Способ получения бициклических соединений или их гидрохлоридов

(19) 4199 15 4 С 07 0 471 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ ИЯ АТЕНТ,Ф. СН) О)пС е п - 0,1 или 2; а ю- ющее дейши Лими д Кинг (ОВ)088,8)етаг, Методы эксческой химии. М,:1.,Н ЯСй,и имеет указагидрохлорид,рода или бромсной кислотыродукта в сво гидрохлоридо ные чени кисляют перекись го НИЯ БИЦИКЛИЧЕСКИХ 1 Х ГИДРОХЛОРИДОВ ния бициклических ормулы едяной целевоили в 54) СПОСОБ ПОЛУЧ СОЕДИНЕНИЙ ИЛИ 57) Способ получ соединений общей де ни водо уксу го п омвс с вы боди вид ви ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(33) (46) 30.06,86, Бюл (62) 3513949./23-04 (71) Дзе Веллкам Ф (ОВ) (72) Уилльям Ричар (53) 547.781/.785( (56) Вейганд-Хильг пепимента в органи Химия, 1968, с, 61 ш - 1 или 2,или их гидрохлоридов, о т л и щ и й с я тем, что соответст соединение общей формулыИзобретение относится к способуполучения бициклических соединенийобщей формулы(ОС 1)Б(1)ь(о),сн,где п - 0,1 или 2;ш - 1 или 2,Или их гидрохлоридов, обладающих попожительной инотропнай активностьюЦелью изобретения является создание на основе известных методов способа получения новых соединений, обладающих ценными фармакологическимисвойствами,Получение исходных соединений,а) 2-(2,4-Диметоксифенил)-1 Н-имидаза(4,5-с)пиридин,Смесь 2,5 г 2,4-диметаксибензойной кислоты и 1,5 г 3,4-диаминапиридина измельчают в тонкий порошок идобавляют по частям к 50 мл хлорокисифосфора при перемешивании. Реакционную смесь перемешивают и кипятят собратным холодильником в течение2,5 ч, после чего избыток хлорокисифосфора удаляют в вакууме. Остатокохлаждают, добавляют к нему 20 млводы и доводят рН до значения, равного , посредством гидрата окисиаммония, получая в результате светла-желтый твердый остаток, которыйсобирают, промывают водой и сушат.Указанный твердый продукт дважды перекристаллизовывают из водного раствора этанола, получая кристаллическое веществе кремового цвета имеютщее температуру плавления 195-198 Г,Рассчитано,; С б 5,88; Н 5,09;Б 16,47,Найдено, Е: С б 5,70; Н 5,15;Б 1 б,05.Структура продукта подтверждаетсяданными ЯМР и масс-спектра,Аналогично способу получения соединения а), получаютб) дигидрохлорид 2-(2-метоксиметилтиофенил)-1 Н-имидазо(4,5-с)пиридин, т,пл, 205-206 С,в) дигидрохлорид 2-(2,5-диметоксифенил)-1 Н-имндазо-(4,5-с)пиридин.2,5-Диметоксибензальдегид, морфолин и серу нагревают в течение 3 чпри 120 С. Твердую смесь при этомрасплавляют, получая жидкость, Реакционную смесь охлаждают и растворяют,в горячем метаноле. Метанольный раствор охлаждают, отфильтровывают образующийся твердый остаток (тиоморфолид) и сушат его. Указанный тиоморФолид нагревают с обратным холодильником в течение примерно 2 ч в ацетоне с иодистым метилом (1,2 эквивалента). Затем ацетон удаляют в вакууме,получая вязкое коричневое масло (тиоморфолидметиодид), которое смешиваютО с 3,4-диаминопиридином в этиленгликоле и нагревают полученную смесь прио1 О С в течение 2 ч, Затем реакционную смесь разбавляют водой и отфильтровывают полученный твердый продукт,15 суспендируют ега в воде и подщелачивают " помощью 0,88 аммиака, Твердыйпродукт отфильтровшвают, сушат и переводят в указанную в заголовке соль(дигицрохлорид), имеющую темгературу20 плавления 88-190 С (с разложением).г) Гицрохлорид 2-(2,4-диметокси- З-метилтиафепил)-1 Н-имидазо(4,5-с)пиридина.Указанное в заголовке соединение25 получают аналогично соединению в).Продукт имеет температуру плавления205-207 С.д) Дигидрохлорид 2-(3-метилтиафенил)-1 Н-имидазо(4,5-с)пиридина,ЗО т,пл. 123,5-125 С, получают в соответствии со следующей методикой.