Способ получения аргинин-содержащегополипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот

И Е Союз Советских Социалистицеских Республик(61) Зависимое от (22) Заявлено 21,1 вт. свидетельства71 (21) 1727542 51) М. Кл. С 07 с 10352 исоединением зая осударотвеннвй комитеСовета Министров СССРпо делам изобретенийи открытий) УДК 547,964,4(088,8 4. Бюллетень ЛЪ 8 ликовано 28 та опубликования опи ния 12.08.74(71) Заявител жикскои СС нститут химии 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АРГИНИН-СОДЕРЖАЩЕ ПОЛИПЕПТИДА С ПОВТОРЯЮЩЕЙСЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬЮ АМИНОКИСЛОТаланил.- (ХО-нп рпродукт реакциинитро-группы. Моэтом полипептида5 Применив известполучают новый фгинин-содержащпарг) . Кроме тогопредложенном ре10 анидированпя, пруменьшено число с о) -арпнпна. Полимерныйгидрируют для удаления з. вес образуюцегося при равен 10000.ный способ полимерпзации, изпологиески активный арполипептид (глп.-ала. - в Отличие От известного 11 енин исключен процесс гуотекающнй неполностью и тадий. Изобретение относится к получению поли- пептидов с повторяющейся последовательностью аминокислот и может быть использовано в медицине.Известен способ получения аргинин-содержащего полипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот, заключающийся в том, что бромгидрат М-оксисукцинимндного эфира 1 -лейцил-Л 1 п-трифторацетил.-орнптцл.-лейцина полимеризуют в диметилформамиде в присутствии триэтиламина, из полимера удаляют трифторацетильнуо группу с помощью пиперидина и освободившуюся ам иногруп ну гуанидируют, получая названный выше трипептид. При этом гуанидирование протекает только на 25%.Предлагаемый в изобретении спосоо получения нового аргинин-содержащего полипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот (гли.-ала.-арг) заключается в том, что бромгидрат ХО-нитроаргинин-содержащего трипептида, например, 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил.-аланил- (ХО-нитро) -1.-аргинина, полимеризуют в димстилформамиде в присутствии 2,5 эквивалента триэтиламина с последующим удалением Хо нитро-группы гидр огенолизом и выделением целевого продукта известными приемами.В качестве мономера используют бромгидрат 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил.Пример 1.гидр а та 2,4,5-тр 5 цил.-аланпл.- К 0,5 г картетрагидрофуран и охлаждении д циклогексилкарб О ют 20 мин, прилрата 2,4,5-трихло аргинина в ТГФционную массу п и оставляют на 5 туре. Избытокразрушают ледя воритель отгон этилацетате и пр НС 1, НеО и 5,о- О слой сушат над Получение мономера - бромхлорфенилового эфира гли(п-нитро)-аргинина.бобензокси-глицил-аланила в е (ТГФ) при перемешиванип о - 5 С добавляют 0,7 г диодиимпда в ТГФ, перемеппваивают раствор 1,5 г бромгидрфенилового эфира ХО-цитрон 0,8 мл триэтпламина. Реакеремешивают 4 час прп - 5 С ночь при комнатной темперадициклогексилкарбодии мида ной уксусной кислотой, растяют, остаток растворяют в омывают последовательно 2 и. ным ХаНСО,. Органический Мд 50. растворптель отгоня417418 Предмет изобретения Составитель А, Васильев Техред Л. БогдановаКорректор А. Степанова Редактор Г, Тимофеева Заказ 1707/6 Изд.1330 Тираж 506 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 ют, остаток кристаллизуют из смеси этилацетат-петролейный эфир.Выход карбобензокси-трипептида 0,85 г (66%); т. пл. 89 - 91 С; Кг 0,9 и 0,81 в системах Н 20 - СН,СООН - и-С 1 НОН (30: 10:100) и вторичный СНзОН - 3% ИНаОН (100: 44).Растворяют 0,85 г 2,4,5-трихлорфенилового эфира карбобензокси-глицил.-аланил.- (Ю- нитро)-аргинина в 3 мл ледяной уксусной кислоты и прибавляют 2 мл 35%-ной НВг/ /СН,СООН. Реакционную смесь встряхивают в течение 20 мин при 20 С и приливают абсолютный эфир. Выпавший осадок промывают эфиром и сушат в вакууме. Выход 0,5 г (63%); Ят 0,28 и 0,54.П р и м е р 2. Получение полипептида глицил.-аланил-Е-аргинин.Растворяют 0,5 г бромгидрата 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил.-аланил.- (Ю-нитро) -аргинина в 0,4 г диметилформамида (ДМФА) при нагревании не выше 50 С. После охлаждения раствора до 20 С прибавляют 0,2 г триэтиламина (2,5 эвк). Полимеризацию проводят в течение 5 суток при комнатной температуре в запаянной ампуле. Полученный продукт обрабатывают абсолютным метанолом и выпавший осадок промывают декантацией метанолом и эфиром,Поли - (глицил. - аланил.- (Р-нитро-аргинин) подвергают каталитическому гидрированию на Рс 1 в присутствии эквивалентного количества НС 1 в ДМФА в течение 15 час, Раствор фильтруют, растворитель отгоняют в вакууме, а остаток обрабатывают абсолютным эфиром. Мол. вес образующегося при этом 10 полипептида равен 10 000. 1. Способ получения аргинин-содержащего 15 полипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что бромгидрат Р-нитроаргинин-содержащего полипептида полимеризуют в диметилформамиде в присутствии 2,5 эквивалента 20 триэтиламина с последующим удалением К 8- нитро-группы гидрогенолизом и выделением целевого продукта известными приемами.2, Способ получения по п. 1, о тл ич а ющ и й с я тем, что как мономер используют 25 бромгидрат 2,4,5-трихлорфенилового эфираглицил.-аланил.- (Ю-нитро) -аргинина.