Способ консервации микроорганизмов

САНИЕ ЕТЕНИЯ 07 ЗО Союз Советски 1 Гоциалистическик,Республик. ИДЕТЕЛЬСТВУ К АВТОРСКО свид-ву 2098242 13.01.75 (21 с присоединением заявки Ъс(23) ПриоритетОпубликовано 15.12,76. Бюллетеи хЪ 4 Гасударствениык комитет Совета Министров СССР по делам изобретенийи открытий 3) УДК 577.15,0. В, Патрикеев, О. В. Парина и С. И. Аксено сковский ордена Ленина и государственный унив 1) Заявитель(54) СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ МИ ГАНИЗМО,1 срода. Состав минеральной среды (г/л водороводпои воды): .хНН.РО 3; (МН 4) зНРО,0.5; КзЯО, 0,2; МдО., 0,2. Дрожжи проращивяют В колбах ия к 1 алках В течение 2-х су ток при 32 С. Зятем в колбы добавляют 150 -200 мл стерильных шариков пдрогеля силикагеля, который готовится из жид,Ого стекла с содержанием 04" соли железа, считая иа Ге 80. 7 НО. Колбы выдерживают в термо стате в течение 24 ч, затем рН доводят до 7 -8. Культгралшую жидкость сливают, шарики силикягеля с клетками дрожже Высш 1 Вя 10 т В эксикаторе при пониженном давлении в течение 5 - 6 суток. Хранение дрожжевых орга иизмов ОсуЩестВляют В запаянных Яъпуляхпри пошжеииом давлс 1 ип (100 мм рт. ст.).После храпения 200 мг шариков силикагеляизм сльчают 1 помеиья ют В 5 мл стерильной Водопроводной воды иа 12 ч. Зятем делают 20 посев в исходную жидкую минеральную среду,содсржац 1 ую 1-иый парафин. Сухие дрожжи остаются жизнеспособными в течение 3-х лет, причем сохраняется оптимум влажности в силикагеле (примерно 10 - 12 о). Клетки ие ут рячивают способности к окислению парафинапосле храпения.Процент выживаемости культуры Саиддш 11 е П 1 опд 1 в зависимости от добавления различных микроэлементов в исходную мине ряльиую среду или использование п 1 дрогеля яется икростаньтуру сляюпосев синте- параа угИзобретси 1 с относится к микробиологической и мсдицшской 1 рохыиЛенпости.Известен способ консервации микрооргаииз- мОВ, прсдусм;1 триВя 10 щий Высуциванне питательной среды с пдрогелем силикагеля (11.Недостатком известного способа явл сравнительно небольшой срок хранения м ОрЯииззОВ (О.О;О 2-х ле) .С целью удлинен;я сроков храпения микроорганизмов используют пдрогель силикагеля, содержяи;ий, по крайней мере, один микроэлемент, выбранный пз ряда Со, Хп, Мп, М, Мо, Гс, , при этокол:честно мкроэлемситов сс;тяьляет (мг аЛикагсля):Со 15 - 20Хп 10 - 20Мп 15 - 25Мо 30 - 40Мо 15 - 30с 20 - 4007 15 - 30Предложенный сяо;об поясняется следующими примера.и его ВьпОлисния.П р и м е р 1. Берут выращенную ия дартиом сусло-ягярс двухсуточную кул дрожжей (Сапс)11 ртц 111 сгпОпй), оки щуюглеводород 1 нефти. Делают 0,1 мл суспепзии роккевых клеток иа ти 1 сскуО минера. ьию среду с 1%-иы рииом В качеств; -дцС-,венного источ;ии рдена Трудового Красного Знамени итет им. М. В. ЛомоносоваСоставитель П. ЬонарЕЕев Те,:р л Ж. Семенов Редактор Г, МозисесЕкова Корректор О, Ткриис Заказ " 718 Изд. 54 Ъ 1854 Тираж 575 Подписное ЕИ 1 ИПИ Го ударствепного коЕитета Совета Министров СССР по лслам изобретений и сткрвтий 113035, Ъ 1 осЕсва, )1 С,-35, Ргуснская паб., л. 4/5(15 Гмгл) 47; ЛИ 804 НО (15 мг/;) 45;314 ЪОз (10 мг/л) 54; Ге 804711 зО (100 мг/л)73. 