиц, Попов, Попова, Салова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, тимозину, штамм

...состава должно быть в 10 разбольше. При росте в указанных условиях штамм образует круглые клетки,слабо прикрепляющиеся к твердой подложке и снимающиеся с нее ресуспендированием супернатантом. Времяудвоения популяции 30 ч. Кратностьрассева 1:3 3-4 раза в неделю.Культивирование в организме животных, Внутрибрюшинное введение клеток сингенным мышам, сенсибилиэированным пристаном или вазелиновыммаслом, вызывает образование асцитной опухоли. В сыворотке крови и асците таких животных содержатся антитела к Ы., -тимоэину, Способность кпродукции монАТ сохраняется при последовательных перевивках клеток отодного животного другому, а такжепри культивировании клеток асцитической жидкости п чдСто,Продуктивность штамма.При стандартных...

Номер патента: 1528791

Опубликовано: 15.12.1989

Авторы: Гуртовой, Дерюгина, Дризе, Леменева, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00, C12P 21/00 ...

Метки: антигену, антител, гибридных, группоспецифическому, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, системы, человека, штамм, эритроцитов

...су,Морфология клеток: штамм представ 35лен слабо прикрепляющимися к субстрату клетками с обычной для антителообразующих клеток морфологией.Видовая принадлежность штамма доказана цитогенетическим методом.Кариотип соответствует виду Мыв.шцзсо 1 цв. Модальное число хромосом89, генетические маркеры - 2 метацентрические хромосомы. 45Сведения о комтаминации линии:не обнаружена контаминация Ьактериями, грибами и микоплазмой, Вирусы нетестированы.Характеристика полезного вещества,продуциируемого штаммом; 1 ВИ анти-Мантитела, агглютинирующие эритроцитычеловека, содержащие М антиген. Методтестирования - агглютинация в солевойсреде или на плоскости.Характеристика биосинтеза полезных55продуктов: титр антител культуральнойжидкости в реакции солевой...

Номер патента: 1532873

Опубликовано: 30.12.1989

Авторы: Конев, Левин, Лобанок, Мажуль, Свирновский, Семенов

МПК: G01N 33/50

Метки: антигенов, антилимфоцитарных, антител, крови, лимфоцитарных, сыворотке

...клеток 810 в 1 мл. К 25 тестовой сыворотке анти-Н 1 Адобавляют равный объем взвеси лимфоцитов(опытная проба), Контрольным образцомслужат лимфоциты, проинкубированные в ,изотоническом растворе (растворе Хенк"30 са). После 30 мин инкубации при 37 С ,контрольный и опытный образцы одно кратно отмывают раствором Хенкса иосадок ресуспендируют в 0,4 мл раствора Хенкса (рН 7,2). Возбуждают триптофановую фосфоресценцию клеток путемоблучения ультрафиолетовым светом и с помощью Т-фосфориметра определяют время жизни триптофановой фосфоресценции контрольной и опытной проб лимГ40 фоцитов.я контрольного образца лимфоцитов равно 1,264 с, опытного - 0,822. Степень снижения времени жизни медленного компонента ТФКТ лимфоцитов 357,.Следовательно,...

Номер патента: 1534404

Опубликовано: 07.01.1990

Авторы: Бойко, Быкова, Лукина, Маслак

МПК: G01N 33/53

Метки: антител, противопарагриппозных

...результаты: чений Титр сьвороткираз- по показателюле ОП по диаграм -исло- ме 15344 ме р, 1 3200к 3, 2 мл ЗФРАТ добавляют 1 мкл сыворотки и тщательно перемешивают) . Вносят в лунки микроплат, заранее сенсибилизированные антигеном, по 100 мкл сывороток в одном5 разведении 1:3200, на каждую сыворотку используют по три лунки микроплат, Далее реакцию ТФИФА проводят, как описано вьше. Учитывают результаты спектроФотометрически и определяют величину ОП в разведении 1:3200 для каждой сыворотки.В результате установлено, что для 1 -й сыворотки величина ОП равна 0,984; 1,000; 1,025. По диаграмме находят титр для этой сыворотки - 1:409600. Для 2-й сыворотки ОП равна О, 923; 0,879; 1,001, титр по диаграм,ме 409600. Для 3-й сьворотки ОП 20 Ор...