Диаминопиридин диспергируют с соответствующей замещенной бензойнойкислотой и смесь по частям добавляютк полифосфарной кислоте. Получающуюся реакционную смесь нагреваютпри 130 С в течение приблизительноо3 ч, Охлажденную реакционную смесьвыливают на лед и выпавшее в осадокА 1; твердое вещество отфильтровывают,суспендируют в воде и нейтрализуютО 88 аммиаком. Полученное таким образом твердое вещество отфильтровывают, сушат и превращают в хлористоводородную соль,е) Дигидрохлорид 2-(3-метилтиометоксифгнил)-1 Н-имидазо(4,5-с)пиридина,3-Метилтиа-метоксибензойную кислоту (полученную диазотированием 3- амико-метоксибензойной кислоты с последующей обработкой метилмеркаптаном) суспендируют в сухом толуоле и тионилхлорид (1,1 эквивалента) медленно добавляют к суспензии, Смесь кипятят с обратным холодильником в течечие 3,5 ч. Тонкослойная хроматография показывает, чта реакция завер 3 124 щена. Растворитель удаляют в вакууме и получают темно-коричневый остаток,Полученный вьппе хлорангидрид кислоты суспендируют в минимальном количестве сухого эфира и по частям до 5 бавляют к суспензии 3,4-диаминопиридина (1 эквивалент, экв.) в сухом пиридине и триэтиламине. Получающуюся смесь кипятят с обратным холодильником в течение 5.ч. Тонкослойная хроматография показывает, что реакция завершена.Получение целевых продуктов.П р и м е р 1. 2-(2-Метокси-метилсульфонилфенил)-1 Н-имидазо(4,5- -с)пиридин.К смеси 20 мл уксусной кислоты, 6 мл воды и 2,5 экв ЗОЕ перекиси водорода при перемешивании при комнатной температуре добавляют по частям 1,5 г соединения, полученного согласно соединению б). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 и оставляют на ночь при 4 С, Данные тонкослойной хроматографии указывают на то, что реакция закончена. Полученную реакционную смесь выливают в 25 мл воды, подщелачивают 0,88 аммиаком и экстрагируют хлороформом. Органический экстракт сушат, обесцвечивают и упаривают в вакууме, получая пену, которую кристаллизуют из смеси этилацетата и ацетона, выделяя в результате указанное в заголовке соединение, .имеющее температуру плавления 20235 204 С.В альтернативном варианте указанное в заголовке соединение получают следующим способом.40К перемешиваемой охлажденной суспензии соединения б) (18 г) и 1 экв ацетата натрия в ледяной уксусной кислоте добавляют 3,2 мл брома с та-, кой скоростью, чтобы температура поддерживалась на уровне ниже 5 С, Реако 45 ционную смесь выливают в 100 г колотого льда и доводят рН до 9 посредством 0,88 аммиака, Полученный раствор (содержащий некоторое количество коричневого твердого продукта)50 насыщают хлористым натрием и экстрагируют 4 порциями по 300 мл хлороформа. Объединенные экстракты в хлороформе сушат, обесцвечивают живот 55 ным углем и упаривают в вакууме, получая пену, из которой после растирания с эфиром выделяют указанный в заголовке продукт. 1993 4П р и м е р 2, Гидрохлорид 2-(2 метилсульфинил-метоксифенил)-1 Нимидазо(4,5-с)пиридина.Используя способ, аналогичный примеру 1, и исходя из 2-(2-метилтиометоксифенил)-1 Н-имидазо(4,5-с)пиридина, получают аналогичным образомуказанное в заголовке соединение.П р и м е р 3. Гидрохлорид 2-(2 метокси-метилсульфинилфенил)-1 Нимидазо(4,5-с)пиридина.Соединение, аналогично примеру 1,суспендируют в эфире и пропускаютчерез -.полученную суспензию сухой газообразный хлористый водород в течение 2 мин. Нерастворимое твердое вещество отфильтровывают и сушат, получая в результате указанное в заголовке соединение в виде белого твердого продукта, имеющего температуруплавления 153-155 С.П р и м е р 4. 2-(2,4-Диметокси-метилсульфинилфенил)-1 Н-имидазо(4,5-с)пиридин.Вьппеуказанное соединение получаютиз соединения а) по способу, аналогичному примеру 1,П р и м е р 5. 2-(2-Метокси-метилсульфонилфенил)-1 Н-имидазо(4,5-с)пиридин и его гидрохлорид.2-(2-Метокси-метилтиофенил)-1 Нимидазо(4,5-с)пнридин по частям добавляют в перемешиваемый растворЗОЕ-ной перекиси водорода в ледянойуксусной кислоте и воде. Светло-коричневый раствор перемешивают при70 С в течение 3 ч. По данным тонкослойной хроматографии реакция завершена. Реакционную смесь упариваютпод вакуумом, для удаления растворителей и остаток очищают хроматографированием на колонке с выделением вьппе- .