Способ определения количества -каротина в белоксодержащих продуктах

(21) 4687784/ (22) 03.05.89 (46) 30.04.92. (71) Краснода тут юл. % 16 кий политехнический инс окрашенныи гексановыи фильтр с безводным Иа 2 мерную колбу на 100 мл, ге кса н ам и о и редел я ют. спектрофотометре.Содержание ф -кароти ляют по формуле экстракт через 504 переносят в оводят до меткипоглощение на мгlг) опреде а(мг) в 1 мг деленное по где С - количество лизируемого раств дуировочному графЧ - объем ана каротиора,оприку;лизиру а- ра го тво щества, г. дуировочногонавеска троение ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(72) С, П, Кудинова ва и И.С.Кунщико (53) 557.161.11.01 (56) Ермаков А.И, ского исследован хозиздат, 1952, с. (54) СПОСОБ ОП ВА Р -КАРОТИНА П Р ОДУ КТАХ (57) Изобретение содержания р"-ка Р.В.Казарян, Е,Б.Ремизова(088.8)и др. Методы биохимичеия растений. М. - Л Сель.РЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВ БЕЛОКСОДЕРЖАЩИХ относится к определению ротина в продуктах, содерИзобретение относится к определению содержания 3 -каротина в пищевых продуктах, содержащих белок.Цель изобретения - сокращение времени определения и упрощение анализа,Для этого пробу обрабатывают полярным растворителем при соотношении объема полярного растворителя и массы пробы . (5 - 7):1. При механическом воздействии экстракт переносят в делительную воронку, осадок декантируют и экстрагируют неполярным растворителем при соотношении масс осадок: экстрагент 1:(5 - 15) 2-4 раза.Экстракт собирают в делительную воронку, добавляют воду в соотношении вода; объединенный экстракт 1;(2 - 6), встряхивают с целью полной экстракции полярного растворителя из гексанового экстракта. Нижний водно-спиртовой слой удаляют, а жащих белок. Цель изобретения - сокращение времени определения и упрощение анализа. Пробу материала обрабатывают полярным растворителем при механическом воздействии, экстракт переносят в делительную воронку, осадок декантируют и экстрагируют неполярным растворителем. К полученному объединенному экстракту добавляют воду, встряхивают для полной экстракции полярного растворителя из гексанового экстракта. Окрашенный гексановый экстракт подвергают спектрофотометрированию, 1 з.п. ф-лы, 1 табл,Навеску около 0,02 г кристаллов Р -каротина, взвешенных с погрешностью не более 0,0002 г, тщательно переносят в мерную колбу на 100 см, предварительно заползненную на 1/3 гексаном, Следы каротина со стенок воронки и колбы смывают небольшими порциями по 5 см гексана. Объем расзтвора в мерной колбе доводят до метки гексаном и тщательно перемешивают (раствор А). Из колбы отбирают пипеткой соответственно 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2; 1,4; 1,6;1,8; 2,0 мл раствора А и доводят до метки гексаном, Определяют оптическую плотность полученных стандартных растворов на спектрофотометре при 451 нм. На основании полученных данных строят график зависимости оптической плотности стандартных растворов от концентрации в них Р -каротина, По градуировочному графику определяют величину С.П р и м е р 1, Навеску плавленого сыра переносят в ступку и обрабатывают этанолом в соотношении 1:5, подвергают механической обработке, экстракт сливают в делительную воронку, осадок в ступке шесть раз экстрагируют гексаном в соотношении 1:5, Экстракт переносят в делительную воронку, добавляют воду в соотношении вода: объединенный экстракт 1;6, встряхивают, нижний водно-спиртовой слой удаляют. Гексановый экстракт через фильтр с безводным Ма 2 ЯОа переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят до метки гекса ном.Поглощение раствора определяют на спектрофотометре Сф - 26 М на длине волны 451 нм. В качестве контрольного раствора используют гексан.Содержание 3 -каротина (мг/г) определяют по формулеХ -гйгде С - количество каротина (мг) в 1 мл анализируемого раствора, определенное по градуировочному графику;Ч - объем анализируемого раствора, мл; в - навеска вещества, г.П р и м е р 2. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают при соотношении его объема и массы пробы 7,5;1, четыре раза экстрагируют гексаном в соотношении 7,5:1, добавляют воду в соотношении 7,5;1.П р и м е р 3. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 10;1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 15:1, добавляют водув соотношении 10:1.П р и м е р 4. Осуществляют аналогичнопримеру 1, но этанолом обрабатывают в со 5 отношении 2,5:1, шесть раз экстрагируютгексаном в соотношении 30:1, добавляютводу в соотношении 2,5:1.