Способ получения транс-3, 4-изомеров производных 4-(3 оксифенил)-пиперидина

(51) С 07 1) 211/1 1 К 31/44 ОПИСАНИЕ ИЭОБРЕТЕНИК ПАТЕНТУ 2лучению транс,4-изоых 4-(3-оксийенил)-пип ов проиидина в А-лы СНз Ж Н 2-СИ-СН(0 1986.1978. алкил, обладающих ть мю- или каппасвойс рецеп вом блокиров оры, и может ине. Цель - учения соеди ной активнос ггь использовано азработ а спосоНИЯ ТРАНС-Зу 4-ИЗО 4-(3-ОКСИФЕНИЛ) -ЛУЧНЫ и(54) СПОСОБ ПОМЕРОВ ПРОИЗВОДПИПРРИДИНА(57) Изобретениециклическим соед ений, обладающпхью. Получение ве" соответствующего табл,ут восстановлением етопроизводного. 4 относится к гетеронениям, в частности ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Эли Лилли Энд Компани (ББ)(72) Чарльз Говард Митч и ДенниМайкл Циммерман (118)(56) Патент СИА У 458 1456,кл. С 07 1) 21.1/22, опубликПатент 0161 А Р 408 1450,кл. С 07 0 419/06, опублик Изобретение относится к области получения новых гетероциклических соединений, в частности транс,4-изомеров производных 4-(3-оксифенил)-пиперидина, обладающих свойством блокировать мю- или каппа-рецепторы, что может быть использовано в медицине.Целью изобретения является создание на основе известных методов способа получения новых производных пиперидина - блокаторов мю- и каппа- рецепторов, обладающих высокой активностью при низкой токсичности.П р и м е р 1, Гидрохлорид транс(+)-1-(К,Б)-(1-циклопентилпропанол-З- ил)-3,4-диметил-(З-оксийенил)-пиперидина. К раствору транс-(+)-1-(1-циклопентилпропанол-З-ил)-3,4"диметил- (3-оксиАенил)-пиперидина в 100 мл сухого диэтиловогоэйира добавляют 2,0 мп 1 М алюмогидрида лития в тетрагидроАуране. Смесь нагревают 90 мин с обратным холодильником и охлаждают до 0 С, К смеси добавляют 5,0 мл этилацетата с последующей добавкой достаточного количества воды, чтобы вызвать кристаллизацию. Жидкую фазу сливают и полученный Аильтрат сушат над безводным карбонатом калия. Фильтрат концентрируют под вакуумом и переводят в соль хлористоводородной кислоты, чтобы получить целевое соединение,1598869 20 40 Вычислено,; С 76,09; Н 10,03;И 4,23.И 0.Найдейо,: С 76,07; Н 10,09Я 4,01.Спектр Н-ЯМР (СЭС 1 ): 0,54 (ЗН,д, Л=б Гц)р 1,20 (ЗН, с); 3,62 (1 Н,кв, 3=10 Гц); 6,6 (1 Н, д, 3=8 Гц),6,7 1 (2 Н, т, 5=9 Гц); 7, 1 ( 1 Н, т, 103=9 Гц); 7,47 (1 Н, широкий синглет).Соединения по примерам 2-6 получают согласно методике, описанной впримере 1.П р и м е р 2. Транс-(+)-1-(Б)-(3- 15окси-З-циклогексилпропил)-3,4-диметил-(З-оксифенил)-пиперидин, т.пл.142-143 С,Вычислено,: С 76,48; Н 10,21;Я 4,05.С 12 НЗР 7Найдено,С 76,64; Н 10,48;И 4,17,П р и м е р 3. Транс-(-)-(Б)-(3,окси-З-циклогексилпропил)-3,4-диметил 4-(З-оксифенил)-пиперидин, т.пл. 15 1152 С.(7 х =-64,9655, Л 36 = 211,655Вычислено,: С 76)48; Н 10,21;Б 4,05. 30Найдено, %: С 76,71; Н 10,43;И 4,05.П р и м е р 4. Транс-(+)-1-(К)"(3" .окси-циклогексилпропил)-3 4-диметилФ 354-(З-оксифенил)-пиперидин, т.пл. 150151 С.ИЗ=+73, 6069, Ге 3 э=+238, 963Вычислено,: С 76,48; Н 10, 21;И 4,05.С Н р 02Найдено,: С 76,24; Н 9,92;И 4,18.П р и м е р 5. Транс-(-)-1-(К)-(3 окси-З-циклогексилпропил)-3,4-диметил-,(З-оксифенил)-пиперидин, т.пл,141-143 С.с/3 =-68,81Ы 3 э=-223,88.Вычислено,: С 76,48; Н.10,21;И 4 05.. 50С,Нэ Ю.Найдено, %: С 76,40; Н 10,35;Н 4,01.П р и м е р 6. Гидрохлорид транс(ф)-1-(К,Б) -(3-окси-циклогексилпропил)-3,4-диметил-(3-оксифенил)-пи- .