Способ очистки сырого 4-деметоксидаунорубицина

СОВЕТ АЗ ОПУБЛИ ш 4 С 07 Н 15/ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТК ПАТЕНТУ.89. Бюл. У италия Карло ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ(72) Эрнесто Оппичи, Карло Варесион Онорино Джиакома Роза (ТТ)(57) Изобретение касается производ ства антрациклиновых гликозидов,в частности онистки 4-двметоксидаун рубицииа, используемого в медицинекак противоопухолевый препарат.Очистку 0,43-ного водного раствораисходного вещества с титром 78,2,содержащего 0,5 Х СНС(О)00 а, ведутпосле доведения рН раствора до 4,7с помощью СНС(О)ОН и последующейадсорбцией на колонке 400 мл со смолой Амберлит ХАД. Затем после промывки водой проводят элюированиецелевого продукта водно-метанольнойсмесью (5;1 оф/об). Полученный раст"вор концентрируют в вакууме с последующей реадсорбцией элюата при рН 4на колонке 150 мл со смолой СИ-Сефароэа-С 1 В. После, этого промывают водой, элюируют 0,033-ной НС 1 и:аыделяют целевой продукт осаждением изсконцентрированного под вакуумомэлюанта. Эти условия обеспечиваютвыход очищенного 4-деметоксидаунорубицинадо 523. с титром 973 и содержанием менее 3 Х примесей,1450748 Первые 800 мл элюата, содержащие18 примесей, доводят до рН 4,7 добавлением ацетата натрия и собирают для рецикла раствор сырого 4-деметоксн-даунорубнцина, который подвергают адсорбции на смолах Амберлит ХАД 2 для первой стадии очистки.Следующий элюат (3500 мл), содержащий чистый 4-деметокси-даунорубнцин,концентрируют в вакууме до объема50 мл,Добавляют 250 мл ацетона, полученный осадок фильтруют, промываютацетоном и высушивают. Получают выход 52(в расчете на исходный сырьевой продукт). очищенного 4-деметокси-даунорубицина, имеющего титр973 и содержащего менее 33 примесей,Формула и э о б р е т е н и я Составитель И.ФедосееваРедактор П.Гереши Техред М.Ходанич Корректор В,Романенко Подписное Заказ 6983 Р 59 Тираж 348 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Изобретение относится к способу очистки антрациклиновых гликозидов селективной адсорбцией на смолах, а йменно к очистке 4-деметокси-даунору 5 бицина.Цель изобретения - создание технологичного способа очистки 4-деметокси-дауворубицина, позволяющего по.". лучить чистый продукт путем селек тивной адсорбции на смолах.П р и и е р 1,-Очистка 4-деметокси-даунорубицина.15,0 г 4-деметокси-даунорубицина в виде сырья, имеющего тиур 78,2 Е н 15 содержание примесей 183, растворяют в 3,6 л раствора 0,5 Х. ацетата натрия. Раствор, рН которого с помощью добавления уксусной кислоты доводят до 4,7, адсорбируют на 400 мл 20 смолы 1 Амберлит ХАЭ 2 (К/Ко 1 шапй На- ав) в колонке диаметром 2,5 см. Продукт промывают 1000 мл воды и затеи элюируют смесью вода. - метанол (5:1 по объему) В качестве первого элюа та отбирают 2000 мл раствора, содержащего аглюконы и различные примеси,Элюирование продолжают смесью во-. да .- метанол (1:1 по объему) и от 6 ирают фракцию 4500 мл: в этом раст воре элюат содержит 4-деметоксидаунорубицин "с 1 Опримесей.Доводят рН элюата дб 2,8 добавлением соляной кислоты и затем элюат концентрируют в вакууме до объема 1500 мл. Доводят рН этого раствора , до 4,0 с помощью добавления концентрированного раствора ацетата натрия и слабо-кислый раствор адсорбируют на 150 мл смолы СМ Сефароза С 1 6 В (К) (РЬайшас 1 а) со скоростью 150 мл/. : Рч на колонке диаметром 2,5 см. После завершения адсорбцин колонку сна.".: чала промывают 450 мл воды и затем ,элюируют0,033-ной соляной кислотой,15 Способ очистки сырого 4-деметокси-даунорубицина, полученного путем ферментации или синтеза, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чистоты целевого продукта, 0,4%-ный водный раствор сырого продукта.с титром 78,2 Х в 0,5 Х ацетата натрия после доведения рН раствора до 4,7 добавлением уксус- ной кислоты подвергают адсорбции на колонке 400 мл со смолой Амберлит ХЦ, затем промывают водой, элюируют целевой продукт смесью вода:метанол,(5:1 об./об.) и концентрируют в вакууме с последующей реадсорбцией эйюата при рН 4 на колонке 150 мл со смолой СМ Сефароза С 1 В, после чего промывают водой, элюируют 0,033-ной соляной кислотой, выпускают первый элюат и выделяют целевой продукт с титром 97 осаждением ацетоном из сконцентрированного в вакууме последующего элюата.