Способ получения ( )-5-(2-бромвинил)уридина

Н=СН НО ные эначен где В, имеет указа обрабатывают низамином, напримерэтилацетате, посл 2 р 35 "триУ ф . эвинил)уридин общешим третичн риэтилами чего по цил Е 1-5 формулы(71) Эдьт Дьедьсерведьесети Дьяр (Нй), А.Б. Зопег, С.Чегйе 1 зг, К.Т. Ча 1 Кег. ТЬе зупгЬпезы ог Ье рогепг. ап 1 Ьегрег чгцз а 8 епг, Е-(2-Ьгошочд-,у 1)"2 -цеохуцг 1 Жпе апй ге 1 агей сошр . ТеггаЬ. 1,еггегз. 1979, 45,4 ОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1 Е 1-5-(УРИДИНА формулы о т л и ч а ю щ ий с я тем, что 2 ,3 , 5 "три-ацил-этилуридин н собщей формулы 40363 А 3(Ю 4 С 07 Н 19 16 А где К - алканоильная группа с атомами углерода, бензоильная незамещенная или замещенна в положении галогеном или алкиль дикалом с 1-4 атомами углерода, подвергают взаимодействию с элементарным бромом под действием УФ-излучения в галоидированном углеводор например в дихлорметане с последуУщим кипячением реакционной массы отгонкой растворителя, а образовавшееся дибромпроизводное, общей формулы1240363 Изобретени нуклеозидов, чения нового -бромвинил)УР О 5 иО,млтиле относится к химииа именно к способу полусоединения Е-(2 идина формулы НО ОНЦелью изобретения является разработка способа получения рибонуклеози- . да формулы 1,.обладающего антигерпес-, кой активностью и более низкой токсичностью, чем структурный аналог 20 -2 -деэоксинуклеозид Е 1-5-(2.-бром- винил)урацила.П р и м е р 1, 2, 3, 5-три- -О-бензоил- Е 1-5.-(2-бромвинил)уридин (17,К-бензоил).2556:,О г (0,095 моль) 2, 3 , . 5- -три-.О-бензоил-этилуридина при слабом нагревании растворяют в 400 мл безводного дихлорметана. Нагревание прекращают. В токе азота и при УФ облучениив течение 20-25 мин к раст-. вору. прибавляют 34,15 .г (11 мл) брома. После.завершения прибавления брома отключают источник УФ-излучения и реакционную смесь 30-40,мин кипятят 35 с обратным холодильником. Затем от- . гоняют растворитель и образовавшийся бромистый водород в вакууме. Оставшийся сироп бледно-желтого цвета разбавляют 20 мл безводного дихлорметана 40 и снова выпаривают. Затем остатокрастворяют в 200 мл безводного этилацетата, раствор при постоянном пегде К имеет указанные значения,непосредственно или после отделения и растворения в спирте с 1-4атомами углерода дезацилируют алкоголятом щелочного металла с 1-4 атомами углерода. ремешивании обрабатывают 15 мл при-. бавляемого по каплям триэтиламына, отфильтровывают выделившийся гидро.бромид триэтиламина и фильтр промывают 2 х 20 мл этилацетата. Фильтрат объединяют с промывными водами и. выпаривают под разряжением. В качестве остатка от выпаривания получают 63,0 г жесткой пены., Выход 1007. После затирания с этиловым спиртом получают.белые кристаллы, плавящиеся при 160-170 С, Процукт, если жела-. тельно, можно деацилировать непосред-, ственно.2 , 3 , 5 -три-бензоил-зтил ), )уридин, используемый в качестве исходного, может быть получен следующим образом:а) 2,4-бис-(О-триметилсилил)-5-. -этилурацил.К 40 г (0,285.моль) предварительно высушенного под разряжением про150 С этилурацила прибавляют 8 ,(0,5 моль) 1,1,1,3,3,3-гексамедисилазана.Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 24 ч в отсутствии влаги, Полученный прозрач- . ный раствор выпаривают при атмосферном давлении. В качестве остатка от выпаривания получают густой сироп, который подвергают перегонке под разряжением., Выход 78,95 г (973) Т.кип. 134 пС (1733 Па).в) 1-0-ацетил,3,5-три-О-бензоил- -Д-рибоза60 г (0,4 моль) Д-рибоэы растворяют в 1280 мл абсолютного метанола. К раствору прибавляют 34 мл 11,2 Ж-ного метанольного раствора соляной кислоты. Реакционную смесь выдерживают 24 ч при 20 С в условиях, исключающих попадание влаги. Затем смесь ней;-бромвинил)уридин Т.