Способ получения сложных эфиров 16, 17-ацетальзамещенной андростан-17 -карбоновой кислоты

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 191 С 07 Е 3 00 ОБРЕТЕ ИСАНИ АТЕНТ Андерсор Арне изводных сложных й андрощей ф-лы сй,яО- о ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНВЕДОМСТВО СССР(21) 4027252/04 (22) 03.04.86 (46) 15,02,93, Бюл. М 6 (31) 8501693-9 (32) Оа,О 4,85 (33) ЯЕ (71) Актиеболагет Драка (ЯЕ) (72) Пол Хакан Андерссон, Пер Тур сон, Бенгт Ингемар Аксельссон, Бр Тален и Ян Вилльям Трофаст(ЯЕ) (56) Патент Великобритании М 1384372, кл, 1 С 2 О, 1975.Патент Великобритании Ф 1438940, кл. С 2 О, 1976.ГЬаеп апб Вгацгапб, Аггпе 1 п. - ГогзсЬ. 29, 1687 - 90, 1979, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЛОЖНЫХ ЭФИРОВ 16,17-АЦЕТАЛ 13 А 11 ЕЩЕННОЙ АНДРОСТАН -КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ (57) Изобретение касается про стероидов, в частности получения эфиров 16,17-ацетальзамещенно стан/3-карбоновой кислоты об 1С=О Изобретение относится к способу получения новых производных стероидов, сложных эфиров 16,17-ацетальзамещенной андростан/3-карбоновой кислоты общей формулы 1: 1795972 АЗ где Х 1= Н, Р; Х 2 = Н,Р, В 1= Н, С 1-С 4-алкил; В 2= Н, С 1-С 5-алкил, Вз = а) СВ 4 В 5-0-С(0)-Вб, б) СВ 4 В 5 - О-С(О) - У - Вб при В 4 = Н, С 1 - С 5-алкил,фенил; В 5.- СНЗ, Н-: Вб = Н,н - или изостроения насыщенная или ненасыщенная с;с,ц е с,-сдщщ фтором, фенил, бенэил, -СН 2-СН = СН-СН= = СН-О, причем положение 1,2 - насыщенное или означает двойную связь, У = кислород, при условии если В 2 = Н, то В 1= С 1-С 4-алкил, обладающих физиологической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более эффективных стероидов, Синтез ведут реакцией соответствующей кислоты (без группы Вз) или ее 20(В)- или 20(Я)-эпимера с соединением ф-лы 11 Е - СВ 4 В 5-О-С(О)-В 6 или ф-лы П 12-СВ 4 В 5 - О - С(О) - У-В 6, где Е = галоген, с последующим, при необходимости, хроматографическим разделением полученной смеси на отдельные эпимеры, Новые вещества имеют сродство к глюкостероидному рецептору. 4 табл.(с 0,2снеса) Н,. В УРа,Х Хт му ес охранкее Ьмн (мл) р мчисл мамдено 192-9(На)аа 5 0 эН СНаН Сн26 25 1795972 Таблица 4 Составитель И.федосееваТехред М.Моргентал Корректор иль актор Т.Иванов Заказ 441 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобре;ениям и открытия113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 ри ГКНТ СССР оизводственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101-сн .12 0 1,2-положение является насыщенным илиозначает двойную связь;У - атом кислорода, при условии, еслиВг - водород, то 81 - С 1-С 4-алкил,обладающих ценными фармакологическимисвойствами,Цепь изобретения - получение новыхстероидных производных, имеющих преимущества перед известными структурными аналогами;Цель достигается описываемым способом, заключающимся в том. что соединениеобщей формулы 11;ОНС.Ос Оили его 208 эпимер Яс,-О ц,эпимер или его 203 О/ЪО йт1 и Х 2 имеют вышеуказанные знавергают взаимодействию с соеобщей формулы 111;й-с-ОСО-яй 585 имеют вышеуказанные значебщей формулы 111 а гдЕ 81 Вг,Хчения, подинением гдо 84; 85 ИНИЯ, ИЛИ 0 е-с-.