Способ получения -незамещенных карбамоилоксиметилцефал оспоринов

(22) Заявлен 27,01.7 24.08.7 29.11.7 тания 15.01.75. 2) Приорит осударственныи комитет авета Министров СССР(33) Великоб Опубликован по делам изобретений и открытий547,86.07 (088.8 Бюллетень2исания 05.05.75 Дата опубликования Авторыизобретен Иностранцы ант Кристенсен, Джо А(Индия) Иностранная фирма Мерк энд Ко, ИнкКерн тон 1) Заявител 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ У-НЕЗАМЕЩЕННЫХ АРБАМОИЛОКСИМЕТИЛЦЕФАЛОСПОРИ НОВ Но СООН(61) Зависимый от патент 1,Изобретение относится к способу получения новых производных цефалоспорина, которые могут найти применение в фармацевтической промышленности.Известен способ получения К-замещенных карбамоилоксиметилцефалоспоринов взаимодействием, например, 3-оксиметилцефалоспорина с соответствующим изоцианатом.Однако получить известным способом Х-незамещенные карбамоилоксиметилцефалоспорины не удавалось, поскольку в условиях известной реакции происходит лактонизация цефалоспоранового соединения,Предлагаемый способ получения 1 Ч-незамещенных кар 6 амоилоксиметилцефалоспоринов заключается в том, что цефалоспорин общей формулы де К, - атом водорода, замешенная сул тильная группа, такая как фенилсульфони этилсульфонил, бензилсульфонил, 2,5-диметилфенилсульфонил, 4-хлорфенилсульфонил, 4-метоксифенилсульфонил, или ацильная группа общей формулы ЕзКСНСО, в которой Язв атом водорода, галоид, амино-, гуанидино-, фосфоно-, окси-, тетразолил-, карбокси-, сульфо-, сульфаминогруппа; Р - фенил, замещенный фенил, незамещенпый или замещенный моноциклический пяти-, шестичленный гетерил, содержащиц один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, содержащей азот, кислород, серу, нсзамещенный или замещенный гетерилтио-, фенилтио- или цианогруппу, причем указанными заместителями могут быть: галоид, карбоксиметил, гуанидино, гуанидинометил, карбоксамидометил, аминометил, нитрогруппа, метоксил, метил;К, - атом водорода, мстоксил, или соответ. ствующее Л - соединение, или его соль, или его сложный эфир, подвергают взаимодействию с таким галоидизоцианатом, как бромсульфонилизоцианат или хлорсульфонилизоцианат, с последующим гидролизом полученного при этом продукта.Для осуществления этой реакции можно использовать как бромсульфонилизоцианат, так и хлорсульфонплизоцианат, но лучше использовать хлорсульфонилизоцианат, поскольку он более доступен. Реакцию проводят при непосредственном контактировании спирта с галоидсульфонилизоцианатом, как правило, в полярном органическом растворителе, таком как ацетонитрил или демитилсульфоксил и гидролизом полученного продукта реакции.Для получения конечного продукта с максимальным выходом реакцию ведут с избытком галоидсульфонилизоцианата обычно при 0 - 100 С. Выбор условия для этой реакции в определенной мере зависит от выбора спирта, применяемого в реакции. Гидролиз продукта реакции осуществляется предпочтительно в водной кислой среде.Если реагирующий цефалоспорин содержит заместители, которые реагируют с изоцианатом, например окси-, или аминогруппы, то эти заместители блокируются или защищаются такими группами, как трифенилметил, трет.бутилкарбонил, К-трихлорэтоксикарбонил и подобные им, и затем удаляются после введения карбамоилоксигруппы. Например, 7-тритиламиноцефалоспорановая кислота контактирует непосредственно с цитрусовой ацетилэстеразой, давая 7-тритиламинодезацетилцефалоспорановую кислоту, которая после реакции с галоидсульфонилизоцианатом и гидролиза полученного в результате продукта дает соединение 3-карбамоилоксиметила. Удаление защитной тритильной группы методами, известными в практике, дает 3-карбамоилоксиметил-амино-цефем-карбоновую кислоту, которую можно ацилировать известными методами, и получать 3-карбамоилоксиметил-ациламидо-цефем-карбоновые кислоты. Пример 1. 3-карбамоилоксиметил-(2- тиенилацетамидо) -3-цефем-карбоновая кислота.К 0,2 г 3-оксиметил-(2-тиенилацетамидо)- 3-цефем-карбоксилата кальция, суспендированного в 5 мл ацетонитрила, охлажденного до 0 С и содержащегося в атмосфере азота, добавляют 0,15 мл хлорсульфонилизоцианата. Реакционную смесь перемешивают в течение 70 мин и затем упаривают в вакууме досуха. Полученный в результате остаток экстрагируют 10 мл этиладетата и 10 мл 0,1 н. фосфатного буфера, затем устанавливают рН водного слоя около 1,6 и смесь перемешивают в течение 2,5 ч при комнатной температуре, Затем рН доводят до -8 с помощью раствора трикальциевого сульфата и водную фазу отделяют. Органическую фазу экстрагируют 10 мл фосфатного буфера при рН 8. рН объединенной водной фазы доводят до 2,1 с помощью соляной кислоты и дважды экстрагируют этилацетатом. Этилацетатные вытяжки сушат над сульфатом натрия и упаривают в вакууме, при этом получают 0,055 г остатка. Этот остаток промывают эфиром и получают 3-карбамоилоксиметил- (2 - тиенилацетамидо) -3- цефем-карбоновую кислоту в виде бледно- желтого твердого вещества. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3-оксиметил-(2-тиенилацетамидо) - 3 - цефем-карбоксилат кальция, используемый в качестве исходного материала, готовят из 7-(2-тиенилацетамидо)-цефалоспораната натрия путем выдерживания в термостате с цитрусовой ацетилэстеразой по способам, хорошо известным в практике.П р и м е р 2, А. 3-Оксиметил- (трет.бутоксикарбонил)-амино-цефем 4-карбоновая кислота.7-Аминоцефалоспорановая кислота реагирует с грет.бутоксикарбонилазидом, давая М- (трет.бутоксикарбонил) - производное в соответствии с известными методами. Затем это производное контактирует непосредственно с цитрусовой ацетилэстеразой в водном фосфатном буфере при рН 6,5 - 7 в течение 15 ч, после чего из полученной смеси извлекают 3-оксиметил- (трет.бутоксикарбонил)- амино-цефем-карбоновую кислоту.Б. З-Карбамоилоксиметил-(трет.бутоксикарбонил) -амино-цефем-карбоновая кислота реагирует с хлорсульфонилизоцианатом; полученный в результате реакции продукт гидролизуют и З-карбамоилоксиметил-(трет. бутоксикарбонил) -амино-цефем- карбоновую кислоту извлекают способами, описанными в примере 1.В. 3-карбамоилоксиметил-амина-цефем-карбоновая кислота,К 0,5 г З-карбоксиметил-(трет.бутоксикарбонил) -амина-цефем-карбоновой кислоты добавляют 3,5 мл анизола, 2 мл трифторуксусной кислоты и перемешивают при 0 С в течение 5 мин. Полученную в результате смесь упаривают в вакууме и получают карбамоилоксиметил- амино-цефем-карбоновую кислоту, которую затем очищают кристаллизацией из этилацетата.Пример 3. А. 7-(трет.бутоксикарбонил)- аминоцефалоспорановая кислота.27,2 г (0,1 моля) 7-аминоцефалоспорановой кислоты растворяют в 250 мл воды и рН раствора доводят до 8,7 15/О-ным раствором ед. кого натра. К этому раствору по каплям добавляют 16 г (0,11 моля) трет.бутоксикарбонилазида при быстром перемешивании в течение более 1 ч; рН раствора должно быть постоянно 0,87. О конце реакции можно судить по установлению постоянного рН 8,7. Затем рН раствора доводят фосфорной кислотой до 2 и продукт экстрагируют этилацетатом (Зр,500 мл). Этилацетатную вытяжку промывают дважды водой, сушат, упаривают и получают 7-(трет.бутоксикарбонил) -аминоцефалоспорановую кислоту.Б. 3-оксиметил- (трет.бутоксикарбониламино-цефем-карбоксилат кальция.18,5 г 7-(трет.бутоксикарбонил) -аминоцефалоспорановой кислоты растворяют в 1000 мл препарата, содержащего цитрусовую ацетилэстеразу. Температуру поддерживают при 30 С и рН 6,5 - 6,8 путем добавления 1 н. КаОН. После установления определенного рН,реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч и трижды экстрагируют по 500 мл этилацетата. Этилацетатную вытяжку промывают дважды водой и затем экстрагируют водным раствором бикарбоната кальция, концентрация которого достаточна для поддержания рН 7,5, Водную фазу сушат при температуре ниже 0 С и остаток кристаллизуют из смеси метанол-изопропанол; получают 3-оксиметил- (трет.бутоксикарбонил)-амино - 3 - цефем- карбоксилат кальция.В. З-карбомоилоксиметил-трет.бутоксикарбонил-амино-цефем-карбоновая кислота.5 г З-оксиметил-(трет.бутоксикарбонил)- амино-цефем-карбоксилата кальция суспендируют в 150 мл ацетонитрила, ох,-.ажденного до 0 С в атмосфере азот 3,75 мл хлорсульфонилизоцианата добавляют по каплям в течение не менее 15 мин, Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при 0 С и упаривают досуха при пониженном давлении. Оста ток переносят в 250 мл этилацетата и 250 мл 0,1 н. фосфатного буфера при рН 2. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Затем раствором трикалийфосфата устанавливают рН водного слоя равным 8. Смесь перемешивают и органическую фазу отделяют и промывают снова фосфатным буфером с рН 8. Объединенные водные вытяжки доводят до рН 2 и экстрагируют (ЗМ 200 мл) этилацетатом. Этилацетатную вытяжку промывают еще один раз водой, сушат над МАМБО,ь упа.ривают и получают 3-карбамоил оксиметил - 7- (трет.бутоксикарбонил) -амино-цефем-карбоновую кислоту.Г. 3-карбамоилоксиметил-амино-цефем-карбоновая кислота.1,5 г З-карбамоилоксиметил-(трет.