Способ получения цефемовых соединений или их аддитивных солей с кислотами

7158 АЗ СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКРЕСПУБЛИК НИ Лтд(3 Р) та, Кензи СО 4 есь й мл хета и тече-диметилформаористого фосфоемешивают при ие 30 мин, чтобы ОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНЕДОМСТВО СССР.ГОСПАТЕНТ СССР)ОПИСАН ИК ПАТЕНТУ(71) Фудзисава Фармасьютикал Ко(56) Международная заявкаМ ЮО 86/00070,кл. С 07 О 501/46, опубл. 1986.Европейский патент М 0223246,кл. С 07 О 501/46, опубл. 1987.(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЦЕФЕМОВЫХСОЕДИНЕНИЙ ИЛИ ИХ АДДИТИВНЫХСОЛЕЙ С КИСЛОТАМИ(57) Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению цефемовых соединений флы носится к способу половых соединений или их кислотами, которые обнтибиотика и могут наймедицине для лечения леваний, вызванных паганизмами.тения является получеиков ряда цефема, обланной антимикробной е илл юстИзобретение от учения новых цефем аддитивных солей с ладают свойством а ти применение в инфекционных забо тогенными микроор Целью изобре ние новых антибиот дающих повыше активностью. Примеры, прив рируют изобретени При мер 1, См мида (0,41 мл) и 0,4 рила в 2 мл этилац охлаждении льдомЦ00 О0-й. р в виде синизомеров, где 81 и В 4 независимо друг от друга - свободная или защищенная аминогруппа; й 2 - низший алкил или фторированный метил; йз - свободный или защищенный гидрокси (низший) алкил; Я 5-Н, или метил, или их аддитивные соли с кислотами, которые. обладают свойствами антибиотика, Цель - разработка способа получения более активных соединений. Получение ведут ацилированием кислотноаддитивной соли реакционноспособного производного соответствующего цефемого соединения со свободной 7-аминогруппой реакционноспособным производным соответствующей (2-замещенный тиазолил)- алкоксииминоуксусной кислоты, 2 табл. приготовить реактив Вильсмайера. К указанному выше раствору при 0-5 С добавляют 1,02 г 2-(2-формамидотиазол- ил)-2-метоксииминоуксусной кислоты и смесь перемешивают при указанной температуре в течение 30 мин, чтобы получить активированный кислотный раствор, Этот активированный кислотный раствор добавляют в раствор 7-бетамино-3-амино-(2- гидроксиэтил)-1-пиразолио)-метил-цефем-карбоксилата, тригидрохлорида (2 г) и 5,85 г М+триметилсилил)ацетамида в 40 мл тетрагидрофурана при охлаждении льдом и затем смесь перемешивают при 10 - 15 С в течение 1 ч. Образовавшуюся смесь выливают в 500 мл дизтилового эфира и образовавшийся осадок собирают путем фильтрации,(2 Н, мул ьтиплет), 5,88 (1 Н, дублеты, 3 = 5 Гц 5 10 лачивают до рН 2 водным раствором (50 ) бикарбоната натрия. Этот раствор подвергают хроматографированию на колонке с макропористой неионной адсорбионной смолой "Дайион Эйч-Пи" (торговый знак, производство фирмы Мицубиси Кемикал Индастриз). Целевое вещество элюируют 10%-ным диизопропиловым спиртом и диофизируют, получая 0,43 г 7-.бета-(2-аминотиа зол-ил)-2-метокси ими ноацетамидо)-3- 3-а мино-(2-гидро ксиэтил)-1-пиразолио)- метил-З-цефем-карбоксилата, синизомер (0,43 г).ИК-спектр (нуйол); 3300, 1770, 1640 см , Я М Р-спектр (пердейтеродиметилсульфоксин) д: 3,00 и 3,30 (2 Н, АВ-квартет, 3 . 18 Гц), 3,60 (2 Н, мультиплет), 3,83 (ЗН, синглет), 4,37 (2 Н, мультиплет), 5,06 (1 Н, дублет, 3 =- 5 Гц), 5,18 (2 Н, широкий синглет), 5,6 (1 Н,45 50 55 и 8 Гц), 5,99 (1 Н, дублет, 3 = 3 Гц), 7,48 (1 Н, синглет), 8,12 (1 Н, дублет, Л = 3 Гц), 8,59(1 Н, син глет), 9,81 (1 Н, дублет, 3 = 8 Гц).Следующие вещества (примеры 2 и 3) 15 получают по методике, аналогичной таковой в примере 1.П р и м е р 2. 7-бета-(2-Аминотиазол-ил)-2-метоксииминоацетамидо)-3-3-амино-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио)метил- 20 цефем-карбоксилат, синизомер.