425400

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК ПАТЕНТУ Союз Советеюа Социалистицеооа Республик(33) ШвейцарияОпубликовано 25,04,74. Бюлле осударстеенный ломнте Соаета Инннстроа ССС по делам нзобретеннйн открытий(72) Авторы изобретени Иностранцы юллер, Рольф Боссхард и Бруно фехтигХейнрих Петер 71) Заявител ОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 7-АМИНОЛОСПОРАНОВОЙ КИСЛОТЫ СПО Изобрете производны лоты (7-АЦ логической стными ана Описывае акции азид соединения 7-АЦК общучению новых орановой кисышенной бионению с извеиями.известной реер, с галоген- производных м карбоксильн а легкоотщеп в которо аязащищен ляегруппой,Х - реакционноспособное производное оксиацетильного радикала, предпочтительно, галогенацильное производное, как фтор, бром-, йод-, хлорацетил. Таким реакционноспособным производным является также оксиацетильный остаток, этерифицированный сильными органическими сульфоновыми кислотами, такими, как низшалкильными или арильными сульфоновыми кислотами, например, и-толуолсульфокислотой);К - водород, свободная или этерифицированная карбоновой или тиокарбоновой кислотой оксигруппа,подвергают взаимодействию с азидом металла, предпочтительно с азидом щелочного металла (калий, натрий). Реакция проходит при комнатной температуре. Однако возможно проведение реакции при несколько повышенной илипониженной температуре. Предпочтительной является температура 20 - 40 С. Для данной реакции можно использовать раствор итель воду или водно-органические растворы, например смесь воды и спирта, смешиваемого с водой (метанол или этанол).Полученные соединения 1, в которых Р - свободная окси- или апетоксигруппа, известгруппа может быть мой сложноэфирной ние относится к пол х 7-аминоцефалосп К), обладающих пов активностью по срав логичными соединен тся основанный на а металла, наприм ми способ получения ей формулы (1) М, - Н,С ССНР уппа, этерифииокарбоновойпы;илокси-, тиоая аминогруп где К - во ванная карб лотой, кромеМ-замещен илмеркаптоили ее внут Способ зак формулы (11 цир кидород, оксигроновой или тацетоксигрупная карбамочетвертичнренняя соль.лючается в т арба 20 ени ом, что со 2 Н 0425400 8- СЗ-%Л В- м3 60 65 ными приемами переводят в соединения с другими эфирными или тиоэфирными группами, с К-замещенной карбамоилокси-, или тиокарбамоилмеркапто-, или четвертичной аминогруппой К. При желании соединения, где К - тиоэфирная группа, переводят в соединения, в которых К в четвертичн аминогруппа, и в соответствующем случае отщепляют защитную сложноэфирную группу. В качестве последней пригодна такая, которая может отйтралъных - или слабо- щелочных условиях. Прежде всего это легко отщепляемая в условиях кислого гидролиза или алкоголиза и-метокси- или а-нитробензилокси-, бензилоксигруппа, трет-бутил, третамил, группы эфира кремния, олова.В качестве этерифицированных групп К, в которых атомы кислорода могут быть замещены серой, можно назвать в данном случае, например, замещенные атомами галогена, в частности хлором, низшие алканоилоксигруппы, как формилокси-, пропионилокси-, бутирилокси, пивалоилокси-, хлорацетокси-, а также замещенные низшими алкил-, низш-алкокси- или низш-алкилмеркапто-остазками, атомами галогена или нитрогруппами моно- или дициклические арилкарбонилокси- или тиокарбонилокси-, арилкарбонилмеркапто- или тиокарбонилмеркаптогруппы, в частности бензоилмеркаптогруппы,При карбамилоксигруппе подразумевается карбомилоксигруппа формулы - С - СО - ХН - К, где К 1 - алифатический, ароматический, аралифатический или гетероциклический остаток, незамещенный или замещенный одной или несколькими низшими алкоксигруппами или атомами галогена, неразветвленный или разветвленный низший алкил (метил, этил), однако, прежде всего Р - хлорэтил остаток, или К - тиокарбамилмеркаптогруппа формулы где К имеет указанное значение;К 2 - водород или К; или К в четвертичная аминогруппа, в которой четвертичный атом азота - часть ароматического кольца, например кольца хинолина, изохинолина или пири- дина, но особенно незамещенного или заме- щенного кольца пиридина, например, форму- лы где Кз - одна или несколько низших алкил-, низших алкоксикарбонил-, карбамил- или карбоксильных групп, или один или несколько атомов галогена.