Номер патента: 1534405

Опубликовано: 07.01.1990

Авторы: Амфитеатрова, Киселев, Чечик

МПК: G01N 33/53

Метки: антител, биологической, воrdетеllа, жидкости, реrтussis

...материалу, делают мазок, высушивают и окрашивают фуксином и определяют наличие антител к Вогдеге 11 а реггцввдв,Составитель Л,ПадюконРедактор В.Петраш Техред И,Дидык Корректор С,Шекмар Заказ 39 Тираж 501 Подписное ВИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж - 35, Раушкая наб д. 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент". г.ужгород, ул, Гагарина,101 бавляют 3 ч забуференного глицином физиологического раствора, содержащего 0,1 Е бычьего сывороточного альбу- мина и 0,037. азида калия, Данный диагностикум хранят при температуре 5- 10 С не более 15 дней. Для постановки реакции латекс-агглютинации используют стеклянную пластинку, на которую наносят двукратные разведения...

Номер патента: 1536315

Опубликовано: 15.01.1990

Авторы: Демченко, Каральник, Кузьмин, Лучинин

МПК: G01N 33/53

Метки: антител, выявления

...и антительного эритроцитарного.диагностикума, В остальном способ осуществляли, как в примере 1. 15По известному способу определяли антитела при помощи РПГА с использо, ванием антигенного эритроцитарного,диагностикума, приготовленного с оптимальной дозой - 250 мкг/мл.Каждый опыт повторяли 8 раз, Результаты приведены в табл.2.Видно, что чувствительность предлагаемого способа в 3 раза выше в сравнении с известным, а точность 25 обоих способов не различается.П р и м е р 3. Выбор оптимальной дозы антигена-сенситина Зонне для приготовления антигенного эритроцитарного диагностикума, используемого 30 в предлагаемом способе. Способ осуществляли, как в примере 1, но использовали серии антигенного диагностикума, полученные с разными (1,6- 100,0...

Номер патента: 1460994

Опубликовано: 30.01.1990

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Оганян, Размадзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, высших, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, человека, штамм

...присутствии ПЭГ(реакциявстречной и радиальной иммунодиффузии). Константа ассоциации МКА с1 яА человека составляет 2,2 10 М,с 1 яА обезьян - 510М.Контаминация.Бактерии, грибы и микоплазмы .отсутствуют. Родительская линия Х 63-Ар8.653 продуцирует эндогенный ретровирус С-типа мышей.Криоконсервирование.5-6 млн. кл, замораживают в жидком азоте в присутствии 90% сыворотки плода коровы и 10% ЭМЯО. Жизнеспособность клеток после размораживания составляет 90% (по включениютрипанового синего).Использование штамма иллюстрируется следующими поимерами.Пример 1,Навески иммуноглобулинов всехклассов человека в количестве 15 мкг50на трек кипятят в течение 5 мин наводяной бане в буфере для нанесениясодержащем меркаптоэтанол. При этомпроисходит...

Номер патента: 1541253

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Алексеева, Козловский, Новохатский, Соколов, Черепахина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, голарктической, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, поверхностному, расы, туляремии, штамм

...при 37 С в пластиковой или стеклянной посуде при посевной дозе 150200 тыс./мл в течение 3-4 дней доплотности насыщения 800 тыс./мл.Клетки пассируют один раз в 3-4 днятой же дозой Коэффициент рассева1;4-1;5. Культивирование ведут напитательной среде ВРМ 1 1640 илиДМЕМ, содержащей 10 Е эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глютамина,8-10 мМ буфера НЕРЕЯ. Культивирование штамма в организме экспериментальных животных, Индукцию асцитных опухолей у интактных беспородных белых мышей и инбредныхмышей линии Ва 1 Ь/с, внутрибрюшиннопраймированных за 14 дней до введения гибридомы пристаном в дозе0,5 мл/мышь осуществляют путем ино/кулирования 10 10 гибридных клеток на одно животное в 3 мл среды. Иммунную асцитическую жидкость собирают по мере...