О-СО1й где 84 85.85 и У имечения, а Е - атом гпри необходимост ют вышеуказанные зна алогена с последующи и хроматографически где Х- водород или фтор, Х 2 - водород или фтор:81 .водород или С 1 С 4-длкил, 82 водород или С-С 5-алкил;Вз - группа С 84850 СО 85 ил и С 8485 ОС 085. где 84 - атом водорода, С 1-С 5- апкил или фенил;85 - водород или метил;85 - водород или линейная или разветвленная насыщенная или ненасыщенная цепь С 1-Сз, С 1 - С 4-апкил, замещенный фтором, фенил или бензил, или радикал разделением полученной эпимерной смесина отдельные эпимеры.В примерахпри проведении опытовпрепаративной хроматографии применяют объемную скорость движения потока2 -12,5 мл/см ч . Во всех примерах молекулярные веса определены посредствомэлектронной ударной масс-спектрометрии. Точки плавления измерены на микро"0 скопе с обогреваемым столиком фирмы"1 е 1 и" Ветцлар, ФРГ. Все анализы НР 1 С"ЧЧатегз,и ВопбагаМ -С 1 а" (300 х 3,9 мм15 внутренний диаметр) при объемной скорости потока 1,0 мл/мин и смесью этанола сводой в соотношении от 50:50 до 60:40 вкачестве подвижной фазы, при отсутствииособых указаний,П р и м е р 1. Получение (2285)-, (228)- и(223)-11 фаа-, 21- тетрагидроксипрегна,4-диен,20-диона, 17 а -ацеталей.Приготовление (2283-), (228)- и (223)- 1 ба, 17 а- бутилидендиокси-б а, 9 а -дифтор 11 ф 21-дигидроксипрегна,4.- диен,20 диона,А, К суспензии 1,0 г ба,9 а-дифторР,16 а, 17 а, 21- тетрагидроксипрегна-.1,4-диен 3,20-диона в 500 мл метиленхлорида добавляют 0,32 мл свежеперегнанного н-бутаналяи 2 мп 72-ной хлорной кислоты. Реакционную смесь оставляют стоять при комнатнойтемпературе и при перемешивании на 24 ч.Реакционную смесь промывают 107 ь-нымводным раствором карбоната калия и водой,высушивают над сульфатом натрия и выпаривают, Остаток растворяют в этилацетатеи осаждают петролейным эфиром, Остается883 мг (2283)-16 а, 17 а-бутилидендиокси 40ба, 9 а-дифторф 21- дигидроксипрегна 1,4-диен,20-диона.НР 1 С-анализпоказывает 9900-ную чистоту и соотношение 16:84 у 223 и 228 эпимеров, Молекулярный вес: 466, (Вычислено 466,5), (2283)эпимерную смесь хроматографируют на колонке "Стефадекс1 Н 20" (76 х 6,3 см) сприменением гептан: хлороформ: этанол,20:20:1 в качестве подвижной фазы, фракции 12315-13425 мл (А) и 13740 - 15690 мл (В)собирают, выпаривают, остаток растворяютв метиленхлориде и осаждают петролейнымэфиром, Фракция (А) дает 62 мг (225)-, афракция Вмг (228) 16 а, 17 а-бутилиден 55диокси-ба, 9 а-дифтор -1 1 Р, 21-дигидроксипрегна,4-диен,20-диона. (228)-эпимер:молекулярный вес 466 (вычислено 466,5.т,пл. 196-200" С, (225)-эпимер: молекулярныи вес 466 (вычислено 466,5), т,пп,: 169172 С.В, К раствору 1,0 г ба, 9 а-дифторф 21-дигидроксиа, 17 а-//1-метилэтилиден/бис/окси//и регна,4-диен,20-диона в 500 мл метиленхлорида добавляют 0,30 мл свежеперегнанного н-бутаналя и 2 мл 72 О-ной хлорной кислоты, Реакционную смесь оставляют стоять 24 ч при 33 С перемешивании, экстрагируют водным раствором карбоната калия и водой, высушивают над сульфатом натрия и выпаривают, Остаток растворяют в метиленхлориде и осаждают петролейным эфиром, получая 848 мг (22 ЯЯ)-16 а, 17 а-бутилидендиокси-ба, 9 а.