ИК-спектр (Нуйол): 3300, 1770, 1640 см П р и м е р 3, 7-бета-(2-аминотиазол-ил)-2-(дифторметоксиимино)ацетамидо)-3- 3-амина-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио)- метил-цефем-ка рбоксилат, синизомер,ИК-спектр (нуйол): 3300, 1760, 1660 см .П р и м е р 4. К раствору дигидрохлорида 7-бета-(2-форма мидотиазол-ил)-2-метоксииминоацетамидо)-3- 3-амино-(2-гид- ЗО роксиэтил)-1-пиразолио)метил-цефем- карбоксилат (синизомер, 2,5 г) в метаноле (12,5 мл) добавляют 0,88 мл концентрированной хлористоводородной кислоты (0,88 мл) при комнатной температуре, З 5После перемешивания при той же самой температуре в течение 2 ч смесь выливают в этилацетат(500 мл) и образовавшийся осадок собирают путем фильтрации. Осадок растворяют в воде (1 00 мл) и подще дублет, 3 = 5 Гц и 8 Гц), 5,84 (1 Н, дублет, Л - 3Гц), 6,71 (1 Н, синглет), 7,18 (2 Н, широкий синглет), 7,38 (2 Н, широкий синглет), 8,08 (1 Н,дублет, 3 = 3 Гц), 9,52 (1 Н, дублет 3 = 8 Гц).Следующее вещество (пример 5) получено по.методике, аналогичной примеру 4.П р и м е р 5. 7-бета-(2-аминотиазол 4-ил)-2-(дифторметоксиимино)а цетамидо)3-3-амино-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио)метил-З-цефем-карбоксилат, синизомер.ИК-спектр (нуйол): 3300, 1760, 1660 см 1,П р и м е р 6. 8 суспензию 7-бета-(2 аминотиазол-ил)-2-(дифторметокси ими но)ацетамидо)-3-3-формамидо-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио)метил-цефем-карбоксилата, синизомер (0,7 г) в метаноле (3,5 мл)добавляют 0,42 мл концентрированной хлористоводородной кислоты при комнатнойтемпературе, После перемешивания притой же самой температуре в течение 2 чсмесь выливают в этилацетат. Образовавшийся осадок растворяют в воде и подщелачивают его до рН 2 с помощью 5 -говодного раствора бикарбоната натрия, Этотраствор подвергают хроматографированию,на колонке с макропористой неионной адсорбционной смолой "Дайоин Эйч-Пи".Целевое вещество элюируют 100 -ным диизопропиловым спиртом и диофилизируют,получая 0,41 г 7-бета-(2-аминотиазолил)-2-(дифторметоксиимино)ацетэмидо)-3-3-амино-(2-гидроксиэтил)-1-пира зол иометил-З-цефем-карбоксилат, синизомер.ИК-спектр (нуйол): 3300, 1760, 1660 смЯМР-спектр (в тяжелой воде), д; 3,02 и3,35 (2 Н, АВ квартетЗ = 18 Гц), 3,78 (2 Н,мультиплет), 4,28 (2 Н, мультиплет), 4,95 и5,16 (2 Н, АВ квартет, Л =- 16 Гц), 5,16 (1 Н,дублетЗ=5 Гц),6,86(1 Н, триплет, Л =69 Гц),7,16(1 Н, синглет), 7,83 (1 Н, дублет, 3 = 3 Гц),Следующее вещество(пример 7) получено по методике, аналогичной примеру б.П р и м е р 7, 7-бета-(2-аминотиазол 4-ил)-2-метоксииминоацетамидо)-3-3-амино-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио)метилцефем-карбоксилат, синизомер,ИК-спектр (нуйол): 3300, 1770, 1640 смП р и м е р 8. В раствор 6,5 г 7-бета 2(2-аминотиа зол-.ил)-4-метокси ими нов цетамидо)-3-3-амино-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио)метил-З.цефем-карбоксилат, синизомер, в 6,5 мл воды добавляют 6,5 млдвухнормальной серной кислоты при комнатной температуре. Смесь перемешиваютпри этой температуре, чтобы выпал кристаллический осадок, Эти кристаллы собираютпутем фильтрации и промывают их ледянойводой и затем ацетоном, получая соль серной кислоты 7-бета-(2-аминотиаэол-ил)-2-метоксииминоацетамидо-3-амино(2-гид роксиэтил)-1-пира зол иометил-цефем-карбоксилат, синизомер (5,92 г).Я М Р-спектр (пе рдейте роди метилсул ьфоксил), д: 3,13-3,83 (2 Н, мультиплет), 3,40- 53,83(4 Н, мультиплет),5,15(1 Н, дублет, Л =5 Гц),5,05 и 5,30 (2 Н, АВ квартет, 1 = 13 Гц), 5,79 (1 Н,дублеты 3 = 5 Гц и 8 Гц), 5,88 (1 Н, дублет, Л =3 Гц), 6,71 (1 Н, синглет), 7,28 (2 Н, широкийсинглет), 7,95(1 Н, дублет, Л =3 Гц),9,57(1 Н, 10дублет,3 = 8 Гц),Следующие соединения (примеры 9 - 12)были получены по методике, описанной впримере 1.