Способ получения производных метилендифосфоновой кислоты

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК Ю И 4 С 07 Р 9/38, 9/4п 1 Р ф ИСАНИЕ ИЗОБРЕ И АТЕ Х=О, )ИИ, Я Н и 0-10, п=О ридило = 0 и галоген, и - цело и условии, что при не может быть мет или при К, = СН ил 3 не может быть фенилчисл - Н К), Ксав арсиа (Р ом ил ом илОСКнилом: замещены СУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРО делАм изОБРетений и ОтнРытии(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХМЕТИЛЕНДИФОСФОНОВОЙ КИСЛОТЫ(57) Изобретение касается фосфорорганической химии, в частности получе,ния производных метилендифосфоновойкислоты (МФК) общей формулы 1.(К,О) К(О)-СНК-К(0) (ОК,),где К= (СН,)ЯК ; К = Н, прямой или разветвленный С, -С-алкил; К -алкил, не- илизамещенный: а) ОН, ЯН, одним или несколькими галогенами, алкоксикарбонилом; б) И 2,2; 2, и 2-независимы ипредставляют Н, низший алкил, фенил,не- или замещенный одним или несколькими атомами галогена, НО, низшималкилом, низшим алкоксилом, СР, МН,С(0)ОН, С(О)О - алкил; в) С(Х)112, 2,Х = 0 или Я, или вместе с азотом5-.или 6-тичленный гетероцикл, содержащий один или два гетероатомаазота и/или серы, гетероцикл: где Ц - галоген, МО , СР , которые обладают противоревматической и противовоспалительной активностью и могут быть использованы в медицине. Цель - разработка способа получения новых активных веществ указанного класса. Синтез МФК ведут из тетраалкилового эфира метилендифосфоновой кислоты и гидрида натрия в среде толуола и/или диметилформамида при 15- ф,а 25 С с последующей обработкой полу- (д ченного продукта сульфидом "К -Я(СН )-.в .7, или дисульфидом -К-Я-Я-К, где К и и - указаны выше; У - галоген, 2о при температуре от 20 С до точки кипения реакционной смеси. Выделение целевого продукта ведут в виде эфира, который при необходимости может быть переведен омыпением в кислоту. Новые МФК оказывают ингибирующее дей" ствие на секреции нейтральных протеи- ,фЬ наз стимулированными хондроцитами ( , до 992, а также на артриты и ревматоидные полиартриты до 557. 6 табл.18 1333240 Таблица 3 НО И 11 ОНО ОфР - СН - РНО (снОН7. ЬБ1Ъ Рабочие условия Выделенный про -- цуктем гидролиз: конли центрация НС 1и длительност Кодовый номер и замещение: тпература и дтельность свободная кислота, т.пл. 300 С бн.НС 1,12 ч 20 С, 24 4126 И. ИН К 41388 Он.НС 1, 12 20 С,сво дная кисло.пл,272 Сталлизуетта,(СН ) 4155 а бл 4 НО одовый номер дролиз, концент ция НС 1 и дли- ельность еленный продуктБВ, 41908 12 н,НС 1, 16 ч БК 41960 БК 42249 бн. НС 1, 12 ч ЯК 41959 С 16 / С БК 42143 Таблица 5 вый номеукта Кодовый номер Культивировапродукта ный хондроци22 21 1333240 Продолжение табл 5 9812 ЯК 41388 90 ф 1 БК 41960 82+ 2 5514 90+3 97+1 94+ 1 92+4 89+ 2 79+ 2 Этидронат натрия 3 ЯК 41625 92 ФО Таблица 6 БК 41036 ЯК 41100 БК 41421 БК 4145 БК 4145 ЯК 4126 25 58 41552 42 41 К 41689 БК 41319 ЯК 41549 34 БК 4148 ЯК 4168 ЯК 4195 38 идронат натрия 10 БК 41341 ЯК 41456 БК 41908 БК 41689 ЯК 41688 ЗК 41549 Кодовый номерпродукта БК 41344 БК 41388 БК 41482 ЯК 41690 БК 41688 БК 41480 БК 41342 Артриты привспомогательном средстве,вес лапы, Еингибирования БК 41690 БК 42249 БК 41687 БК 41959 Кодовый номепродукта ЯК 41319 ЯК 41452 ЯК 41272БК 41179 БК 41264 ЯК 41263 БК 41273 Артрит привспомогательном средстве,вес лапы, 2ингибированияВ 1 ОРОо сн оЗБ 10 где К, - водород, линейный или разветвленный низший алкил С,-СК - алкил, который может быть15 замещен гидроксильной или тиольной группой, одним или несколькими атомами галогена, алкоксикарбонильной груп пой или группой 7Г"2где ги г - независимо друг от друга водород, низший алкил, фенил, который может быть замещен