бутоксикарбонил)-амино-цефем-карбоновой кислоты в 15 мл анизола и 25 мл трифторуксусной кислоты перемешивают при 0 С в течение 10 мин, Полученную в результате реакционную смесь упаривают при 0,1 мм рт. ст, и 30 С, Добавляют 5 мл анизола и упаривают при 0,1 мм рт, ст. и 30 С. Остаток переносят в 20 мл воды и доводят рН до 7,5 добавлением 0,1 н. раствора едкого натра. Водный раствор экстрагируют трижды по 10 мл хлористого метилена и устанавливают рН 2,5 осторожным прибавлением смолы Дауэкс 50 (Н+форма). Твердую смолу отфильтровывают и фильтрат высушивают при температуре ниже 0 С. При этом получают 3-карбамоилоксиметил-амино-цефем-карбоновую кислоту.Д. 3-карбамоилоксиметил-(Р-а-азидофенилацетил)-амино-цефем-карбоновая кислота,0,271 г 3-карбамоилоксиметил-амино-цефем-кар боновой кислоты суспендируют в 2 мл воды и 3 мл ацетона, охлажденного до 0 С при установленном добавлением триэтилдмина рН смеси 8, Затем добавляют 0,200 мл пиридина и после этого в течение более 5 мин добавляют по каплям 0,200 г Р-а-азидофенилдцетилхлорида. Реакционную смесь переме 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 шивают при 0 С в течение 20 мин, Ацетон удаляют при пониженном давлении и остаток очи- щают 10 мл фосфатного буфера с рН 8 и трижды экстрагируют по 8 мл этилацетата. рН водной фазы доводят до 2 и экстрагируют 3(15 мл этилацетата. Этилацетатную вытяжку сушат, упаривают и получают 3-карбамоилоксиметил- (Р-а-азидофенилацетил) - амино-цефем-карбоновую кислоту; после кристаллизации из смеси этилацетат: эфир получают очищенный продукт.Е. 3-карбамоилоксиметил- (Р-а-аминофенилацетил) -амино-цефем-карбоновая кислота,0,300 г 3-карбамоилоксиметил-(Р-а-азидофенилацетил) -амино-цефем-карбоновой кислоты растворяют в 10 мл метилового спирта и 2 мл НО. Добавляют 0,300 г 10/О-ного палладия на угле и смесь восстанавливают при давлении 40 фунтов Н в течение 2 ч. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают и получают 3-карбамоилоксиметил- (Р-ааминофенилацетил) -амино-цефем - 4-карбоновую кислоту. Реакцией полученной кислоты со стехиометрическим количеством основания в водном растворе и лиофильной сушкой полученного раствора получают соль щелочного металла, например натриевую или калиевую соль, или аминную.П р и м е р 4. Карбамоилоксиметил-метокси-(2-тиенилацетамидо)-3 в цефем - 4-карбоповая кислота,К суспензии 0,3 г 3-оксиметил-метокси- (2-тиенилацетамидо) -3-цефем- карбоксилата кальция в 7,5 мл ацетонитрила, охлажденного до 0 С в атмосфере азота, добавляют 0,25 мл хлорсульфонилизоцианата. Полученную реакционную смесь перемешивают в течение 1,5 ч и затем упаривают при пониженном давлении досуха. Полученный остаток переносят в 15 мл этилацетата и 10 мл 0,1 н. фосфатного буфера. рН водного слоя устанавливают равным 1,6 и смесь перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре. После установления рН 8 водным раствором трикалиевого сульфата водную фазу отделяют, Органическую фазу экстрагируют 15 мл фосфатного буфера при рН 8. Соляной кислотой рН объединенной водной фазы доводят до 2,0 и дважды экстрагируют 10 мл этилацетата. Этилацетатные вытяжки сушат над сульфатом натрия и упаривают при пониженном давлении, получая остаток, содержащий 3-карбамоилоксиметил-метоксп- (2 - тиенилацетамидо) -3-цефем-карбоновую кислоту. Таким же образом, когда 3-оксиметил-метокси- (2-фурилацетамидо) -3-цефем - 4-карбоксилат калия, 3-оксиметил-метокси- (2-тианафтен-ацетамидо) -3-цефем-карбоксилат калия, 3-оксиметил- (2-тиенил- карбоксиацетамидо)-3-цефем-карбоксилат калия и 3-оксиметил-(2-фенил-карбоксиацетамидо) - 3-цефем-карбоксилат калия реагируют с хлорсульфонилизоцианатом и получаемые реакционные продукты гидролизуются по способу,10 15 20 описанному выше, получают соответствующие соединения З-карбамоилоксиметила,Исходные соединения, используемые .в этом примере, приготовляют из соответствующих соединений 3-ацетоксиметила выдерживанием в термостате с цитрусовой ацетилэстеразой в соответствии со способами, хорошо известными в практике.Соли 7-метокси- (2-тиенилацетамидо) -цефалоспорановой кислоты, 7-метокси- (2-фурилацетамидо) -цефалоспорановой кислоты и 7-метокси-(2-тианафтен - 2 - ацетамидо) -цефалоспорановой кислоты готовят по известным способам, описанным ранее.Таким образом, 3-оксиметил-метокси- (2- тиенилацетамидо) -3-цефем-карбоксилат калия готовят следующим образом. А. Бензгидрил-аминоцефалоспоранат.К смеси 6,8 г (0,25 моля) 7-аминоцефалоспорановой кислоты в 300 мл свободного от перекиси диоксана при комнатной температуре добавляют при перемешивании 4,3 г (0,022 моля) моногидрата и-толуолсульфокислоты. Чистый раствор концентрируют в вакууме и промывают дважды диоксаном.