Способ получения рацемических аглюконов

СО 103 СОВЕТСНИХСООИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК АЗ С 50/26 //А 61 К 3 И ПАТЕН 7. Бюл кой приГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ПИСАНИЕ ИЗОБ 21) 3556256/23-04 (62) 3444074/23-04(23).25,05.82 (31) 176264 (32) 28.05,81 (33) ОВ (46) 15.05.8 , и. 18 (71) Фармиталия Карло ЕРБА С.п.А. (тт) (72) Франческо Анджелини, Серджио Пекко и Федерико Аркамоне (1 Т) (53) 547.567.2,07(088,8) (56) Сап. 7. СЬет., 51, 1973, р. 446Патент СИА У 4107423, кл. 260-210 А,В, опублик. 1972,Патент США У 3803124, кл. 536-4, опублик. 1969. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РАЦЕМИЧЕСКИХ АГЛ 1 ОКОНОВ (57) Изобретение касается замещенных полифункциональных конденсированных ,циклических соединений, в частности получения рацемических аглюконовРА) общей ФормулыО " 4 сн где В и Р - один водород, а другойгидроксил, которыЕ, как промежуточные продукты, могут быть использованы в синтезе новых биологически ак-тивных антрацикличееких гликозидов(АГ). Цель - разработка способа получения таких промежуточных продуктов, которые дали бы возможность получить новые АГ с лучшими свойствами Получение РА включает стадии: получение сложного моноэира из 1,2,3,6- -тетрагидрофталевого ангидрида и метанола при кипячении в присутствии и-толуолсульфокислоты; получение Ф-ненасьпценного кетона из сложного монозйира и ацетилхлорида с последующей щелочной обработкой; получение 4-ацетилпергидрофталата из сС,-ненасьпценного кетона при каталитическом восстановлении его на 107.-ном Рй/С при комнатной температуре и давлении 1 атм; получение смеси изомеров из 4-ацетилпергидрофталата и 1,4-диметоксинафталина в присутствии СУС(О)ОН и СРС(0 О; получение рапемической смеси антрациклинов (соотношение 1:1) из смеси изомеров, которые восстанавливают при комнатной температуре и давлении 1 атм в присутствии 0,5 Е-ного Рй/С с последующей обработкой конц. Н БО сначала при комнатной температуре, а затем при 80 С 1 ч; получение диастереоизомеров смеси рацемических (+)4.в .диметокси,7-дидеоксидауномиценона и (+)4-диметокси,11- ;-дидеоксидауномиценона из смеси рацемических антрациклинов обработ ее сначала кипящим СН С(О)1 О в сутствии п-толуолсульфокислоты, а затем м-хлорнадбензойной кислотой при комнатной температуре 2 ч; разделение диастереоиэомеров хроматографированием на силикагеле с последующей отдельной обработкой каждого полученного соединения этиленглико" лем в бензоле в присутствии п-толуолсульфокислоты при кипячении и получением соответствующих 13-кеталей;Дозамг/кг Соединение 100 93 Доксорубицин 97 4/7 100 О/б ХОО83 О/7 10 О/7 98 92 1/7 16,9 99 100 5 с Г.ф,", 1 ,тщгф Мьппи, не несущие ракового новообразования, находились под наблюдением по меньпей мере 90 дней, считая от начала лечения,Составитель 1, МарголинаРедактор Л. Веселовская Техред Л.Сердюкова Корректор А. Зимокосов Заказ 1905/57 Тираж 372 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Н, Рау 1 пская наб., д, 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, .4.% Среднеевремя выжив анияМ/Т, дни Гибель засчет отравления13 последние бромируют Вг в СС 1,1 в присутствии 2,2-азо-бис-изобутиронитрила с последующим гидролизом кетальных групп водной НС 1 в среде ацетона при комнатной температуре 3 ч с получением индивидуальных рацемических (+)4-деметокси-деокси-дауномицинона и (+)4-деметокси-деокси-дауно 11616мицинона, Из РА получают 4-деметокси- -6-деокси-даунорубицин, который при испытании против клеток НЕСа показывает цитотоксическую активность, за счет которой достигается ингибирование роста опухоли на 993 при дозе 16,9 мг/кг в неделю. 5 табл.