Номер патента: 1541254

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Алексеева, Бичуль, Бурлакова, Новохатский

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, вибриона, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, о-антигену, огава, серовара, термостабильному, холерного, штамм

...клетки ГХ-В 7/Ог представляют собой крупные оКруглые клетки с узким ободком базофильной цитоплазмы. Ядрагиперхромные, неправильно-овальнойформы, крупные, с грубой структурой ядерного хроматина, В значительной части клеток цитоплазма имеетвыросты.Культуральные признаки типичныдля перевиваемых клеток мышиныхплазмоцитом. Клетки ГХ-В 7/Ог культивируют в виде стационарной суспензииопри 37 С в пластиковой или стеклянной посуде при посевной дозе 1001500 тыс./мл в течение 3-4 дней доплотности насыщения 800-900 тыс.кл./мл,Клетки пассируют один раэ в 3-4 дня.той же дозой. 1(оэффициент рассева1:4-1:5, Культивирование ведут на питательной среде ВРМХ 1640 или ДМЕМ,содержащей,10 эмбриональной телячьейсыворотки, 2 мМ глютамина, 8-10 мМбуфера...

Номер патента: 1551737

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Дерюгина, Дризе, Лапенков, Леменева, Носырев, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигена, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, растворимой, формам, человека, штамм

...клетокморфологией.Кариологические признаки. Кариотип соответствует Мця. пшяси 1 ця. Модальное число хромосом 78 с интервалом варьирования 74-80. С помощью Сокрашивания выявляются две большиеметацентрические хромосомы, 30Культуральные признаки. Среда длякультивирования ВРМ 1 1640 или ДМЕМс 207. эмбриональной телячьей сыворотки, 4 мМ Ь-глютамина, 17 пируватанатрия, 1-2% НЕРЕЯ-буфера, 510М2-меркаптоэтанола, антибиотики. Характер роста - стационарная суспензия. Метод снятия - резиновым "полисменом". Частота пассирования 2-3 сут.Кратность рассева 1:3-1:4,40При введении мышам ВАЬВ/с предварительно обработанных пристаном 2-5 "10 клеток асцит образуется черезб20 сут, Стабильная продукция антителнаблюдается в течение 2 пассажей на 45мышах, титр...

Номер патента: 1551738

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Дерюгина, Дризе, Лапенков, Леменева, Носырев, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, н-антигена, форме, человека, штамм

...выявляются большой и малыйметацентрики и один большой акроцент.рик,Культуральные признаки. Среда длякультивирования КРМ 1 1640 или ДМЕМс 20/ эмбриональной телячьей сыворотки, 4 миф 1.-глютдмина, 1 Е цируватанатрия, 2 К НЕРЕЯ-буФера, 5 10 2-меркаптоэтанолд, антибиотики. Характерроста - стационарная суспензия. Ме -тод снятия - резиновым "полисменом",Частота пассирования 2-3 сут. Кратность рассева 1:3-1;4,При введении мышам ВЛ 1.В/с предварительно обработанным пристаном(2-5) 10 клеток асцит образуется6через 9-14 сут. Стабильная продукция 45антител наблюдается н течение 2 пассажей на мышах, титр антител н асцитной жидкости н реакции агглютинации в солевой среде с эритроцитамиФенотипа 0 составляет 1:256-1:512 тыс,50в культуральной...