дифторф -ф дигидроксип регна,4-диен,20-диона, НРС-анализа показал 93- ную степень чистоты и отношение 12/88 между 223- и 228-эпимерами,В 1, К суспензии 4,0 г ба, 9 а-дифтор Р, 21-дигидроксий, 17 й -//1-метилэтилиден/бис/окси//прегна,4-диен,20-диона в 100 мл гептана добавляют 1,2 мл свежеперегнанного н-бутаналя и 3;8 мл 72 О/- ной хлорной кислоты, Реакционную смесь оставляют стоять при комнатной температуре на 5 ч при интенсивном перемешивании, экстрагируют водным карбонатом калия и водой, высушивают над сульфатом натрия и выпаривают, Получают 4,0 г (22 ВБ)-16 а, 17 а -бутилидендиокси-ба, 9 а -дифтор1/3, 21-дигидрокси-прегна;4- диен,20-диона. НРС-анализ показал 98,5%-ную чистоту и отношение между 223 и 228-эпимерами 3/97. После 2-х перекристаллизаций из смеси хлороформа с петролинейным эфиром получено 3,1 г 22 Р-эпимера, содержащего всего лишь 1,1 О/о 225-эпимера и 1,3% других загрязняющих примесей,С, Подобным же образом, следуя процедуре, изложенной в примере, при замене 6 а, 9 а-дифтор/3. 16 а, 17 а, 2 1-тетраоксипрегна,4-диен,20-диона 11 Р, 16 а, 17 а, 21-тетрагидроксипрегна,4 -диен,20- дионом получают 9 а -фтор- и 6 а-фторР, 16 а, 17 а, 21-тетрагидроксипрегна,4-диен,20-дион или соответствующие 16 а, 17 а -ацетониды нефторированные и фторированные несимметричные (22 ЯЯ)- (228) и (225)-1 1 Р, 16 а, 17 а, 21-тетраоксипрегна,4- диен,20-дион 16 а. 17 а-ацетали из ацетальдегида, пропаналя, бутаналя, изобутаналя, пентаналя, 3-метилбутаналя; 2,2-диметилпропаналя, гексаналя, гептаналя, октаналя, ионаналя и додеканаля. Пример 2,А. Преднацинолон 16 к 17 а-ацетонид (250 мг; 0,6 ммоля) растворяют в 75 мл метиленхлорида. Добавляют н-бутанал (130 мг;1,8 ммоля) и 70/-ную хлорную кислоту 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55(0,025 мл), Раствор пвремешивают при ЗЗ С в течение 15 час. Желтый раствор промывают 2 х 10 мл 10%-ного раствора карбоната калия и 4 х 10 мл воды, высушивают и выпаривают, Выход; 257 мг (97,7%), НРЕС показал 91,1%-ную чистоту, Содержание непрореагировавшего ацетонида составило 7,4% загрязнений, Соотношение эпимеров 14,6/85,4.В. Триамцинолон 16 а, 17 а -ацетонид (0,5 г, 1,1 ммоль) растворяют в 150 мл метиленхлорида, Добавляют н-бутаналь (260 мг;3,6 ммоля) и 70 о -ную хлорную кислоту(0,22 мл). Смесь перемешивают при 33 С 16 ч, В делительную воронку помещают метиленхлорид и колбу, в которой проводили реакцию, промывают несколько раз 10 мл карбоната калия и метиленхлоридом соответственно, Затем раствор промывают 2 х 10 мл 10%-ного К 2 СОз и 4 х 10 мл воды, высушивают и выпаривают. Выход: 438 мг (84,9%), НР С показала 80,2%-ную степень чистоты, Соотношение эпимеров 19/81,С, Флюцинолон 160, 17 й-ацетонид (0,5 г; 1 ммоль) растворяют в 150 мл метиленхлорида, Добавляют и-бутаналь (260 мг; 3,6 ммоля) и 70%-ную хлорную кислоту (0,22 мл), Смесь перемешивают при 33 С 24 ч. Метиленхлоридную фазу переносят в дели- тельную воронку. Колбу для проведения реакции промывают несколько раз 15 мл 10%-ного К 2 СОз и метиленхлорида, соответственно, Раствор промывают 2 х 15 мл 10%- ного К 2 СОз и 4 х 15 мл воды, высушивают.