Способ получения 2, 4-диамино-5-(замещенных)пиримидинов или их солей

СОЮЗ СОВЕТСНИХсоцИАлистичеснихРЕСПУБЛИН 247 ОМИТЕТ СССР ЕНИЙ И ОТКРЫТИЙОСУДАРСТВЕНО ДЕЛАМ ИЗ П ИЕ ИЗОБ Е НТУ У 3 ундеймитед г уа ниди иа общей фор интез ведут оли соедине г и Пол Марсел или его К -ны НО ИХ 2,4-ДИАМИИМИДИНОВ ИЛИ ОСОБ ПОЛУЧЕ ЩЕ ННЫХ) ПИР(57) Из н бретение каса нов (ЗП), в ч енных тся стности с п или(72) Сюзан Мэри ДСконезни (08)-М=СН-, или их солей, которые обладают антимикробной активностью имогут быть использованы в медицине.Цель - создание более активных именее токсичных веществ указанного ы (11): СН=СН-У-Х-С=С-СК =СК- й Н-С-СН -К, К К, Х, Т - уыше, К - -СН(СК)-СН(ОК ) и К; К = С,-С-алкнл;-алкокси, анилино, морфос оследующим выделением цео продукта в свободном виде виде соли. Антибактериальная ность к Яацгеиэ СМ 49 1-6,5 мг/к вивалент основания (против мг/кг для триметоприма), что ляет снизить смертность телят аракении сальмонеллезом.2 табл,1424732 5 1 О 15 20 25 7,8-Диметокси-формилН-бензопиран (362 г, 1,64 моль) в растворе спирт - диметилсульфоксид (1,5 л)добавляют к кипящему с обратным холодильником морфолинопропионитрилу(299 г, 2,13 моль) и метилату натрия (1 16 г, 2, 13 моль) в смеси спиртдиметилсульфоксид (800 мл) в течениеболее 45 мин. Всю эту реакционнуюсмесь разбавляют водой (100 мп),концентрируют в вакууме до однойчетверти исходного объема и сноваразбавляют водой. Полученный раствор экстрагируют дихлорметаном(2 х 2 л) и органическую фазу промывают водой (2 л). Органический слойконцентрируют и сушат ВОЗА азеотропом. Полученное масло используют непосредственно на следующй стадии.Спектр ЯМР соответствовал предполагаемой структуре. Тонкослойная хроматография показала наличие смесиЕ и 2-изомеров,Д. 2,4-Диамино-(7,8-диметоксиН-бензопиран-илметил)пиримидин2-(7,8-ДиметоксиН-бензопиран-илметил)-3-морфолиноакрилонитрил(562 г, 1,64 моль) и анилингидрохлорид (234 г, 1,80 моль) кипятят собратным холодильником в 2,4 л 501 А(этанол) в течение 1 ч. Реакционнуюсмесь охлаждают и добавляют гуаницингидрохлорид (313 г, 3,28 йоль) и метилат натрия (275 г, 5,08 моль). По 1Изобретение относится к способамполучения новых биологически актив -ных соединений, в частности 2,4-диамино-(замещенных)пиримидиновили их солей, которые могут бытьприменены в медицине и биологии.Цель изобретения - способ получе.ния новых производных пиримидина,малотоксичных и обладающих более высокой антимикробной активностью.Пример 1.А. Метил,4-диметокси-(2-пропинилокси)бензоатМетил,4-диметокси-оксибенэоат (0,54 г, 2,54 ммоль), пропаргилхлорид (0,23 г, 3,04 ммоль), иодиднатрия (3 мг, 2,54 ммоль) и карбонаткалия (0,53 г, 2,81 ммоль) кипятятс обратным холодильником в ацетоне(Зх 10 мп). Органический слой сушатнад сульфатом натрия, концентрируюти перекристаллизовывают из спирта(2,5 мл), гексана (20 мп) до получения метил,4-диметокси-(2-пропинилокси)бензоата (0,29 г,497),т. пл. 72-73, 5 Г,Вычислено: С 62,39; Н 5,64.Найдено,7: С 62,28; Н 5,68.В. Метил,8-диметоксиН-бенэопиран-карбоксилат.