О Б,СОСЯ где В и В - огидроксил,которые являютс одород, а другой омежуточными проии новых биологидуктами при получ чески активных а апиклических глиэндов Цель Изобретение относится к получению новых тетрациклических аглюконов, имеющих оксиантрахиноновую структуру, а именно к способу получения рацемических аглюконов общей Формулы зобретения является способ получения промежуточных продуктовпри получении новых антрациклическихгликозидов с улучшенными биологическими свойствами.Изобретение иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1, Получение монометил 1,2,3,6-тетрагидрофталата (В =(выход 833), которое перекристаллио 1зовывают из петролейного эфира 60 )от.пл, 85 С,5 0 15 20 25 ЗО 35 40 2Тонкослойная хроматография на кизельгуровых пластинках маркиМегс 1 Р (хлороформ: ацетон 2:1 пообъему). ВГ 0,28,П р и м е р 2, Получение монометил-ацетил,2,3,6-тетрагидрофталата (В = СНз),К суспензии безводного треххлористого алюминия (85 г, 0,64 моль) в15 л безводного хлористого метиленапри перемешивании в атмосфере азотаОпо каплям при -5 С добавляют хлористый ацетил. Затем в течение 2 ч добавляют 40 г (0,217 моль) соединения, полученного в примере 1, в750 мл безводного хлористого метилена. Реакционную смесь выдерживают 6 чопри -5 С,. а затем в течение ночи прикомнатной температуре. После добавления льда (1 кг) органическую Фазуотделяют, промывают водой и упаривают досуха. Остаток растворяют в500 мл метанола, обрабатывают 50 гкарбоната калия при комнатной темпе -ратуре в течение 5 ч, После Фильтрования растворитель упаривают, остаток растворяют в воде и промываютхлороформом. Г 1 елочной водный раствордоводят до рН 3 и повторно экстрагируют хлороформом. Полученный при упаривании растворителя остаток очищаютхроматографически на колонке с кремневой кислотой при использовании вкачестве растворителя смеси хлороФорм: ацетон (95:5 по объему). Получают 28 г названного соединения (общий выход 572), которое перекристаллизовывают из диэтилового эфира:опетролейного эфира, т,пл. 94-96 С,Тонкослойная хроматография на кизельгуровых пластинках марки).Раствор 4,6 г соединения, полученного в примере 2, в 120 мл этанола гидрируют при комнатной температуре при давлении 1 атм в присутствии 0,6 г катализатора - 10%-ногопалладия на угле. При упариваниирастворителя получают названное соединение с количественным выходом.ИК-спектр (пленка): 1680 смСОкислоты; 1710 смСО кетона; 730 смСО сложного эфира.ПМР (ЖС 1 ): 1,5-2,6 (мультиплет,8 Н); 2,18 (синглет, ЗН, СОСН ); 3,28-ацетилцйклогексилкарбонил)-нафталина и 1,4-диметокси-З-(2 -метоксикарбонил-ацетилциклогексилкарбонил)40нафталина (В = СН).1,4-Диметоксинафталин (3,2 г,0,017 моль) и соединение, полученноев примере 3 (4,0 г, 0,017 моль), в50 мл трифторуксусного ангидрида и4525 мл трифторуксусной кислоты кипятят с обратным холодильником в тече. -ние 24 ч. Остаток, полученный приупаривании растворителей в вакууме,50растворяют в хлороформе и промываютнасьпценным водным раствором бикарбоната натрия и водой. Остаток, полученный после упаривания растворителей, промывают на колонке с силикагелем с использованием в качествеэлюирующего растворителя хлороформапри этом получают 3,5 г смеси изомеров названных соединений. 4Тонкослойная хроматография на кизельгуровых пластинках маркиМегсЕ Р+(хлороформ:ацетон 98:2 пообъему): ВГ 0,3.Масс-спектр, тп/е: 398 (М+).ИК (пленка): 1660 см СО ненасы - 1щенного кетона; 1710 см СО кетона;1720 см СО сложного эфира.ПМР (СЗС 1 э); 1,5-2,3 (мультиплет,8 Н); 2,18 (синглет, ЗН, СОСН); 3,67(мультиплет, 4 Н),Г р и м е р 5. Получение 6,647,8,9,10,10 м 11-октагидро,12-диметокси-оксо-ацетилнафтаценаи 6,6 М 7,8,9,10,Ос,11-октагидро,12-диметокси-оксо-ацетилнафтацена.