и выпаривают, Выход; 513 мг (100%). НР 1 С показала 97,4%-ную степень чистоты, Соотношение для эпимера: 8,6/91,4.П р и м е р 3. Данный пример иллюстрирует способ получения 11 р -гидроксиа, 17 а -К 1-метилэтилиден)бис(окси)1- и (20 ВЯ)-, (208)- и (205)-11 Р-оксиа, 17 а -алкилметилендиоксинандроста -1,4-диен-З-он- карбоновой и -4-ен-онф-карбоновой кислот,Получение ба, 9 а-дифтор-гидроксиа, 17 а -1-метилэтилиден)-бис(окси)андроста,4-диен-З-он/3 - к а р бо н овой кислоты,А, К раствору 1,99 г флюоцинолон 16 а, 17 а-ацетонида в 120 мл метанола добавляют 40 мл 20%-ного водного раствора карбоната калия. Через этот раствор барбортируют струю воздуха в течение примерно 20 часов при перемешивании при комнатной температуре, Метанол выпари. вают и к остатку добавляют 200 мл воды, Раствор экстрагируют метиленхлоридом. Водную фазу подкисляют разбавленной хлористоводородной кислотой. Образовав 1795972-гидроксиа, 17 а -(1-метилэтилиден)бис (окси) )эндроста,4-диен-З-онР -карбоновой кислоты, Степень чистоты, опреде ленная НР 1 С, составила 99,5.С. Аналогичным образом, следуя процедуре, изложенной в примере при замене флюоцинолон 16 а, 17 а-ацетонида 11 ф 16 а, 17 а, 21-тетрагидроксипрегна,4-диен,20- диона; 6 а-фторР, 16 а, 17 а, 21-тетрагид- . роксипрегна,4-диен,20-диона и 40 45 50 55 шийся осадок собирают фильтрованием и высушивают, что дает 1,34 г ба, 9 а-дифтор/3 -оксиа, 17 а -(1-метилэтилиден)- бис(окси)-андроста,4-диен-онР -карбоновой кислоты, точка плавления 264- 268 С, молекулярный вес 438. Степень чистоты, определенная посредством НР С, составляет 94,0 , Водную фазу экстрагируют этилацетатом, После высушивания растворитель выпаривают, что оставляет дополнительно 0,26 г порцию кислоты, Чистота: 9.3,70 .В, Йодную кислоту(15,1 г) в 16,5 мл воды добавляют к раствору флюоцинолон 16 а, 17 а -ацетонида (5.0 г) в 55 мл диоксана, Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 20 ч, нейтрализуют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и выпаривают, Остаток растворяют в 200 мл метиленхлорида и промывают 8 х 100 мл 10 -ного карбоната калия, Водную фазу подкисляют конц,хлористоводородной кислотой и экстрагируют 6 х 100 мл этилацетата, После высушивания раствори- тель выпаривают. Остаток растворяют в 400 мл этилацетата и осаждают петролейным эфиром, что дает 3,96 г ба, 9 а-дифторР получают триамцинолон 16 а, 17 а-ацетонид11 Р -гидроксиа, 17 а -(1- метилиден)бис(окси) ) андроста,4-диен-З-он/3-карбоновые кислоты. П р и м е р 4. 1-Этоксикарбонилоксиэтил ба, 9 а-дифторР - гидроксиа, 17 а (1-метилэтилиден)бис(окси)1 андроста,4- диен -3-онД -карбоксилат.