Метил,4-диметокси-(2-пропинилокси)бензоат (390 г,1,56 ммоль)в Н,И-диметиланилине (0,4 л) кипятят с обратным холодильником в течение 40 мин, Раствор охлаждают иразбавляют метиленхлоридом (2 л),Органический раствор экстрагируют1 н, соляной кислотой (5 х л), сушат над сульфатом магния и концентрируют до получения указанногосоединения (390 г, 1003),У образца, перекристаллизованного из смеси эфир - гексан, т,пл,88,5-90 С. Вычислено,З: С 62,39; Н 5,64.СН,О,Найдено,Ж: С 62,35; Н 5,68.В, 7,8-Диметокси-формилН-бензопиран,Метил 7,8-диметоксиН-бензопиран-карбоксилат (390 г,1,56 моль)в толуоле (1,6 л) охлаждают до - 15 Си добавляют раствор натрийбис(2-ме 30 35 40 45 50 55 токсизтокси)алюминийгидрида (908 мп, 3,5 М) в толуоле (3,18 моль) и морфолин (277 г, 3,18 моль) в толуоле (900 мл) за 45 мнн. После перемешивания в течение дополнительных 30 мин добавляют 2 н.раствор гидроокиси натрия (2,85 л). Органический слой отделяют, промывают 0,8 н.соляной кислотой (Зх 1 л), 57.-ным бикарбонатом натрия (500 мп) и водой (1 л), высушивают над сульфатом магния и концентрируют до получения 7,8-диметокси-формилН-бенэопирана (344 г, 86 Ж).У образца, перекристаллиэованного из смеси эфир - гексан, т.пф. 82 82,5 С.Вычислено,7.: С 65,44; Н 5,49,С, Н, ОНайдено,7.: С 65,42; Н 5,51.Г. 2-(7,8-ДиметоксиН-бензопиран-илметил)-3-морфолиноакрилонитрил.сле кипячения с обратным холодильником продукт перекристаллизовываютиз охлажденной реакционной смеси.После фильтрации с последующей промывкой водой 2 л) получают 2,4-диамино-(7,8-диметоксиН-бензопиран-илметил)пиримидин (220 г 142,1 ).После перекристаллизации иэ смесиэтанол-вода получают указанное в соединении с т,пл. 235-238 С.Пример 2.А, 3-(7,8-ДиметоксиН-бензопиран-ил) -2-метоксиметилпропеннитрил .Смесь метилата натрия (7,02 г,0,13 моль) 7,8-диметокси-формилН-бензопирана (57 г,0,26 моль)и 3-этоксипропаннитрила (28,35 г,0,286 моль) в метаноле (150 мл) нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 4 ч, затем охлаждают и разбавляют водой (150 мл)и этиловым эфиром (5,0 мп). Слоиразделяют и эфирную часть промываютводой (Зх 250 и 1 х 100 мл) и сушатнад сульфатом магнияЭфирный раст, вор концентрируют до получения 55 г(73 ) янтарного масла, которое исЪпользуют далее без дополнительнойочистки,Б. 2,4-Диамино-(7,8-диметоксиН-бензопиран-илметил)пиримидинГуанидингидрохлорид (11,46 г,0,12 моль) в метаноле (25 мл) до, бавляют к метилату натрия (6,55 г,0,12 моль) в метаноле (40 мп), полученрый натрийхлорид отфильтровывают и промывают метанолом (ЬО мп).,Гуанидиновый раствор добавляют к 3-(7,8-диметоксиНбенэопиран-ил)-2-метоксиметилпропеннитрилу(11,5 г, 0,04 моль), полученнуюсмесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч. После охлаждениясмеси до 3 С получают 5,38 г желтого твердого продукта. Высокоэффективная хроматография дала выход28,6 . Температура плавления образца, перекристаллизованного из смесиоспирт - вода, составила 232-4 С.Пример 3.