перидина,Вычислено, %: С 69,18; Н 9,50;М 3,67. СН э,СЦЮ Найдено,: С 68,97; Н 9,37;3,70,Фармакологические испытанияСпособность соединений блокироватьму- или каппа-рецепторы (ы чегго),Самцов крыс линии Бргапое Ра 1 еудля экспериментов на месте приложениядействия мю- и дельта-клеток и сам"цов морских свинок линии Нагг 1 еу дляисследований каппа-рецепторов умерщвляли обезглавливанием и удаляли головной мозг. Мозговую ткань, весь мозгмозжечка крыс для изучения места приложения действия мю- и дельта-клетоки коры головного мозга для изучениякаппа-рецепторов, гомогенизировалив гомогенизаторе с тефлоновой и стеклотканью. Фракцию отстоявшегося слоя1, осадка после отстаивания 17, замораживали в азотном холодильнике вконцентрации 1,33 г/мл и выдерживалине более пяти недель до использования. Ткань повторно гидратировали физиологическим буфером перед применением.Для изучения мю- и дельта-клетокв полистироловых пробирках смешивалипри комнатной температуре возрастаю"Шие концентрации экспериментальногосоединения (О, 1 - 1000 нмоль), буферКребса-Гепеса с рН 7,4 и меченый тритием лиганд. Реакцию инициировали добавлением регидратированной.ткани,которую предварительно инкубировалипри 37 С в течение 20 мин. Реакционную смесь выдерживалив водяной банепри 37 ОС 20 мин,Реакцию заканчивали быстрой фильтрацией (вакуумные коллекторы Аяесоп)через стеклянные Фильтры ЪЪагвап СР/С,которые предварительно смачивали вбуфере Кребса-Гепеса с рН 7,4, ЗатемФильтры промывали два раза по 5 мпкаждый раэ переохлажпенным буферомКребса-Гепеса с рН 7,4, ПромытыеФильтры помещали в сцинцилляционныепробирки и добавляли 10 мл РСБ (АтпегэЬат), и пробы обсчитывали на счетчике бета-излучения Беаг 1 е Д; Средние значения и стандартные отклонениярассчитаны после трехкратного экспериментального определения в конкрет-.ных случаях. Метод несколько модифицирован для каппа-рецепторов. Тканьобрабатывали предварительно 100-наномольными концентрациями блокаторов1598869 К( -концентрация меченых трутнем лигандов,1+е мю- и дельта-клеток. Инкубационноевремя для реакционной смеси составляло 45 мин при 37 С. где ИК - концентрация, при которой 1050% меченых тритием лигачдов замещено испытываемымсоединением;1( - константа диссоциации длямеченых тритием лигандов 15на месте действия рецептора,Результаты оценки некоторых соединений в эксперименте на связывание опиатного рецептора, представлены в20 табл. 1, Соединения А " Е - известные соединения и представляют собой соединение А - гидрохлорид 4/3-(3-оксифенип)-Здо-диметнл-о/-фенил"пипе 25 ридинпропанола; соединение В - гидрахлорид 3- (1, Зо/, 4 р-триметило-пиперидил)-фенола; соединение С - малеат 3- . Г 4/3-(З-оксифенил)-Зр,4 о-диметилпиперидино 3-пропиофенона; соединение Р - гидрохлорид 3-(Зс/,4 р-диметил-фенетилЫ-пиперидил)-фенола; соединение Е - налоксон -4,5-эпокси-З, 14-диокси-(2-пропенил)морфинан"6-он; соединение Е налтрексон - 17-циклопропилметил,5-эпокси-З, 14-диоксиморфи- . 35 нан-б-он.Испытания 1 п чача. Соединения согласно изобретению показали также нысокую активность в экспериментах 1 п 40 ччо на мышах как антагонисты опиатных мю- и каппа-рецепторов. Эту активность устанавливали следующим образом.