Номер патента: 1551739

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Дерюгина, Дризе, Леменева, Садовникова, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, группоспецифическому, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, системы, человека, штамм, эритроцитов

...2 большие метацентрические хромссомы.Продуктивность штамма. Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом: анти-Б антитела,агглютинирунудие эритроциты человека,15 20 25 30 35 40 45 50 55 содержащие М-антиген. Метод тестирования - агглютинация в солевой среде или на плоскости,Характеристика биосинтеза полезных продуктов: титр антител в культуральной жидкости в реакции солевой агглютинации в круглодонных микроплатах 1:64-1:256, титр антител в асцитной жидкости в реакции агглютинации на плоскости 1:1600-1:12800. Стабильность антителопродукции сохраняется втечение 13 пассажей в культуре и 2пассажей в мыши.Криоконсервирование клеток, Ростовая среда, 107. ДМСО, 407. любой сыоворотки, сутки при -70 С, затем -жидкий азот,...

Номер патента: 1554782

Опубликовано: 30.03.1990

Авторы: Митио, Сатоси, Тадамитсу

МПК: G01N 33/53

Метки: антигенов, антител

...нахо диться в обычном интервале рН, применяющемся дЛя реакций антиген-антитело, обчно используют рН в интервале приблизительно 5 - 10.Концентрация полианиона в реакционной среде обычно не превышает 5 мас.Е40и предпочтительно равна 0,0010,5 мас.Х.Более высокая концентрация можетприводить к нестабильности реакции45в некоторых системах анализа, В то жевремя бЬлее низкая концентрация снижает ингибирование так называемыхнеспецифических реакций, которые мешают анализу и делают невозможным получение точных данных анализа из-за50повышенного ингибирующего эффекта.Аитигены, которые служат н качестве определяемого соединения и реагента, включают в себя различные антигены, такие как белки, полипептиды, стероиды, полисахариды, липиды, пыльца,пыль и...

Номер патента: 1555360

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Вербицкий, Папазов, Фидлер

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гонадотропных, гормонов, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, субъединице, человека, штамм

...37 С, газовая фазавоздух +5% СО, Способ культивирования - в пластиковых флаконах на 50-." 25250 мл, посевная доза 500.000 клеток/мл, кратность рассева 1:2времясубкультивирования 3-4 дня,В организме животного - .мьппь ВАЯВ/собработанная пристаном (0,5 мл.в/бр.за 5-40 дней до инокуляции), доза,инокуляции 3-8 млн клеток, время образования асцита 10-20 дней,Характеристика продуцируемого продукта, Штамм гибридных клеток продуцирует монАТ 1 яС класса, направленныепротив,Ы-ХГЧ с-ЛГ, о(-ФСГ и с(-ТТГчеловека. Концентрация полезного продукта (монАТ против Ы-ХГЧ. с-ЛГ,Я-ФСГ и ТТГ человека) в культуральной среде около 10 мкл/мл,.в асцити"ческой жидкости - около 7 мг/мл, титры данных антител при определении спомощью твердофазного...

Номер патента: 1555361

Опубликовано: 07.04.1990

Авторы: Вербицкий, Папазов, Фидлер

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гонадотропину, гормону, животных, клеток, коровы, культивируемых, лютеинизирующему, мusсulus, моноклональных, продуцент, свиньи, специфичных, хорионическому, человека, штамм

...воздух + 5 СО .Споооб культивирования в пластиковых флаконах на 50-250 мл, посев,ная доза 500000 клеток/мл, кратностьрассева 1:2, время субкультивирования 3-4 дня,Культивирование в организме животного, В организме животного -мышьВИ В/с, обработанная приставом(0,5 мп в/бр, за 5-40 дней до инокулицин)доза инокуляции 3-8 млн.кле- .ток, время образования асцита 1020 дней,40Продуктивность штамма, Концентрация полезного продукта (монАТ против р-ХГЧ, р-ЛГЧ, р-ЛГС, р-ЛГК) в. купьтуральной сРеде около 10 мкг/мл,в асцитической жидкости - около7 мг/йл.Титры данных антител при определении с помощью твердофазного иммуноферментного метода: 1:3000 - в культуральной среде, 2 х 10 - в асцитичес-кой жидкости, при концентрации антигеяа при нанесении в...