Остаток растворяют в 300 мл диоксана при комнатной температуре, и раствор 10 г (0,05 моля) дифенилдиазомстана в 25 мл диоксана добавляют по каплям в течение 15 мин. Темно-окрашенный раствор перемешивают еще 30 мин. Затем метилового спирта (25 мл) добавляют для разложения избытка дифенилдиазометана. Смесь концентрируют в вакууме и остаток распределяют между 2 смз хлористого метилена и 200 мл воды, содержащей 10 г кислого фосфорнокислого калия (рН 8,5) . Органическую фазу промывают водой, сушат над сернокислым натрие, концентрируют в вакууме и получают масло.Масло перемешивают со 100 мл эфира в тсчение 1 ч. Полученный осадок фильтруют, промывают эфиром и сушат до постоянного веса, получая 4,6 г бензгидрил-аминоцефалоспораната. Т, пл. 126 - 128 С. Б. Бензгидрил-диазоцефалоспоранат.К перемешиваемой смеси 1,6 г нитрита натрия, 30 мл воды и 40 мл хлористого метилена при 0 С добавляют 880 мг (0,002 моля) бензгидрилового эфира, 760 мг (0,004 моля) раствора и-толуолсульфокислоты в 5 мл воды в течение нескольких минут. Смесь перемешивают при 0 С в течение 20 мин, затем органическую фазу отделяют, промывают 10 мл ледяной воды, сушат над сульфатом натрия при 0 С, фильтруют и концентрируют в вакууме при комнатной температуре, получая 900 мг бензгидрил-диазоцефалоспораната в виде стекла.В. Бензгидрил-бром-азидоцефалоспоранат.К раствору 900 мг бензгидрил 7-диазоцефалоспораната в 20 мл хлористого метила и 10 мл нитрометана при 0 - 10 С сразу добав 25 30 35 40 45 50 55 60 65 ляют четвертичную соль триэтиламина(ЕзИНИ,), и затем нитрида брома (ВгХз), далее добавляют 50 мл воды и твердый бикарбонат натрия до рН 8. Органический слой отделяют и экстрагируют 2 К 20 мл воды, сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая 900 мл бензигидрила 7-бром-азидоцефалоспораната.Приготовление раствора бромазида (ВгК,).К 8 мл хлористого метилена при 0 С сначала добавляют 2,66 г (0,04 моля) азида натрия и затем 0,65 г (0,0042 моля) брома. К полученной смеси при 0 С и перемешивании добавляют по каплям 2 мл концентрированной соляной кислоты. Смесь перемешивают при 0 С в течение 3 ч. Органический слой декантируют и водный слой экстрагируют 5 мл хлористого метилена. Объединенную органиче. скую фазу хранят при - 10 С,Приготовление (СНь) зМНХз раствора, К смеси 1,5 г азида натрия в 5 мл воды и 10 мл хлористого метилена, охлажденных до - 10 С добавляют по каплям при температуре - 10 С - 0 С 4 мл 50/,-ной серной кислоты. Органическую фазу осторожно сливают с водной пасты, и водный экстракт промывают 5 мл хлористого метилена, Объединенную органическую фазу сушат над хлористым кальцием, Декантированный раствор азотистоводородной кислоты доводят до рН 7 добавлением (С,Н)зХ и хранят при - 10 С.Г, Бензгидрил 7-метокси-азидоцефалоспоранат.К раствору 0,4 г (0,00072 моля) бромазида в 30 мл метанола добавляют 0,150 г (0,0008 моля) борфторидсерсбра (АдВР 4). Смесь перемешивают в темноте в течение 2,5 ч. Смесь концентрируют в вакууме и остаток переносят в 50 мл профильтрованного хлористого мети- лена. Фильтрат экстрагируют дважды насыщенным раствором бикарбоната натрия, дважды - водой, сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют в вакууме, получая 0,3 г (837 ю) продукта в виде кристаллов, т. пл. 145 - 148 С.Д. Бензгидрил-метокси-аминоцефалоспоранат.1,0 г бензгидрил-азидо-метоксицефалоспораната растворяют в 100 мл диоксана, добавляют 1,0 г окиси платины и смесь перемешивают при атмосферном давлении в атмосфере водорода в течение 1 ч, Затем добавляют вторую порцию окиси платины (1 г) и реакционную смесь вновь помещают в атмосферу водорода и перемешивают в течение 3 ч до тех пор, пока азид полностью не прореагирует, что о;.рсделя,".-.я с помощью инфракрасно. го анализа. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток переносят в 50 мл хлороформа и фильтруют через силикагель 9 в хлороформ в пористой стеклянной воронке10 15 20 25 зо 35 4 О 45 50 55 бО 65 емкостью 60 мл. Вещество элюируют хлороформом до тех пор, пока нс образуется 200 мл хлороформного раствора, Хлороформ удаляют при пониженном давлении и получают632 г бензгидрил-метокси -7 - аминоцефалос раната, который ацилируется без дальнейшей очистки. Е. Бензгидрил 7-метокси-(2-тиенилацетамидо) -цифалоспоранат,0,632 г бепзгидрил-метокси-аминоцефалоспораната помещают в 25 мл хлористого метилена и охлаждают до 0 С,Затем к полученной смеси добавляют по каплям 0,6 мл 2-тиенилацетилхлорида в течение 05 мин и 0,6 мл пиридипа в течение 1 мин. Реакционную смесь перемешивают при 0 С в теченис 15 мин и выливают на истолченный лед. Смесь перемешивают, орга ичсский слой отделяют и промывают 20 мл воды, 20 мл 5%-ного раствора бикарбоната натрия и еще раз 20 мл