П р и м е р 9, 7-бета-(2-формамидотиазол-ил)-2-метоксииминоацетамидо-4 метил-амино-(2-гидр оксиэтил)-1-и иразолио-метил-З-цефем-карбоксилат, синизомер.ИК-спектр (нуйол): 3150, 1770, 1650 см . 20Я М Р-спектр (пердейтеродиметилсул ьфоксил), д: 1,94 (ЗН, синглет), 3,32 (2 Н, широкий синглет), 3,52 - 3,68 (2 Н, мультиплет),3,88 (ЗН, синглет), 4,12 - 4,39 (2 Н, мультиплет),5,14, (2 Н, широкий синглет), 5,29 (1 Н, дублет, 25Л = 5 Гц), 5,82 (1 Н, дублеты 3 = 5 Гц и 8 Гц),7,36 (1 Н, синглет), 7,83 (1 Н, синглет), 8,47 (1 Н,синглет), 9,63 (1 Н, дублет, Л = 8 Гц),П р и м е р 10, 7-бета-(2-формамидотиазол-ил)-2-метоксииминоацетамидо- 303-ацетамидо-(ацетоксиэтил)1-пиразолиометил-З-цефем-карбоксилат, синизомер,ИК-спектр (нуйол): 1780; 1660, 1550 смЯМР-спектр (пердейтеродиметилсульфоксид), д: 1,96 (ЗН. синглет), 2,27 (ЗН, синглет), 3,2-3,6 (2 Н, мультиплет), 3,87 (ЗН,синглет), 4,1 - 4,5 (4 Н, мультиплет), 5,22 (1 Н,дублет 3 = 5 Гц), 5,43 (2 Н, синглет), 5,90 (1 Н,дублеты 3 = 8 Гц и 5 Гц), 7,00 (1 Н, дублет,(ЗН, синглет), 3,06 и 3,37 (2 Н, АВ-квартет, Д =18 Гц), 3,37 - 3,93 (2 Н, мультиплет), 3,98 (ЗН,синглет), 4,19-4,43 (2 Н, синглет), 5,09 (2 Н,широкий синглет), 5,19(1 Н, дублет, 3 = 5 Гц),5,89 (1 Н, дублет,.3 = 5 Гц), 6,96(1 Н, синглет),7,71 (1 Н, синглет).П р и м е р 14, 7-бета-(2-аминотиазол 4-ил)-2-метоксииминоацетамидо-3-а цет. а м идо-(2-гидро ксиэтил)-1-и и раз од иометил-З-цефем-карбоксилат, синизомер былполучен по методике, описанной в примере6. Температура плавления 160 С(с разложением),И К-спектр (нуйол): 3200, 1770, 1600 см .ЯМР-спектр(в тяжелой воде), д; 2,26(ЗН,синглет), 3,10 (1 Н, дублет)3 = 18 Гц), 3,47,3 = 5 Гц), 6,93 (1 Н, дублет, Л = 3 Гц), 6,94 (1 Н,синглет), 8,16 (1 Н, дублет 3 = 3 Гц).Теперь для того, чтобы показать полезность целевых соединений способа по изобретению, проведены данные испытаний наМ И К (минимальную ингибирующую концентрацию) характерного вещества (1) этогоспособа.Метод испытания,Противомикробную активностьи ч 11 гоопределяют методом двухкратного разбавления агаровой пластинки.Одну петлю ночной культуры каждогоиспытуемого штамма в триптиказо-соевомбульоне (10 жизнеспособных клеток на81 мл) наносят полосами на агар сердечногоэкстракта (Н 1 агар), содержащий постепенно изменяющиеся концентрации испытуемого вещества, Минима ьнуюингибирующую концентрацию (МИК) выражают в единицах мкг/мл после выдерживания при 37 С в течение 20 ч,Испытуемое вещество,1) 7-бета-(2-аминотиазол-ил)-2-мета ксии ми нов цета мидо-3-амин о-(2-гидро ксиэтил)1-пиразол ио-метил-цефем-карбоксилат, синизомер, вещество примера 4,Результаты испытания представлены втабл.1,Для терапевтического назначения целевое вещество (1) или его фармацевтическиприемлемую соль используют в виде фармацевтического препарата, который содержитуказанное вещество в качестве активногокомпонента, в смеси с фармацевтическиприемлемыми носителями, такими как органическая или неорганическая твердая илижидкая среда для лекарства, которая при35 40 45 50 55 1) Метод испытания.Антибактериальную активность цн ви 1- оо определяли с помощью метода двухкратного разбавления чашки с агаровой средой как это описано ниже.Одну полную петлю культуры, выращенной в течение ночи, каждой испытуемой линии в триптикаэа-соевом бульоне (10 жизнеспособных клеток в 1 мл) наносили на агар сердечного экстракта (Н 1-агар), содержащий отградуированные концентрации характерного испытуемого соединения. Минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) выразили в единицах мкг/мл после инкубации при 37 С в течение 20 ч.2) Испытуемое соединение.Испытуемое соединение 1): 7 /3-2-(2- .