Номер патента: 1560549

Опубликовано: 30.04.1990

Авторы: Буларгина, Ездакова, Катруха, Сологуб, Федоров, Феоктистова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рогатого, скота, штамм

...активность.В культуральной жидкости монАТнакапливаются в титрах 1:500 - 1:1000(ИАФ) или 1:8 - 1:16 (РДП - реакциядиффузионной преципитации).В. асцитной жидкости титры в ИФА0,5 (10 -10 ), в РДП 1:160 - 1:640,Контаминация, Иикоплазмы, бакте 50рии, плесневые грибы и дрожжи невыявлены,Криоконсервирование, Среда для замораживания; 45% среды Игла, 457 эмбриональной сыворотки к,р.с., 107ДМСО, Режим замораживания до -30 Со 55со скоростью 1 град/мин до "ЗООС соскоростью 2 град/мин, далее - жидкийазот. Раэмораживают при 40 С, центрифугируют при 1000 об/мин в течение1 О мин, ресуспендируют в ростовойсреде до концентрации 0,510 кл/мл.Использование штамма и продуцируемых монАТ иллюстрируется следующимипримерами,П р и м е р 1. Клетки клона...

Номер патента: 1562353

Опубликовано: 07.05.1990

Авторы: Демчева, Папковский, Савицкий, Чередникова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, копропорфирину, культивируемых, мusсulus, моноклональных, штамм

...вводят 0,5 мл 2, 6, 10, 14-тетряметилпентядекана в/б. На 7 день штаммклеток инъецируют В/б в количестве500000 клеток в мышь. Асцитную жидкость отбирают на 12-4 день. Объемасцита 4-5 мл. Клетки из асцита перевиваются новым мышам в течение 8 ОО пассажеи без заметного изменениянТИТРЯ МОНОКЛОНЯЛЬНЫХ ЯНТИТЕЛ В ЯСЦИТНОЙ ЖИДКО С Ти еПродуктивность штаьола,Концентрация моноклональных антлтел в культуряльной жидкости на7 день культивирования 100 икг/мл,а в аситной жидкости 10-2 мг/мл приопределении по методу Лоури и методомтвердофязного иммуноферментного анализа.Контаминация: бактерии и грибы вкультуре не обнаружены, Тест на микоплазму отрицателен.Кариологическая характеристикаштамма: модяльное число хромосом 100.Маркерых хромосом не...

Номер патента: 1562857

Опубликовано: 07.05.1990

Авторы: Варгин, Иванникова, Семенов

МПК: G01N 33/53

Метки: антител, асцитной, вирусу, жидкости, клещевого, энцефалита

...пипетированием и переносят на поверхность предметного стекла 20+0,005 мкл суспензии клеток. Каплю подсушивают на открытом воздухе при комнатной температуре. Подсушенный материал на поверхности, стекла фиксируют в охлажденном до -202 С ацетоне в течение 2012 мин. Результаты способа учитывают с помощью непрямого иммунофлуоресцентного мето да, где используют антитела к вирусу КЭ и меченные Флуоресцеином антитела к соответствующим иммуноглобулинам.В-исследуемых каплях суспензий клеток Бподсчитывают количество кле 45ток со специфической Флуоресценцией из расчета на 500 об"ледованных клеток, Результат считают положительным при увеличении доли содержащих ан". тиген вируса КЭ клеток в сравнении с контролем (вирус + нормальная сыворотка +...

Номер патента: 1564184

Опубликовано: 15.05.1990

Авторы: Баев, Зеленин, Капник, Прудовский, Рубцов, Скрябин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, гормону, животных, используемый, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рогатого, роста, скота, штамм

...замораживания - на программномзамораживателеС/мин до -70 С, затем перенос в жидкий азот и хранениев нем.При размораживании клеток послехранения в жидком азоте ампулы быстро 40опереносят в водяную баню при 37 С,слегка покачивая. Содержимое ампулыстерильно переносят в подогретую питательную среду в ячейки платы с макорофагамн, инкубируют при 37 С. После 4520-24 ч инкубации среду сливают идобавляют свежую подогретую питательную среду,Жизнеспособность после размораживания - 70%.50Контроль контаминаций.Проверку на микоплаэменное и бактериальное заражение осуществляли сиспользованием флуорохромов Хехст33258 и ДАПИ и посевом культуральной55среды на мясопептонный; агар. Заражения не обнаружено.Прививаемость животным изогенногопроисхождения -...