воды. Органическую фазу сушат и метиленхлорид упаривают досуха. При этом получают 1,417 г неочищенного продукта, Это вещество помещают на колонку, заполненную 60 г силикагеля, предварительно смоченного бснзолом и элюируют бензолом; отбирают 100 мл фракции с послсдующим элюированием смесью 300 мл метиленхлорид/бензол/1:1/ в видс 3 фракций и 500 мл метиленхлорида в 5 фракциях. Продукт удаляют из колонки элюированием 400 мл ,хлороформа в 4 фракциях, получая 0,592 г. Это вещество переносят в 25 мл метпленхлорида и перемешивают при компатнои температуре с раствором 0,120 г бккарбопата натрия в 20 мл воды в течение получаса, Слон отделяют и органический слой промывают водой, сушат и упарнвают досуха, получают 0,420 г бснзгидрил 7-,:стокси-(-(2-тиенилацетамидо)-цефалоспораната, который показываег одно пятно на тонкослойной хроматографической пластинке. Ж. 7-метокси- (2-тиенилацетамидо) -цефалоспораната калия,0,420 г 7-метокси-(2-тиснилацетамидо)-цефалоспоранат бензгидрила растворяют в 3,5 мл анизола и обрабатывают 10 мл трифторуксусной кислоты при комнатной температуре в течение 10 миы. Трифторуксусную кислоту и анизол удаляют при пониженном давлении и температуре не вьппе 40 С; остаток переносят в 25 мл хлороформа и обрабатывают 20 мл воды, содержащей ",120 г бикарбоната калия. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение получаса и органическую фазу отделяют и промывают е.- дой. Объединенную водную фазу промывгнот дважды метилспхлсрпдои ,здвергают лиофильной сушке, получая о,382 г 7-метоксп- (2-тиенилацетамидо)-цифалоспораната калия в виде коричневатого твердого вещества.3, 3-оксиметил-мстокси-(2-тиенилацстамидо)-3-цефем-карбоксилат калия,В результате обработки 7-метокси-(2-тиенилацстамидо)-цефалоспораната калия в водном растворе при рН 6 ацетилэстсразой, получс ной из апельсиновых корок получают 3-оксиметил-метокси- (2 - тненилацетамидо) -3-цефем-карбоновую кислоту, которую извлекают в виде ее соли калия, полученной известным способом.3-оксиметил-метокси- (2 - карбоксифенилацетамидо) -3-цефем-карбоксилат калия готовят следующим образом.Л. Бензгидрил 7- (2-карбокси-фенилацетамидо) -7-метоксицефалоспоранат,К раствору 0,5 г бензгидрил 7-амино-метоксицефалоспораната в 15 мл мстилепхлорида добавляют монобензгидрилфенилмалоилхлорид (его способ получения описан ниже) с последующим добавлением 0,5 мл пириднна. Полученную рсакционную смесь перемешивают 30 мин и добавляют 12 мл воды. Водную смесь перемешивают 5 мин и слои разделяют. Порцию метиленхлорида промывают 2,5 н. НС 1, водой, дважды водным раствором бикарбоната натрия и насыщают хлористым натрием, Затем органический слой сушат над сульфатом магния, фильтруют и упаривают при температуре до 25 С при пониженном давлении. Получают 0,695 г бензгидрил 7-(2-карбокси-фенилацетамидо) - 7 - метоксицефалоспораната, Последний хроматографируют на 50 гейтральпого силикагеля и алюируют хлороформом, Получают 400 мг продукта в виде рыжевато-коричпевой стекловидной массы,Монобспзгидрил фенилмалоилхлорид готовят следующим образом. К раствору 19,25 г фенилмалоновой кислоты в 165 мл этилацетата добавляют раствор 25 г дифенилдиазомстана в 100 мл этилацетата в течение не менес 15 мин прн 15 - 20 С. Раствор перемешивают более 10 мин и добавляют 500 мл воды и достаточное количество 5000-ного раствора гидроокиси натрия при 15 С, чтобы сделать реакционную смесь щелочной. Органический слой отделяют и дважды экстрагируют водным раствором бикарбоната натрия. Объединенные водные растворы дважды промывают этилацстатом, охлаждают, подкисляют соляной кислотой и экстрагируют еще 3 раза этилацстатом. Этилацетатные вытяжки дважды промывают водой, один раз насыщенным раствором хлористого натрия и затем сушат над сульфатом магния. Растворитель упаривают при температуре не выше 25 С при пониженном давлении до получения масла, из которого при дооавлепии 200 мл смеси эфир;петролейный эфир=1:3, кристаллизуется 20,9 г мопобензгидрила фенилмалоната с т, пл, 119,5 - 122 С., смеси 0,7 г этого моноэфира в 2,5 мл воды добавляют 2,10 мл 0,962 н, КаОН, Раствор перемешивают в геченис 3 мин, фильтруют и сушат прп температуре ниже 0 С до получсния натриевой соли моноэфира. К полученной со;и; добавляют 5 мл бензола и смесь обрабатывают при 0 С 1,5 мл хлорангидрида5 10 15 20 25 ЗО 35 40 45 50 55 60 бб щавелевой кислоты и выдерживают 10 мин при 0 С и 5 мин при 25 С. Затем смесь упаривают при температуре ниже 25 С при пониженном давлении и остаток дважды концентрируют в четыреххлористом углероде. Продукт в 5 мл четыреххлористого углерода в условиях сухой атмосферы фильтруют и концентрируют, давая монобензгидрилфенилмалоилхлорид.