Для определения п чача антагониз" ма опиатного рецептора использовали реакцию "письма", обычно применяемую у мышей для измерения аналгезии, Реакция "письма у мышек определялась как сокращение абдоминальной мускулатуры с последующим вытягиванием1 1 нижних конечностей, Реакция письма вызывалась внутрибрюшинным введением 0,6%-ной уксусной кислоты н объеме 1 мл/ 100 г веса. Пять самцов мышей ОР(СЬаг 1 еэ К-чег, Роггаде, И.1), несинших приблизительно 20-22 г каядая, после фиксирования их на ночь, непрерывно наблюЗначения К 1 рассчитывали с использованием статистической мини-программы по следующей формуле:ИК50 Крдали в течение 10 мин эа реакцией"письма", которая начиналась через5 мин после введения уксусной кислоты. Процент ингибиравания реакции"письма" определяли из среднего числацарапаний в контрольной группе.1(аждае сочетание доз вводили пятимышам.1(аждае испытуемое соединение вводили в различных дозах с анальгеэирующей дозой морфия - прототипического конкурента опиатного мю-рецептора,и анальгазирующей дозой И, 488 Нпрототипического конкурента опиатногокаппа-рецептора. (И, 488 Н - общеизвестное диагностическое веществатранс,4-дихлор-И-метил-И"12-(1-пирролидинил)циклогексил Збензолацетамидометансульфонат). Соответствующиедозы составляли 1,25 и 2,5 мг/кг веса, Эти дозы вызывают примерно,90100 ингибирования реакции "письма".Каждый потенциальный антагонист испытывали в дозе 1,25 мг/кг с морфиеми И, 488 Н. Если наблюдался значительный антагонизм анальгеэчи либоморфия или И, 488 Н, то испытывалиряд последовательных даз антагониста,чтобы получить полную,кривую зависимости доза - эффект и вычислить антагонистическую дозу 50 (АЧ 5, ). АЛрассчитывали из уравнений линекнойрегрессии полученных на самописцеэкспериментальных данных и она означает примерную дозу, которая снижаетанальгезирующее действие конкурентадо 50% ингибирования реакции "письма".Инъекции испытываемых лекарств и прототипичных конкурентов проводили подкожно за 20 мин до инъекции уксуснойкислоты,Результаты эксперимента на реакцию"письма" у мьппей представлены итабл. 2,Установлено, что взаимодействиеантагонистов опия с каппа-рецепторами приводит к заметному мочегонномудействию (1 еапйег. 1 пе Лоцгпа 1 оЕРЬагшаса 1 о 8 у апй Ехрегйпепга 1 ТЬегарецгса 1, 1983, чо 1 224, Р 1, 89-94).Соединения согласно изобретению оце. нивали также в эксперименте на диу рез у крыс, проводимом по методу, описанному 1,еапйег ес а 1, 1 п 1)гц 8 Оече 1 оршеп КевеагсЬ, 1984, 4, 421- 427, для доказательства способности предлагаемых соединений блокировать ,каппа-рецепторы.Согласно этому методу б 0 накрытых 10 колпачками крыс самцов линии Лонг- Эванса (СЬаг 1 ев Ковчег ВгЫп 8 1,аЬогагогхев, Рогга 8 е, И 1), весивших 300- 500 г каждая, помещали отдельно или парами в помещение вивария с конт ролируемой температурой (23 С), которое освещали от,б ч вечера до б ч утра. Корм,пля грызунов и водопроводная вода были постоянно доступны крысам, за исключением времени, когда 20 проводили измерения выделения мочи. Животных использовали повторно, но не чаще двух раз н неделю.