Продукты выделяют известным способом в свободном виде или в виде солей или внутренних солей. Соли соединений являются сочями металлов, прежде всего таких, которые могут применяться в терапии, т. е. щелочными или щелочноземельными металлами, как натрий, калий, аммоний, кальций, или солями с органическими основаниями, например три этиламина, К-этилпиперидина, дибензилэтилендиамина, прокаина.Если группа К носит щелочной характер,то она и карбоксигруппа могут образовывать внутренние соли.1 о .Производные цефалоспорина, применяемыев качестве исходных продуктов, могут быть получены известными способами.На тонкослойной хроматографии на пластинках из силикагеля применяли следующие 15 системы: система 52 - к-бутанол - ледянаяуксусная кислота - вода в соотношении (75:7,5:21); система 101 А - и-бутанол - пиридин в ледян уксусная кислота - вода в соотношении (42:24:4:30).20 Пример 1, 3,93 г бромацетил - 7-АЦКрастворяют в смеси 680 мл абсолютного спирта и 20 мл воды при 30 С. Раствор выдерживают при этой температуре и затем добавляют к нему нагретый до 30 С раствор 13 г ази да натрия в 50 мл воды при перемешивании.Затем раствору дают медленно остыть до комнатной температуры и прореагировать в темноте в течение 15 час. После этого раствори- тель отгоняют с холодильником при вакууме, ЗО создаваемом водоструйным насосом. Еще сырой осадок переносят в 50 мл воды и 200 мл уксусного эфира, встряхивают и разделяют фазы. Водная фаза наслаивается 200 мл уксусного эфира и тотчас же посредством З 5 концентрированной соляной кислоты устанавливается рН до 1,5, Эта операция проводится при хорошей вытяжке, так как выделяется в больших количествах азотоводородная кислота. Фазы разделяют и экстрагируют водную 40 фазу еще трижды, каждый раз 100 мл эфирауксусной кислоты.Органические фазы дважды промывают насыщенным раствором поваренной соли и высушивают сульфатом натрия. Затем их фильт руют через колонку силикагеля (10 г) и выпаривают фильтрат в вакууме досуха, Остаток растворяют в 12 мл этанола и спустя ночь кристаллизуют при - 20. 7-Азидоацетил-АЦК плавится при 132 - 133. Маточник раство ряется в небольшом количестве метанола ипереводится посредством 3 м метанольного натрий-Х-этилгексаната в натриевую соль, которая через некоторое время также выпадает в кристаллической форме.55 Нд =+1291 (с=1 в воде в виде солинатрия); Р 52=0,27; Я 101 А=0,45. Натриевая соль в УФ-спектре (в воде) имеет максимум при 1=260 ммкм (в=9000).5,44 г натриевой соли азидоацетил-АЦК растворяют с 3,02 г роданида калия в15 мл воды. Затем вносят 3,0 мл пиридина и добавлением 0,26 мл 85-ного раствора фосфорной кислоты рН раствора устанавливают равным 6,4. Смесь нагревают в течение б час при550 С, затем раствор шестикратно экстрагируют каждый раз 75 мл раствора амберлита 1.А = 1 - а цетата в метил изобутилкетоне, один раз 75 мл метилизобутилкетоном и дважды по 75 мл эфиром уксусной кислоты. (Раствор жидкого монообменника готовят, применяя смесь из 200 мл амберлита 1.