Б. Дикалий-(2-карбокси-фенилацетамидо)-7-метоксицефалоспоранат.0,4 г бензгидрил-(2-карбокси-фенилацетамидо)-7-метоксидефалоспорант обрабатывают при 0 С в течение 2 мин 1,2 мл анизола и 6 мл трифторуксусной кислоты. Полученный в результате реакции продукт замораживают, отгоняют при низкой температуре и глубоком вакууме, разбавля 1 от анизолом и повторно упариваютри 25 С. Остаток, содержащий свободную кислоту. переносят в 20 мл 1 М раствора бикарбоната натрия, промывают 4 раза небольшими количествами метиленхлорида, подкисляют соляной кислотой, насыщают поваренной солью иэкстрагируют 4 К 10 мл этилацетата. Экстракты промывают дважды насыщенным раствором хлористого натрия, сушат над сульфатом магния, фильтруют и упаривают при пониженном давлении. Получают 218 мг 7- (2-карбокси-фенилацетамидо) -7- метоксицефалоспорановой кислоты в виде желтого сиропа, Полученную кислоту растворяют в 5 мл воды, содержащей 79 мг бикар. боната калия и сушат при температуре замерзания. Высушенный таким образом остаток растворяют в 5 мл воды, фильтруют, и подвергают лиофильной сушке. Получают 182 мг двукалиевого 7- (2-карбокси-фенилацетамидо) -7-метоксицефалоспораната.В. Дикалий-оксиметил-метокси-(2- карбокси-фенилацетамидо) -3-цефем- карбоксилат получают по вышеуказанному пункту В, обрабатывая его ацетилэстеразой при рН 6.Таким же образом получают другие соли 3-оксиметил-метокси-ациламидо- цефем-карбоновой кислоты.Пример 5. Л. Бензгидрил-карбамоилокси-а-метоксн- (Р- амино - 5-карбоксипентанамидо) -З-цефем-карбоксилат.Льдом охлажденная суспензия 0,368 г ка- лиевой соли бензгидрил-оксиметил-а-метокси-(Р-трет,бутилокси-карбониламино- карбоксилпентанамидо)-5-цефем - 4-карбоксилата в 5 мл сухого ацетонитрила обрабатывают 0,15 мл хлорсульфонилизоцианата, Полученную с есьеремешивают 30 мин в атмосфере азота и затем упаривают в вакууме почти досуха. Осгаток растворяют в смеси этилацетат: 0,1 н. фосфатный буфер = 1: 1. После установления рН 1,5 - 2,5 добавлением соляной кислоты, смесь перемешивают в течение 2,5 ч.Воднуо фазу отделяют, разбавляют этанолом, обрабатывают по каплям пиридином до тех пор, пока не появится осадок. После охлаждения в тс,енпс почи в хслодильнике полученное,вердо= в гдсство промываот холодным этанолом и эфиром, и сушат до воздушно-су. хого состояния, получая бензгидрил 3-карбамоилоксиа-метокси-(Р-амино - 5 - карбоксипентанамидо) -3-цефем-карбоксилат в виде аморфного порошка.Б, Мононатриевая соль 3-карбамоилоксиаметокси- (Р-амино- карбоксипентанамидо) -3-цефем-карбоновой кислоты,Перемешиваемую суспензию 0,256 г бензгидрил 3-карбамоилоксиа-метокси- (Р- амино-карбоксипентанамидо) -3 - цефем - 4- карбоксилата в ацетонитриле вносят в раствор при добавлении 5 мл трифторуксусной кислоты и 3 мл анизола. После выдержки при комнатной температуре в течение 10 мин трифторуксусную кислоту и анизол удаляют в вакууме. Остаток растворяют в 50 мл воды и промывают двумя порциями хлороформа. Затем водную фазу разбавляют водой, разбавленной соляной кислотой устанавливают рН 2 и абсорбируют 50 мл смолы Дауэкс 50)(2 в водородной форме, Колонку промывают водой и затем элюируют 2%-ным водным раствором пиридина до тех пор, пока рН вытекающего из колонки потока не достигнет 7. Разбавленной гидроокисью натрия рН элюата доводят до 8 и концентрируют его при пониженном давлении для удаления пиридина. Полученный таким образом продукт представляет собой мононатриевую соль 3-карбамоилоксиа-метокси-(Р-амино - 5 - карбоксипентанамидо)- 3-цефем-карбоновой кислоты.Исходное вещество - бензгидрил-окси-метил-а-метокси- (Р-амино- карбоксипентанамидо) -3-цефем-карбоксилата готовят следующим образом.К 48 мл ледяного диэтилового эфира добавляют 4,8 мл концентрированной серной кислоты и 48 мл свежеперегнанного бензилового спирта. Эфир удаляют при пониженном давлении и остаток при перемешивании обрабатывают порционно 7,83 г Р-а-аминоадипиновой кислоты. После выдерживания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 24 ч ее разбавляют 100 мл абсолютного этанола и 20 мл пиридина. При охлаждении выпадает тонкий белый осадок, который промывают этанолом и эфиром и перекристаллизовывают из кипящей воды, содержащей не. сколько капель пиридина; получают аналити. чески чистый бензил-Р-амино-карбоксипентаноат,Перемешиваемую суспензию 3,13 г бензил Р-амино-карбоксипентаноата и 1,01 г окиси магния в 32 мл воды обрабатывают раствором 3,58 г трет.