аминотиазол-ил)-2-(дифторметоксиимино)- ацетамидо)-3-3-амино-(2-гидроксиэтио)-1- пиразолио-метил-цефем-карбоксилат, синизомер.Испытуемое соединение 2); 7 ф-(2- ам инотиазол-ил)-2-метоксии мин оацетамидо)-3-4-метил-амино(2-гидроксиэтил)годна для перорального, парэйтерального иэкстериального назначения. Эти фармацевтические препараты могут быть в твердойформе, такой как таблетки, гранулы, порошок, капсулы, или в жидкой форме, такойкак раствор, суспензия, сироп, эмульсия,лими над.Если необходимо в указанные препараты могут быть включены вспомогательныесоединения, стабилизирующие агенты, увлажняющие агенты и другие добавки, такие как лактоза, лимонная кислота, винная кислота, стеариновая кислота, стеарат магния, белая земля, сахароза, кукурузный крахмал, тальк, желатин, агар, пектин, масло земляного ореха, оливковое масло, маслокакао, этиленгликоль.Дозировка вещества (1) может изменяться и, кроме того, зависеть от возраста, состояния пациента, характера заболевания и самого типа активного вещества, Вообще пациенту в сутки можно назначать дозы между 1 мг и приблизительно 4000 мг или даже больше. Для лечения заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами, можно применять средние единичные дозы приблизительно 50, 100, 250, 500, 1000, 2000 мг целевого вещества настоящего изобретения.Для подтверждения преимуществ целевых соединений способа данной заявки в сравнении с известными цефемовыми антибиотиками были проведены сравнительные испытания,101520 25 301-пира зол ио)-метил-З-цефем-карбоксилат, синизомер (соединение примера 11).Испытуемое соединение А): 7 ф -2-(2- аминотиазол-ил)-2-(дифторметоксиимино)- ацетамидо)-3-(3-амино-метил-пиразолио)- метил-З-цефем-карбоксилат, синизомер (соединение примера 67 Европейского. патента М 0223246),Испытуемое соединение Б): 7 В -2-(2- аминотиазол-ил)-2-метоксииминоацетамидо)-3-(4-метил-амино-метил-пиразолио)- метил-З-цефем-карбоксилат, синизомер (соединение. примера 89 Европейского патента М 0223246),3), Результаты испытаний представлены в табл.2.Таким образом, соединения способа данного изобретения являются перспективными для создания лекарственных средств с повышенной антимикробной активностью, Формула изобретения Способ получения цефемовых соединений формулы1, С-СОВН р" рй Нй-й000 о-ц,з в виде синизомеров, где В 1 и В 4 независимо друг от друга - сцободная или защищенная аминогруппа;В 2 - низший алкил или фторированный метил;Вз-свободный или защищенный гидрокси(низший)алкил;Вь- водород, или метил, или их аддитивные соли с кислотами, отл и ч а ю щи й с я тем, что соединение формулы 4-ЯСН-В РЪ СОО,Р где Вз, Ва и Вь имеют указанныезначения, в виде кислотно-аддитивной соли его реакционноспособного производного, подвергают взаимодействию с реакционноспособным производным кислоты формулы. в виде синизомера,где В 1 и В 2 имеют укаэанные значения,10 1787158 10 Таблица 1 аблица Минимальная ингибирующэя кон ент а ия мкг/млИспыт емое сое ине 3,1 0,0 6,его епез 84,5 оставительехред М.Моргентал ректор М,Максимишинец едакто аказ 267 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 роизводственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 и выделяют целевой продукт в свободном . виде или в виде аддитивной соли с кислотой или в целевом продукте или его аддитивной соли с кислотой, где В и/или В 4- защищенная аминогруппа, и/или Вз - защищенный 5 гидрокси(низший) алкил, удаляют защитную группу или группы с получением целевого продукта, где В 1 и/или В 4 - свободная аминогруппа и/или Вз - свободный гидрокси(низший) алкил, или его аддитивной соли С киСЛОТОЙ.Приоритет по признакам;14.09.81 при В, В 2, Вз и В 4 имеют указанные значения, В 5 - водород,28.06.88 при В 1, В 2, Вэ и В 4 имеют указанные значения, В 5 - метил.