Индикатор для определения аскорбиновой кислоты

СОНИ СОЕЕТСНИХеиРЕСПУБЛИН М 21 78 БРЕТЕНИ ПАТЕН 0-90 ГОСУДМфСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙОПИСАНИЕ ИЗО(71) Берийгер Ианнхайм ГмбХ ( СРГ ) (53) 543, 42. 063 (088. 8)(56)1. Акцептованная заявка ФРГ В 2309794, кл. 6 03 М 31/22,опублик.1974 (прототип).(54)(57) ИНДИКАТОР ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ, содержащий соль фосформолибденовой кислоты и органическую кислоту, о тьл и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения стабильности при хранении и увеличения точности определения, он содер.801015834 А жит в качестве соли фосформолибденовой кислоты соль щелочного металла 2,18-фосформолибденовой кислоты, в качестве органической кислоты - лимонную или яблбчную; или винную кисло ту, или смесь укаэанных кислот с их солями щелочных металлов и дополнительно содержит хлорат щелочного металла при следующем соотношении компонентов, г/л водного или водно-метанольного раствора:Соль щелочного металла 2,18- -фосформолибденовой кислоты 3-9 Хлорат щелочного металла 1-6 Лимонная или яблочная, или винная кислота или смесь указанных кислот ,с их солями щелочных металлов.11-6 Изобретение касается стойкого быстрого индикатора, служащего дляполуколичественного определения ас"корбиновой кислоты в напитках и жид.костях организма.Известен индикатор для определе"ння аскорбиновой кислоты, состоящий.из смеси соли фосформолибденовойкислоты нейтрального нитрата и малоновой кислоты 1.Недостатком известного индикаТораявляется невысокая стабильность прихранении, связанная с тем, что малоновая кислота при хранении сублимируется, что умейьшает точностьанализа аскорбиновой кислоты, 15Цель изобретения - повышение ста.бильности при хранении и увеличениеточности определения,Поставленная цель достигается тем,что индикатор для определения аскор 20.биновой кислоты в качестве соли фос-.формолибденовой кислоты содержитсоль щелочного металла 2,18-фосформолибденовой кислоты, хлорат щелочного металла, лимонную или яблочную, 25или винную кислоту, или смесь указанных кислот с их солями щелочныхметаллов при следующем соотношениикомпонентов, водного или водно-ме,танольного раствора: 30Соль щелочного металла 2,18-фосформолибденовой кислоты 3-9Хлорат щелочного"металлаЛимонная или яблочная, или винная кислота, или смесьуказанных кислот сих солями щелочногометалла 10-9040Полоски индикаторной бумаги изготавливают следующим образом,Соль щелочного металла 2,18-фосформолибденовой кислоты,в концентра.ции 3,0-9,0 г/л растворяют в воде 45вместе с 1,0-6,0 г/л хлората щелочного металла и 10-90 г/л алифатической гидроксикарбоновой кислотыс добавлением в раствор любого органического растворителя или спирта 50низшего порядка, которыйпеюемешйваютс водой, или без этой добавки. Припомощи едкой щелочи, например гидроокиси лития или натрия и т.д., уста-навливают рН раствора от 2,5 до 5,0.Применяют также смесь гидроксикарбоновой кислоты с соответствующейсолью щелочного металла, причем соотношение компонентов смеси выбираюьтаким образом, чтобы значение водородного показателя рН получилось,равным 2,5-5,0. Применяют также сме-си органических кислот. Такими пропиточными растворами обычным образом пропитывают фильтровальную бука гу. После сушки приготовленную реак"тивную бумагу режут и далее подвергают дальнейшей обработке для получения отдельных или комбинированныхиндикаторных полосок, например, путем наклеивания на пластмассовый илипленочный держатель или смачивания,При помощи индикаторных полосок,.изготовленных таким образом, определяют содержание аскорбиновой кислотыв жидкостях либо вручную, сравниваяокраску пластинок, либо. способомяркостной Фотометрии.П р и м е р 1. 7 г натриевой соли2,18-фосформолибденовой кислоты 4 гхлората натрия, 40 г лимонной кислотыи 13,5 трилитийцитрата растворяют всмеси из 600 млметанола и 380 млводы. Этим раствором, рН которогоравно 3,7, импрегнируют фнльтровальную бумагу и далее ее сушат 1 ч приба С, Из реактивной бумаги, приготовленной таким образом, нарезают кускиразмером 6 х 6 мм, которые затем за-";печатывают между пластмассовым держателем и тонкой нейлоновой сеткой.Эти индикаторные полоски очень хорошоокрашиваются в цвета от светло-зелено.зато-голубого до темно-сине-Фиолетового при наличии в моче аскорбиновойкислоты в интервале очень важных концентраций от 0 до 40 мг/л.Индикатор, изготовленный такимспособом, пригоден также для полуколичественного определения аскорбиновой кислоты в фруктовых соках илив других напитках, причем перед окончательным определением в данном случае необходимо разбавлять водой.Объективную оценку реакционной окраски устанавливают при помощи. фотометра.