Патенты с меткой «сайт-специфической»

Номер патента: 1120019

Опубликовано: 23.10.1984

Авторы: Дебов, Карташова, Никольская-Санович, Сучков, Упорова

МПК: C12N 15/00

Метки: сайт-специфической, эндонуклеазы

...интерферирующих ферментов - неспецифических эндо- и экзонуклеаз. Изоэлектрофокусирование проводится в градиенте плотности,глицерина,.что позволяет опустить обычнуюпри выделении рестриктаз заключительную 19 4стадию стабилизирующего диализа с сохранением активности рестриктазы ЕсоВ в течение года.Целью изобретения является повышение чистоты зцдоцуклеазы ЕсоВ 1,Цель достигается тем, что согласно способу получения сайт-специфической эндонуклеазы ЕсоВ 1, включающему культивирование штамма Е.СоВ У 13, разрушение клеток, очистку фермента, очистку фсрмецта ведут путем хроматографии субстрата на голубой сефарозе с последующим изоэлектрофокусированием при рН 3,510 в градиенте плотности глицерина О, - 60% и отбором фракций прир 1 7,7-8,0.П р и м...

Номер патента: 1040794

Опубликовано: 30.05.1985

Авторы: Золотова, Калинин, Лапаева, Лунин, Тихоненко

МПК: C12N 15/00, C12N 9/22

Метки: 4994-продуцент, сайт-специфической, штамм, эндонуклеазы

...(картофельно- глицериновый агар) . Колонии серого цвета, блестящие, с гладкими краями, через 24 ч достигают 1,0 мм в диа метре. Гемолиз не выявлен.Среда КУА (казеиново-угольный агар), Колонии серовато-креиового , цвета, вязкой консистенции, с гладкими краяии, через 24 ч достигают 50 1,0 им в диаметре, Пигмент не выявлен.Пептонный агар "Мясо". Колонии кремового цвета, вязкой консистенции, через 24 ч достигают 1,5-2,0 мм в диаметре. 55Жидкая питательная среда типа Коен-Уилер. Аэробные условия выращивания, Растет при покачивании, Среда 794 гне окрашивается. Микробная взвесь серовато-белого цвета.Физиолого-биохимические признаки. Усваивает .органические соединения. Оптимальная температура роста 33-36 С. В качестве источников азота,...

Номер патента: 1294824

Опубликовано: 07.03.1987

Авторы: Крамаров, Прохорова, Смольянинов

МПК: C12N 15/00

Метки: конструирования, плазмида, продуцент, рекомбинантная, сайт-специфической, штамм, эндонуклеазы

...роторе 50,2 Тх. Зону, соответствующую сверхспиральной ДНК, отбирали, бромистый.этидий экстрагировалиизопропанолом, плазмидную ДНК осаждали этанолом, осадок растворяли в0,5 М ИаС 1 и дополнительно очищалиДНК-хроматографией на колонке с Биогелем А, Фракции, содержащиеДНК, объединяли, ДНК осаждали добавлением 2 объемов этанола, осадок отделяли центрифугированием, растворяли в НО и в таком виде использовалив дальнейшем. ДНК Р. стц 1 яаг 3.з выделяли после лизиса клеток лизоцимом,. как описано вьппе, с последующей фенольной деротеинизацией. После обработки фенолом водную фазу, содержащую ДНК, диализовали против 0,01 Инатрий-цитратного буфера (рН 7,5)инкубировали 5 ч при 25 С 50 мкгпанкреатической РНК-азы, затем вновьобрабатывали равным...

Номер патента: 1306127

Опубликовано: 30.01.1988

Авторы: Крамаров, Мочалов, Смольянинов

МПК: C12N 9/00

Метки: выделения, сайт-специфической, эндонуклеазы

...дана в таблице. Изобретение относится к областибиотехнологии, в частности к получению сайт-специфических зндонуклеаз,предназначенных для создания реком 5бинантных молекул ДНК, анализа первичной структуры ДНК, создания банков генов.Целью изобретения является увеличение выхода сайт-специфической эндонуклеазы С 1 а, 1 и повышение степениочистки ее от примесей,Способ осуществляют следующим образом.Приготовление носителя с иммобилизованным цибакроновым синим УЗСА.20 мл сефарозы С 1 4 В суспендируют в30 мл НО, добавляют 110 мг красителя УЗЛА, затем раствор 4 М 11 аСХ доконечной концентрации 0,4 М, объемпри этом доводят до 45 мл, После20 мин механического перемешиваниясмеси добавляют 0,2 мл 5 М ИаОН иинкубируют при 62 С. Проверяют количество...

Номер патента: 1693041

Опубликовано: 23.11.1991

Авторы: Бунина, Смольянинов

МПК: C12N 1/20, C12N 9/22

Метки: luтеus, micrococcus, в-2836, вкпм, культивирования, питательная, продуцента, сайт-специфической, среда, эндонуклеазы

...максимальным концентрациям компонентов. Условия культивирования, как в примере 1. На фиг, 1 рост представлен кривой 2. Как видно по кривым 1 и 2 минимальные и максимальные значения содержания компонентов среды показывают идентичные результаты.П р и м е р 3, Среда с концентрацией компонейтов меньше предлагаемой, мас.ф. гидролизат казеина 1,5; дрожжевой экстракт 2,5; хлористый натрий 0,1; дистиллированная вода остальное, Условия культивирования, как в примере 1. На фиг.1 рост клеток представлен кривой 3. Как видно по характеру кривой 3, в сравнении с кривыми 1 и 2, снижение концентраций компонентов приводит к уменьшению плотности клеток в конце роста.П р и м е р 4. Среда с концентрацией компонентов выше предлагаемой, мас.:...