Способ получения полинуклеотидов

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ н 11 46927 Союз Советских Социалистических Республик61) Зависимое от авт. свидетельства22) Заявлено 26.07.73 (21) 195454023-4 7 д 51 5 ем заявки Ьге с присоедине 32) ПриоритеОпубликовано УДК 547,963.32(088.8) 5, Бюллетень8 ата опубликования описания 26.09.75У. Я. Микстайс и И. Р. Чакстеилиал Всесоюзного ордена Трудового Красного 3 сследовательского института химических реактивои особо чистых химических веществ мен ПО УКЛ ЕОТИД ОЛУЧЕНИЯ ет с соо полуетение усовершенству плинуклеотидов.тен способ получения полм химической полимеризафатов в присутствии разлиих агентов, например дициимида.ью обеспечения высокой п ционнои способпредложено возидфос фатовнуклеозидмоносцию проводитьствии оспованиСогласно наосуществляют и инуклеотиции нуклечных акти- клогексилмеризац- Р - ОН1С 1 1 МВ оно - г - он с 2 НзО ) зОН- Р=Оон,с/НО - Р=О ОН С О НО Гасударственный комитет Совета Министров СССР ло делам изобретенийи открытий Изобр чения по Извес дов пут озидфос вирующ карбоди С целности и упрощения процесса качестве производных нуклеиспользовать хлорапгидриды форпых кислот и полимеризапреимущественно в присут- ", например третичных аминов, тоящему изобретению способ о следующей схеме:461927 нВ, - всгнь)ы и ) НСЮ О Предмет изобретения 40 45 50 Составитель Е, СоколоваТехред О, Гуменюк Редактор Е. Дайн Корректоры: Л. Денискииа и И. Позняковская Заказ 2086/4 Изд. Мо 1250 Тираж 530 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 где Х обозначает хлор, водород; 1 - водород, оксигруппа; В - гетероциклическое основание; М - метилморфолин,В качестве исходных веществ можно использовать как моно-, так и дихлорангидриды нуклеозидмонофосфорных кислот.Преимущество применения хлорангидридов и в том, что они лучше растворяются в органических растворителях. В отличие от известных способов при проведении процесса с дихлорангидридами реакция не слишком чувствительна к небольшим количествам воды, так как при взаимодействии дихлорангидрида с молярным количеством воды образуется также реакционноспособный монохлорангидрид.Третичные амины являются акцепторами выделяющегося хлористого водорода и активаторами хлора в хлорангидридах, они не вызывают побочных реакций.П р и м е р 1, 4,01 г (10 мм) дихлорангидрида гуанозин-монофосфорной кислоты, полученного при хлорфосфорилирювании гуанозина, растворяют в 18 мл триметилфосфата. К раствору добавляют 0,018 мл (10 мм) воды и смесь перемешивают 3 час при комнатной температуре. К раствору монохлорангидрида гуанозин-монофосфорной кислоты при комнатной температуре добавляют 0,5 мл триэтиламина. Через час смесь обрабатывают 50 мл эфира. Осадок растворяют в 20 мл воды и переосаждают 200 мл спирта.Продукт исследован методами бумажной и ионообменной хроматографий и электрофореза на бумаге. Анализ данных показывает наличие полинуклеотидов различной степени полимеризации. Наличие фосфодиэфирных связей доказано также методом электрометрического титрования.Пример 2. 3,62 г (10 мм) дихлорангидрида уридин-монофосфорной кислоты, полученного при фосфорилировании уридина, рас 5 10 15 20 25 30 35 творяют в 15 мл триметилфосфата, раствор охлаждают до 5 С и при этой температуре добавляют 0,5 мл пиридина, оставляют час при комнатной температуре, Смесь обрабатывают 100 мл эфира, осадок растворяют в 15 мл воды, добавляют 1 мл 2 и, раствора гидроокиси натрия и переосаждают 300 мл спирта,Продукт исследуют, как описано в примере 1. Анализ данных показывает наличие полинуклеотидов различной степени полимеризации.П р и м е р 3, 3,85 г (10 мм) дихлорангидрида дезоксигуанозин-монофосфорной кислоты, полученной при фосфорилировании дезоксигуанозина, растворяют в 11 мл триметилфосфата, раствор охлаждают до 10 С и прн этой температуре добавляют 0,5 мл триэтиламина. Через час смесь обрабатывают 100 мл эфира. Осадок растворяют в 10 мл воды и переосаждают 300 мл спирта.Продукт исследован, как описано в примере 1, Анализ данных показывает наличие полинуклеотидов различной степени полимеризации.П р и м е р 4. 3,67 г (10 мм) монохлорангидрида дезоксигуанозин-монофосфорной кислоты растворяют в 11 мл триметилфосфата, раствор охлаждают до 10 С мл эфира. Осадок растворяют в 10 мл воды и обрабатывают 100 мл эфира. Осадок растворяют в 10 мл воды и переосаждают 300 мл спирта.Продукт исследован как описано в примере 1. Анализ данных показывает наличие полинуклеотидов различной степени полимеризации. 1. Способ получения полинуклеотидов путем химической полимеризации производных нуклеозидфосфатов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью обеспечения высокой полимеризационной способности и упрощения процесса, в качестве производных пуклеозидфосфатов применяют хлорангидриды нуклеозидмонофосфорных кислот.2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что полимеризацию проводят в присутствии оснований, например третичных аминов,