Способ определения цис и трансизомеров метилстильбенов при их совместном присутствии в смеси

/08 РЕ П.НИ ИЬИдИсаА ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ОПИСАНИ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71)Ордена Ленина институт элементоорганических соединенийим. А.Н. Несмеянова(56) 1. С.Нуааподз 1 сх Пегегш 1 пагхоп о сегга 1 п цпзагцгагей ЬуйгосагЬепз Ьуг 1 ггаЬоп юхгЬ регшапдапаге гп попазцеопз шей 1 цш.-"Тц 1 апга", 3977, ч. 24, В 3, р. 190-)912. Обтемперанская С.И., Калугина С.В., Бухтенко Л.Н. Спектрофотометрическое определение ненасыщенных соединений,в виде комплексов с переносом заряда. -"Журнал аналитической .химии", 1981, т, 36, Р 11,с.2199 (прототип). 801 31 А(54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИС- ИТРАНСИЗОМЕРОВ МЕТИЛСТИЛЪБЕНОВ ПРИИХ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ В СМЕСИс использованием обработки раствора анализируемой пробы комплексообразующим реагентом, о т л и ч а ю -щ и й с я тем, что, с целью повышения селективности и возможности кощчественного определения индивидуальных цис- и трансизомеров метилстильбенов, анализируемую пробу растворяют в гексане с последующим тонкослойным хроматографированием в системе петролейный эфир-бензол, обработкой полученной хроматограммы0,025-0,05 М раствором хлоранилав бензоле, раздельным экстрагированием полученных окрашенных комплексов гексаном и упариванием экстрактов.Изобретение относится к способаманализа метилстильбенов, а именно1-Фенил4-метилфенил 1 этилена ( 4-метилстильбена) 1) и 1,2-бис-метилфенил 1 этилена 4,4-диметилстильбена 1 П 1, и может быть использовано для контроля частоты изомеров и в целях разделения метилпроиэводных стильбенов в цис- и трансФорме. Проблема анализа, разделенияи очистки изомеров такого типа важна и для получения более активных, Форм ряда лекарственных соединений.Известен способ определения иена.сыщенных соединений, основанный наокислении их перманганатом калия в 15неводной среде Я .Однако данный способ приводит кнеобратимой деструкции ненасыщенных соединений, так как при этомпроисходит окисление их до органических кислот и других продуктовокисления, и не позволяет различатьцис- и трансизомеры,Наиболее близким к изобретениюпо технической сущности является 25способ определения ненасыщенных соединений в виде молекулярных комплексов с тетрацианхинодиметаном, заключающийся в растворении анализируемого ненасыщенного соединения в 30трихлорэтилене, добавлении комплексообразующего реагента, в качествекоторого используют тетрацианхинодиметан в ацетонитриле, разбавлениитрихлорэтиленом с последующим измерением оптической плотности полученного окрашенного, раствора 2 .Однако в известном способе циси трансизомеры оказываются неразличными.40Целью изобретения является повышение селективности способа и возможность количественного определения индивидуальных цис- и трансизомеровметилстилбенов.Поставленная цель достигается тем,что согласно способу, заключающемусяв том, что анализируемую пробу растворяют в гексане с последующим тонкослойным хроматографированием всистеме петролейный эфир-бензол, обработкой полученной храматограммы0,025-0,05 М раствором хлоранила вбензоле, раздельным экстрагированиемполученных окрашенных комплексов гексаном и упариванием экстрактов. 55Предлагаемый способ основан наобразовании комплексов переноса заряда олефина с хлоранилом, отличающихся между собой по окраске. Различие значений 1 для цис- и трансизомеров метилстильбена повышает селективность способа и дает возможностьколичественно определять эти изомеры.