А, ба, 9 а-Дифтор-гидроксиа, 17 а -(1- метилэтилиден)бис(окси)1-андроста,4-диен-З-он/3 -карбоновую кислоту (600 мг) и бикарбонат калия (684 мг) растворяют в 45 мл диметилформамида, Добавляют 1-бромэтил этилкарбонат (2 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре на протяжении ночи, Добавляют воду (200 мл) и смесь экстрагируют. метиленхлоридом, Объединенные экстракты промывают 50 -ным водным бикарбонатом и водой, Оста 1 ок очищают хроматографией на колонке "СефадексН" 5 10 15 20 25(72 х 6,3 см), используя хлороформ в качестве подвижной фазы, Собирают фракцию1515-2250 мл и выпаривают, что дает 480 мг1-этоксикарбонилоксиэтил ба, 9 а -дифтор 11 Р -гидроксиа, 17 а-(1-метилэтилиден)бис(о кси-а ндроста,4- дие н-онРкарбоксилат. Степень чистоты, определенная посредством НР С, составляет 98,10 ,а соотношение эпимеров А/В, 4852. Точка плавления: 218 - 227 С. (а)р =+ 63,2(с= 0,214; СН 2 С 12), Молекулярный вес 554,1-Этоксикарбонилоксиэтил 6 а, 9 адифтор18-гидроксиа, 17 а -(1-метилэтил иден) бис(окс иа ндроста,4-дие н-он 17 ф -карбоксилат (480 мг) хроматографируют на колонке "Сефадекс" 1 Н 20" (76 х 6,3 см)с применением смеси гептан;хлороформ:этанол, 20:20:1 в качестве подвижнойфазы. Собирают фракцию 2325-2715 мл, выпаривают и остаток растворяют в метиленхлориде, осаждают петролейным эфиром,что дает 200 мг соединения (А), имеющегостепень чистоты 97,30(определено НРСанализом). Точка плавления: 246-250 С(С= 0,246 СН 2 С 2), Молекулярный вес: 554,Сигнал метина и сложноэфирной группы0,13 млн.дол. смещен вниз поля в Н-ЯМРспектре В по сравнению с А, между тем какостаточные части спектров почти идентичны,В. 6 а, 9 а-Дифторр-гидроксиа,17 а -(1-метилэтилиден) бис(оксиандроста 1.4-диен-З-онР -карбоновую кислоту (200мг) растворяют в 25 мл диметилформамида.Добавляют 1-хлорэтил-этил карбонат (100мг), бикарбонат калия (70 мг) и 18-кроунпростой эфир. Реакционную смесь перемешивают при 80 С 3 ч., охлаждают, последобавления 150 мл воды экстрагируют метиленхлоридомвысушивают и выпаривают,Неочищенный продукт очищают, как указано в процедуре А, причем остается 207 мг1-этоксикарбонилоксиэтил 6 а, 9 а -дифтор-1 1 Р -гид рокс иа, 17 а (1-метилэтилиден)бис(оксиЦ андроста,4-диенон/3 -карбоксилат. Чистота (НР С) составляет 98,4 и соотношение эпимеровА/В = 54/46,С. 6 а, 9 а -Дифтор-гидроксиа,17 а (1-метилэтилиден) бис(окси)андроста 1.4-диен-З-онрС -карбоновую кислоту (200мг) и 1,5-диазабицикло (5,4.0)ундецен(140мг) суспендируют в 25 мл бензола и нагревают до дефлегмации,Добавляют раствор 1-бромэтил-этиЛ- бромметилэтилкарбоната в 10 мл метиленкарбоната (175 мг) в 5 мл бензола и смесь хлорида, Смесь перемешивают при 45 Снагревают 2,5 ч, Послеохлаждениядобавля ч, разбавляют 10 мл метиленхлорида,ют 50 мл метиленхлорида и раствор промы- выделяют и очищают как указано в процевают водой, высушивают и упа ривают, 5 дуре "Е", Получают 254 мг 1-этоксикарбониНеочищенный продукт очищают таким же локсиэтил 6 а,образом, как в процедуре А. Получают 207 9 а-дифтор-гидроксиа, 17 а(1-метимг 1-этоксикарбонилоксиэтил 6 а, 9 а-диф- лэтилиден)бис,ссиандроста,4-диен-Зтор-гидроксиа, 17 а(метилэтили- онф -карбоксилата. Чистота (НР 1 С);97,4.ден)бис(оксиандроста,4-диен-З -он10 Отношение эпимера А/В = 60/40.-карбоксилата, Чистота (НР 1 С) 96,4 , Отно, 6 а, 9 а -Дифтор-гидроксиа,шение эпимеров А/В = 44/56. 