Способ диагностики тимомегалии у детей

3 СОЕЕТСНИХЦИАЛИСТИЧЕСНИХСПУБЛИН 19 1 И,ЗЗ 53. ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ 2 Б инсти с, 1 0-12МОМЕ ГАЛИИ о е Определение числто в. 1 Забо к о деовь получают и осле обработки вают скарификае 0,2 мп самоте улиновый шприц ельно раствором р ейлнодуляторов.Цель изобретения щение, соо сти ослож кращение врненийСпособ осуществлобразоМ,Для осуществледимо произвести ичества лейкоцитов емени и вер 0 ед/мпрмоста ующи ся сл янную центрим 10 мпитщ не обхоо коли особа ни я сподсчелим обще цито ала для йкоцито ссл вио и ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕ О ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТ ПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМ з( СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТИУ ДЕТЕ(57) Изобретение относится к прак-.тической медицине, в частности к клинической иммунологии и педиатрии, может найти применение в практическомзравоохранении при обследовании детеис подозрением на наличие гиперплазиивилочковой железы и дальнейшем ихИзобретение относится к практ кой медицине, в частности к клинической иммунологии и педиатрии, .ждт найти применение в практическ здравоохранении при обследовании тей с подозрением на наличие гип плазии вилочковой железы и дальн шем их лечении с применением имму лечении с применением иммуномодулято рав. Цель изобретения - упрощение способа, сокращение времени и снижение осложнений, Для этого проводят иммунологическое обследование детей и при повышении абсолютного числа лимфоцитов до 6,5-8,5 109 /л, абсолютного числа Т-лимфоцитов до 2,5 4,О Й 0 /л и В-лимфоцитов до 1,292,610/л или дисбалансе относительного и абсолютного содержания Т- и В-лимфоцитов, з аключающемся в сниже нии относительного числа Т-лимфоцито до 5-30% при нормальных значениях их аб солютно го чи сл а и по вышек ном абсолютном числе лимфоцитов до 6,5- 8,5 10/л и В-лимфоцитов до 1,2- 2,6109/л диагностируют наличие тимомегалии у детей,делить число Т- и В-лимфоцир р ви, Крбезымянного пальцаПэтанолом палец прокальтором и кровь в объемком набирают в туберк(смоченный предваритгепарина концентрациивысушенный при 37 С вКровь помещают в стеклфужную пробирку объемательно встряхивают,лимфоцитов определяют по стандартным методикам, дпя чего отбирают0,02 мп крови. Оставшуюся крсвьцентрифугируют при 200 я в течениемин. Отслоившуюся плазму выливают,а осадок используют для выделениялейкоцитарной взвеси,3 Приготовление лейкацитарнойвзвеси. Лейкоцитарную взвесь получают путем лизиса эритроцитов гемолитической жидкостьн следующего состава", к 0,083%-ному раствору хлористого аммония добавляют 0,04 г/лЭДТА, Доводят рН раствора до 7;274 7,5%-ным раствором бикарбонатанатрия, К ос" авшимся поспе центрифугирования клеткам крови добавляют5 мл гемолитической жидкости наЗО с при постоянном помешивании а 20Затем добавляют 5 6 мл среды 199 дляпр екр ащени я дей ствия гемалитиче ской:идкости на клеткицентрифугируют10 мин при 200 д, сливают надосадочную жидкость, осадок осторожно встря 25хивают, Добавляют 1-2 мл гемолитической жидкости на 3-5 с, затем добавляют 1 О мл среды 199, центриФугируют 10 мин при 200 я. Надосадочнуюжидкость сливают, Остатки жидкостиудаляют фильтров альной бумагой. Кполученному осадку клеток добавляют0,2 мл среды 199,4. Определение числа Т и В"лимфоцитов, Определение числа Т- иВ"лимфоцитов проводят метоцом розет"кообразованияРеакции ставят в 96 луночных планшетах для иммунологических реакций одноразового пользования.40 В лунку планшета наливают 0,05 кп полученной суспензии лейкоцитов, добавляют 0,05 мл 0,5% ной суспензии эритроцитов барана для определения45 Т-лимфоцитов или 0,05 мл 0,5%-ной суспензии эритроцитов мыши для определения В-лимфоцитов. Крышку на планшете закрепляют и центрифугируют при 200 8 в течение 5 мин. Планшет инку бируют 30 мин при 4 С, затем в лункио 50 осторожно добавляют каплю 3%-ного раствора глутарового альдегида, вы" держивают при комнатной температуре 5 мин, После этого надосадочную жид 55 кость удаляют, а в лунки наливают по 0,1 мп,цистиллированной воды, Осадок тщательно ресуспендируют и готовятмаз ки,5, Определение абсолютного содержания розеткообразующих клеток вмкл коо витысмкд ВОЛ%РО 11юадсэ д втыс/мкл 100% где РОЛ ь, к, - абсолютное количество роз еткообразующихлимфоцитов в 1 мклкро ви;Т т ,- абсолютное содержание лимфоцитов в1 мкл крови;РОЛ% - количество розеткообразующих лимфоцитов, %.