одним или несколькими атомами галогена, нит рогруппой, низшей алкильной или низшей алкоксильной группой, трифторметилом, -ИН, -СООН или - СОО - алкил группами; 30 группа Х г где Х - кислород или сера;г, и г - имеют указанные значения;5- или 6-ти членный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, выбранных из азота и серы; 5-ти член -ный гетероцикл, конденсированный сбензольным кольцом и имеющий формулу( уЕ где Х - кислород, группа ИН или сера,К - водород или галоген;и - целое число от О до 10,при условии, что при К -водород ии = О, К - не является метильной или 50пиридильной группами, при К, -метилили этил, п = О, К - не является фенилом или замещенным Фенилом формулы ОСНЗ1 где- галоген, нитро- или трифторметильная группа,13332Изобретение относится к химии фосфорорганических соединений с С-Р связью, а именно к способу получения новых производных метилендифосфоновой кислоты общей формулы5 40 2Производные метилендифосфоновойкислоты формулы (1) обладают противоревматической и противовоспалительной активностью и могут найти применение в медицине,Целью изобретения является разработка способа получения новых производных метилендифосфоновой кислоты,которые проявляют противоревматичес"кую и противовоспалительную активность.П р и м е р 1. Тетраметил-бензоксазолилтиометилендифосфонат, К В смесь 24 г тетраметилметилендифосфоната и 50 мл диметилформамидадобавляют в атмосфере азота и приО15 С 2,5 г гидрида натрия. Выцержиовают смесь при перемешивании при 15 Св течение 1 ч, затем добавляют при20 С 44 г 2-дибензоксазолилдисульфиоода. Продолжают перемешивание при 25 Св течение 68 ч, затем выпаривают диометилформамид при 20 С под вакуумом,Остаток, растворенный в метиленхлориде, хроматографируют на колонке с500 г двуокиси кремния,Элюируя метиленхлоридом, удаляютнепрореагировавшие исходные продукты,затем, элюируя смесью метиленхлоридас этанолом 96:4 (по объему), получают загрязненный целевой продукт,Очищают путем нового хроматографирования на 160 г двуокиси кремния,С помощью смеси метиленхлорида и этанола 97;3 (по обьему) получают продукт, который кристаллизуется приоохлаждении раствора до 0 С, т,пл7678 С.Работая таким же образом со сложным тетраизопропиловым эфиром метилендифосфоновой кислоты и изменяяиспользуемый дисульфид, получают различные сложные эфиры, представленныев табл, 1,Условия синтеза и физические характеристики прсизводных метилендиФосфоновой кислоты представлены втабл. 1.П р и м е р 2, Тетраизопропилфенилтио,1-бутилендифосфонат (БК 41341),з 13332Получают натриевое производное тетраизопропилметилендифосфоната (34,4 г) как в примере 1, затем добавляют 28,7 г 1-.бром-З-фенилтиоо .5 пропана и нагревают при 100 Св течение 1 ч.Растворитель выпаривают досуха под вакуумом, затем остаток растворяют в 500 мл воды и экстрагируют ме. тиленхлоридом, Отделяют органическую фазу, сушат над сульфатом натрия и растворитель выпаривают под вакуумом. Остаток нагревают при 130 С под вакуумом для удаления леотучих продуктов, затем хроматографируют на колонке с силикагелем, элюируя смесью хлороформа и метанола 99:1 (по объему).Таким образом, получают масло (23 г), которое очищают снова путем хроматографии на силикагеле с помощью той же системы растворителей, Путем тонкослойной хроматографии на двуокиси кремния с помощью системы 25 растворителей бутанони воды 95:5 (по объему), получают пятно с К0,57.П р и м е р 3, Тетраизопропил-ноктилтиометилендифосфонат (БК) я 1 -- Сц". 0 Кг (СН 2)7 "3СН: - -сСН 1Работают согласно примеру 1, используя в качестве растворителя смесь З 5 безводного толуола с диметилформамидом.