А. 3-(7,8-ДиметоксиН-бензопиран-ил)-2-диметоксиметилпропан-йитрил.,Смесь метилата натрия (8,86 г,0,164 моль) и 3-(7,8-диметоксиН-бензопиран-ил)-2-метоксиметилпропеннитрила (пример 2 А, 23,0 г, 51015 0,080 моль) в метаноле (60 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 24 чоставляют остыть и разбавляют водой (200 мл). Полученную смесь экстрагирую-, толуолом (1 х 200 и 2 х 100). Объединенные толуольные фракции экстрагируют водой (Зх 100 мл) и сушат над сульфатом магния. Раствор толуола концентрируют. В остатке получают коричневое масло, которое отгоняют при пониженном давлении до получения 1 Ь 9 г (622) желтого масла, используемого без дальнейшей очистки.Б. 2,4-Диамино-(7,8-диметокси- -2 Н-бенэопиран-илметил)пиримидин .Гуанидингилрохлорид (11,94 г, 20 0,125 моль) и метилат натрия (6,81 г,0,126 моль) объединяют в метаноле(100 мл) и полученный хлорид натрияотфильтровывают. Иетанольиый гуанидиновый раствор добавляют к 3-(1,8-диметоксиН-бензопиран-ил)-2-диметоксиметилпропаннцтрилу(15,9 г, 0,05 моль), и полученнуюсмесь кипятят с обратным холодильником в течение еще 2 ч. После охлаж- ЭО дения отфильтровывают и высушивают2,85 г (18 ) 2,4-диамино-(7,8-диметоксиН-бензопиран-илметил)пиримидина, т,пл. 233-234 С. Полученоный фильтрат концентрируют до 70 С.Нагревают дополнительно 2,5 ч, добавляют 75 мл метанола и полученныйтвердый продукт отфильтровывают, получают 10,4 г светлоокрашенноготвердого продукта. Полный анализ 40 высокоэффективной хроматографией далвыход 60,3 . Образец перекрксталлизовывают из смеси спирт - вода,т.пл. 236 С.П р и м е р 4. 2,4-Диамино-(8- 45диметиламино-метил-хинолилметил)-пиримидин.А.-Морфолинопропионитрил(0,85 г), диметилсульфоксид (1 мп)и сухой метилат натрия (40 г) нао 50гревают и перемешивают при 65 С подтоком азота. Добавляют раствор 8-ди"метиламино-метипхинолин,-карбоксальдегида,(1 г) в диметкпсульфоксйде (2 мп) и смесь нагревают до 75 С, 55Через 2 5 мин анализ гаэожидкостнойФхроматографией (З 210 + 2 Х ОЧ 101,152 см колонка, 200 С) показал, чтовесь альдегид прореагировал. Продукт вливают в воду и затем экстра 1424732гируют этилацетатом, Органическийслой промывают водой, сушат над сульфатом магния и затем упаривают подвакуумом, получая 2-(8-диметиламино-метилхинолин-илметил)-3-морфолиноакрилонитрил (1,3 г) в видесветло-коричневого твердого вещества, которое перекристаллиэовывают иэ изопропанола.6 ОМН) Н ЯИК (СЭС 1 ); 2 55 (ЗН,Б. -СН,) 3,1 (6 Н, Б, М/СН, );3,1-3,35 (4 Н, ш)-Я, 3,48 -(1 Н, Б, Н); 8,03-8,23 (1 Н, ш,Н-З);8)8-9)6 (1 Н) ш, Н).ИК (п ш)см : 2185, 1660,1240, 1120,Б. Продукт по примеру 6 А (0,3 г),гуаиидин карбонат (0,313 г) и диметилсульфоксид (0,6 мл) вместе наОгревают на масляной бане при 180 Св течение 1 ч. Смесь затем охлалдаюти разделяют между водой и этилацетатом. Органический слой отделяют, сушат над сульфатом магния и концентрируют на силикагеле. Загружают полученный порошок в верх силикагельной колонки и элюируют хлороформомс последующим элюированием 53-нымметанолом в хлороформе, получая соединения в виде желтого твердого вещества (181 мг, 68)5 Х).6 оин) Н ЯИР (СОС 1): 2,48 (ЗН,(2 Н, ЬБ, -СН,-) е 5,74 (2 Н) ЬБ, МН);6,23 (2 Н, ВБ, МН)7,07-7,6 (ЗН,ш, Н); 6 (1 Н) ) 8,2 -8,5 (1 Н,ш, Н) ) 8) 74 -8,92 (1 Н, ш,Н) (ф Сигнал исчезает йосле до.бавления окиси дейтерия).Кристаллизация из 953-ного этанола, содержащего НС 1, дает дигидрохлорид соединения, т.пл250 -252 С (раэлож.) .