кия. 98-1.05 С (133,3 Па) 2 ,3 ,5 -три-(п-метилбензоил)-5- (2-бромвинил)уридин Т,кип. 209 С Исходные продукты для примеров 25 получены путем, описанным в примере 1.. 50П р и,м е р б. Е 1 -5-(2-бромвинил)уридин (1)К 65,5 г (0,11 иоль) 2, 3, 5- три;бензоил- Е-(2-бромвинил)уридина.,неочищенный продукт примера 1)прибавляют 250 мп 0,5 нметилатанатрия и 250 мл абсолютного метанола. ,; Реакционную смесь перемешивают 3 ч при 20 фС. Если осадок выделяется,его отфильтровывают, рН прозрачногораствора устанавливают равным 5"6 при,помощи ионообменнойсмолы Юошех 50 Нзатем смолу отделяют фипьтрацией и .,-,промывают 2 х 100 мл метанола. Фильт"рат и промывные воды объединяют изатем выпаривают под разряжением,Остаток обрабатывают этанолом и бен-.эолом. После. затирания остатка с эфиром получают 33 ч.яеочищеннОго про 1240363 4 трализуют 120 мл пиридина и выпарива- делившихся кристаллов отделяют деканют в вакууме .при 30-40 С. тацией воду. Кристаллы перемешиваютОстаток обрабатывают еще 120 млс 500 мл воды, жидкость снова деканпирндина и Опять выпаривают. Получен- тируют, затем снова перемешивают с ный вязкий сироп слабо-желтого цвета 5 200 мл 50-80-ного метанола. и затем . растворяют в смеси 304 мл пиридина фильтруют, Неочищенный продукт пере-. н 320 мл хлороформа. Смесь при охлаж- кристаллизовывают из 2,5 л метанола., девин льдом обрабатывают 233.,8 мл Получают 128,5, г (60 Х) продукта, ко- свежеперегнанного бензоцлхлорида и за- торый плавится при 131 С. затем оставляют наночь в холодильниО с) 2,3 ,5-три-бензоил-эткп",Фке.На другой день смесь выливают науридин лед и разлагают таким образом избы,1 г (0,095 моль) 1-0-ацетилточный хлористый бензоил. Затем раз- -2,3,5-три-О-бензоил -ц-рибозы раст- деляют фазы.Водную фазу экстрагируют воряют в 1690 мл дихлорметана, Раст 2 х 160 мл хлороформа, хлороформенные 11 вор при перемешивании обрабатывают , вытяжки объединяют., промывают 200 мл33,7 г (0,118 моль) 2,4-бис-(О-тримеводы, высушиваютнад безводным суль- тилсилил)-5-этилурацила и 14 мл хлор- фатом натрия и выпаривают при 30 - ного олова (1 Ч) в 110 мл дихлорметана. 40 С в вакууме. Прибавляют 100 мл то- Реакционную смесь перемешивают 2-3 ч луола и снова выпаривают. После уда и затем выдерживают 24 ч при " 20 С.о .ления следов растворйтеля получают Затем смесь встряхивают с 2300 мл намасло красного цвета. Его растворяют сыщенного водного раствора бикарбона смесью 96 мл ледяной уксусной кисло- та калия. Органический слой отцеляют, ты и 224 мп уксусного ангйдрида, раст- высушивают и выпаривают под разряжевор при интенсивном перемешивании и 25 нием. Белый кристаллический остаток охлаждении льдом медленно (в течение перекристаллизовывают из 250 мл эта- . 2-3 ч) обрабатывают 32 мл,95-973-ной нола. Выход 53,5 г (953). Т. пл. 155о серной кислоты и затем на ночь остав С. ляют в холодильнике. На следующий Продукты,.полученные по примерам 2 день смесь выливают на лед, и от вы-5,представлены в табл.1,Таблица .1 Пример Продукт Показателищ а1240363 Таблица 3 Соединение формулы Штаммы ви сов 0,1 мл) 3,26 0 3 6,0 2,772,52,53,0 е данные одн что в результ образуется 5 -2 .,3,5"-т ин. Данное с аться лишь в брома в полож значно подте реакции В 1-метоксии- (п-хлорединение мо" ом случае, нии. этильно" Получени.тверждают,с метанолом-2-бром)этилбензоил)уриджет .образовсогда атом дукта, который перекристаллизовываютиз воды и затем из этанола, Выход28 г (71,7%), Т. пл. 165-167 С,П р и м е р 7. Подтверждение образования 5-(1,2-дибромэтил).-2 ,35-три-О-(и-хлорбензоил)уридина какпромежуточного продукта в процессесбромирования 2 ,3 ,:5 -три"0-( -хлорбензоил)-5-этилуридина.2 ,3 , 5 -три-(ч-хлорбензоил) -1в .5-этилурйдин бромируют как описанов примере 1, после окончания реакциирастворитель упаривают, к оставшемусяс. 