бутилоксикарбонилазида в 40 мл диоксана. Полученную в результате смесь перемешивают в закрытой колбе в течение 66 ч при 45 - 46 С. После охлаждения смесь отфильтровывают и фильтрат упаривают в вакууме для удаления диоксана, Водный остаток разбавляют 40 мл воды, насыщают хлористым натрием, устанавливают рН 3 с помощью лимонной кислоты и экстрагируют этилацетатом, Обьедииенные экстракты про55 60 65 мывают водой, сушат над безводным сульфа. том магния. Упаривание растворителя при пониженном давлении дает бензил-Р-трет, бутилоксикарбониламино- карбоксипентаноат в виде светлого масла.1,6 г дициклогексилкарбодиимида добавляют к перемешиваемому раствору 2,70 г бензил-Р-трет.бутилоксикарбониламино- карбоксипентаноата, 2,32 г 2,2,2-трихлорэтанола и 1,24 г пиридина в 70 мл сухого хлористого метилена. Сразу выпадает тонкий белый осадок. Смесь перемешивают в течение 60 мин при комнатной температуре в атмосфере азота и затем фильтруют для удаления дициклогексилмочевины. Фильтрат промывают 0,1 н. НС 1, водой, 2%-ным водным раствором бикарбоната натрия, насыщают перенасыщенным раствором поваренной соли и сушат над безводным сульфатом магния. После упаривания растворителя получается смесь дициклогексилмочевины и бледно-желтого масла.Неочищенный продукт в небольшом объеме бензола вводят в колонку, содержащую 70 г силикагеля. Элюирование бензолом и этилацетат-бензольными смесями дает чистый бензил-Р- трет.бутилоксикарбониламино - 5- (2,2,2-трихлорэтокси)-карбонилпентаноат в виде светлого масла.Смесь 1,18 г бензил Р-трет.бутилоксикарбониламино - 5 - (2,2,2-трихлорэтокси) карбонилпентаноата и 0,12 г предварительно уравновешенного 10% -ного палладия на угле в 40 мл абсолютного этанола перемешивают в атмосфере водорода при комнатной температуре. После абсорбации одного эквивалента водорода смесь фильтруют через суперцел, фильтрат упаривают и получают светлое масло. Неочищенный продукт очищают с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле с использованием смеси пиридин - петролейный эфир=1:2 в качестве проявляющего растворителя. Объединенные монокислотные соли из нескольких пластин перемешивают в течение 15 мин с 5%-ньпм водным раствором бикарбоната натрия и затем фильтруют для удаления силикагеля. Фильтрат подкисляют до рН 2,5 концентрированной соляной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Объединенные экстракты сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают при пониженном давлении. Получают Р-трет.бутилоксикарбониламино- (2,2,2 - трихлорэтокси) - карбонилпентановую кислоту в виде светлого масла.Раствор 1,14 г Р-трет.бутилоксикарбониламино - 5 - (2,2,2-трихлорэтокси) - карбонилпентановой кислоты в 100 мл сухого бензола охлаждают в ледяной ванне и перемешивают при 10 С в течение 60 мин в атмосфере азота, Упаривание растворителя и избыточное количество оксалилхлорида дают сырой хлорангидрид в виде бледно-оранжевого масла.К раствору 0,650 г бензгидрид-а-метокси-аминоцефалоспораната в 15 мл хлористого метилена при 0 С и перемешивании добавля 5 10 15 20 25 Зо 35 40 45 50 ют по каплям в течение приблизительно 30 с раствор 0,560 г Р-трет.бутилоксикарбониламино- (2,2,2-трихлорэтокси) - карбонилпентаноилхлорида в 10 мл сухого хлористого метилена, Спустя 1 мин добавляют 0,11 мл пиридина, Реакционную смесь перемешивают при 0 С 30 мин и затем выливают на измельченный лед. Смесь перемешивают, фазу хлористого метилена отделяют и промывают фосфатным буфером с рН 2 и водой. После сушки над безводным сульфатом натрия хлористый метилен упаривают в вакууме и получают сырой продукт в виде вязкого масла. Это вещество хроматографируют на 40 г силикагеля с использованием смеси бензол - этилацетат (объемное соотношение 9: 1) в качестве элюента, и получают бензгидрил-а-мстокси- (Р-трет.бутилоксикарбониламино - 5) - 2,2,2- трихлорэтокси (карбонилпентанамидо) цефалоспоранат в виде светлого масла,Раствор 0,930 г бензгидрил-а-метокси- Р- трет.бутилоксикарбониламино- (2,2,2- трихлорэтокси) - карбонилпентанамидо 1-цефалоспораната в 5 мл 90% -ного водного раствора уксусной кислоты охлаждают до 0 С и при перемешивании добавляют 0,500 г цинка в виде порошка. Полученную смесь перемешивают в течение 2,5 ч при 0 С. После фильтрации фильтрат упаривают при пониженном давлении досуха. Остаток растворяют в хлороформе, промывают водой, насыщенным раствором хлористого натрия и сушат над безводным сульфатом натрия. После упаривания растворителя при пониженном давлении получают бензгидрил-а-метокси- (Р - 5-трет.бутилоксикарбониламино - 5-карбоксипентанамидо) цефалоспоранат в виде смолы.В двухгорлую грушевидную колбу емкостью 10 мл, снабженную магнитной мешалкой и стеклянным электродом, загружают 0,650 г бензгидрил - 7-а-метокси- (Р-трет.