17 а Ц 1-метилэтилиден)бис (окси)андростаО. К раствору 6 а, 9 а -дифтор-гидро,4-диен-З-онф -карбоновую кислоту (200ксиа, 17 а(1- метилиден)бис(оксиандро- мг), 1-бромэтилэтилкарбонат (135 мг) и триста,4-диен-З-он-карбоновой кислоты 15 этиламин (275 мг) растворяют в 20 мл диме(100 мг) в 25 мл ацетона добавляют 175 мг -тилформамида. Смесь перемешивают приа-бромдиэтилкарбоната и 45 мг безводного 80 С 3 ч, разбавляют 200 мл метиленхлорикарбоната калия. Смесь нагревают 6 ч. с да, промывают водой, высушивают и выпаобратным холодильником. Охлажденную ривают. "Сырой" продукт очищают,.какреакционную смесь выливают в 150 мл воды 20 указано в процедуре А. Получают 69 мг 1 и экстрагируют метиленхлоридом. Экстракт этоксикарбонилоксиэтил 6 а, 9 а -дифторпромывают водой, высушивают над сульфа ф - гидроксиа, 17 а(1- метилэтитом натрия и выпаривают. Выход 65 мгтвер- лиден)бис (оксиЦандроста,4-диен-З- ондого 1-этоксикарбонилоксиэтил ба, 9 а - 17 ф -карбоксилат, Чистота (НР С) 97,8 идифторф-гидроксиа, 17 а(1-метили отношение эпимеров А/В = 48/52.ден)бис(оксиандроста,4-диен-З-он- П р и м е р 5. 1-Ацетоксиэтил 6 а, 9 йкарбоксилата, Чистота, определенная -дифтор-гидроксиа, 17 а-Ц 1-метилиНР 1 С, составила 97,6/ и отношение зпиме-ден)бис(оксиандроста,4-дйен-З-онфров А/В = 49/51. карбоксилат.Е, ба, 9 а-Дифтор-гидроксиа, 30 6 а, 9 а-ДифторВ-гидроксиа, 17 а17 а -1-метилэтилиден) бис(оксиандро-метилэтилиден)бис (оксиандроста,4 ста,4-диен-З-онД -карбоновую кислоту диен-он-карбоновую кислоту (500 мг)(500 мг) и кислый тетрабутиламмоний суль- и бикарбонат калия (575 мг) растворяют в 40фат (577 мг) добавляют к 3 мл 1-м гидроокси мл диметилформамида, Добавляют 1-хлорэнатрия. Добавляют также раствор 435 мг 35 тилацетат(1 мл) и реакционную смесь пере 1-бромдиэтилкарбоната. в 50 мл метиленх- мешивают при комнатной температуре 40 ч.лорида. Смесь нагревают с обратным холо- Реакционную смесь выливают в 50 мл водыдильником, Происходит разделение на 2 иэкстрагируютметиленхлоридом, Экстрактслоя. Органический слой промывают 2 х 10 промывают водным бикарбонатом натрия имл воды, высушивают и выпаривают, "сы водой, высушивают и выпаривают. Остатокрой" продукт очищают хроматографией на хроматографируют на колонке "Сефадекс, колонке "Сефадекс 1 Н" (72 х 6,3 см) с 3 Н" (72 х 6,3 см), применяя хлороформприменением хлороформа, в качестве по- как подвижную фазу, Фракции 1755-2025 идвижной фазы. Собирают фракцию 1545- 2026-2325 мл собирают и выпаривают.1950 мл, выпаривают и остаток осаждают из 45 Твердый продукт от фракции 1755 - 2025смеси метиленхлорида и петролейным мл дополнительно очищают хроматограэфиром. Остается 341 мг 1-этоксикарбо- фией на колонке "Сефадекс Н" (76 х 6,3нилоксиэтил ба, 9 а-дифтор/-гидро- см - внутренний диаметр), используя смеськсиа, 17 а-Ц 1-метилэтилиден)- бис(окси гептан-хлороформ-этанол, 20:20;1 в качестандроста,4-диен-З-он-карбоксилат, 50 ве подвижной фазы. Фракцию 2505-2880 млСтепень чистоты, определенная посред- собирают и выпаривают. Остаток растворяством НР С: 99,2/. Отношение эпиме- ют в метиленхлоридеи осаждают петролейров А/В = 56/44, ным эфиром, причем остается 167 мгГ. 6 й, 9 й-Дифтор/З-гидроксиа, твердого продукта (А). Чистота, определен 17 а -1-метилиден)бис (оксиандроста,4- 55 ная НР С = 99,1 ф . Точка плавления 