Способ получения смеси рибонуклеозид-2 и 3 монофосфатов

(51)" С 07 Н 19/2 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР САНИЕ ИЗОБРЕТЕН КОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ АВ 2тов, которые могут быть использованы в биохимии, медицине и Фармацевтике. Цель - упрощение процесса, повышение его безопасности и защита окружающей среды. Получение целевой смеси ведут обработкой водной суспенэии исходного сырья содержащего рибонуклеиновую кислоту (РНК), гидро- окисью кальция. Процесс ведут в молярном соотношении гидроокиси кальция и органического фосфора РНК 2-2,5:1. Способ позволяет в несложных технологических условиях получить продукт высокого выхода и чистоты при исключении сорбции на угле и упаривания, а также работы с токсичным метанолом. 1 табл.(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СМЛ И 3 -МОНОФОСф И РИБОНУКОВ Изобретение относитс м, в частности к пол бонуклеозид, и 3 к нуклецению сме озида си ри мон ос акальция в 5 дроок Изобретение относится к усовершенствованному способу получения смеси рибонуклеозиди 3-монофосфатов щелочным гидролиэом природнойРНК и может быть использовано в биохимиии, меди ци не и Фарма цевти ке,Цель изобретения - упрощение процесса, повышение его безопасности изащита окружающей среды использованием гидроокиси кальция в качестве реагента для гидролиза в установленноммолярном соотношении,Изобретение иллюстрируется следующими примерами,П р и м е р 1. Смесь рибонуклеозиди 3 -монофосфатов,Суспендируют 100 г РНК (содержание органического фосфора 75"ь) в250 мл воды и при перемешивании прибавляют суспензию 35,8 г (2 моль) мл воды, Реют 1 ц приотфильтродок и промыыщенногоия. Выходного веакционн 80 С, О ю смесь выд лаждают до образовавшийся ос Фильтре 30 мл на гидроокиси каль(с од ержа ни е ос но определенное по 9 М) .ержи в5-10 ыва ют вают нараст вора84,04 гщест ва,Спирина,оду А.С нализ смеси 3 -монофосфатов на ноэин(3 ) -монофо -2(3 )-монофосфата -монофосфата и урид фата проводился на тографе "Чагап"-85 ной колонке Моего Р фосфатный буфер/аце путем расчета компо 4363633/3123,11.8730.11.89.Научно-прои"Биолар"И.ВКондрГа йлума547.85.07(Патент США1974. юл. й 44зводственное объедибонуклеозидисодержание адесфата, гуанозинцитидин(3)- ин(3)-монофосжидкостном хрома на анионообмена 1 ЯХ, элюент тонитрил (,=254 нм) нентов по площади1525167 Количество Са(ОН ) Темпера- Время, Выходура С ч смеси г мол ь г Содержа ни еосновноговеществаФ Пример 1 84,04 16 82,29 1 87,7 1 77,78 9" 96 90 90 35,8 45,0 2,0 20 2,51 80 80 2,79 1,56 50,0 28,0 Составитель Г, КонноваТехред М.Ходанич Корректор Т. Малец Редактор М. Недолуженко Заказ 7364/18 Тираж 338 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина,101 регистрируемых пиков (по сравнению со ста идар та ми ) .Осадок содержит, ммоль: гуаноэин- -2 (3 ) -монофосфа та 65 ммол ьаденозин (3 ) -монофосфата 60 уридин(3 ) -монофосфата 67 цитидин(3 )- -монофосфата 50.П р и м е р ы 2-4 в которых выяснялось влияние температуры времени и количества реагента на выход и качество целевого продукта, осуществляли в аналогичных условиях (см.таблицу) . 15П р и м е р 5. В 50-литровый стеклянный реакторБыпах" загружают 30 л деминерализованной воды и при перемешивании дозируют 1 О кг РНК (содержание органического фосфора в РНК 7,51) 20 К суспенэии по порциям прибавляют 4,1 кг (2,29 моль) гидроокиси кальция выдерживают при перемешиваниио16 ч при 20 С. Реакционную смесь подаютт нд нут ч-фил ьт р и отфил ьт Ровывают образовавшийся осадок. Осадок промывают на фильтре 2,5 л воды и сушат при 20 С. Выход 8,32 кг (содержание основного вещества 951).П р и м е р 6 . Суспендируют 100 г РНК-содержащего материала, полученного экстракцией биомассы дрожжей белково-витаминного комплекса (содер жание органического фосфора 138 РНК 13,8 Ж) в 250 мл воды. К суспензии добавляют при перемешивании 6,58 г (2 моль) гидроокиси кальция, суспендированной в 20 мл воды, Реакционную смесь выдерживают 1 ч при 100 С 1 ч, охлаждают до 5-10 С, выдерживают при этой температуре 6 ч, осадок отфильтровывают. Выход 16, 15 г (содержание основного вещества 90) .Таким образом, данный способ позволяет в несложных технологических условиях достигать высокого выхода и чистоты целевого продукта при исключении операций сорбции на угле и упаривания, а также работы с токсичным метанолом.формула изобретения Способ получения смеси рибонуклеоэид, и 3-монофосфатов путем обработки водной суспенэии исходного сырья, содержащего рибонуклеиновую кислоту (РНК), щелочным агентом о тличающийся тем, что, сцелью упрощения процесса, повышения его безопасности и защиты окружающей среды, в качестве щелочного агента используют гидроокись кальция в молярном соотношении гидроокиси кальция к органическому Фосфору РНК, равном 2-2,5;1,