укаэанного свободного основания,т.пл. 225-227 С. Полученное свободноеоснование суспендируют в метаноле ичерез раствор продувают сухой газообразный хлористый водород. Твердоесоединение отфильтровывают, сушат иполучают указанный гидрохлорид ст.пл. 221-223 С (с разложением).П р и м е р 6. 2-(3-Метилсульфинил-метоксифенил)-Н-имйдазо(4,5-с)пиридин.Соединение, полученное по примеруг), окисляют с использованием перекиси водорода (2 экв) аналогично попримеру 1. Вышеуказанное соединениеполучают в виде белого твердого веЯщества с т,пл. 227-229 .С.3П р и м е р 7. Гидрохлорид 2-(3- метилсульфинилфенил)-1 Н-имидазо(4,5- -с)пиридица,Соединение, полученного аналогично составу д), окисляют также, как по примеру 3, с получением соединения в виде белого твердого, соединения с т,пл. 250-252 С.Следующие примеры иллюстрируют фармацевтические рецептуры по предлагаемому изобретению, в которых активное соединение может представлять собой любое соединение определенной выше формулы (1), например, 2-(2-Метокси-метилсульфинилфенил)-1 Н-имидазо(4,5-с)пиридин.П р и м е р 8.Рецептура таблеток.Активное соединение (в форме20основания)ЛактозаНатриевая сольгиколята крахмала 20 мг 25Поливинилпирролидон 4 мгСтеарат магния 2 мг 124993 100 мг 100 мг 22 б мгСмешивают активное соединение слактозой и натриевой солью гликолятакрахмала. Смесь гранулируют растворомполивинил"ирролидона в 50%-ном водномспирте, Сушат гранулят и смешиваютсо стеаратом магния. Прессуют таблет 35ки, имеющие средний вес 226 мг.П р и м е р 9.Рецептура капсул.Активное соеди 40нение (в формеоснования) 100 мгЛак тоза 100 мг.Крахмал 30 мгИетилцеллюлоэа 4 мгСтеариноваякиегота П р и м е р 12. СуппозиторийСоединение (в форме основания) 100 мгСуппозиторная оснсва (Мазза Езе гугш С) до 2 гРасплавляют суппозиторную основу 50 о,при 40 С, В расплавленное основаниевводят активное соединение в формемелкоизмельченного порошка и перемешивант до гомогенного состояния, Отливант смесь в подходящие Формы, по 552 г на Форму, и оставляют стоять.Биологическая активность.Определение инотропной активности.п г 5.1 го. 238 мг Активное соединение смешивают с лактозой и крахмалом. Гранулируют раствором метилцеллюлозы в воде, Сушат и смешивают со стеариновой кислотой 238 мг. Помещают в плотную желатиновую капсулу. П р и м е р 1 О, Инъекция 17 (лиофильно высушенная). ЬАктивное соединение (гидрохлорид) 50 мг11 аннит 50 мгВода для иньекций до 2 млАктивное соединение растворяют в воде для инъекций. Раствор стерилизуют пропусканием через мембранный фильтр, имеющий размер пор 0,2 мк, собирают Фильтрат в стерильный стеклянный приемник. Переносят в стерильные стеклянные ампулы емкостью 2 мл в асептических условиях и защищают алюминиевыми уплотнениями. Перед введением состав инъекций разбавляют добавлением удобного объема воды для инъекций или стерильного солевого раствора, если,цля введения требует- . ся больший объем. П р и м е р 11, Инъекция 1 Ч (ампула для многократной дозы),Активное соединение (Гидро -хлорид) 250 мгБензиловыи спирт 0,075 млВода для инъкций 5 мл Бензиловый спирт растворяют в воде для инъекций, Добавляют и растворяют активное соединение. Доводят до нужного объема водой для инъекций. Пропускант через мембранный Фильтр с диаметром пор 0,2 мк, собирают Фильтрат в стерильный стеклянный приемник, Наполняют стерильные стеклянные ампулы. Закрывают ампулы стерильными резиновыми крышками и герметизируют алюминиевыми уплотнениями.7 1241Самцов морских свинок (На 11 я 275- 350 г), имеющих свободный доступ к пище и воде, забивают ударом по голове, Сердце быстро удаляют и промывают раствором Кребса-Генеслейта,5 содержащим-адреносепторный антаго М нисткаразолол (510 М) и при 34 С продувают газовой смесью 95 Е 0+57. СО. Сердце помещают в чашку Петри, содержащую тот же буфер, поддерживае-,О мый при постоянной температуре (34 С) и пропусканием через рассечение, Для каждого рассечения используют свежий буфер и после использования буфер выбрасывают. Из каждого сердца используют один капиллярный мускул правого желудочка, конец сухожилия привязывают к крючку из нержавающей стали, .