А=1, 24 мл ледяной кислоты и 600 мл метилизобутилкетона, затем в течение получаса размешивают с 160 мл воды, от которой после выстаивания отделяюг органическую фазу, которую и используют). Водный раствор прибавляют к 1 л спирта. Затем выдерживают на водяной бане в течение 2 час, и отделяют от хлопьевидного осадка фильтрацией. Фильтрат упаривают в вакууме, еще сырой осадок растворяют в 60 мл воды и фильтруют через колонку, которая содержит снизу вверх 10 мл ЯерЬаг 1 ех СМ С - 25 (Н+-форма), 40 мл А 1 ох, 10 мл Еео Сагс 1 226 (Н+-форма), 40 мл Аох, 10 мл Роех) (ацетатная форма) и 10 мл Яер)тас 1 ех СМ С(Н+-форма). Колонку промывают 200 мл воды, и объединенный элюат досуха выпаривают в вакууме. Осадок дигерируют 10 мл абсолютного спирта и в результате получают чистую 3- (дезацетоксиметил) -3-пиридинометил- (азидоацетиламино) - цефалоспорановую кислоту (дигидраг).1 сс =36-(-1 (с=0,77 в воде).Рг 52=0,02, Рг 101 А=0,2,УФ-спектр (в воде) имеет максимум при Х=258 ммкм. П р и м е р 2. 4,53 г натриевой соли -азидоацетиламиноцефалоспорановой кислоты растворяют в 300 мл воды, нагревают до 37 и рН устанавливают посредством добавления 2,4 мл 0,1 н. гидроокиси натрия. Затем добавляют во взвешенном состоянии 120 мл ацетиластеразы приблизительно в 4 мл воды и нейтрализуют непрерывно образующуюся уксусную кислоту 0,1 н. раствором гидроокиси натрия (рН до 7,3; 37 С), Через 4 час 45 мин реакция заканчивается, Устанавливают рН до 6,5, раствор фильтруют через стеклянный фильтр 64 и подвергают лиофильной сушке. В результате получают 5,34 г желтоватой смолы натриевой соли 7-азидоацетиламино-О-дезацетилцефалоспорановой кислоты.4,47 г этого сырого продукта растворяют непосредственно в смеси 50 мл абсолютированного диметилформамида и 14,0 мл триэтиламина, смешивают с 8,4 мл Р-хлорэтилизоцианата и перемешивают при комнатной температуре в течение получаса. Затем удаляют растворитель в высоком вакууме и растворяют смолообразный остаток трижды каждый раз с 250 мл абсолютного эфира. Остаток, нерастворимый в эфире, переносят в 125 мл 10/-ного фосфатного буфера с рН 6,7, и взбалтывают с 750 мл уксусного эфира. После отделения фаз верхнюю фазу отбрасывают, а нижнюю снова взбалтывают с 750 мл уксусного эфира. Путем добавления 45 мл 2 н. соляной кислоты величину рН устанавлн 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 ваюганной в водной фазе 2,8. После сильного и гряивания отделяют фазу и водную фазу после этого насыщают поваренной солью и еще раз дважды дополнительно экстрагируют каждый раз 500 мл уксусного эфира. Органическую фазу дважды - каждый раз по 75 мл - промывают насыщенным раствором поваренной соли, высушивают сульфатом натрия и упаривают досуа в вакууме. Получаемую смолу переносят в смесь ацетона и хлороформа (5:95) и подвергают хроматографированию на колонке (диаметр 3 см, высота 25 см) с 85 г силикагеля с увеличивающейся частью ацетона в смеси с хлороформом. Продукт элюируют ацетоном 20 - 35 об, /о. Легко окрашенный в желтый цвет элюат объединяют и упаривают в вакууме досуха. Остаток растворяют в 6 мл метанола, добавляют 1,35 мл 3 М метанольного раствора натрия- а-этилгексанона, разбавляют 10 мл ацетона и сгущают в вакууме медленно до появления мути. После этого заражают кристаллом (или натирают шпателем) и после многочасового стояния ири - 10 образуются бесцветные кристалльь Отфильтрогывают на путче, промывают ацетоном, высушивают в высоком вакууме и получают чистую натриевую соль О-дезацетил-О - (Р-хлорэтилкарбамил) -7-азидоацетиламино-цефалоспорановой кислоты, ," Ф.спектр имеет ъ 1 аксимум так=261 ммкм (а=9350), Оптическое вращение 1 сс =- = + 114+.1 (с=0,75 в воде), Тонкослойная роматограмма насиликагеле: Лу 101 А=0,62; Р в системе уксусный эфир - пиридин - уксусная кислота - вода в соотношениях 62:21: :б:11 равно 0,39.П р и м е р 3. 