После нагревания в течение 16 ч при 100 С путем такой же обработки получают целевой продукт в виде мас ла, характеризующийся согласно тонкослойной хроматографии на двуокиси кремния в системе растворителей этилацетата и этанола 8:2 (по объему), К = 0,65, 45Точно так же, заменяя диоктилдисульфид эквивалентным количеством ди-итолилдисульфида, получают тетраизопропил-и толилтиометилендифосфонат (ЯК), масло, характерйзующее ся путем тонкослойной хроматографии на двуокиси кремния с помощью системы растворителей этилацетата и этанола 8:2 (по объему), К, равным0,57.55Точно так же с ди(3-трифторметилфенил)дисульфидом получают тетраизопропил(3-трифторметилфенилтио)метилендифосфонат, К = 0,51, (при соот 404ношении этилацетата и этанола 95:5(по объему) (БК)Наконец, используя ди(3-трифторметил-нитро-фенил)дисульфид, получают точно так же тетраизопропил (3- трифторметил-нитро-фенилтио)мети.- лендифосфонат, К = 0,51, при соотношении этилацетата и этанола 95:5 (по объему), БК 42247,П р и м е р 4. Тетраизопропил-(4-нитрофенилтио)-1,1-гептилидендифосфонат (БК), СНЗр,: с 3снзи=6, К=Н В БО - ь 3 ф 2 2 К раствору 27 г тетраизопропилметилендифосфоната в 200 мл толуола.порциями добавляют 3,8 г 507-нойсуспензии гидрида натрия в масле,После окончания добавления оставляют1 ч перемешиваться, затем добавляют27 г 1-(4-нитро-фенилтио)-6-бромгексана и нагревают в течение 3 ч при80 С.Выпаривают досуха под вакуумом иостаток растворяют в гексане. Растворпромывают два раза водой, затем сушат над сульфатом натрия. Растворитель выпаривают досуха и остаток хроматографируют на колонке с двуокисьюкремния, элюируя смесью метиленхлорид:метанол 98;2 (по объему), Такимобразом, получают 8,5 г масла, характеризующегося путем тонкослойнойхроматографии на.двуокиси кремнияс помощью системы растворителей этилацетата и этанола 95:5 (по объему),К, равном 0,37.Поступая таким же образом, ноизменяя используемое бромсодержащеепроизводное, получают:тетраизопропил-(4-метоксифенилтио)-1, 1-гептилидендифосфонат (БК42306) , К 0,37 этилацетат;этанол95:5, по объему),тетраизопропил(4-хлорфенилтио)- 1,1-гептилидендифосфонат (ЯК 4 1964),К 0,37(этилацетат:этанол, 95:5, пообъему);тетраизопропил-(3,4-дихлорфенилтио)-1, 1-гептилидендифосфонат (БК42146), К .0,37 (этилацетат.этанол95:5, по объему);тетраизопропил-(4-хлорфенилтио)1,1-ундецилидендифосфонат (ЯК 42145),К-О,З (этилацетат:этанол 95:5, пообъему) .(3-фенил-пропилтио)метилидендифосфонат (БК 4 1907),РВ течение 20 ч при 25 С перемеши 5вают смесь 29,2 г тетраизопропилметилиденфосфоната, 80 мл толуола, 11,2 гпоташа и 23,2 г (3-фенил-пропил)дисульфида.Смесь промывают пять раз 50 мл воды, затем сушат раствор над сульфатомнатрия и выпаривают досуха под вакуумом,Получают масло, хроматографируемоена колонке с 500 г двуокиси кремния.После удаления элюированных метиленхлоридом примесей путем элюированиясмесью метиленхлорида с этанолом95:5 (по объему) получают целевой продукт (11,2 г), хроматографируемой натонком слое двуокиси кремния: К0,5 (этилацетат:этанол 95:5, по объ.ему), Точно таким же образом, но ис.пользуя ди(2-метокси-токсикарбонилэтил)дисульфид, получают тетраизопро- .пил(2-метоксикарбонилэтилтио)метилендифосфонат (БК 42250), К 0,37 (этилацетат:этанол 95:5, по объему).1П р и м е р б. Тетраэтил(Б,И-диэтилтиокарбамоилтио)-метилендифосфо- ЗОнат (БК 41905) .Работают, как в примере 3, исходяиз тетраэтилметилендифосфоната и бис(диэтилтиокарбамоил)дисульфида. Точно таким же образом получают маслос К 0,5 (этилацетат:этанол 8:2, пообъему), при тонкослойной хроматографии на двуокиси кремнияП р и м е р , Тетраизопропил(БК 42327),оПри 25 С и в атмосфере азота перемешивают смесь 16 г тетраизопропилметилендифосфоната и 1,05 г гидрида натрия. Спустя 1 ч добавляют а 510 мл перфторгексилсульфенилхлорида.