а нижний конец перевязывают, выводят из стенки желудочкаи прикрепляют к перспексному зажиму и, таким образом, ткань находится в контакте с платиновым игольчатым электродом, Крючок из нержавеющей стали подвешивают к датчику Огаяя 1" т. 0,3 который записывает изометрическое натяжение. Препарат помещают в емкость для органов (сделанную из пирекса), которая содержит буфер, продуваемый газовой смесью 953 02, 57 СО и подо держиваемый при температуре 34 С. На препарат накладывают растягивающую нагрузку, равную 500 мг. Стимуляцию осуществляют прямоугольными импульсами продолжительностью 1 мс с частотой 1,5 Гц, при напряжении, превышаю 35 щем на ЗОБ пороговое напряжение (1-5)В, с помощью стимулятора ЯВ 1. Входы датчика подсоединяют к потенциометрическому записывающему прибо 40 ру с помощью шестиканального перехода датчика Огаяя. Через 90 мин препараты, не способные производить равномерные вне данного периода времени сокращения, отбрасывались. После дос 45 тижения как стабильной базовой линии, так и сократительного усилия (обычно через 15 мин), проводят добавление испытуемых соединений кумулятивным образом с интервалами 0,5 ю единиц в пределах. от 10 до 1 О М (конечная концентрация в емкости) или до предела растворимости, который всегда выше.Было установлено, что соединения примеров 2 и 6 обладают положительной инотропной активностью и способны вызывать, по крайней мере 753-ное увеличение основного сокращающего 993 8усилия с активностью )1 ОМ. Соединения примеров 1,3 и 5 аналогичны,но с активностью в интервале 1 О1 О М.Определение ин виво инотропной.ивазодилаторной (расширяющей сосуды)активности,Соединения по примеруиспытывают в сравнении с амриноном и Бардакс,У анастезированных гончих собак свскрытой грудной клеткой внутривенное введение испытуемого соединенияприводит к зависящему от дозы положительному инотропному стимулированию(измеряемому по повышению скоростиизменения давления в левом желудочкесердца - йр/Ы ) в интервале доз0,003-3,0 мг/кг. Это сопровождаетсязависящим от дозы увеличением потока крови в аорте и падением общегокровяного давления.Дозы соединении, эффективные длядостижения увеличения на 507 йрЯЪ(ЭД ,ИНО) и для уменьшения диастолического кровяного давления на ЗОХ(ЭДо ВАЗО) у анестезированных гончихсобак.Соединение ЭДр ИНОЭДр ВАЗОПример 1 0,063 мг/кг 0,19 мг/кгВардаксАмринонОпределение фосфодиэстеразной ингибиторной активности.Определение фосфодиэстеразной ингибиторной активности проводится пометодике Томпсона и Эпплмэна.ьН-сАМФ (5 микромолей) инкубируютпри 37 С в течение ЗО мин с 1000 Хсупернатантом 103 (вес/объем) гомогената сердца морской свинки в.,буфере 50 м/моль 1 рис./НС 1, имеющем рН7+5 м/моль МдС 1 как в присутствии,так н в отсутствии соединения попримеру 1, которое в первом случаерастворяют в Трис-буфере с получением конечных концентраций 100 мк/моль,1 и 10 м/моль, л. Фосфодиэстеразныйермент в гмогенате гидролизуетН-сАМФ до Н-АМФ, который затем(преращается в Н-аденозин-нуклеотидазой, добавленной в инкубационнуюсмесь. По окончании инкубирования не 3превращенный Н-сАМФ удаляют добавлением в смесь ионнообменнЬй смолы и3центрифугированием. Содержание Н всупернатанте измеряют жидкостнымсцинтилляционным счетчиком и получаютколичественную оценку образованияаденозина, (т.е. гидролиза сАМФ),9 12 Сравнением количеств Н-аденозина, образовавшихся в присуствии и отсутствии испытуемого соединения, получают величину ФДЭ-ингибирующей активности соединения. При концентрации 100 мк/моль, 1 и 10 м/моль соединение по примеру 1 не обнаруживает ФДЭ-ингибирующей активности.