При определении антагонистической активности соединений согласно изобретению каждому животному вводили инъекцию 0,08 мг/кг бромазоцина, потенциального конкурента каппа-рецептора, чтобы вызвать мочеиспускание. Затем животных инъецировали различными дозами испытываемых соединений. Чтобы измерить выделение мочи, жинотных удаляли из домиков, взнешивали, инъециронали и помещали на 5 ч в обменные клетки. Выделенную мочу отводили по у 5 трубке в цилиндры с делениями. Накопленные объемы мочи определяли через установленные интервалы времени (обычно через 2 и 5 ч после инъекции),Соединения, которые испытывали, 40 были в форме солей, растворенных в дистиллированной воде. Если необходимо, то соединения растворяли в дистиллированной воде с помощью несколькихкапель молочной нли хлористонодородной кислоты и легкого подогрева. Всеинъекции проводили подкожно в объеме1 мл/кг веса. В экспериментах на антагонизм проводили две инъекции, поодной с каждой стороны тела. 50Результаты изучения эксперименталь-.ного диуреза у крыс представлены в табл. 3. Предлагаемые соединения, как установлено, обладают способностью увели 55 чивать количество потребляемой пищи 1 п что, Следующий эксперимент проведен для оценки способности соединенийсогласно изобретению увеличивать потребление корма и воды тучными крысами линии ЕцсКег.Согласно применному методу тучных крыс Ецс 1 ег в возрасте 3-4 мес приучали есть корм днем от 8 ч утра до 4 ч вечера, только с тем, чтобы прибавка в весе приближалась к таковой, когда крыс кормили аИ 1 Ыгцш. Воду эти крысы. могли потреблять в любое время. Крыс группировали по четыре в каждой группе, две самки и два самца. Одна. группа служила контролем для трех остальных групп кажцый день. Каждой из остальных трех групп подкожно вводили испытынаемое соединение, подлежащее оценке, Испытываемые соединения готовили в физиологическом растворе, содержащем 10 об,диметилсульфоксида.Животным не внодили лекарства в течение 4 дней до следующего испытания. Потребление пищи и воды каждой крысой измеряли в течение первых 4 ч. Испытания одного соединения продолжались три последующие дня. Действие лекарства выражали в процентах от контроля для конкретного дня испытаний.Результаты этих экспериментов пред" ставлены в табл. 4, где дана эффективная доза ЭДпредставляющая собой количество оценинаемого соединения (в мг/кг), необходимое для увеличения потребления пищи на 20 . в первые 4 ч эксперимента.Таким образом, предлагаемые соединения обладают низкой токсичностью и проявляют только слегка отрицательный эффект на мьпиах при очень большой дозе 300 мг/кг. формула и э о б р е т е н и яСпособ получения транс,4-изомеров производных 4-(3-оксифенил)-.,пиперидина общей формулыОН сн,СН ХС -СН -СН-ВОН где 8. - С -С -циклоалкил, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что вос - станавливают соединение общей формулы1598869 ОН Таблица К;) нмоль) для Соеди нение рецептора каппа-рецептор Ивестное 1,0 80,05,4 1,2 6,3-рецептора каппа-рецеп- тора Предл гаемо по приИзвестноеА В 0) 05 0,74 О, 14 2,50Предлагаемоепо примеру1 . 041 2 0) 410) 03 1,40+0,62,40+0,6 5 2,24+0, 1 6 0,22+0,0 0,04 0,01 0,05 0,03 0,07 0,07 где К имеет указанное значени 5,472,02+0,4611) 4514) 2911,45+4,2914) 29+2, 105, 04+0, 58 22,7833,0208,0 51,0. 66,4 0,08 0,07 0,24 0,36 0,52 0,1412 1598869 1 Родопжгние ачбц 0,16 0,08 0,05 12 06 т 3 л Соеди кение ф 150кг, чере 0,4 8 4,09 2,71 2,17 2,3,2,аблица мг/кг Со ение Предлагаемоепо примеру 5 6 звестн Составитель И.Банниковаедактор С.Пекарь Техред Л,Олийнык Корректор С.Шев Заказ 307 2 Подписное Производственно-издательский комбинат "атент", г.ужгор Гагарина,10 Предлага мое по примеругИзвест- ное ВНИИПИ Государственного комитета по из113035, Москва, Ж,0,07 0,05 О, 12 О, 13 0,35 0,55 3,99 3,72 0,94 1,40 2,05 ретениям и открытиям при ГКНТ СССРушская наб., д. 4/5