В связи с тем, что не происходит полного связывания влаги в образце, количество10 гексана для экстракции увеличиваетсявдвое.П р и м е р 5. Осуществляют аналогичнопримеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 10;1, добавляют воду в соотно 15 шении 5:1, Такое количество гексана наэкстракцию оказалось избыточным, последняя порция гексана не была окрашена.П р и м е р 6. Осуществляют аналогичнопримеру 1, но этанолом обрабатывают в со 20 отношении 12,5:1, три раза экстрагируютгексаном в соотношении 10:1, добавляютводу в соотношении 12,5:1,П р и м е р 7. Осуществляют аналогичнопримеру 1, но этанолом обрабатывают в со 25 отношении 5:1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 5:1, добавляют воду всоотношении 5:1,Произошло неполное извлечение Р -каротина, так как такого количества гексана30 недостаточно для полного извлечения.П р и м е р 8, Осуществляют аналогичнопримеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 5:1, один раз экстрагируют гек 35 саном в соотношении 30:1, добавляют водув соотношении 5:1.При этом происходит неполное извлечение.П р и м е р 9. Осуществляют аналогично40 примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 7,5,1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 20:1, добавляют водув соотношении 7,5:1.В таблице приведены результаты опре 45 деления содержания Р -каротина, стандартное отклонение и доверительныйинтервал, полученные в опытах по примерам 1,2,3,6 и 9.П р и м е р 10. Осуществляют аналогич 50 но примеру 1, но этанолом обрабатывают всоотношении 7,5;1, два раза экстрагируютгексаном в соотношении 2,5;1, При этомпроисходит неполное извлечение Р-каротина.55 Предлагаемый способ определения Р-каротина обеспечивает по сравнению с известным сокращение расхода растворителей, уменьшение объемов воды напромывку, а также уменьшение безвозврат1730578 Известный способ Предлагаемый способ Образцы с содержаниенкаротина, мг/г Доверительныеграницы Содержание Относительное -каротина стандартное мг/г отклонение,Доверительныеграницы Содержание Относительное19-каротина стандартноемг/г отклонение,Ф Опыт 1+ 5,63 10 о,о 48 0,070 0,065 ных потерь растворителя. Все это улучшает условия труда.Формула изобретения1. Способ определения количества ф -каротина в белоксодержащих продуктах, 5 предусматривающий экстракцию растворителем 3-каротина из пробы и измерение показателя, коррелирующего с количеством р-каротина в исследуемой пробе, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью сокращения 10 времени и упрощения, перед экстракцией пробу обрабатывают полярным растворителем при соотношении объема последнего и о,о 17 0,021 о,а 18 0,023 о,ога о,о 44 о,о 47 0,054 0,056 о,о 48 0,068 0,064 0,062 0,072 0,075 0,017 0,021 О,О 18 0023 0,020 о,о 47 0045 0,051 0,046 0,053 о,о 71 о,о 64 0,068 о,о 7 г 0,075 а,о 46 0,049 0,044 о,о 53 0,051 о,а 74 0,068 о,обб 0,069 0072 массы пробы (5 - 7):1, полученный осадок декантируют и экстрагируют, причем в качестве экстрагента используют неполярный растворитель при соотношении масс осадок : экстрагент 1:(5-15), при этом обработку неполярным растворителем осуществляют 2 - 4 раза с последующим объединением полученных экстрактов и промывают их водой при соотношении вода; объединенный экстракт 1:(2-6),2. Способ по п.1, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что в качестве полярного растворителя используют этиловый спирт,о,о 19 0,017 0,025 0,021 0,019 0,046 0,052 0,051 0,048 0,047 а,об 7 0,064 0,075 о,о 81 о,о 84 а,о 18 0,023 о,огг 0,024 0,026 О,О 4 Е 0,052 0,046 0,044 0054 О, 067. о,о 64 0,075 о,о 81 о,о 84 0,044 0,049 о,ово 0,052 0,051 0,068 0,068 0,072 0,075 0,0711730578 Продолжение таблицы Образины с содержаниемкаротина мг/г Известный способ Предлагаемый способ Содержание Относительное 3-каротина стандартное мг/г отклонение,Содержание13-каротинамг/г Ловерительныеграницы Роверительныеграницы Относительное стандартное отклонение,Опыт 6-Ъ 0048 15,6310 0,065 0,07 40 45 50 Редактор М.Петрова Заказ 1510 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 0,024 0,017 0,019 0,021 0,016 0,047 0,051 0,054 0,046 0,045 0,076 0,068 0,065 0,067 0072 О, 019 0,024 0,018 0,022 0,021 0,049 0,046 0,051 0,053 0,047 0,074 0,068 0,068 0,069 0,072 0,022 0,018 0,021 О, 018 0,019 0,043 0048 0,044 0051 0,054 0,065 0,070 0,072 0,066 0,074 О, 021 О, 018 0,022 0,020 0019 0,052 0,051 0,050 0,049 0,046 0,068 0,070 0,075 0,072 0,070 Составитель Н,АрцыбашеваТехред М,Моргентал Корректор З,Лончакова