Вычислено)Х: С 52,92; Н 5,88;М 21,78; С 1 18,38,Сп НМь 2 ИС 1 ф 0,25 НОНайцено) й: С 52,77; Н 5,90;М 21) 74; С 1 18.22.(1,1 г) и диметилсульфоксида (0,4 мл)добавляют 297-ный метанольный раствор метилата натрия (5,2 мл) больше 6 мин. После перемешивания прикомнатной температуре в течение 17 ч,добавляют метанол (6 мл) и гидрохлорид гуанидина (2,1 г), смесь затемнагревают с обратным холодильникомв течение 5 ч. Растворитель выпаривают с помощью паровой бани при140 С в течение более 30 мин, Выделенный растворитель вновь добавляют к остатку и это нагревают еще в 1015,20 ляют между дихлорметаном (100 кп) и 0,5 н. гидроокисью натрия (50 мл);органический слой промывают водой (100 мп сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют, получая 0,61 г (743) 8-метоксихинолин-карбоксальдегида, т.пл. 121-122 С после перекристаллизации иэ смеси этаноп " гексан (2:25). Н 4)85) Вычислено,й: С 70,58;М 7,48.С Н,МО.,Найдено)Ж: С 70,55; Н 4,91; М 7,44.Б. 3-Анилино-(8-метокси-хинолилметил)акрилонитрил. 55 течение 30 мин. Суспензию охлаждаютдо 20 С и твердое вещество отфильт ровывают, промывают метанолом(2 мп) и водой (Зх 50 мл), затем су 25 шат в вакууме при 80 С. Получаюттвердое вещество желтого цвета(1,58 г, 443) ) 2,4-диамино-(8-диметиламино-метил-хинолинметил)пиримидин, т.пл. 221-225 С.30 Пример 6,А. 8-Иетоксихинолин-карбоксальдегид.К раствору 0,76 г (4,39 ммоль)8-оксихинолин-карбоксальдегида в5 мл диметилсульфоксида добавляют0,24 г (4,4 ммоль) метилата натрия,выдерживая смесь в атмосфере азота,После перемешивания в течение 5 миндобавляют 0,56 г (4,4 ммоль) диме 40 тилсульфата., Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч и растворительудаляют под вакуумом. Остаток разде"Проведены биологические испытания, полученных в условиях описыва - емого способа производных пиримидина. Установлено, что эти соединенияотносятся к категории малотоксичных(Ы,внутрибрюшинно мышам 500 -610 мг/кг). 55 В табл.1 показана антибактериальная активность испытуемых соединений. Продукт по примеру 1 А (0,11 г,3,79 ммопь) растворяют в 2 мл диметилсульфоксида вместе с 3-анилинопропионитрилом. 0,21 г (3,89 ммоль)метипата натрия добавляют к этомураствору, нагревают при 130 С в течение 15 мин, после чего охлДждают иразбавляют смесью вода - этанол 8:1,Полученный твердый продукт вьщеляют, экстрагируют кипящим этилацетатом и снова выделяют. Получают 0,28 г(237) 3-анилино-(8-метокси-хинолилметил)акрилонитрила. Дополнительные 0,26 г (227) получают изфильтрата путем хроматографированияна силикагеле.В. 2,4-Диамино-(8-метокси-хинолилметил)пиримидин-дигидрохлорид. 20К 10 мл этанольного растворагуанидина, полученного из 0,20 г(2,1 ммоль) гуанидингидрохлорида и0,12 г (2,2 ммоль) метилата натрия,добавляют 0,52 г (1,65 ммоль) 3-анилино-(8-метокси-хинолилметил)акрилонитрила, Раствор нагревают с обратным холодильником в течение 0,5 ч,а затем добавляют 5 мп 2-метоксиэта-циола, Температура внутри реактораопостепенно повышается до 120 С путем перегонки этанола, прсле чегоего нагревают при этой температурев течение 1,5 ч. Затем горячую смесьотфильтровывают, а полученный осадок(0,19 г, 413 неочищенного продукта)перекристаллизовывают из 953-ногоэтанола в присутствии соляной кислоты, в результате чего получают дигицрохлорид 2 4-диамино-(8-метокси"40.