Раствор смеси изомерных соединений, приготовленных в соответствиис примером 4 (0,45 г, 1,1 ммоль), в40 мл этанола и 0,2 мл концентрированного раствора соляной кислоты гидрируют при комнатной температуре вприсутствии катализатора - 0,3 г 57. -ного палладия на угле. Катализаторотфильтровывают и раствор упариваютдосуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в концентрированнойсерной кислоте. Через 20 мин реакционную смесь выливают в холодную воду,а затем экстрагируют хлороформом.Органическую фазу промывают насьпценным водным раствором бикарбоната натрия, а затем водой, упаривают досуха,а остаток очищают хроматографическина колонке с силикагелем, используяв качестве элюента хлороформ, приэтом получают 0,2 г смеси изомеровназванных соединений.Тонкослойная хроматография накиэельгуровых пластинках маркиМегсЫ Р (хлороформ:ацетон 98:2 пообъему); ВГ 0,33.Масс-спектр, тп/е: 352 (М ); 337-11-гидрокси-ацетилнафтацена и5,7,8,9,10,12-гексагидро,12-диоксо.-б-гидрокси-ацетилнафтацена.Раствор 0,05 г смеси изомерныхсоединений, полученных в примере 5,в 5 мл концентрированной серной кисолоты нагревают при 80 С в течение1 ч. Реакционную смесь выливают в холодную воду и экстрагируют хлороформом. Органическую фазу промывают насьпценным водным раствором бикарбонатанатрия, а затем водой, концентрируютдо малого объема при пониженном давлении и хроматографируют на колонкес силикагелем, элюируя хлороформом.Получают смесь (1:1) названных изомерных соединений,Тонкослойная хроматография на. силикагелевых пластинках маркиМегс 1 Р(хлороформ:ацетон 98:2 пообъему): ВГ 0,5.Масс-спектр, тп/е: 320 (М); 227(СН СО+).ИК (КВг); 1625 см связанная С=Охинона; 1670 смсвободная С=О хинона; 1710 см С=О кетона; 1940 смсвязанная ОНПМР (СЭС 1); 1,8-2,3 (мультиплет,ЗН); 2,30 (синглет, ЗН, СОСН ); 2,63,1 (мультиплет, 4 Н); 7,4-8,4 (мультиплет, 5 Н); 11,71 и 11,75 (два синглета, 1 Н, ОН фенола).Уф-видимый (СНС 1 ); 250, 267,414 нм.П р и м е р 7, Получение 4-деме. токси,7-дидеоксидауномицинона (А)и 4-деметокси,11-дидеоксидауномицинона (В),Смесь(0,32 г) соединений, полученных в примере б, приготовленную,как описано в примере 6, растворяютв 38 мл уксусного ангидрида и кипятят с обратным холодильником в течение 18 ч в присутствии 0,19 г и-толуолсульфоновой кислоты, Остаток, полученный при упаривании при пониженном давлении смеси, растворяют в40 мл хлористого метилена и обрабатывают 0,258 г м-хлорнадбензойнойкислоты, Реакционную смесь оставляютна 2 ч при комнатной температуре, азатем промывают ненасыщенным воднымраствором бикарбоната натрия и водой.Остаток, полученный после упариваниярастворителя, растворяют в смесиацетона и этанола и обрабатывают30 мл 1 н. раствора гидроксида нат 40 45 50 55 77-8,4 (мультиплет, 4 Н, ароматические); 12,99 (синглет, 1 Н, ОН),Уф-видимый (СНС 1 з): 250, 267,414 нм,ИК (КВг); 1625 см связанная С=Охинона; 1665 см свободная С=О хинона; 1705 см С=О кетона.П р и м е р 8, Получение (+)4-деметокси-деоксидауномицинона(В, =ОН, В =Н) .Раствор 0,5 г (+)4-деметокси,7-дидеоксидауномицинона, приготовленного таким образом, как описано впримере 7, в 50 мл бензола обрабатывают при кипячении в течение 4 ч12 мл этиленгликоля в присутствии0,045 г п-толуолсульфоновой кислоты.Получают соответствующее 13-кетальноепроизводное (0,4 г), кристаллизующе 11616 6рия в течение 1.ч при комнатной температуре. После обычной обработки неочищенный продукт хроматографируютна колонке с силикагелем при использовании хлороформа в качестве элюирующего агента с целью получения названных соединений в чистом виде,Соединение А.