П р и м е р 1. Приготавливают раствор в гексане смеси цис- и трансизо мера 4-метилстильбена в гексане с со- держанием 45 мг в мл (,0,24 М). Готовят смесь растворителей: петролейный эфир-бензол 119:1 по объему) . В хроматографическую камеру наливают 4 мп этой смеси. На пластину с силикагелем "Силуфол В" размером 5 х 14,5 см на расстоянии 1 см от нижнего края отмечают стартовую линию и на нее наносят микропипеткой или микрошприцем 0,24 М раствор смеси цис- и трансметилстильбенов. Пластину помещают в камеру с растворителем. После поднятия растворителя на 10 см пластину вынимают, быстро отмечают границу фронта растворителя и оставляют на воздухе для испарения растворителя. Через 1-2 мин пластину обрабатывают раствором хлоранила в бензоле 0,25 М раствор : 0,3 г хлоранила растворяют в 50 мл бензола), распыляя его пульверизатором под давлением сжатого воздуха. Разделенные изомеры практически мгновенно окрашиваются: трансметилстильбен в синий цвет (В 0,40),цисметилстильбен в фиолетовый цвет (В 0,52) . Проявленные полосы комплексов изомеров удаляют раздельно с пластины путем соскребания на фильтры, проьывают 3-4 раза гексаном. порциями по 5 мл Растворы упаривают, получают 17 мг транс- и 26 мг цисизомеров.выделенные соединения вновь хроматографируют в описанных условиях,При повторном хроматографировании обнаружили в приемнике с цисизомером наличие вещества с В 0,52, окрашивающегося в Фиолетовый цвет, в приемни- ке с трансизомером - наличие вещества с В 0,40, окрашивающегося в синий цвет.П р и м е р 2. Приготавливают . раствор в гексане смеси цис- и транс,4-диметилстильбена (1:1); содержащий 0,1 мг вещества в 1 мл.В хроматографическую камеру наливают 4 мл гексана. На пластину с силикагелем "Силуфол 0 Ч = 254" размером 5 х 14,5 см на расстоянии 1 см от нижнего края отмечают стартовую линию и наносят микропипеткой или микрошприцем раствор смеси 0,001 мл, т.е. на стартовую точку наносят 0,0001 мг смеси изомеров. Пластину помещают в камеру с растворителем. После поднятия растворителя на 10 см пластину вынимают, быстро отмечают границу Фронта и оставляют для высыхания. Через 1-2 мин пластину обрабатывают раствором хлоранила в бензоле 0,05 М : 0,6 г хлоранила растворяют в 50 мл бензола), распыляя его пульверизатором под давлением сжатого воздуха. Практически мгновенно проявляются разделенные изомзры в виде окрашенных пятен: транс1081531 Смесь изомеров Вычислено, мг Найдено, х,мг Стандартное Доверительотклонение ный интервалЯ, мг х 1 Е, мг(2,29+0, 19) ф 10 (2,44+0,33) 10 2,2910 2,44 10 2,3410 2,50 10 0,15 10 0,27 10 трансцисП р и м е ч а н и е. х-среднее значение содержания анализируемого вещества из 5 определений, 3 - стандартное отклонение,и - число определений (5), К - надежность (0,95)коэффициент нормированных отклонений (Стьюдента2,776); Х. Е - доверительный интервал определяемой1 величины, к - число степеней свободы. Составитель В. ШкильковаТехред Т.Маточка Корректор Г. Решетник Редактор Л. Гратилло Заказ 1540/39 Тираж 823 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССР-4, 4-диметилстильбен голубого цветаВ 1 0,42), цис,4-диметилстильбензеленого цвета В 0,52) . Проявление пятна изомеров удаляют с пластины раздельно путем соскабливания нафильтры, промывают 3-4 раза гексаном по 5 мл, растворы упаривают, получают 0,049 мг транс- и 0,049 мгцисизомеров. Для проверки индивидуальности полученных веществ в остатках после упаривания проводят повторное хроматографирование. Онопоказывает наличие индивидуальныхсоединений, имещцих В 0 42,1 для трансиэомера 1 и 0,52 Йля цисизомера), С переносом заряда в избыткерастворителя разрушается и хроматографируются только чиажые изомеры,которые вновь проявляются при опрыскивании раствором хлоранила, давая окрашенные комплексы.Метрологические характеристикиспособа приведены в таблице.Таким образом, предлагаемый спо соб позволяет как качественно, так