Всего обследовано 369 детей в возрасте от четырех мес до четырех лет, Из них у 52 человек выявлены нормапьные показатели Т- и В-лимфоцитов, абсолютные значения лимфоцитов были значительно выше нормы,Содержание лимфоцитов в крови де тей с тимомегалией приведены в таблице,Высокие абсолютные показатели Ти В-лимфоцитов, увеличение абсолютного зн ачения лимфоцито в характеризуют их Функциональную незрелость,обусловленную тимомегалией. Так,абсолютное число лимфоцитов у детейс тимомегапией увеличено до 6,58,5 1 О/л, абсолютное число Т лимфоцитов цо 2,5-4,0 107 /л, а В-лимфоцитов 1,2-2,6 107/л, Кроме того, воз-.можно наличие дисбаланса между относительным и абсолютным числом Т-лимфоцитов, который заключается в снижении относительного числа Т=лимфоцитов до 15-30% при нормальных значениях их абсолютного и повышенном абсолютном числе лимфоцитов до 6,58,5 101/л и В-лимфоцитов до 1,22,6 109/л.П р и м е р 1 Больной П, 2 года. Ребенок поступил в грудное отделение детской областной больницы сдиагнозом; пневмония, затяжноетечение, Рентгенологически у ребенкавыявлено: срединная ткань в верхнейи средней трети грудной клетки расширена в обе стороны за счет тенивилочковой железы, КТТ.-индекс 0,58При иммунологическом обследовании выявлено: лимфоциты 811.10 /л,Т-РОЛ 52%, абс 4,22 109/л, В-РОЛ38%, абс. 2, 81-10/л, Увеличение абсолютных показателей лимфоцитов, а1642395 10 Де ы 8,5+1,0 21,3+1,1 77+0 1,85+0,1 51,5+1,2 45,1+2,2 2,5+О Зд оро выеС тимоме галией О+0,2,38+0,2 764+0,т акже Т- и В-лимфоцито в свиде тельствует об их функциональной цезрело сти и обусловлено тимомегалией, что нашло подтверждение при рентгеновском об следовании,П ри м е р 2, Больной К, 1 год 3 мес, История болезни Р 335, Поступил в кожное отделение детской больницы 11 3 с дигцозом; детская экзема.При иммуноло гическом об следовании больно го выя вле но: Лимфоци гы 7, 94 10 /л; Т-РОЛ 52%, абс, 413 х х 1 ОЭ/л, В-РОЛ 20%, абс, 1,59 1 О/л, Выявленное увеличение абсолютных показателей лимфоцитов, Т- и В-РСЛ свидетельствует о функциональной цезрело сти лимфоцито в, характерной дпя тимомегалии что было подтверж дено при рентгенологическом исследовании (КТТ-индекс 0,45) .Пример 3, Больцой 1 ц 2 года, Поступил в кожное отделение детской больницы 11. 3 с диагнозом; детская экзема,Г 1 ри иммунологиче ском об следовании установлено: лимфоциты Я,о 10 /л,Г 7 Т-РОЛ 18%, аос, 1,55 1 О/л, В-РОЛ 15%, абс, 1,29 107/л, Явный дисбаланс между относительными и абсолютными показателями Т- и В-лимфоцитов обусловлен функциональной незрелостью лимфоцитов, выявляемой при тимомегалии. Однако при рентгенологическом обследовании больного в прямой проекции тень тимуса не опрецелялась и КГТ"индекс не превышал 0,38, При рентгенологическом обсле довании в боковой проекции выявлено увеличение вилочковой железы,Анализируя изложенные данные, можно заключить, что изменения показаюФ цЮЧЗЭ ЭЭФ аюа% Ц 7 а тай е телей иммунного статуса в виде суще ст вен цо го у в ел ич е ция по к аз а те лей Т- и В-лимфоцитов, а также дцсбаланс между относительными и аб солютными 5показателями при увеличенном абсолютном числе лимфоцитов может служить основанием для постановки диагноза тимомегалияИспользование предлагаемого способа диагностики тимомегалии у детейимеет следующие преимущества: нетнеобходимости проводить рентгенологическое обследование детей; сокращение времени и сложности исследования (время исследования сокращаетсядо 4 ч, не нужна К-установка, пленка);при массовых иммунологиче ских обсле дованиях детей дает воэможность выявить детей с тимомегалией и проводить своевременное профилактическоелечение; отсутствует побочныйэффект25 Формула из обре те ния Способ диагно стики тимомегалииу детей путем клинического исследо ЗС вания, о тли ч ающий ся тем,что, с целью упрощения, сокращениявремени и снижения осложнений праводят исследование крови с определениемчисла лимфоцитов Т- и В-лимфоцитов и у при значении числа лимфоцитов(6, 5-8,5) 107 кл/л, абсолютного количества Т-лимфоцитов (2,5-4, 0)109 кл/лпри нормальных значениях относительного числа или относительном числе 4 С Т лимфоцитов 15-30% при нормальномабсолютном количестве, числа Э-лимфоцитов (1,2 2,6) О кл/л диагностируют наличие тимомегалии у детей,