Номер патента: 1567624

Опубликовано: 30.05.1990

Авторы: Антропова, Барловская, Воробьев, Галактионов, Иванов, Маргулис, Пинаев, Фридлянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерферону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...проводят в смесиравных объемов в кондиционированнойростовой среды и 20-ного диметилсульфоксида на ростовой среде приконцентрации 0,5 10 кл. в 1 мл. Режим замораживания: 1 град в 1 мин от+20 до минус 60 С, 1 О град в 1 минот минус 60 до синус 100 С, 50 градв 1 мин от минус 100 до мину: 150 С,Клетки хранят в жидком азоте. Отогревают при 40 С в течение 1-2 мин,одалее разбавляют 10-кратным объемомсреды, центрифугируют 5 мин при1000 об/мин и высевают в ростовуюсредуЖизнеспособность клеток штамма 1580 после размораживания, определенная по включению трипановогосинего, составляет 60-701,Контаминация.Бактерии и грибы в культуре не обнаружены. Микроплазма не выявлена по включению тимидиновой метки,П р и м е р, Каждая мышь...

Номер патента: 1571063

Опубликовано: 15.06.1990

Авторы: Антропова, Барловская, Воробьев, Галактионов, Иванов, Маргулис, Пинаев, Фридлянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерферону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...проводится в смесиравных объемом кондиционированной ростовой среды и 20%-ного диметилсульфоксида на ростовой среде при концентрации0,5 -1 10 клеток в 1 мл. Режим заморажи 6вания: 1 амин от 20 до минус 60 С, 10 вмин от минус 60 до 100 С, 50 в мин отминус 100 доминус 150 С. Клетки хранят вжидком азоте. Отогревают при 40 С в течение 1-2 мин; далее разбавляют 10-кратнымобъемом среды, центрифугируют 5 мин при10 1000 об/мин и высевают в ростовую среду, Жизнеспособность клеток штамма 159 Д после размораживания, определенная повключению трипанового синего, 60-70%.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре не обнаружены, Микоплазма не выявлена по включению тимидиновой метки.П р и м е р, Каждая мышь линии ВА В/с...

Номер патента: 1571506

Опубликовано: 15.06.1990

Авторы: Васильев, Змушко, Рыбкин, Семенов, Яковлев

МПК: G01N 33/53

Метки: антител, противовирусных

...7 дней, Сыворотку больной брабатывали 1%ным раствором реопоиглюкина в равных объемных соотноениях по 0,025 мл в течение 90 минпоследующей постановкой РПГА по писанной выше методике. Полученные итры реакции составили 1;320 и 1:320, В дальнейшем получено серолоическое подтверждение кори.П р и м е р 2, Больная Т., 31 год оступила с диагнозом острый гастронтерит средней тяжести, При серологическом обследовании с использованием метода парных сывороток,(с интервалом между взятием крови 7 дней) титр РПГА составил 1:80 и 1;320 соответственно, Проводилась также РПГА по предлагаемому способу, согласно которому сыворотки больной предварительнообрабатывались 2%-ным раствором рео 5полиглюкина в равных объемных соотношениях в течение 1 ч, По...

Номер патента: 1576561

Опубликовано: 07.07.1990

Авторы: Барышников, Короткова, Тупицын

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, животных, клеток, кортикальных, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тимоцитов, человека, штамм

...КРИ 1 1640или среде МЕМ в 1 Х модификацииДульбекко, содержащей 15% телячьейзмбрйональной сыворотки, 2 мМ/мл глюгал 1 ина, 0,1 мг/мл гептамицина.Титр антител в культуральной жидкости определяют непрямой реакциейповерхностной иммунофлооресценции наживых тимоцитах, Интенсивность флюоресценции ацениваот на флюоресцентном микроскопе при увеличении объектива 40, окуляра 2,5-10.Титр антител в культуральной жидкости 1:50.Культивирование хп ч 1 чо. Для выращивания асцитной опухоли из штаммагибридных клеток пригодны мыши самкилинии ВА 1.В/С, Интактным мышам за 1-7днеи до прививки опухоли вводят внутрибрюшинно (в/бр) по 0,5 мл 3%-ногопептона на вазелиновом масле. Клеткигибридомы инъекцируют в/бр по 1 О кле 7так на мышь в 5 мл среды. Через...