Тонкослойная хроматография А на10 кизельгуровых пластинках маркиМегс 1 с Р (хлороформ:ацетон 98:2 пообъему): КГ 0,18,Масс-спектр, и/е: 336 (М ); 318(мультиплет, 4 Н, ароматические);13,03 (синглет, 1 Н, ОН).ИК (КВг); 1620 см связанная С=Охинона; 1665 см свободная С=О хи 25 нона; 1705 см С=О кетона.УФ-видимый (СНС 1); 250, 267,414 нм.Соединение В,Тонкослойная хроматография на ки 30 зельгуровых пластинках маркиМегсЕ Р (хлороформ:ацетон 98:2 пообъему); ВГ 0,15.Масс-спектр: щ/е 336 (М ),ПМРМГц (СРС 1): 2,0 (мульти 35 плет, 2 Н, Н); 238 (синглет, ЗН,СОСВ з); 2,75-3,28 (два дуплета, Х174 Гцу 2 Ну Н) 30 (мультиплет, 2 Н, Н); 3,75 (синглет, 1 Н, ОН); 7,51 (синглет, 1 Н, Н);(Б=Н, Б =ОН).Соединение, полученное в примере7, превращают в названное соединение,следуя методике, описанной в примере 8,Тонкослойная хроматография на силикагелевых пластинках маркиМегс Р (система растворителей хлороформ:ацетон 9:1 по объему): БГ0,34.ГР"РМГц (СРС 1 /РМСО-Ле); 2,42(синглет, СИСО); 3,08 (дуплет, Нс -1 Ор,Тец 18 Гц); 3,28 (дуплет, Н,р -1 Ор Т,ер, 18 Гц); 5,32 (мультиплет,Н-7, У = 1 О Гц); 6,62 (синглет,Н); 13,24 (синглетр ОН б) 7 р 78,5 (мультиплет, 4 ароматических протона).П р и м е р 1 О. Получение 4-деметокси-деоксидаунорубицина (ХОО 0170) и 7,9-диэпи-деметокси-б-деоксидаунорубицина. К раствору 0,065 г рацемического 4-деметокси-деоксидаунорубицина (Бр = ОН, Б = Н), полученного, как указано в примере 8, в 45 мл безводного дихлорметана добавляют 1 гомолекулярного сита (4 А МесгК)р 0,079 г 2,3,б-тридеокси-З-трифторацетамидо-0-трифторацетил-К-Ь-пиранозил-хлорида (Т = С 1 р Б-СРзСООр Б = Н), 0,029 мл сим-коллидина и 0,057 г серебра-трифторметан сульфоната, растворенного н 2 мл безводного диэтилового эфира. После 2 ч выдерживания при комнатной температуре реакционную смесь Фильтруют, промывают водной 0,1 н. хлористоводородной кислотой, водой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой. После этого осадок, полученный выпариванием растворителя, воспринимают метанолом и после 30 мин вьщерживания при комнатной темпера,туре завершают гидролиз С-трифторацетильной группы путем обработки смеси диастереоизомеров: И-трифторацетил-деметокси-деоксидаунорубицина и 7 рО-диэпи-И-трифторацетил- -4-деметокси-деокси-даунорубицинапо способу тонкослойной хроматографии на кизельгуровых пластинках (МегсЕ У ) с применением системы Окончательный гидролиз кетальных групп осуществляли при обработке водным раствором хлористого водорода в ацетоне .(300 мл 0,25 н, раствора) при комнатной температуре в течение 3 ч.Целевое соединение. 45Тонкослойная хроматография на кизельгуровых пластинках марки Мегс 1 Г при использовании системы2 Нрастворителей хлорофррм:ацетон (9:1 по объему): БГ 0,24, 50Масс-спектр: ш/е 352 (М ).ПМРМГц (СПС 1 з); 2,42 (синглет, ЗН, СОСНь); 2,98 (дуплет, 1 Н, ;Н -10 р Трем 17,9 Гц) 3,13 (дуплет,ГН Нер Тгем 17 р 9 Гц); 4,07 (дуплет,55 ОН, Т = 10 Гц); 4,46 (синглет, ОН); 4,93 (мультиплет, Нзэ -7, У =10 Гц, после добавления РОУя = 7 1316еся непосредственно при охлажденииреакционной смеси. Это соединение растворяют в 250 мл четыреххлористогоуглерода и вводят во взаимодействиес 2 мл раствора 3,2 г брома в 32 млочетыреххлористого углерода при 45 Св течение б ч в присутствии 0,46 г2,2 -азо-бис-изобутиронитрила. Охлажденную реакционную смесь экстрагируют 1 н.водным раствором гидрок- Осида натрия, доводят рН окрашеннойводной Фазы до 8,5 и экстрагируютхлороформом. Органические экстрактыупаривают до малого объема и получают 0,11 г кристаллического 4-деметокси-деокси-кеталя дауномицинона.Тонкослойная хроматография на кизельгуровых пластинках маркиМегсЕ Р(система растворителей 20СНС 1- (СНз) СО 9:1 по объему):БГ 0,21,Электрон. удар - МЯ; ш/е 396 (М ).