238 -диен-онф-карбоновую кислоту(200 мг) 259 С (а )о = + 94 (С = 0,192; СНО),и трикаприлметиламмоний хлорид (200 мг) Молекулярный вес = 254,добавляют к 5 мл насыщенного водного би- Твердый продукт из указанной вышекарбоната натрия. Добавляюг 100 мг 1- фракции 2026-2325 мл дополнительно очи 1795972щают хроматографией так же, как указано выше, Фракцию 5100-5670 мл собирают и выпаривают, Остаток растворяют в метиленхлориде и осаждают посредством петролейного эфира, что дает 165 мг твердого продукта "В". Чистота, определенная путем НР С, составляет 99,4%. Т.;чка плавления 261 - 265 С (а)о = + 34 (С:= 0,262; СН 2 С 2). Молекулярный вес = 524,Н-ЯМР спектры А и В являются почти тождественными, за. исключением того, что метиновый квартет от сложноэфирной группы, который сдвинут на 0,16 млн,дол, в нижнюю область соединения В в сравнении с соединением А. Характеристики щ/е А и В в масс-спектре являются идентичными, исключая интенсивности. Такие спектроскопические характеристики А и В показывают, что они являются эпимерами вследствие хирального центра в сложно- эфирной группе. П р и м е р 6-88. Вещества, приведенные в таблицах 1-3, приготовлены, выделены и очищены по способу, аналогичномуописанному в примерах 4 и 5.Примечание к таблице 1.1) На колонке "СефадексН" (76 х 6,3см), применяя хлороформ- гептан-этанол(вес/объем) суспензии декстрана 170 в 20 ммоль Трис, рН 7,4 1 ммоль ЭДТА и 20 ммоль МаМо 04 10 мин при 0 С. После этого центрифугируют при 500 х 9 10 мин, и 230 мкл всплывшего слоя сосчитывают в 10 млпэмза-Ое в сцинтилляционном спектрофотометре "Рас 1 агб". Всплывшие слои инкубируют с а) с одним ( Н) дексаметазоном, б)( Н) дексаметазоном вместе с 1000-кратным зизбытком немеченого дексаметазона и в) 4) На колонке "СефадексН" (80 х 2,5см), применяя хлороформ в качестве подвижной фазы,5) На колонке "СефадексН" (81,5 х5 х 2,5 см), применяя хлороформ в качествеподвижной фазы.фармакология,Сродство новых сложных эфиров андростан-карбоновой кислоты по отноше 10 нию к рецептору глюкокортикоида.Все стероиды, соответствующие насто-ящему изобретению, являются физиологически активными соединениями, Сродствоновых сложных эфиров андростан/3-кар 15 боновой кислоты к глюкокортикоидному рецептору использовано в качестве моделидля определения способности к противовоспалительному действию. Их средства крецептору сравнивают с будезони 20 дом//228/Я/-16 а, 17 а -бутилидендиокси 11 ф 21-диоксипрегна,4-диен,20-дион/,глюкокортикоидом повышенной активности, с благоприятным соотношением междулокальным действием, и действием, относя 25 щимся к организму в целом (ЕЬаеп апбВга 1 сзапб, Агапеа, - РогзсЬ, 29, 1687 - 90(1979).Во время всех исследований используют крыс - самцов "Яргагце-Оавеу" в возра 30 сте 1-2 месяцев. Зобную железу удаляют ипомещают в физиологический раствор поваренной соли, охлаждаемый льдом, Ткань гомогенизируют в гомогенизаторе "РоцегЕЬеЦепз" в 10 мл буферного раствора,35 содержащего 20 ммоль.Трис, рН 7,4 10%(вес-объем) глицерина, 1 ммоль этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), 20ммоль йаМоОа, 10 ммоль меркаптоэтанола.