Номер патента: 1585329

Опубликовано: 15.08.1990

Авторы: Беркова, Добрынин, Коробко, Чувпило, Шамборант

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, некроза, опухоли, продуцент, фактору, человека, штамм

...4 С.Плашку отмьвает 0,1%-ным растворомтвина 20 в О, 01 М натрий-Фосфатномбуфере, содержащем 0,15 М МаС 1(ФСБТ), рН 7,2, инкубируют с 200 мкл1%-ного раствора бычьего сынороточного альбумина (БСА) в течение 1 чпри 37 С, Плашку отмывают 3-4 разаФСБТ и вносят в лунки по 50 мкл препарата, содержащего антитела. Послеинкубации в течение 1,5 ч при 37 Сплашку отмывают ФСБТ и обрабатьваютраствором антител к иммуноглобулинам мыши, конъюгиронанных с пероксидазой хрена (50 мкл в лунку, разведение 1:1000, 1 ч при 37 С). Затемплашку отмьвают и нносят 50 мклраствора ортофенилендиамина (1 мг/мл)н 1%-ном цитратном буфере (рН 4,5),содержащем 0,05% Н О. Реакцию останавливают добавлением 50 мкл влунку растнора 2 М серной кислоты.Взаимодействие...

Номер патента: 1445183

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Андросова, Владимирский, Ильиных, Погуляева, Трахт, Ходун

МПК: A61K 39/40, C12N 5/00

Метки: bcg, антител, воvis, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, штамм

...клеток 2 А 5 эамораживаютв эмбриональной телячьей сыворотке сдобавлением 10% ДМСО в жидком азотедля хранения. Другую часть используют для получения гибридной опухоли васцитной форме у мышей ВАЬВ/с введением внутрибрюшинно 10 клеток мы 7шам, подготовленным внутрибрюшиннойинъекцией 0,5 мл ваэелинового маслаэа 3-30 дней до инъекции клеток, Асцит образуется через 10-16 дней. Изасцнтической жидкости выделяют иммуноглобулины с помощью сульфата аммония, Штамм 2 А 5 хранится в Специализированной коллекции перевиваемьпссоматических клеток позвоночных Института цитологии АН СССР по номером600 и характеризуется следующимипризнаками,Культуральные признаки.Среда НРИ 1-1640 с 10% телячьей эмб-,риональной сыворотки и 10% лошадинойсыворотки, 4 мМ...

Номер патента: 1595902

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Барышников, Дубинкин, Заботина, Кадагидзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, кортикальных, культивируемых, мusсulus, моноклональных, сд38, тимоцитов, штамм

...и иэ положительной лун кй гибридому вновь клонируют. Колонки возникают на двенадцатый день в 58 из 96 лунок. Проводят скрининг на Т-клетках. Позитивные клоны поеле50 клонирования составляют 100% (58 иэ 58)Культивирование п чд 1 го. Для выращивания штамма используют пластиковую или стеклянную посуду. Во флаконобъемом 45 смэ в 5 мл среды запиваютпо 5 к 10 клеток штамма. Пассаж 1 разв 3-4 дня той же дозой, Штамм выращивают при 37 С на среде ВРМ 1-1640 илисреде МЕМ в 1 Х модификации Дульбекко,содержащей 15,0 оленьей или телячьейэмбриональной сыворотки; 2 мМ/мл глютамина; 0,1 мг/мл гентамицина,Культивирование п чиччо. Для выращивания опухоли из штамма гибридныхклеток пригодны мьппи самки линии;ВА 1 В/с, Интактным мьшам за 1-7 днейдо...