Температура спонтанно повышается до80 С, Выдерживают 3 ч при этой температуре, затем смесь выливают в50 мл воды и экстрагируют эфиром,Растворитель выпаривают и остатокрастворяют в 100 мп гексана. Раствор промывают 5 раз 100 мл воды, затем сушат раствор и концентрируютдосуха под вакуумом. Г 5, Остаток хроматографируют на колонке с двуокисью кремния. Непрореагировавшие продукты удаляют метиленхлоридом, затем элюируют целевой продукт смесью метиленхлорида с этанолом 97;3 (по объему), Продукт получается в виде масла К 0,60 (этилацетат:этанол, 95:5, йо объему).П р и м е р 8. Три(трет-бутиламин)метилтиометилендифосфонат (БК 41036), К, = Н, и = О, К = СНВ смесь 8,8 г тетраизопропилметилендифосфоната и 25 мл толуолаопри 0 С добавляют 0,65 г гидрида натрия, затем перемешивают в течение 1 ч при 15 С. Добавляют 25 мл диметило дисульфида, затем нагревают при 60 С в течение 24 чКонцентрируют досуха под вакуумом, затем остаток растворяют в 250 мл диизопропилового эфира, Отфильтровывают нерастворимую часть и концентрируют досуха, Хроматографируют на колонке с окисью алюминия (150 г), Элюируют сначала диизопропиловым эфиром для удаления примесей, затем метиленхлоридом, извлекающим целевой продукт.Кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч 3 г вышеполученного сложного эфира в 12 мл водного 6 н, раствора НС 1. Раствор промывают три раза 30 мл пентана, затем обесцвечивают водную фазу активным углем и концентрируют под вакуумом досуха,Таким образом, полученную сырую кислоту превращают в соль, добавляя к ней 2,4 г трет-бутиламина в 200,мл кипящего абсолютного этанолаПосле охлаждения получают тритетрабутиламинную соль в виде бесцветногого твердого вещества, т,пл. 212 СТочно таким же образом, изменяя используемые дисульфиды, получают кислоты (1), представленные в табл.2,Условия синтеза и Физические характеристики производных метилендифосфоновой кислоты представлены в табл, 2.П р и м е р 9, Ди-(трет-бутиламин) -(4-хлорфенил) тиометилендифосфонат (БК 4 1319), К = Н; и = 0;в=-лРаботают как описано в примере 4, заменяя в качестве растворителя толуол диметилформамидом.Для осуществления замещения эфир метилендифосфоновой кислоты нагрео вают с дисульфидом при 25 С в течение б ч, Выделяют сложный эфир как указано в примере 4, затем превращают в соль с 12 н,НС 1 в течение 18 ч,71333Таким же образом получают кислоту, которую превращают в ди-трет-бутиламинную соль, как указано в примере 4," т.пл. 253 С (разложение).Условия синтеза и физические характеристики производных метилендифосфоновой кислоты представлены втабл. 3.П р и м е р 10. Трет-бутиламин,З-метилтио,1-пропилидендифосфонат(БК 41273) К, = Н, и = 2,Работают как в примере 4, заменяядисульфид 1-бром-метилтиоэтаном.После нагревания в течение 20 ч при30 С, выделяют сложный эфир, затемего гидролизуют как указано в примере 4 с помощью 8 н,НС 1 при кипячении с обратным холодильником.Наконец, кислоту превращают в соль 2воздействием на нее трет-бутиламина,т.пл. 212-214 С.П р и.м е р 11, Ди-(трет-бутиламин)-4-фенилтиобутилидендифосфонат(БК 41342), К = Н; п = 3; Ц - /25Кипятят с обратным холодильником втечение 7 ч раствор 5 г сложного эфира БК 41341 (пример 1) в 18 мл 6 н,НС 1, Выпаривают досуха и остатокрастворяют в 25 мл воды. Отсасываюти осадок высушивают и перекристаллизуют из ацетонитрила, затем пре: вращают в соль с трет-бутиламином,т.пл. 223 С.Точно таким же образом, изменяяисходный сложный эфир, получают продукты, представленные в табл, 4,ЬУсловия синтеза и Физические характеристики производных метилендифосфоновой кислоты представленыв табл. 4,П р и м е р 12, Ионоаммониеваясоль гексадецилтиометилендифосфоновой кислоты (БК 41453), К, = Н, п =45= О, К, = -(СН,),. -СН,.