9,06 г натриевой соли 7-азидоацстиламиноцефалоспорановой кислоты расгьоряют в 250 мл воды и ири 37 переводят посредством 240 мг ацетилэстеразы по способу, описанному в примере 2, в натриевую соль 7-азидоацетиламино-О-дезацетил - цефалосиорановой кислоты (10,47 г).8,79 г этого сырого продукта суспендируют вОО мл абсолютного диметилформамида и смешивают с 0,15 мл три-и-бутилстаннумоксил (ВцзЯп)О. Затем в течение 15 мин прикаиывают раствор 5,2 мл метилизоцианата в 45 мл диметилформамида и затем перемешивают еще в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат упаривают досуха в высоком вакууме. Смолообразный остаток трижды перетирают каждый раз в 500 мл абсолютного эфира (часть, растворимая в эфире, отделяется и отбрасывается), а затем переносится в 250 мл 10/о-фосфатного буфера с рН 6,7, Последовательно экстрагируют 1,5 и 0,5 л уксусного эфира, Органическая фаза дважды экстрагируется каждый раз 100 мл буфером рН 6,7 и затем отбрасывается. Водная фаза собирается, переливается в 1,5 л уксусного эфира, затем путем добавления 2 н. соляной кислоты и перетряхивания рН устанавливается до 2,4, и фаза отделяется. После насыщения поваренной солью вод425400 НсС - НХ СО 7-амино- формулы НгВ Составитель С. Полякова Техред Л. Акимова орректор Б. Ау жарагетти ае Подписное Тираж 506Совета Министров СССРоз крьтийаб., д. 415 Изд, М 781дарственного комитета о делам изобретений и осква, Ж.35, Раушская Заказ 2466 г 16Ц 1-1 ИИПИ Рос ографпя, пр. Сапунова, 2 ная фаза еще дважды экстрагирустся, каждый раз по 1 л уксусного эфира., органическая фаза последовательно промывается дважды, каждый раз по 200 мл насыщенным раствором поваренной соли, высушивается сульфатом натрия и фильтруется через колонку 1 диаметр 4,5 см) со 100 от силикагеля. Колонку промывают 500 мл свежего уксусного эфира и упаривают суммарный эфирный элюат в вакууме досуха, Получают аморфный оста ток 4,5 г, который кристаллизуется при добавлении 15 мл метанола. Сырой кристаллизат отделяют, еще раз растворяют во влажном уксусном эфире, фильтруют снова через колонку с 10 г силикагеля и переводят сухой 15 остаток элюата с помощью натрий-а-этилгексаната в метанольном растворе в кристаллическую натриевую соль, Последняя может быть перекристаллизована из метанола, если необходимо, можно удалить с помощь 1 о не большого количества животного угля (Хог 11), Таким образом получают чистую натриевую соль О-дезацетил-О-метилкарбамил- азидоацетил-амино-цефалоспорановой кислоты, которая прочно удерживает в кристаллической 25 решетке половину моля метанола.УФ-спектр имеет максимум Х,гази=260 ммкм (е=8750). Оптическое вращение аЯ = =+117+1 (с=0,88 в воде). Тонкослойная хроматограмма на силикагеле К 101 Л=0,5, З 0 Яу 52=0,3.Предмет изобретения Способ получения производных ефалоспорановой кислоты общей8Ы;НвС - ОС- НХ где К - водород или оксигруппа, этерифицированная карбоновой или тиокарбоновой кислотой, кроме ацетоксигруппы,М - замещенная карбамилоксигруппа, тиокарбамилмеркаптогруппа, или четвертичная аминогруппа,или ее внутренней соли, отличающийся тем, что соединение формулы в которой карбоксильная группа может быть защищена легкоотщепляемой сложно- эфирной группой;Х - реакционноспособное производное оксиацетильного остатка;Р - водород или свободная или этерифицированная карбоновой или тиокарбоновой кислотой оксигруппа,подвергают взаимодействию с азидом металла, например с азидом щелочного металла, и полученные соединения, в которых Р - свободная окси- или ацетоксигруппа, известными приемами переводят в соединения, которые содержат другие эфирные или тиоэфирные группы, или 1 х 1-замещенную карбамилоксигруппу, или тиокарбамилмеркаптогруппу, или четвертичную аминогруппу К, и, если желательно, переводят соединения с тиоэфирной группой К в соединения с четвертичной аминогруппой К и в соответствующем случае отщепляют защитную сложноэфирную группу, с последующим выделением продуктов известным способом в свободном виде или в виде соли или внутренней соли.