ПМР (СХ)С 1 з): 1,47 (синглет, ЗН,14-СН); 1,53 (синглет, 1 Н, ОН); 252,27 (д,д,д,; 2 Н, Н) Т = 14,5, 4,5,6,0 Гц; 3,02 (д.д,р 2 Н, Н),Т =Р 7 р 5 Гц; 3,90 (дуплетр 1 Н, ОН)(4:1 по объему):ВГ = 0,16 и 0,13.Чистые диастереоизомеры получаютхраматографическим разделением наколонке с силикагелем с применениемсистемы растворителей хлороформ:ацетон (б:1 по объему) для отмывки отадсорбента.1) Ч-Трифторацетил-деметокси-б-деоксидаунорубицин, т.пл. 155-160 С(м., Щ = 7 Гц, Н = 7); 5,26 (м.Щ = 5 Гц Н), 6,73 (Ьгй, Ю = 8 Гц,ИН), 7,75 (с., Н-б).Гидролиз Б-защищающей группы 7 Б;9 Б диастереоизомера осуществляют путем растворения И-трифторацетил-производного в водном 0,1 н.растворегидроокиси натрия. После ЗО мин вьюдерживания при 0 С раствор доводят дорН 8 и экстрагируют хлороформом.Выпаривание растворителя до небольшого объема с последующим добавлением 0,1 н.метанольного растворахлористого водорода для доведениярН 4,5-5 приводит к получению 4.деметокси-деоксидаунорубицина в видеего гидрохлорида.Тонкослойная хроматография на силикагелевых пластинках (МегсХ Р )с применением системы растворителейхлороформ:метанол:уксусная кислота:ювода (80:20 й 7:3 по объему): В 1 =(ХОО-О 68).Используя как исходный материал/4-деметокси-деокси-эпидаунорубнцин, полученный по примеру 11, вы 30 деляют названное соединение в видеогидрохлорида т.пл. 182-184 С (разложение); М = +300 С=0,08 МеОН),П р и м е р 14. Получение 4-деметокси-деокси-доксорубицина.35 Используя как исходный материал4-деметокси-деокси-даунорубицин,полученный по примеру 3, выделяютназванное соединение в виде гидрохлорида, т,пл. 195 С (разложение);40 Гоц, = +60,8 (С = 0,055 МеОН).П р и м е р 15. Получение 4-деметокси,11-дидеоксидоксорубицина(ХО 0-0185).Используя как исходный материал45 4-деметокси,11-дидеокси-даунорубицин, полученный по примеру 4, выделяют названное соединение в видегидрохлорида, т,пл. 188-189 С;Я, = +105 (С = 0,04 МеОН).50 Биологическая ак ивность соединений ХОО, ХОО, ХОО,ХОО, ХОО.Соединения испытывают против клеток НЕ 1 а в стеклянной посуде,Результаты испытаний приведены в13, 13 166ют смесь рацемических антрациклиновформулы 8 и 9 при соотношении 1:1 14 0 0 Сиз О ОН блица оединение 21,42,50,8,16 аунорубицин 250-0170 2 0 0 0 ОН которую обрабатывают сначала кипящим уксусным ангидридом в присутствии 1 О й-толуолсульфокислоты и затем М-хлорнадбензойной кислотой при комнатной температуре в течение 2 ч с получе.нием диастереоизомерной смеси рацемического (+)4-деметокси,7-дидеокси-,15 дауномицинона и рацемического (+)4- -деметокси,11 -дидеоксидауномицено- на разделяют полученную диастереоизомерную смесь хроматографированием на силикагеле и каждое из полученных соединений обрабатывают раздельно этиленгликолем в бензоле, кипящем с обратным холодильником в присутст-, вии 6 гтолуолсульфокислоты и получают соответствующие 13-кетали, которыеподвергают бромированию путем обработки бромом в четыреххлористом уг(лероде в присутствии 2,2 -азо-бис-изобутиронитрила, затем гидролизуют кетальную группу водным раствором хлористого водорода в ацетоне при комнатной температуре в течение 3 ч с получением индивидуальных рацемических (+)4-деметокси-деокси-дауномицинона или (.)4-деметокси-деокси-дауномиценона.-4 -11.-дидеоксидаунорубицин) 24 181 4/1 О ХОО30 (4-деметокси 11-дидеоксидоксорубицин) 9 195 1/10Средняя продолжительность вы.живания обработанной мыши (среднее время выживания контрольной х 100)." Оценка по данным вскрытия. ф Средняя продолжительность вы 35 живания обработанной мьппи . фф Оценка по данным вскрытия. Таблица 4 Соединение ХОО-доксорубицин) 34 233 1/6 13 217 О/1 О 16,9 133 7/О ф Среднее из трех экспериментов,(4-деметокси-деокси-эпидаунорубицин)ХООХОО