Работают согласно способу примера4, но в качестве растворителя используют смесь толуола с диметилформамидом 40:2 (по объему). 50оПосле нагревания при 100 С в течение 20 ч получают соответствующийсложный эфир, который гидролизуюткипячением с обратным холодильникомв течение 15 ч с 12 н. НС 1. Сыраякислота, растворенная в аммиаке, даетомоноаммониевую соль, т.пл, 103-110 С.Точно таким же образом, изменяяиспользуемый дисульфид, получают де 240 8цилтиометилендифосфоновую кислоту,выделяемую в виде ди-трет-бутиламинной соли (БК 4 1457), т.пл. 170-175 С.П р и м е р 13. Ди(трет-бутиламин)-(2-окси-этилтио)-метилендифосфонат (БК 41318), К, = Н, и = О, КНО-СНеСН в .При 70 С в течение 1 мин нагревают смесь 35 г ди-(2-оксиэтил)дисульфида, 80 мл 3,4-дигидроН-пирана и0,1 г п-толуолсульфокислоты,оОхлаждают до 40 С и в течение10 мин перемешивают. Выливают в200 мп воды и экстрагируют эфиром,Эфирный раствор высушивают и выпаривают растворитель досуха с получением71 г дисульфида, содержащего двеспиртовые функции, блокированные вформе простого 3,4-дигидрон-пиранилового эфира.Осуществляют конденсацию вьппеуказанного дисульфида с тетраизопропилметилендифосфонатом согласно приРомеру 5, поддерживая температуру 20 Св течение 3-х ч.Полученный продукт (18 г) растворяют в 150 мл метанола и добавляют2 мл концентрированной соляной кислоты. Кипятят с обратным холодильникомв течение 1 ч, затем концентрируютметанол и выпивают в 200 мл воды.Экстрагируют 2 раза метиленхлоридом,раствор высушивают и концентрируютдосуха. Таким образом, получают 13 гсложного эфира, защитные группы которого удалены.Сложный эфир превращают в солькак описано в примере 4 путем кипячения с обратным холодильником с 6 н,НС 1 в течение 16 ч.Таким образом, полученная кислота,обработанная трет-бутиламином в эта- "ноле, дает дисоль (БК 41318), т.пл.168 С,П р и м е р 14. Три-(трет-бутиламин)-2-бензотиазолилтиометилендифосфонат (БК 4148 1), К = Н, иО,Ди(2-бензотиаэолил)дисульфид.К раствору 30 г 2-меркаптобензотиаэола и 1,6 г гидроксида натрия в 800 мп абсолютного этанола прикапы" вают раствор 20 г иода и 115 г иодида калия в 400 мл воды. По окончании добавления перемешивают 30 мин при комнатной температуре, затем отсасы010и их фармакологические свойства подчеркиваются следующим образом.Изучение .п ч 1 го.Изучение ючдго основано на томфакте, что культивированные хондроциты выделяют нейтральные протеиназыпосле стимуляции фактором, синтезированным перитонеальными макрофагами и мононуклеарными клетками крови,Привлечение этого типа стимуляциив ревматические заболевания широкоизвестно.. Принцип теста заключается в изучении секреции нейтральных протеиназстимулированными хондроцитами, обработанными продуктами, по сравнениюс секрецией необработанных стимулированных хондроцитов.Используют следующий ход теста.Приготовление хондроцитов.Хондроциты выделяют из хряща носовой перегородки теленка или межсуставного хряща кролика путем ферментативного переваривания и культивируют в питательной среде ДМЕМ с107 телячьей сыворотки, при плотности клеток 5 х 10 на чашку Петри, размером 10 см. Среда для культивирования обновляется все 48 ч.Спустя неделю после культивирова-,ния клетки субкультивируют обработкой трипсином ЕДТА. Клетки снова помещают для культивирования в средуДМЕМ с 107. сыворотки зародышевоготеленка, при плотности клеток 2 х 10точками размером 16 мм, Слив реализуют спустя 3 дня культивирования.Перитонеальные макрофаги кроликаполучают согласно известному методу,Мононуклеарные:летки человеческой крови готовят и культивируют согласно способу ДАУЕР.