5П р и м с р 2. Бсрут Гулы ру дрожжейС. горЕсаЕЬ, окисляющую углеводороды нссрти. В процессе ЕриЕотовлси)я в едрогсль силиеагел 5 доояв;15 иот 20 ъ 1,л соли ваня "и В ВидеН.УОз. Выраи Нзаш:с культуры в ирису:стВии си;п 1 еаге;я с миероэлсментя 1 и и 1.ОсеВыНс 1 ВЫЖИВсСЪЕОСТЬ ПОС С Рсн 1 СИИ 5, 1:РОИЗВОД 5так, кае описано В ш)имсре 1. Сухие дрож)киостаются )есизнеспособньеъЕИ в течение 3-х лет,ГЕричеы сохран 51 етсЯ Оптимум Влажности,з силикагеле (примерно 10 - осо). Клетки не утрачивают способности к окислению пярафЕшапо истечении 3-х лет хранения.Процент выживаемости ку.ыуры С. 1 горЕсаз в зависимости от добавлешЕя различных 20миероэлементов в исходную минералыю среду или использовании гидрогеля силиеагеля,содер)кащего эти соли: МпЗО 4 КО (15 мг/л)4; СОС 1 г 6 НаО (15 мг/л) 73; Хп 8 О, НаО(15 мг,л) 69 НДОз ;15 мг,л) 73; 25ге 304 7 Н.О (100 Ъмг/л) 82,П р и м е р 3. Берут культуру бактерийВасцз шусоасз. В ращивянис культурыГРОИЗВОДЯТ ИО СТсНДЯРТИОй ЪЕТОДИЕС В М 51 СОпонтоеном бульоне (МПБ). Затем В культуральную жидкость вносят 150 - 200 ъ:л стерильных шариков гидрогеля силиеягел, и впроцессе приготовления добавляют 20 мг/г соли кобальта в Виде СОС 2 6 НО. Колбы Выдерживают г, термостате в течение 48 ч. КульТУРЯЛЫ 1 У 10 ЖИДЕСОС 1 Ь СЛИВЯЮТ, И 1 сРИЕИ СИЛИкагеля с клеткамбаетс)ИЙ высуиНвают в зксикяторе при понисснноъ давлении В течсЕние5 - 6 суток, Хранение осуществля 10 т в запаянных ампулах при онисенном дявлепЕИ 40(100 мм рт. ст.).После хранения 200 мг шариков сплиеагсляизмельчают и помешают В 3 - 5 мл стерильнойводопроьодиой воды на 12 ч. Зятем деллют посев в Гмясопсптонный бульон. Суие бяеЕери ЯЛЫЫЕ СЛЕТСИ ОСТЯЮТС 51 ЖЕ 13 ИЕСГ 10 СООИЫ)1 И В ТСЕСНГЕЕ 5 ЛЕТ, 1 ТО Вндио Из ИХ рОСТя Ис 1 15 СО- иситонном бульоне.ыжи В а сОсть еуг 1 ьтур ы 100 в .110 доОИЫС рСЗЪ ЛЬТЯТЫ ПОЛ сСНЕ Прп иесенин В питательную среду солей следующих микроэлементов: Мп 804 7 Н 20 25 мг/л;711804 7 НвО 20 мг,л; .Н.;ъОз 30 мг/л; Ге 80 НвО 400 мг,л.П р и м е р - Аналогичные результаты получснь: с культурой дро)кжей С. 1 роуса. Процеи Вы:киваемости культуры С. 1 роугСа в зависимост от добавления различных солей мироэлемеитов в исходную минеральную среду или иснользованш: п 1 дрогсля силикагсля, СадЕр)КащЕГО Эти СОЛИ: МЕ)с 50. 7 Н,О (15 МГ,Л) 40; СоС 1, 6 Н 20 (15 мг/л) 60; ,НЛОз (15 мг 1) 100; Ге 804 НО (100 мг/л) 78.Прсдлагяс)яый сиосэб позволяет уьслич 1 ть СРОЕС ХРЯИЕИИЯ СУИХ ЫИКРООРГсзНЗЫОВ, НЯПРИ- мер родов СансГя, ЕМусососсгэ, Ве)сГ 3 до 3 - 5 лет,Способ консервации микроор;анизмов, пред, съЕят;)ив;юиЕИЙ Выс)Ниваиие ИЕЕтятсльиой среды с гидрогелем силикагеля, о т л 11 ч а юи и й с я тем, что, с целью удлш:ения сроков ранен:Ея, используют ПЕдрогсль силиеягсля, содсржяшяй ио еряйнсй мсрс оди ми 1 роэлсмеит, Выбранный из ряда Со, сн, Мп, Мст, Мо, Гсе, Ъс. ПРИ ЭТОМ КОЛИЧЕСТВО МИКРОЭЛЕМЕитОВ составлет (мг/л силикагеля):Со 15 - 207.п 10 - 20Ми 15 25сЕМ о 30 - 40Мо 15 - 30Етс 20 - 400ч 15 - 30ИстОНЕик иес)Оръ.яции, 1 ерииятый ВО Веимяис при экспертизе:1. Лвторсеое свидетельство Е 13 227279, М. Кл.а С 12 С 11,32, 1968.