15сиропообразному .продукту прибавляютбезводный:метиловй спирт. Реакционнуюсмесь выдерживают в течение 10-15 мин.при комнатной температуре, метанолупаривают в вакууме при комнатной тем 20пературе.Остаток хроматографируют наколонке, заполненной селикагелем 60(размер частиц 70-350 мкм,диаметр ко лонки 2 см, высота загрузки 50 см,элюент -хпороформ),Полученный после упаривания хлоро-.форма остаток подвергали ЯМР-исследотваниям, Спектр ЯМР снимают на спектрофотометре типа Чаг 1 ап Х-7 РТ,частота 100, 1 Мгц, в.качестве раст-.ворителя используют дейтерохлороформ, Э 0, в качестве внутреннего стандарта -тетраметилсилан.Результаты ЯИР-спектрометрирования приведены в табл . 2.Таблица 235 го радикала 5-(1,2-дибромэтил)-2,3,5-три-О-(п-хлорбензоил)уридина, образовавшегося при бромировании, заме".няется при обработке метанолом наметоксильную группу.Представленные данные однозначнодоказывают, что при бромировании производных 5"этилуридина в условияхпримера 1 образуется промежуточныйпродукт - производное 5-(1,2-дибром.этил)уридина.,Активируемую активность соединенияформулы 1 оценивают следующим образом."вначале определяют концентрацию вещества в жидкости культуры ткаНи, невызывающую повреждение клеток, которое может быть замечено илй измерено.Зту концентрацию обозначают СТО. Соединение является вырусоспецифичным,т.е. пригодно для лечения,в том случае, если оно в концентрации СТд илеще меньшей уже .тормозит размножениевирусов в ткани.Эффективность действия соединенияобщей формулыпротив вирусов показана в табл.1 и.2.Действие аналогов нуклеозида наразмножение вирусов в культурах клеток при СТо концентрациях приведенов табл.1. ру Негрев Айепо КцЪе пЕ 1 цЮ 81 шр 101 а еп 2 а Тормозящее деиствие соединенияормулы 1 на размножение вирусовриведено в табл.2Таблица о 8 ТС/П, д 1 о 8 ТС/Вц1240363 табл,4 ГЕД-( ется от изозидов темствие еготельно нев 2,53,02,33 3,163,03, 17 концентрации 503-ной (СТ ) и нетоксичной%оТо) соединения форму на различных культур аженные в 1 оя р/мп,5,666,05,5Средние значе цито-.кон-,.ы 1 чения ости ии ( ах енны выр 5 82 3,16 ны абл.Т. а б л и ц оединеие, фор мулы 2 6 2,0 1,6 6 х .25Незначительная токсичность дляткани Е-.5-(2-бромвинил)-урндина также подтверждается опытами, проведенными на мышах . йя определения острой токсичности (1 Л) )юоОстрая токсичность на мышах (растворитель:вода, содержащая 20 Ж.диметир формамидачерез 24 ч приведена.в табл,лиц Соотношение умработанных). Сформулы Доза,г/кг Вид применения об едине нутри Внутрибр шинн о/1000 О/1500 О/5 аль Исследование токсичностй хЛ растворимости в,воде.соедине фф Водные суспензия соединения,папиоксиэтиленсорбитол-монол и карбоксиметилцеллюлозой. ограничено из-за говленные сТреп 80) ия.приг а Для эксперимента с Негрез Зхшр 1 е Туу 1 в НеЬа-культуре клеток для 1 Е 1 -5-(2-бромвинвл)-уридина получено с отношение между лечебной и вредной дозой лекарства: 1063, из вели чины, показывающей 503-ное подавляющее действие по,. отношению к . контролю. Зн токси центр опред клето приве1240363 10 Составитель И.Корсакова Техред В.Кадар Корректор М.Самборская Редактор В,Иванова Заказ 3416/60Тираж 343 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5щ ГПроизводственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная,4,Лекарственные препараты, приготовленные известным путем с Е 1-5-(2- -бромвинил)-уридином в качестве биологически активного вещества, типа растворов для инъекций, мазей,таблеток и т,д могут применяться, против заболеваний, вызываемых Нег- рез 5 юрбех тип 1, не только ло кально, но и стстематически.