После культивирования содержащую."хондроцит стимулирующий фактор"среду рекуперируют, фильтруют нафильтре с размером пор 0,22 мк и замораживают при -20 С.Стимулирование хондроцитов.При слиянии культуральная средахондроцитов нагружается средой ДМЕМс 1 Е сыворотки зародышевого теленка,содержащей 203 среды, содержащей фактор активации хондроцитов,Испытуемые продукты вводятся вкультуральную среду в то же самоевремя, что и среда активации, приконцентрации, при которой избегаютпитотоксичности продукта или его не 9 133324вают осадоК, который промывают этано.лом, затем сложным эфиром. После высушивания получают 28 г дисульфида,т,пл. 174 С.Конденсируют вышеполученный дисульфид с тетраметилметилендифосфонатом согласно примеру 5 (нагревание2 ч при 20 С).К раствору 6,5 г вышеполученного.тетраметилового эфира в 80 мл четйреххлористого углерода добавляют вьатмосфере азота при температуре 10 Смл триметилсилилбромида и перемешивают 30 мин при этой температуре.Добавляют 10 мл воды, отделяютводную фазу и промывают ее эфиром.После выпаривания водной фазы получают 4 г целевой кислоты, ее превращают в трисоль путем воздействиятрет-бутиламина в этаноле, т.пл. 202204 С.Точно таким же образом, используяди(2-тиенил)дисульфид, получают 2 тиенилтиометилендифосфоновую кислоту,выделяемую в виде три-трет-бутиламинной соли, кристаллизующейся с двумямолекулами воды (БК 41549), т,пл.210 С.П р и м е р 15. Ди(трет-бутиламин)7-(1-метил-имидазолилтио) - 1,1-гептилидендифосфонат (БК 42 132) .Тетраизопропил-бром,1-гептилидендифосфонат получают, используя1,6-дибромгексан.оНагревают при 80 С в течение 2 чраствор 10 г предыдущего бромированного производного, 2 г 2-меркаптометилимидазола и 0,8 г гидроксиданатрия в 50 мл этанола.40Выпаривают досуха, остаток растворяют в воде и экстрагируют эфиром.Промывают раствор Зн,раствором гидроксида натрия, затем водой. Растворвысушивают над сульфатом натрия и выпаривают досуха.Хроматографируют на колонке сдвуокисью кремния, элюируя смесьюметиленхлорида с метанолом, 98-2,по объему, Таким образом получают4 г целевого сложного эфира,50Гидролизуют с помощью 12 н, НС 1 пу"- тем кипячения с обратным холодильником в течение 16 ч. Целевое соединение выделяют в виде ди-трет-бутиламинной соли, т.пл. 158-162 С.о551Соединения предпочтительно используются в качестве противовоспалительных и противоревматических лекарствгде 2 и 2 - независимо друг от друФ 450 га водород,низший алкил, фенил, который может быть замещеи однимили несколькими атома 1ми галогена, нитрогруппой, низшей алкильной или низшей алкоксильной группой, трифтормети" лом - ИН -СООН илиЭ д Ф-СОО - алкил группами; растворимости. Спустя 3 дня культивирования, среду рекуперируют с цельюопределения в ней содержания нейтральных протеиназ.Полученные с различными продуктами результаты представлены в табл.5(выражены в Х ингибирования секрециинейтральных протеиназ стимулированны-.ми хондроцитами, обработанными иссле дуемыми продуктами, по сравнениюс таковой стимулированных хондроцитов, не обработанных продуктами).Изучение п что: Артрит при вспо"могательном средстве,. 15Инъекция ИусоЬасгегцш крысе вызывает полиартрит, напоминающий человеческий ревматоидный артрит.Суспензию МусоЪасТегыш ЫЬегсц 1 озез (0,4,мг на 0,05 мп парафинового масла) инъекцируют внутрикожно,в хвост самцов крыс Бргадце Паю 1 еусо средним весом 150 г.Спустя 15 дней отбирают животных,обладающих наиболее заметными симпто мами артрита. Этих крыс разбивают иапартии по 5 животных, затем каждуюгруппу обрабатывают исследуемым продуктом в дозе 10 мг/кг в день, в те"чение 6 дней в неделю (подкожно) . Од-З 0на из групп получает только растворитель и служит контролем.