Таблица 1 Средняя эФфективная доза по отношению к бактериям Б.ацгецз СН 491 у мышей (мг/кг - эквивалент основания) Соединение по примеру 1,2,3 6,5 ф 0,7 4,7 ф 0,8 4, 5 Триметоприм 27,7+2,1 П р и м е ч а и и е. Соединениявводят мьппам в водном растворев виде принудительного кормачерез 1 и 6 ч после внутрибрюшинного заракения бактериямиБ.ацгецз Р 370 в количестве100 х среднюю леталъную дозу. Проведенные испытания показали, что соединения, полученные по предла. гаемому способу, имеют более низкую эффективную дозу в сравнении с триметопримом (в 4-6 раз).Проведено сравнение триметоприма (ТМП) и 2,4-диамино-(7,8-диметокси Н-бензопиран-илметил)пиримидином (соединение по примеру 1) при экспериментальном сальмонеллезе у телят.26 трехнедельным телятам орально ввели дозы культуры За 1 шопе 11 а ОцЬ 1 дп по способу, который вызывает симптомы, близкие к встречающемуся в естествЕнных условиях острому сальмонеллезу у телят, со степенью смертности около 903, Телят разделили на четыре группы, в каждой по 6-1 телят. Через два дня после инфицирования и до 5 консервативных дней телятам в группах 1-3 вводили ежедневно инъекции сульфадиозина (СДЗ) плюс либо триметоприм (ТМП), либо соединение по примеру 1 в дозах, которые указаны в табл.2, в которой также приведены и результаты смертностиСДЗ даше при дозах 40 мг/кг/день не оказывает влияния на смертность при этом заболевании, поэтому низкая смертность в группах 1-3 связана с одновременным введением бензилпиримидина. В этом отношении соеди1424732 10 Таблица 2 Дневная доза, мг/кг Смертность Группа Количест Соединение СДЗ ТМП во телят по примеру1 20 2/7 1 20 О/6 0,5 20 3/7 6/6 и СК1 1 Н 2 СН-СН-СН(ОК,Н 2 де К - С,-С 4 К, - С,-С,-С -алкок 4 ди-(С,па; К елевои про ом виде и ПИИПИ Заказ 4699/58 ТиРаж 370 Подписнос Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 нение по примеру 1 в дозах 1 мг/кг(группа 2) превосходиФ ТМП в дозах1 мг/кг (группа 1). Телята в группе2 выздоравливали гораздо быстрее,чем телята в группе 1. Даже 0,5 мг/кгсоединения по примеру 1 (группа 3)привело к снижению смертности по Полученные результаты показали, что предлагаемые соединения малотоксичны, обладают в 4-6 раз более высокой антибактериальной активностью, чем триметоприм и, кроме того, значительно снижают смертность телят при заражении их сальмонеллезом. Формула изобретения Способ получения 2,4-диамино-(замещенных)пиримидинов общейформулы С-С 4-алкил илиси;С, -С 4-алкокси илС 4 -ал кил) ами ног сравнению с группой (ТМП, 1 мг/кг). Следовательно, соединение по примеру 1 приблизительно вдвое эффективнее ТМП для этого синдрома заболевания у телят.Результаты приведены в табл .2.(Х-У) - -0-СН- или -И=СН-, или их солей, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что гуанидин или его соль вводят во взаимодействие с соединением формулы 35 31Н 2 Х 9 где К К, и (Х-У) имеют укаэанные значения ал кил;алкокси анилино илиморфолино,кт выделяют в свободвиде соли.