Гомогенат концентрируют 15 мин. при40 20000 х 9, Долислоя, всплывшего при 20000х 9 (230 мкл), инкубируют около 24 ч при 0 Сс 100 мкл фенилметилсульфонилфторида(конечная концентрация 3 нмоль). Связанный и свободный стероиды разделяют инкубированием смеси с 60 мкл 2,5%1795972 13 Формула изобретенияСпособ получения сложных эфиров 16,17-ацетальзамещенной андростанфкарбоновой кислоты общей формулы 20ОйО, ГЗ аэанные значения необходимости хромаделением полученной отдельные эпимеры,(Н) дексаметазоном вместе с 0,03-300- кратным избытком "соперника", Неспецифическую связь определяют, когда 1000-кратный избыток немеченого декса. метазона добавляют к( Н)-меченому дексаэметазону. Радиоактивность, связанная с рецептором в присутствии "соперника", разделенная на радиоактивность, связанную с рецептором в отсутствии "соперника" и умноженная на 100, дает выраженную в Оспецифическую связь для меченого дексаметаэона. Для каждой ко. центрации "соХггде Х 1 и Х - водород или фтор;В 1 - . водород или С 1-С 4-алкил;В 2 водород или С 1 С 5-алкилВЗ группа СВ 4 В 50 СОВб или СВ 4 В 50 СОУВб, где В 4 - водород, С 1-С 5-алкил или фенил; В 5 - водород или метил; Вв - водород или линейная или разветвленная насыщенная или ненасыщенная цепь С 1 - Сз, С 1-С 4-алкил, замещенный фтором, фенил или бензил, или радикал 1,2-положение является насыщенным илиозначает двойную связь.У - кислород, при условии, если В 2 -водород. то В 1 - С 1 С 4-длкил,отличающийся тем, что соединениеобщей формулы перника" специфически связанная радиоактивность, выраженная в %, наносится на график по отношению к логарифму концентрации "соперника". Кривые сравнивают 5 при 50%-ном уровне специфической связи,и относят к будезониду, относительное сродство связуемости ЯВА), которого принимают за 1.Табл,4 суммирует относительное срод ство связуемости(ВВА) по отношению к глюкостероидному рецептору для. некоторых исследованных соединений,О.где В 1, В 2, Х 1 и Х 2 имеют указанныения. подвергают взаимодействию снением общей формулыъС-ОСО-ййв где Я 4-Вб имеют ук или общей формуль 40Ъ-Ьо-Со-Уйгде Я 4-Я 6 и У имею 45 Е - галоген,с последующим при тографическим ра эпимерной смеси н(20:20:1).2 На Сефадексе 1.Н 20 колонка (07,6 х 2,8 си) подэмк 44 юза хлорофорфю гантэн зтеюл(20:20:1).3) На Сефадексе СНколами (88 х 28 си подана.фаза - вюрофарм.4) На Сефадексе ЕНколонка (72 к В.Э си подэмх.фаза - июраформ.б Нэ Сефадексе 0+20 колонка (71,8.х 0,3 сиподемэсфазэ - хлороформ.Тавлнца 21) На Сефэдексе О.20 коломка (72 х 6.3 см модвак.фазе - хлороформ.2) На Сефадексе СН 20 колонка (83 х 2.6 си) подетокйюза - хлороформ,7 ЬО 1 2 1314 5 16 17 8 19 20 212223 24 25 26 27 28 29 , 30 31 32 33 За 35 ЗЬ 37 38 н ир нр нир нР Ррр Рр рР Нин рР РР Рр РрР Рр рррР Фенин сн, сн сн, сн, си, сн, Сйз сн, сн, Сйз сн, сн, Сйз Сй, сй, сн, сн, сн, СН 5 сн, сн, сн, сн, сн, сн, сн, сн,н и н. н и н и и н сн И нн Н н Н И н н н н н н н н н н н н йисн,249 238 2 Ь 2-70 268-77 224-30 259-67 130-42 184-87 ЗОО 250-53 230-З 5 235-42 225-33 224-31 227"30 205-28 210-25 242-47226-28 183-97 217-21 207 10 70-78 177-79 190"92 208-ЗЬ 240.56 22 Ь"28