Спустя 3 недели обработки, животных убивают и отрезают правую заднююлапу на уровне берцово-предплюсневого,сустава, затем взвешивают.Для каждой группы определяют среднее и стандартную погрешность этихвесов,Активность каждого продукта вы ражается изменением в процентах среднего веса лап артритных, обработанных крыс, по сравнению с таковыми артритных лап контрольных крыс.Ингибирование артрита новыми соеди нениями представлено в табл, б.Кроме того, предлагаемые продукты мало токсичны. Они могут быть использованы в терапии человека для лечения заболеваний, обязанных воспалительным явлениям, и в особенности для лечения артритных состояний. Особенно соединения могут быть использованы при лечении ревматоидного полиартрита.Соединения могут быть в формах, соответствующих для введения перорально, парентерально и эндоректально. Желатинозные капсулы или таблетки содержат количество действующего начала 10-500 мг/единица.Ежедневная доза этих продуктов взрослому может быть порядка 100 мг - 5 г в день, разделенная на несколько порций.Цифровые результаты, приведенные в табл. 5 и 6, указывают на более высокую эффективность новых соединений, чем этидронат натрия.Токсичность соединения БК 413 19 (пример 9); ЛД 50 для мышей - 1414 мг/2 г при оральном введении и 197 мг/кг при Внутривенном введении, ЛД 50 для крыс - 700 мг/кг при оральном введении и 197 мг/кг при внутривенном введении.Соединения БК 4 1960, БК 41036, БК 41421, введенные мьппам в дозе 300 мг/кг оральным путем ни в одном случае не приводят к летальному исходу. Формула изобретения Способ получения производных метилендифосфоновой кислоты общей формулы"ф .ов,БоВО 11 1 11 ОВо (снгЪ о1БВ 2 где К, - водород, линейный или Разветвленный низший С -С -ал 45К в .алкил, который может бытьзамещен гидроксильной илитиольной группой, одним илинесколькими атомами галогена, алкоксикарбонильной груп"13 14 1333240 К -8-Я-К фенилом формулы Таблица 1 Н,ССН 3СНОО 0 0-СНн,С, О н / сн,уО - СН О сцСИ-О СН О - СНИ С 1 СИ,В Рабочие усло- Физические хараквия (темпера- теристики тура и времянагрева) Кодовый номе СООН 90 С, 5 ч 140 С (ацетонитри К 41265 14.), с 5 С, бч БК 41452 масло, тонная хроматона двуокисия этилацетат 8 ф 2 (по объ = 0,7 г, группа -С-М где Х - кислород или сера, Е,и Е имеют указанные значения, 5- или 5 6-ти членный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, выбранных иэ азота и серы, 5-ти членный гетероцикл, конденсированный с бензольным кольцом и имеющий формулух где Х " кислород, группа ЯН или сера, 15 К - водород или галоген;Ъи ; целое число от 0 до 10,при условии,что при К, - водои и = О, К не является метильной или пиридильной 20группами, при К - метилили этил, и = О, К не является фенилом или замещенным где,- галоген, нитро- илитрифторметильная группа,заключающийся в том, что тетраалкиловый эфир метилендифосфоновой кислоты подвергают взаимодействию с гидридом натрия в среде толуола и/или диметилформамида при 15-25 С с последующей обработкой образующегося натрийсодержащего дифосфоната сульфидом общей фор- мулы К,з-(СН,) -т или дисульфидом общей формулыгде К и и - имеют указанные значения,У - галоген,при температуре от 20 С до температуры кипения реакционной смеси и выделением целевого продукта в виде эфираили переводом его в кислоту путемомыления. ЖелтокослографикремнСН,;Оему),16Таблица 2 1333240 НОО 1 ОНОР - снНО,С 1, ОН12 абочие условия Кодовый номер мещение:тем- гидролиз:конратура и дли- центрация НС 1 ельность и длительност 110 С, 24 ч 6 н. НС 1,5 ч ди-трет-бутиламинная соль, т.пл. 252 С ЯК 41100 20 С, 16 ч 6 н.НС 1,24 ч хлоргидрат,