Сердечно-сосудистое и антиагрегативное действие соединения по примеру 1 (соединения а) на анастезированных резус обеэъянах.Резус обеэъяны обоего пола (вес тела 7,3-9 кг) успокаивают фенциклидином, затем анестезируют тиопентоном и поддерживают пантабарбитоннатрием. Категеры помещают в левую бедренную артерию для измерения кровяного давления и в левую бедренную вену для введения лекарства. Еще один катетер вводят в контралатеральную бедренную артерию для отбора образцов крови. Сердечный ритм записывают на ЭКГ (стандартная инструкция П). Катетер в левыйжелудочек вводятчерез левую сонную артерию для измерения давления в левом желудочке. Все сердечно-сосудистые параметры записываются на полиграфе (Сгаяя модель 7). Ректальную температуру анестезирбванных обеэъян поддерживают равной.37-38 С с помощью нагреваемого стола с прокладкой.а Ех хчо ингибирование агрегации тромбоцитов.Образцы крови (3 мл) набирают в шприца, содержащие тринатрийцитрат (конечная концентрация 0,31 Ц вес/объем), и центрифугируют 2 с, Обогащен- . ную тромбоцитами плазму переносят в агрегометр Бориа и инкубируют 1 мин (при 37 С),а затем добавляют такое количество АДФ, которое достаточно для достижения агрегации либо ниже максимальной (1,цмк/моль, л),либо почти максимальной (8-12 мк/моль,л). Ингибирование агрегации рассчитывают с учетом не менее двух контрольных образцов, взятые до внутривенного введения соединения а). Последствия введения соединения а) изменялись от эксперимента к эксперименту. Эф 1993 10фективная доза соединения .а), которая вызывает Ц 07 ингибирования агрегации, равна приблизительно 1,0 мг/кпри внутривенном введении.56):1.и чЫго ингибирование агрегации тромбоцитов.Свежую кровь набирают в сипиконизированные (Ж 1 ос 1 ад.; С 1 ау Айашя)пластиковые (я 1 ег 1 дп Ый.) пробирки,1 р содержащие тринатрийцитрат (3,153;0,1 объема на 0,9 объема крови) ицентрифугируют (ускорение 200 в течение ц мин) при комнатной температуре. Обогащенную тромбоцитами плаз 15 му (ОТП) помещают в пластиковые контейнеры и хранят при комнатной температуре. Ингибирование агрегации тромбоцитоя определяют на агрегометреБорна, инкубируя аликвоты 0,5 мл)0 ОТП в течениемин при 37 С в отсутствии или присутствии соединения Й), которое вводят до прибавле"ния аденозиндифосфата (АДФ). Для каждого соединения строят зависимостьд ингибирования от дозы и определяютИД 5 (доза, вызывающая цОХ ингибирояання), как дозу, требуемую для снижения агрегации на 503 по сравнениюс контрольной амплитудой. ИДя дляЗО соединения ц равна 1 кг/мл (приблизительно),Исследования токсичности.В предварительных испытаниях нагоксичность определяют действие соец 5 динения й ) на самок крыс Чя 1 аг,Животных случайным образом разбирают на группы по ц особей и в каждбй группе проводят одно введениелекарства. Одна группа является конт,р рольной и в этой группе вводят только инертный фармацевтический носитель, Наблюдения эа поведением проводят через Ц, 20 мин 1,2,3 и 4,Ц ч ичерез 2,4 и б дней после введениялекарства. Результаты этих исследований представлены в таблице.Таким образом, получен предлагаемый способ получения новых производных имидазо 4,5-с пиридина, обладаю 50 щих ценными фармакологическими свойствамии.1241993 12 Доза, мг/кг Смертность Наблюдения за поведением самоккрыс при исследованиях 35 Покраснение кожных покровов,слабая гипотермия 1 С) 70 100 140 5/5 через5-30 мин 200 Составитель Н. НарышковаРедактор Ю, Середа Техред И.Попович Корректор В. Бутяга Заказ 3619/60 Тираж 379 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Пониженная активность, расстройство координации движений, медленное дыхание оГипотермия 2 С), глубокое медленное дыхание, расстройство координации движений, покраснение кожных покровов, пониженная активность Пониженная активность, гипотеромия (2-3 С), расстройство коор,динации движений Пониженная активность, расстройство координации движений, конвульсии 2/5 через3 ч4/5 через2 дня