бутилок. сикарбониламино - 5 - карбоксипентанампдо) цефалоспораната и 1 мл Н 20. Смесь перемешивают на масляной бане при 30 С и добавляют раствор 0,5 н. ИаОН из автоматической бюретки для поддержания рН 6,б, -1 ерез не. сколько часов добавление раствора гидроокиси натрия прекращают и реакцию останавливают. Раствор охлаждают и обрабатывают 1 г мелкокристаллического хлористого натрия. К полученному раствору приливают 10 мл этилацетата и при перемешивании с помощью 2 н. НС 1 доводят рН раствора до 2. Образуется эмульсия, которую измельчают пропусканием через воронку Бюхнера. Этилацетатный слой отделяют, промывают водой, доливают 5 мл воды и доводят до рН 5,6 с помощью раствора гидроокиси калия. Водную фазу отделяют, подвергают лиофильной сушке и получают неочищенную калиевую соль бензгидрил-оксиметил-а - метокси- (Р-трет.бутилоксикарбониламино - 5 - карбоксипентанамидо) -3-цефем-карбоксилата,457224 15 35 СН,О ОООН щенная сульлсульфонил, 2,5-диметил ьфонил, 4- ьная группав которой Составитель ляко рректор Е. Рогайлина Редактор Л. Емельянова Текре ворина Тирани 529комитета Совета Мннистроретений и открытийРаушская нао., д. 4/5 Изд.1062 ИИПИ Государственного по делам изо Москва, Ж, Заказ б 90/10 Цдписное Сапунова, 2 Типография, пр,П р и м е р 6. 3-Карбамоилоксиметил- (2-тпенилацетамидо) -2-цефем-карбоновая кислота.Когда повторяют процесс примера 1 при использовании Л соединения в:, есто Л соединения, получают 3-карбамоилоксиметпл- (2- 5 тиенилацетамидо) -2-цефем-карбоновую кислоту.Л 2 - соединение готовят изомеризацией эфира 3-оксиметил- (2-тиенилацетамидо) -3-цефем-карбоновой кислоты основанием, таким 10 как пиридин, отделением Л 2 в соединен с помощью хроматографии и отщеплением эфирной группы в соответствии с методами, известными в данной области.Точно таким же образом можно получать 15 другие Л-оксиметилцефалоспориновые соединения и превращать их в соответствующие Л 2-3-карбамоилоксиметильные соединения. Примером таких соединений могут служить: 3-карбамоилоксиметил- (2-карбокси - 2-фе нилацетамидо) -2-цефем-карбоновая кислота, 3-карбамоилоксиметил - 7 - (2-фенилацетамидо)-2-цефем-карбоновая кислота и 3-карбамоилоксиметил - 7-(2 - фурилацетамидо)-2-цефем-карбоновая кислота, 25Л 2 - соединения могут быть изомеризованы в соответствующие Л - соединения способами, хорошо известными в данной области. Предмет изобретения30Способ получения Х-незамещенных карбамоилоксиметилцефалоспоринов, о т л и ч а ющийся тем, что соединение общей формулы где Й 1 - атом водорода, заме фонильная группа такая, как фени этилсульфонил, бензилсульфонил, фенилсульфонил, 4-хлорфенилсу метоксифенилсульфонил, или аци, общей формулы КДзСНСО - ,Рз - атом водорода, галоид, амино-, гуанидино-, фосфоно-, оксп-, тетразолил-, карбокси-, сульфо-, сульфаминогруппа, К 4 - фенил, замещенный фепил. 11 езамещенный или замешенный мопоцикличсский пяти-, шестичленпьш гетерил, содержащий один или несколько гстероатомов, выбранных из группы, содержащей азот, кислород, серу, незамещенный или замещенныи гетерилтио-, фенилтио- или цпаногруппу, причем заместителями могут быть; галоид, карбоксиметил, гуанидино-, гуанпдинометил, карбоксамидометил, амипометил, метоксил, метил, нитрогруппа,Я, - атом водорода, метоксил; или соответствующее Л - соединение, или его соль или его сложный эфир, подвергают взаимодействи 1 о с галоидсульфонилизоцианатом, таким как с бромсульфонилизоцианатом или хлорсульфонилизоцианатом, с последующим гидролизом полученного при этом продукта и выделением продуктов или отщеплением защитных групп, если они имеются, известными приемами.Приоритет по признакам:27.01.71 при Я, - атом водорода, К, - атом водорода, й 4 - замещенный фенил, незамещенный или замещенный моноциклический пяти-, шестичленный гетерил, содержащий один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, содержащей азот, кислород, серу, не- замещенный или замещенный гетерилтиоостаток, замещенный фенил, причем заместителями могут быть метил, метоксил, гуанидинометил;24.08.71 при К 2 - метоксил, Кз - галоид, амино-, гуапидино-, фосфоно-, тетразолил, карбокси-, сульфо-, сульфаминогруппа, К 4 - фе. нил, замещенный фенил, фенилтио, цианогруппа, замещенный пяти-, шестичленный гетерил, содержащий один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, содержащей азот, кислород, серу, причем заместителями могут быть галоид, карбоксиметил, гуанидино-, карбоксамидометил, аминометил, нитрогруппа;29.11.71 по признаку Л - соединения, на основании полного описания, имеющего3295/71.