В табл. 1 представлены значенияяркости, измеренные при помощи спектрального фотометра ДИВ 21 с насадкойЕК 21 Фирмы Хевь, и характер окраски,определяемой глазами,П р и м е р 2. 6,5 г натриевой соли 2,18-фосформолибденовой кислоты, 4 г хлората натрия и 45 г яблочной кислоты или винной кислоты растворяют в воде и с помощью 10 н едкой щелочи устанавливают рН раствора в интервале 2,5-5,0.Дальнейшую обработку для получения индикаторных полосок производят также, как в примере 1, функции и свойства индикаторных полосок соответствуют Функциям и овойствамописанйым в примере 1.П р и м е р 3. Реактивную бумагу, соответствующую, примеру 1 или 2, объе диняют в многослойные индикаторные полоски вместе с реактивными бумагами, предназначенными для определения нитрата, рН, глюкозы и кетоновых тел, которые изготавливают по известному способу. Эти многослойные поло. Концентрация аскорбиновой кислоты,мг/100 мл Цвет окраски 89 0 Бледно-желтая 36 Светло-зеленая 10 Зелено голубая 20 Голубая 12 Сине-Фиолетовая 40 100 ски несколько недель хранят в закрытых трубках.Для проведения сравнительного опыта изготавливают реактивные бумажйые полоски по примеру 1, состав компонентов которых изменен так, что вместо лимонной кислоты и литийцитра-. та вводят равные количества янтарной кислоты или малоновой кислоты и гид-роокись лития,для получения рН равно- .го 3,6. Эти реактивные полоски бумаги 30 обрабатывают также, как описано выше, для изготовления многослойных полосок и равным образом хранят несколько недель.Если опыт проводят с применением 15 многослойных полосок, состав которых соответствует изобретению, то получают истинное значение величины рН, например для мочи. Если опыт проводят с многослойными полосками, которые 2 О содержат индикатор аскорбиновой кислоты, изготовленный с янтарной кислотой, то значение рН получают ошибочным.Такое же отрицательное влияние на рН-индикатор можно наблюдать, если бумагу пропитывают солью фосфорно- молибденовой кислоты и малоновой кислотой, и хранят несколько недельП р и м е р 4. 3 г калиевой соли 2,18-фосформолибденовой кислоты, 1 г хлората калия и 10 г винной кислоты растворяют в воде и рН раствора регулируют 10 н, натронным щелоком на 2,5-5,0. Дальнейшую переработку для теста производят как в примере 35 1. Действие и свойства опытных полосок изучают путем помещения в аскообиновчю кислоту с концентрацией . 0-100 мг/100 мл. Избыточную жидкость удаляют с края.сосуда и окрашивание 40 определяют через 1-2 мин реакционного времени. Обработанные таким образом опытные полоски вводят для количественного определения в ремиссионный фотометр и ремиссию определяют при 640 нм-максимальной,интенсивности образующегося синего красителя по сравнению с белым стандартом (см. табл. 2).Субъективные определения в силу хорошей градации полуколичественно определяют на глаз. Концентрацию аскорбиновой кислоты неизвестных растворов измеряют аналогичным образом и определяют калибровочной кривой или субъективным сопоставлением.П р и м е р 5. 9 г литиевой соли 2,18-фосформолибденовой кислоты, 6 г хлората натрия, 45 г лимонной кислоты и 45 г цитрата натрия растворяют в воде. рН раствора устанавли.вают 10 ннатронным щелоком на 2,5- 5,0. Дальнейшеую переработку осуществляют аналогично описанной в примере 1, Исследуют функцию и свойства опытной полоски. Для этого ее погружают в аскорбиновую кислоту концентрацией 0-100 мг/мл. Избыточную жидкость сбрасывают с края сосуда и окраску определяют спустя 1-2 мин реакционного времени. Количественное определение производят погружением обработанной таким образом опытной полоски, используя ремиссионный фото- метр. Ремиссию определяют при 640 нм-максимально интенсивном синем цвете в сравнении с белым эталоном (см. табл.З). Субъективную оценку обеспечивает полуколичественно, .благодаря хорошей градации, визуальное определение. Концентрация аскорбиновой кис 1 лоты неизвестных растворов измеряется аналогичным образом путем сравнения с калибровочной кривой или путем субъективной оценки при сравнении со сравнительными цветами.Таблица 1 Темно-сине-фиолетоваяКонцентрацияаскорбиновойкиСлоты,мг/100 мл Реакционная окраска Белая 47 Желто-зеленая 32 Зеленая 10 Сине-зеленая 23 20 Синяя.40 17 Сине-фиолетовая 100 Таблица 3 Реакционнаяокраска Ремиссия при640 нм, Ф 85 Желтая 0 Зеленая 33 24 Зелено-синяя 10 19 Синяя 20 40 Сине-фиолетовая Темно-сине-фиолетовая 100 . Составитель С. ХованскаяТехред Т.МаточкаРедактор Н. Ковалеваа КорректорЕ. Рошко Заказ 3242/53 Подписное Филиал ППП "Патентф, г, Уагород, ул. Проектная, 4 Концентрацияаскорбиновойкислоты,мг/100 мл Тирам 873ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5